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微重力效应激活VEGFR2/RAP1B/ERK通路促进hCMEC/D3细胞血管生成 被引量:1
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作者 李玉娟 吴爱佳 +3 位作者 汪家苹 闫然然 崔姚远 杨静 《北京理工大学学报》 北大核心 2025年第7期764-770,共7页
探究模拟微重力(simulated microgravity,SMG)效应对人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3的增殖、迁移以及血管生成能力影响.将对数生长期的hCMEC/D3细胞分为对照组(CON)和24h-SMG组,采用ELISA法检测细胞Ang-2和VEGFA因子表达;通过细胞划痕愈合... 探究模拟微重力(simulated microgravity,SMG)效应对人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3的增殖、迁移以及血管生成能力影响.将对数生长期的hCMEC/D3细胞分为对照组(CON)和24h-SMG组,采用ELISA法检测细胞Ang-2和VEGFA因子表达;通过细胞划痕愈合法和管样形成法观察SMG效应对细胞迁移能力影响,利用Western-Blot检测VEGFR2/RAP1B/ERK蛋白表达水平变化.24h-SMG效应显著提升血管生成相关因子Ang-2和VEGFA表达水平,划痕实验及管样形成实验显示SMG效应能够增强hCMEC/D3细胞迁移及血管形成能力,Western-Blot结果显示24h-SMG效应上调VEGFR2、Rap1B和Braf相对表达量,提高MEK1和ERK1/2的磷酸化水平.SMG效应可以通过激活VEGFR2/RAP1B/ERK通路来发挥促脑血管细胞生成的作用. 展开更多
关键词 模拟微重力 脑微管内皮细胞 血管生成 VEGFR2/rap1B/ERK信号通路
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连翘脂素调节cAMP/EPAC1/RAP1信号通路对肺癌细胞恶性进展的影响
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作者 祁卫华 黄广磊 +2 位作者 张媛媛 班宏英 毛诏旭 《天津医药》 2025年第4期343-348,共6页
目的探究连翘脂素调节环磷酸腺苷/环磷腺苷激活的交换蛋白1/Ras相关蛋白1(cAMP/EPAC1/RAP1)信号通路对肺癌细胞恶性进展的影响。方法体外培养肺癌细胞A549,并分为对照组,连翘脂素低、中、高剂量组(25、50、100 mg/L),连翘脂素高剂量+百... 目的探究连翘脂素调节环磷酸腺苷/环磷腺苷激活的交换蛋白1/Ras相关蛋白1(cAMP/EPAC1/RAP1)信号通路对肺癌细胞恶性进展的影响。方法体外培养肺癌细胞A549,并分为对照组,连翘脂素低、中、高剂量组(25、50、100 mg/L),连翘脂素高剂量+百日咳毒素(PTX)组(100 mg/L连翘脂素+5μmol/L PTX),连翘脂素高剂量+EPAC1拮抗剂(ESI-09)组(100 mg/L连翘脂素+1.5μmol/L ESI-09)。CCK-8实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液cAMP水平;Western blot分析cAMP/EPAC1/RAP1信号通路及凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果相较于对照组,连翘脂素低、中、高剂量组OD450值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、cAMP水平、EPAC1、RAP1和Bcl-2表达下降,细胞凋亡率和Bax表达升高,且呈剂量依赖性(P<0.05);与连翘脂素高剂量组比较,连翘脂素高剂量+PTX组A549细胞中光密度(OD)450值、划痕愈合率、侵袭细胞数目、cAMP水平、EPAC1、RAP1和Bcl-2蛋白表达增加,细胞凋亡率和Bax表达下降(P<0.05);连翘脂素高剂量+ESI-09组各指标水平均与之相反。结论连翘脂素通过下调cAMP/EPAC1/RAP1信号通路阻碍A549细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺肿瘤 连翘脂素 细胞增殖 细胞凋亡 cAMP/EPAC1/rap1信号通路
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RAP1GAP基因多态性与阳原驴产仔数的相关分析
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作者 陈亮 苏咏梅 +9 位作者 朱文进 李可强 李哲 明佳 逯春香 王茂森 胡文波 路长青 刘海洋 张艳英 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第6期152-159,共8页
本试验旨在研究RAP1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating Protein,RAP1GAP)基因多态性与阳原驴产仔数的相关性。以86头阳原驴母驴(其中10头为产双仔母驴)为研究对象,采用PCR-SSCP技术对RAP1GAP基因单核苷酸多态性(Single Nucleotide ... 本试验旨在研究RAP1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating Protein,RAP1GAP)基因多态性与阳原驴产仔数的相关性。以86头阳原驴母驴(其中10头为产双仔母驴)为研究对象,采用PCR-SSCP技术对RAP1GAP基因单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点进行分型,并对各SNP位点与阳原驴产仔数进行关联分析。结果表明:在RAP1GAP基因中发现8个单碱基突变,分别为g.44031G>C、g.44156G>C、g.48851 A>G、g.49456 A>C、g.52853T>C、g.52880T>C、g.59730T>C、g.64393T>G。其中g.44031 G>C在外显子上且为错义突变,导致蛋白质二级结构发生变化,其余7个位点均在内含子上。g.44031G>C、g.44156G>C位点CG和GG基因型个体的平均产仔数显著高于CC基因型;g.49456 A>C位点AC基因型个体的平均产仔数显著高于CC和AA基因型;g.52853 T>C、g.52880 T>C位点CT和TT基因型个体的平均产仔数显著高于CC基因型;g.59730 T>C位点CC基因型个体的平均产仔数显著高于CT和TT基因型;而g.48851 A>G、g.64393 T>G位点未发现与产仔数存在显著关联性。综上,RAP1GAP基因的g.44031G>C、g.44156 G>C、g.49456 A>C、g.52853 T>C、g.52880 T>C、g.59730 T>C 6个位点可作为阳原驴产仔数育种的分子标记。 展开更多
关键词 阳原驴 rap1GAP 多态性 产仔数
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不同细胞Rap1对动脉粥样硬化的差异性调控作用 被引量:1
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作者 宋珊杉 杨惠茹 +2 位作者 易小莉 余军 许传铭 《生理学报》 北大核心 2025年第3期483-492,共10页
心血管疾病是导致死亡的主要原因,该类疾病发病率高,对人类健康构成重大威胁。动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,同时也是大多数心血管疾病的主要病理基础。动脉粥样硬化的发病率持续上升,但其发病机制尚未完全阐明。小GTP酶Rap1(Ras-a... 心血管疾病是导致死亡的主要原因,该类疾病发病率高,对人类健康构成重大威胁。动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,同时也是大多数心血管疾病的主要病理基础。动脉粥样硬化的发病率持续上升,但其发病机制尚未完全阐明。小GTP酶Rap1(Ras-association proximate 1)作为小G蛋白超家族成员,是细胞中重要的分子开关,参与调控细胞的分化、增殖和黏附等生理功能。Rap1通过在Rap1-GTP和Rap1-GDP之间循环来实现分子开关的效用。Rap1以细胞差异性的方式参与调控动脉粥样硬化的发生、发展过程。本文总结了不同细胞Rap1在动脉粥样硬化发生、发展中的作用及机制,旨在为动脉粥样硬化的治疗提供新标靶和新思路。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 rap1 内皮细胞 巨噬细胞 平滑肌细胞
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FOXC1通过Rap1信号通路介导结肠癌细胞增殖与凋亡的机制研究
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作者 付小霞 李蕊 +2 位作者 段瑞敏 郝力瑶 靳英 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第13期649-655,共7页
目的:探讨FOXC1在结肠癌中的表达特征、临床意义及其调控细胞增殖与凋亡的分子机制。方法:采用GEPIA数据库分析FOXC1在结肠癌中的表达及预后相关性;qRT-PCR和Western blot检测FOXC1在结肠癌细胞(HCT116、SW620)和正常结肠上皮细胞(NCM4... 目的:探讨FOXC1在结肠癌中的表达特征、临床意义及其调控细胞增殖与凋亡的分子机制。方法:采用GEPIA数据库分析FOXC1在结肠癌中的表达及预后相关性;qRT-PCR和Western blot检测FOXC1在结肠癌细胞(HCT116、SW620)和正常结肠上皮细胞(NCM460)中的差异表达,并构建FOXC1敲低(sh-FOXC1)稳转细胞系。应用Western blot、流式细胞术、CCK-8及平板克隆实验,分析FOXC1敲低对细胞增殖、周期及凋亡的影响;通过Rap1过表达回复实验验证其下游信号通路机制。结果:FOXC1在结肠癌组织中的mRNA表达显著高于正常组织(P<0.001),FOXC1过表达与肿瘤分期的相关性接近显著(P=0.053),且高表达患者总体生存期缩短(Log-rank P=0.013)。敲低FOXC1后,Cyclin D1、Bcl-2表达降低,Bax表达升高(P<0.01),G0/G1期比例增加,S期减少(P<0.001),细胞增殖活性及集落形成数目减少(P<0.001)。机制研究表明,FOXC1敲低后,Rap1表达降低,Rap1GAP表达升高(P<0.05)。敲低FOXC1又恢复Rap1表达后可逆转Cyclin D1、Bcl-2的表达下调及Bax表达升高(P<0.05),S期比例增加(P<0.05),细胞增殖活性和集落形成能力增强。结论:FOXC1通过促进Rap1表达并下调Rap1GAP,促进结肠癌进展,靶向干预FOXC1-Rap1信号轴可能成为潜在治疗策略。 展开更多
关键词 结肠癌 FOXC1 rap1 增殖 凋亡
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COL8A1通过Rap1MAPK信号通路调控EMT过程介导结直肠癌顺铂药物敏感性的机制研究
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作者 许芳根 宋莹 +2 位作者 姜美兰 熊丽玲 姜斯聪 《中国实用医药》 2026年第1期177-180,共4页
目的选择结直肠癌中具备明显临床价值的隐匿靶元素,研究Ⅷ型胶原A1(COL8A1)透过Rap1MAPK信号通路调整上皮-间质细胞转化(EMT)流程介导结直肠癌顺铂药品敏感性的机制。方法透过GEPIA参数库搜索对结直肠癌有明显效果的治疗方法,使用免疫... 目的选择结直肠癌中具备明显临床价值的隐匿靶元素,研究Ⅷ型胶原A1(COL8A1)透过Rap1MAPK信号通路调整上皮-间质细胞转化(EMT)流程介导结直肠癌顺铂药品敏感性的机制。方法透过GEPIA参数库搜索对结直肠癌有明显效果的治疗方法,使用免疫组化染色模式与定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测试目标基因在结直肠癌细胞中的表达;透过小干扰RNA(siRNA)介导敲低目标基因,使用细胞增殖试验与克隆成型试验佐证其在结直肠癌形成演化中的功能;透过生物信息学参数库检索与目标基因融合的microRNA,深入探究潜藏功能体制。分析结直肠癌中高表达的靶元素;比较结直肠癌病变不同位置COL8A1表达。结果共选择46例结直肠癌中高表达并且具备明显临床预后关联度的细胞,最后选取COL8A1当成探究目标基因。结直肠上皮内瘤变位置COL8A1超过常规部位(P<0.05),与病理T分期明显关联。敲定COL8A1表达情况下,结直肠癌增殖速度与克隆成型速度明显下降(P<0.05)。过表达miR-876能够抑制SUZ12表达,让细胞增殖速度变得可控(P<0.05);而过表达miR-876与COL8A1能够明显调整SUZ12表达(P<0.05),复原细胞增殖速度到常规水准。结论COL8A1在结直肠癌内高表达,参与结直肠癌的整个流程,能够被当成结直肠癌初期诊疗的分子标识物;COL8A1带动结直肠癌增殖,能够透过竞争类融合miR-876弱化miR-876同SUZA12融合反应,从而解化SUZ12,带动结直肠癌的演化。通过对Rap1MAPK信号通路调控来明确其机制是否具有重大临床价值。 展开更多
关键词 Ⅷ型胶原A1 rap1MAPK信号通路 调控上皮-间质细胞转化 结直肠癌 机制演变研究
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虎杖苷调节cAMP/EPAC1/RAP1信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量:1
7
作者 刘佳 纪贤芬 严金金 《中国妇幼保健》 CAS 2024年第15期2917-2921,共5页
目的 探讨虎杖苷调节环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白1(EPAC1)/Ras相关蛋白1(RAP1)信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 研究时间为2022年8月-2023年8月。以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,分为空白组、虎杖苷-... 目的 探讨虎杖苷调节环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白1(EPAC1)/Ras相关蛋白1(RAP1)信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 研究时间为2022年8月-2023年8月。以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,分为空白组、虎杖苷-L组(25μmol/L虎杖苷)、虎杖苷-M组(50μmol/L虎杖苷)、虎杖苷-H组(100μmol/L虎杖苷)、Forskolin组(cAMP激活剂,100μmol/L Forskolin)以及虎杖苷-H+Forskolin组(100μmol/L虎杖苷+100μmol/L Forskolin)。分别以克隆形成实验、Transwell实验、划痕实验、TUNEL法、CCK-8法、Western Blot检测细胞克隆数、侵袭、迁移、凋亡、增殖及EPAC1、RAP1、凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。采用ELISA法检测细胞培养基中cAMP水平。结果 与空白组相比,Forskolin组细胞克隆数[(195.66±19.62)个]、侵袭数[(281.52±28.22)个]、迁移率[(82.61±8.31)%]、增殖率[(125.64±12.59)%]、cAMP水平[(1 385.54±138.56)pmol/ml]、EPAC1(1.56±0.16)、RAP1(2.11±0.22)、MMP-9(1.88±0.19)表达显著增加,凋亡率[(5.47±0.56)%]、Cleaved Caspase-3(0.26±0.03)表达均降低(均P<0.05),虎杖苷-L组、虎杖苷-M组、虎杖苷-H组细胞克隆数[(105.34±10.57)个、(65.34±6.58)个、(42.27±4.25)个]、侵袭数[(185.72±18.66)个、(145.47±14.58)个、(112.59±11.29)个]、迁移率[(40.21±4.06)%、(31.12±3.12)%、(21.34±2.15)%]、增殖率[(68.37±6.86)%、(48.67±4.88)%、(35.24±3.55)%]、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达显著降低,凋亡率[(19.85±1.99)%、(27.34±2.77)%、(36.44±3.66)%]、Cleaved Caspase-3表达均增加(均P<0.05)。与Forskolin组相比,虎杖苷-H+Forskolin组细胞克隆数、侵袭数、迁移率、增殖率、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达均显著降低,凋亡率、Cleaved Caspase-3表达均显著增加(均P<0.05)。与虎杖苷-H组相比,虎杖苷-H+Forskolin组细胞克隆数、侵袭数、迁移率、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达均显著增加,凋亡率、增殖率、Cleaved Caspase-3表达均显著降低(均P<0.05)。结论 虎杖苷可抑制子宫内膜癌细胞恶性生物学行为发展,可能与抑制cAMP/EPAC1/RAP1信号通路有关。 展开更多
关键词 虎杖苷 cAMP/EPAC1/rap1信号通路 子宫内膜癌 恶性生物学行为
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基于RAP1信号通路探讨右归丸延缓膝骨关节炎的软骨退变 被引量:3
8
作者 范元赫 杨永菊 +2 位作者 马贤德 张宇 关雪峰 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第4期137-142,I0035,I0036,共8页
目的通过右归丸治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠,观察大鼠关节软骨形态及检测右归丸对RAP1信号通路表达和大鼠血清中的炎性因子表达,探讨右归丸对RAP1信号通路的表达及防治KOA的作用机制,为治疗提供理论基础。方法72只SPF级SD大鼠(雌雄各半... 目的通过右归丸治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠,观察大鼠关节软骨形态及检测右归丸对RAP1信号通路表达和大鼠血清中的炎性因子表达,探讨右归丸对RAP1信号通路的表达及防治KOA的作用机制,为治疗提供理论基础。方法72只SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机数字表法分为假手术组12只和造模组60只。造模组采用改良Hulth法建立膝关节OA模型,假手术组接受假手术。将造模成功的大鼠分为模型组(n=11)、右归丸低剂量组(n=12)、右归丸中剂量组(n=12)、右归丸高剂量组(n=12)及塞来昔布组(n=12)。给药阶段模型组、假手术组给予0.9%氯化钠溶液;右归丸低剂量组为等效浓度的1/2为0.5 g/d、右归丸中剂量组等效浓度为1 g/d、右归丸高剂量组为等效浓度2倍为2 g/d,塞来昔布组配置成悬浮(等效浓度为0.0072 g/d)。驱赶7周后检测并比较各组大鼠软骨病理,血清TNF-α、IL-1β和IL-18含量,以及大鼠软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun的表达水平。结果各组大鼠软骨病理检测结果显示:假手术组大鼠软骨组织未见异常,模型组大鼠关节软骨部分区域出现明显缺损,右归丸低剂量组大鼠关节软骨表面磨损较模型组有所减轻,而中、高剂量组及塞来昔布组大鼠软骨表面可见侵蚀现象明显改善。右归丸对KOA大鼠血清中的IL-1β、TNF-α、IL-18含量与模型组相比,右归丸高、中、低剂量组和塞来昔布组在大鼠血清中表达显著降低,差异具有统计学意义。与软骨组织中RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号通路活化水平检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun的表达水平均显著升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结果提示,在KOA发生时,RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号转导通路激活,介导软骨组织中炎症反应及细胞凋亡的发生,这与以往研究结果一致。右归丸干预后,软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun蛋白表达水平均显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论右归丸能够抑制KOA大鼠软骨组织中RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号通路的活化,降低炎性因子表达,从而延缓软骨退变。 展开更多
关键词 右归丸 骨关节炎 rap1信号通路
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Rap1 GTP酶激活蛋白对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移作用的影响 被引量:2
9
作者 靳英 付小霞 +2 位作者 段瑞敏 郝力瑶 李峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期144-149,157,共7页
目的探讨Rap1 GAP在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的相关性。方法采用免疫组化EnVision两步法检测125例结肠癌组织中Rap1 GAP蛋白表达水平,应用Western blot法检测结肠癌细胞系(LOVO、HCT116、SW480)和正常结肠上皮细胞HCoE... 目的探讨Rap1 GAP在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的相关性。方法采用免疫组化EnVision两步法检测125例结肠癌组织中Rap1 GAP蛋白表达水平,应用Western blot法检测结肠癌细胞系(LOVO、HCT116、SW480)和正常结肠上皮细胞HCoEPiC中Rap1 GAP蛋白表达。通过慢病毒转染LOVO、HCT116和SW480细胞,分别下调、上调Rap1 GAP的表达,根据不同处理分为空载组(sh-NON、LV-NON)、sh-Rap1 GAP组(低表达Rap1 GAP)和LV-Rap1 GAP组(过表达Rap1 GAP),Western blot法验证细胞转染效率;采用MTT实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果125例结肠癌标本中,Rap1 GAP缺失表达者83例(66.4%),高于癌旁对照组织(7.2%)(P<0.001)。Rap1 GAP缺失表达率与肿瘤分化程度(χ^(2)=6.152,P=0.011)、是否伴黏液腺癌(χ^(2)=4.908,P=0.028)有关,与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、临床分期、淋巴结转移均无关(P>0.05)。Western blot结果显示,与HCoEPiC(0.189±0.081)细胞相比,LOVO(0.238±0.008)细胞中Rap1 GAP蛋白表达增高,HCT116(0.064±0.002)和SW480(0.152±0.026)细胞中Rap1 GAP蛋白表达降低(F=159.6,P<0.05)。LOVO细胞转染Rap1 GAP低表达慢病毒后,sh-Rap1 GAP-1组(0.733±0.071)、sh-Rap1 GAP-2组(0.559±0.136)和sh-Rap1 GAP-3组(0.606±0.037)Rap1 GAP蛋白表达水平明显低于LOVO组(1.880±0.129)(F=49.57,P<0.05)。与sh-NON组(1.260±0.109)相比,sh-Rap1 GAP-2组(1.569±0.059)和sh-Rap1 GAP-3组(1.548±0.087)细胞72 h增殖能力明显提高(F=28.36,P<0.05),其侵袭和迁移能力明显增高(P<0.05)。HCT116细胞转染Rap1 GAP过表达慢病毒后,与LV-NON组(0.485±0.097)相比,LV-Rap1 GAP组(1.395±0.137)Rap1 GAP蛋白表达明显较高(P<0.05)。MTT实验结果显示,与LV-NON组(0.652±0.047)相比,LV-Rap1 GAP组(1.212±0.038)细胞增殖能力降低,其侵袭和迁移能力明显降低(P<0.05)。SW480细胞的转染结果及增殖、侵袭和迁移能力与HCT116细胞一致。结论Rap1 GAP缺失表达率与结肠癌分化程度、是否伴黏液腺癌有关,上调Rap1 GAP表达能抑制结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,可为探究结肠癌的发生、发展机制提供理论依据。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 rap1 GAP 增殖 侵袭 迁移
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HPV E6通过Rap1信号通路影响宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究 被引量:1
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作者 秦祥川 李金秋 +2 位作者 黄晓婧 忽吐比丁·库尔班 阿仙姑·哈斯木 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第9期9-16,共8页
目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与... 目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与HPV相关的差异基因;利用GO、KEGG Pathway方法对差异基因进行生物学功能富集分析;Western blotting检测正常宫颈上皮细胞HCerEpic、宫颈癌细胞Hela中Rap、Rap1GAP蛋白表达水平;通过平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测其增殖、侵袭及迁移能力;通过sh-E6慢病毒转染下调细胞内HPV E6表达,分为对照组(Hela细胞)、空载组(sh-NON)和sh-E6组(低表达HPV E6);下调HPV E6表达,采用平板克隆和CCK-8实验分别检测每组细胞增殖能力和细胞活力;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力;Western blotting检测各组细胞中E6、Rap1、Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达水平。在sh-E6组基础上过表达Rap1,Western blot检测细胞中Rap1通路及相关蛋白的表达水平;平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果测序结果显示,与正常宫颈HPV阴性比较,HPV阳性的正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中差异上调表达的基因分别有340、864和1036个;3个数据集寻找共有差异基因共24个。GO|KEGG富集分析24个差异表达基因主要富集在Rap1相关信号通路。与HCerEpic细胞相比,Hela细胞内Rap1表达升高,Rap1GAP表达降低(P<0.01);其细胞的增殖、侵袭和迁移能力增强(P<0.01);下调HPV E6表达后,与Hela组比较,sh-E6组细胞的增殖、细胞集落形成、侵袭和迁移能力降低(P<0.001);Western blotting表明,与Hela组比较,sh-E6组细胞内Rap1、CyclinD1、N-cadherin蛋白表达降低,Rap1GAP和E-cadherin蛋白表达升高(P<0.001)。与sh-E6组相比,过表达Rap1组(sh-E6/OE Rap1)细胞内Rap1/Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达被恢复(P<0.001),细胞增殖、侵袭迁移能力被恢复(P<0.01)。结论在宫颈癌发展过程中,HPV E6通过激活Rap1信号通路促进宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 HPV E6 宫颈癌 rap1通路 增殖 侵袭 迁移
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益气活血方调控cAMP/Epac1/Rap1信号改善冠心病气虚血瘀证大鼠的验证 被引量:10
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作者 吴华英 邓凯 +3 位作者 李静 毛一之 李亮 彭清华 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期107-116,共10页
目的:基于环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路探讨益气活血方对冠心病气虚血瘀证大鼠的心肌保护机制。方法:88只SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表分为假手术组(n=12)和实验组(n=76)... 目的:基于环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路探讨益气活血方对冠心病气虚血瘀证大鼠的心肌保护机制。方法:88只SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表分为假手术组(n=12)和实验组(n=76),实验组大鼠采用限制饮食及力竭性游泳复合冠状动脉左前降支(LAD)结扎术构建冠心病气虚血瘀证模型,采集大鼠心电图,将造模成功后的实验组大鼠随机分为模型组、益气活血方低、中、高剂量组(4.28、8.55、17.1 g·kg^(-1))、西药组(单硝酸异山梨酯片,3.6 mg·kg^(-1)),连续给药4周;假手术组及模型组灌胃等体积双蒸水。末次给药后24 h取材,行心脏超声检测左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD),左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF),腹主动脉采血行血液流变学测定,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆cAMP水平;留取心肌组织进行苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察心肌病理损伤情况,透射电镜观察心肌组织超微结构改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌Epac1、Rap1GTP酶激活蛋白(Rap1GAP)及Rap1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌Epac1、Rap1GAP及Rap1蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠的LVEDD、LVESD显著增加(P<0.01),EF及FS比率显著下降(P<0.01),表现出心功能减退的“心气虚”症状;全血黏度及血浆黏度显著升高(P<0.01),cAMP含量显著升高(P<0.01),心肌组织胶原纤维显著增生(P<0.01),心肌超微结构受损严重,表现出“血瘀”的病理改变;Real-time PCR结果显示模型组大鼠Epac1及Rap1 mRNA显著降低(P<0.01),Rap1GAP mRNA显著增加(P<0.01);Western blot显示Epac1蛋白表达显著降低(P<0.01),Rap1GAP蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,益气活血方能改善冠心病气虚血瘀证大鼠心功能、降低血液黏度、降低血浆cAMP含量、减少胶原纤维增生,改善心肌超微结构损伤,以高剂量组作用效果最佳。益气活血方高剂量组能显著增加Epac1 mRNA及蛋白表达(P<0.01),显著增加Rap1 mRNA表达(P<0.01),明显降低Rap1GAP mRNA及Rap1GAP/Rap1蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:益气活血方可改善冠心病气虚血瘀证大鼠心功能、降低血液黏度与血浆cAMP含量、改善心肌损伤、减少胶原纤维增生,其心肌保护机制可能与调节cAMP/Epac1/Rap1信号通路有关。 展开更多
关键词 益气活血方 补阳还五汤 冠心病 气虚血瘀证 环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(rap1)信号通路
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RAP1B对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞生物学行为的影响研究
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作者 张韵格 张可悦 +3 位作者 黄娴倩 陈吉 黄佳丽 陈勇 《中华临床免疫和变态反应杂志》 CAS 2024年第5期432-438,共7页
目的探讨RAP1B对体外培养的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-1ike synoviocyte,FLS)增殖、迁移以及炎症因子分泌能力的影响。方法通过构建RAP1B过表达及干扰表达的慢病毒载体,转染至人RA成纤维样滑... 目的探讨RAP1B对体外培养的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-1ike synoviocyte,FLS)增殖、迁移以及炎症因子分泌能力的影响。方法通过构建RAP1B过表达及干扰表达的慢病毒载体,转染至人RA成纤维样滑膜细胞(MH7A),分别采用CCK8法、划痕实验、Transwell-迁移实验及ELISA法,对MH7A增殖、迁移及炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8)分泌能力进行检测。结果RAP1B表达上调后,MH7A增殖、迁移及炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8)分泌能力均明显增强(均P<0.01);RAP1B表达下调后,MH7A增殖、迁移及炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8)分泌能力均明显减弱(均P<0.05)。结论RAP1B具有促进RA-FLS增殖、迁移及炎症因子分泌的能力。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 rap1B
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牡荆素调控Epac1/Rap1通路介导H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用机制 被引量:1
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作者 甘琴 王鑫 +1 位作者 杨换花 董六一 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1091-1099,共9页
目的:研究Epac/Rap1信号通路在H9c2细胞缺氧复氧损伤中的作用,并探明牡荆素(vitexin,VT)调控Epac/Rap1信号通路保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用机制。方法:采用氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)构建H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤... 目的:研究Epac/Rap1信号通路在H9c2细胞缺氧复氧损伤中的作用,并探明牡荆素(vitexin,VT)调控Epac/Rap1信号通路保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用机制。方法:采用氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)构建H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤模型。实验随机分为7组:正常对照组、OGD组、OGD+VT组、OGD+Epac1激动剂(8-CPT)+VT组、OGD+Epac1抑制剂(ESI-09)+VT组、OGD+8-CPT+VT+PKA抑制剂(H-89)组、OGD+ESI-09+VT+H-89组。MTT检测细胞活力;LDH检测细胞损伤;Western blot检测H9c2细胞中Epac1及其下游Rap1-GTP、CaMK II和ERK蛋白的表达量;免疫荧光检测H9c2心肌细胞中Epac1和Rap1蛋白的表达;PCR实时荧光定量检测H9c2心肌细胞中Rap1和Epac1的m RNA表达;钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)检测细胞内[Ca^(2+)]i含量;Co-IP检测细胞中Epac1与Rap1的相互作用。结果:与正常对照组相比,OGD组H9c2心肌细胞在缺氧5 h复氧1 h后,LDH释放量显著升高,心肌细胞细胞活力显著降低,Epac1蛋白表达显著升高,Rap1活化,Rap1-GTP上调。VT(10μmol/L)可显著抑制OGD后H9c2心肌细胞Epac1的激活,继而抑制其下游Rap1活性形式Rap1-GTP的表达,另外CaMK II蛋白表达下调,但ERK磷酸化增加,同时减轻心肌细胞内钙超载;8-CPT可抵消VT的作用,ESI-09与VT联合处理后具有协同作用;H-89对心肌细胞Epac1及其下游相关蛋白表达无影响。结论:缺氧复氧可介导心肌细胞Epac1/Rap1信号通路激活,VT通过抑制Epac1/Rap1信号通路,下调CaMKⅡ蛋白表达,促进ERK磷酸化,对心肌细胞缺氧复氧损伤起保护作用。 展开更多
关键词 牡荆素 Epac1 rap1 缺氧复氧损伤
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小鼠上丘Rap1B表达的发育性变化及关键期单眼形觉剥夺对其的影响
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作者 栾长霖 凌颖 +1 位作者 叶京京 史学锋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第7期522-525,共4页
目的探讨小鼠上丘Rap1B表达的发育性变化以及视觉发育关键期单眼形觉剥夺(MD)对其表达的影响。方法SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠45只为实验对象。实验一:小鼠上丘Rap1B表达的发育性变化。该实验小鼠分为3组,即关键期前组[生后18 d(P18)小... 目的探讨小鼠上丘Rap1B表达的发育性变化以及视觉发育关键期单眼形觉剥夺(MD)对其表达的影响。方法SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠45只为实验对象。实验一:小鼠上丘Rap1B表达的发育性变化。该实验小鼠分为3组,即关键期前组[生后18 d(P18)小鼠]、关键期组(P32小鼠)和成年组(P60小鼠),采用qPCR和Western blot检测各组小鼠左右两侧上丘中Rap1B基因及蛋白的表达量。实验二:MD对上丘Rap1B基因及蛋白表达的影响。该实验小鼠分为2组:右眼MD组(小鼠P28时右眼建立MD模型,至P32时行检测)与NC组(正常对照组,P32小鼠),采用qPCR和Western blot检测各组小鼠左右两侧上丘中Rap1B基因及蛋白的表达。结果关键期前组小鼠左右两侧上丘中Rap1B基因和蛋白表达量均较低;与关键期前组相比,关键期组小鼠Rap1B基因及蛋白表达量均显著增高(均为P<0.05);与关键期组相比,成年组小鼠Rap1B基因和蛋白表达量均显著降低(均为P<0.05)。与NC组相比,右眼MD组小鼠左侧上丘Rap1B基因和蛋白表达量均显著增高(均为P<0.05),而右侧上丘Rap1B基因和蛋白表达量均显著降低(均为P<0.05)。结论小鼠上丘中Rap1B基因表达的发育性变化趋势与视觉发育关键期相一致,Rap1B可能参与了关键期MD对上丘发育的调控。 展开更多
关键词 视觉发育 神经可塑性 上丘 单眼形觉剥夺 弱视 rap1B
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缺氧微环境中HIP68/RAP1B信号通路对乳腺癌侵袭转移的作用
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作者 屈航英 闫鹏云 +1 位作者 张佳 陈强 《西部医学》 2024年第4期480-488,共9页
目的探讨HIP68/RAP1B信号通路对乳腺癌侵袭转移的作用机制。方法选取西安交通大学第一附属医院2012—2013年乳腺癌组织样本共73例,通过免疫组化标本及临床资料分析HIP68/RAP1B的表达情况及其与病理特征的关系。将体外培养的乳腺癌细胞系... 目的探讨HIP68/RAP1B信号通路对乳腺癌侵袭转移的作用机制。方法选取西安交通大学第一附属医院2012—2013年乳腺癌组织样本共73例,通过免疫组化标本及临床资料分析HIP68/RAP1B的表达情况及其与病理特征的关系。将体外培养的乳腺癌细胞系(MCF-7和MDA-MB-231)构建成缺氧乳腺癌细胞,分别测定缺氧乳腺癌细胞系(MCF-7和MDA-MB-231)及正常乳腺上皮细胞系SK-BR-3中HIP68/RAP1B蛋白表达情况。构建高/低表达HIP68的乳腺癌细胞,观察其对RAP1B蛋白的影响及对乳腺癌细胞生物学行为的影响;沉默/过表达乳腺癌细胞RAP1B,观察其对HIP68蛋白的影响及对细胞生物学行为的影响;免疫共沉淀检测HIP68/RAP1B的结合位点。结果HIP68和RAP1B蛋白在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.05);HIP68表达与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05),RAP1B的表达与TNM分期、淋巴结转移、ER、RR状态相关(P<0.05);HIP68表达与RAP1B表达呈正相关(r=0.427,P<0.05)。HIP68/RAP1B在缺氧乳腺癌系细胞中高表达;RAP1B蛋白的表达与HIP68表达呈正相关并且高表达HIP68/RAP1B促进细胞侵袭转移,低表达HIP68/RAP1B抑制细胞侵袭转移;HIP68蛋白不因RAP1B蛋白的高/低表达而改变,但是高表达RAP1B促进乳腺癌细胞增殖及侵袭转移;免疫共沉淀结果显示RAP1B可能为HIP 68基因的下游。结论HIP68/RAP1B信号通路在缺氧乳腺癌组织中高表达并促进乳腺癌细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 HIP68 rap1B 侵袭 转移
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脂肪组织RAP1B敲除缓解寒冷条件下肥胖小鼠的脂肪积累
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作者 傅寅旭 朱辉 +4 位作者 王鑫波 胡萍乙 方毓 周怀彬 吕建新 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第11期1881-1893,共13页
该研究旨在探讨RAP1B在脂肪组织细胞代谢功能调节中的作用机制。围绕高脂饮食喂养和冷刺激处理的脂肪组织特异性Rap1b敲除小鼠,结合RAP1B敲低的3T3-L1细胞模型,系统分析RAP1B对白色脂肪组织线粒体功能的影响。通过对比脂肪组织特异性敲... 该研究旨在探讨RAP1B在脂肪组织细胞代谢功能调节中的作用机制。围绕高脂饮食喂养和冷刺激处理的脂肪组织特异性Rap1b敲除小鼠,结合RAP1B敲低的3T3-L1细胞模型,系统分析RAP1B对白色脂肪组织线粒体功能的影响。通过对比脂肪组织特异性敲除Rap1b小鼠与对照组小鼠在脂肪组织中的体质量、脂肪组织含量、脂质代谢相关指标和体温调节能力,评估RAP1B在脂肪组织代谢中的作用,结果表明,RAP1B缺失的小鼠在HFD喂养下夜间体温显著升高,脂肪含量下降。3T3-L1细胞实验结果显示,RAP1B敲低不影响脂肪细胞分化和脂质积累,但显著提高了线粒体的呼吸功能和ATP产量。进一步研究发现,RAP1B缺失显著提高了小鼠脂肪组织和3T3-L1细胞的线粒体复合体含量,脂肪组织蛋白组学结果显示氧化磷酸化和产热途径富集。这些结果表明,RAP1B缺失后可能通过增强线粒体功能改善脂肪组织的代谢能力,进而影响体温调节和脂质储存。该研究揭示了RAP1B在脂肪组织线粒体功能调节中的关键作用,并提出RAP1B缺失后可能通过增强线粒体功能和改变脂质代谢状态影响肥胖的发展。 展开更多
关键词 rap1B 肥胖 线粒体功能 脂肪组织 能量代谢 代谢性疾病
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宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变关系的研究 被引量:1
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作者 秦薇 《中国现代医生》 2014年第20期37-40,共4页
目的研究宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变的关系。方法以我院收治的70例宫颈癌患者为观察组,另选正常宫颈组织70例为对照组。分别对两组对象的宫颈组织进行DNA提取、总RNA提取、cDNA合成、PCR反应扩增。并检测HPV感染、Rap1... 目的研究宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变的关系。方法以我院收治的70例宫颈癌患者为观察组,另选正常宫颈组织70例为对照组。分别对两组对象的宫颈组织进行DNA提取、总RNA提取、cDNA合成、PCR反应扩增。并检测HPV感染、Rap1GAP基因外显子E11和E19缺失率、Rap1GAP mRNA表达及Rap1GAP蛋白表达情况。结果观察组患者HPV感染明显高于对照组(P<0.05)。观察组HPV阳性和阴性组E11和E19的缺失率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Rap1GAP mRNA、Rap1GAP蛋白在观察组HPV阳性组组织中的表达率、阳性表达率明显低于HPV阴性组(P<0.05)。宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关(r=0.578),与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关(r=0.554)。结论宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关,与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV感染 rap1GAP基因 rap1GAP蛋白 关系
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C3G/Rap1和Dock180/Rac1信号通路在卵巢癌浸润中的作用 被引量:13
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作者 高一萌 张瑜 +5 位作者 李文燕 车亚玲 王瑾 刘斌 王辉 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1031-1034,共4页
目的探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G/Rap1酶和鸟嘌呤核苷酸交换因子Dock180/Rac1酶信号通路在卵巢癌浸润中的可能作用。方法 Western blot检测Dock180沉默的卵巢癌细胞SKOV3中C3G的表达,验证上皮性卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达相关性;... 目的探讨鸟嘌呤核苷酸交换因子C3G/Rap1酶和鸟嘌呤核苷酸交换因子Dock180/Rac1酶信号通路在卵巢癌浸润中的可能作用。方法 Western blot检测Dock180沉默的卵巢癌细胞SKOV3中C3G的表达,验证上皮性卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达相关性;免疫组化比较卵巢癌组织中Dock180与C3G的表达趋势;免疫荧光观察SKOV3中Dock180与C3G及它们各自的下游蛋白Rac1/Rap1的定位。结果 Dock180基因沉默的细胞中C3G表达明显增强(P<0.05);Dock180与C3G在卵巢癌组织中的表达呈现相反趋势(P<0.05);C3G/Dock180均主要分布于细胞质,下游效应蛋白Rap1/Rac1在细胞膜和细胞质都有表达,但Rap1以细胞质为主,而Rac1可以伸展至细胞膜及细胞膜皱褶。结论卵巢癌细胞和组织中C3G与Dock180表达呈相反趋势,下游蛋白Rap1与Rac1在细胞内的定位分布差异,可能与C3G/Rap1和Dock180/Rac1信号通路在卵巢肿瘤浸润中的不同作用有关。 展开更多
关键词 鸟嘌呤核苷酸释放因子2 rap1 GTP结合蛋白质类 卵巢肿瘤 肿瘤细胞 培养的 肿瘤浸润
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白花蛇舌草通过抑制RAP1-JNK信号通路选择性促进人肾癌ACHN细胞间质-上皮转化 被引量:7
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作者 邹寒冰 周雁 +3 位作者 张元亮 何小珍 刘培峰 刘永忠 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期235-248,共14页
目的 :研究白花蛇舌草(Hedyotis di usa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24 h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞... 目的 :研究白花蛇舌草(Hedyotis di usa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24 h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞增殖的影响,FCM法检测HDW对细胞周期和凋亡的影响。光学显微镜下及罗丹明染色法观察HDW处理对ACHN和HK-2细胞形态的影响;采用免疫荧光染色法和蛋白质印迹法检测间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)相关蛋白表达的变化。划痕愈合实验和Transwell小室法检测ACHN和HK-2细胞的迁移和侵袭能力,RNA测序法检测HDW对ACHN细胞转录组的影响;实时荧光定量PCR法检测RAP1信号通路相关基因RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)通路相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(phospho-JNK,p-JNK)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达水平的改变。结果:HDW可选择性抑制ACHN细胞增殖(P <0.01),将细胞周期阻滞于S期(P <0.01),诱导细胞凋亡(P <0.01)。HDW处理后ACHN细胞的形态发生了明显变化,HDW可促进ACHN细胞中E-钙黏蛋白1(E-cadherin 1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达,并抑制波形蛋白(Vimentin)和Snail1的表达(P值均<0.01)。HDW能显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.01),且ACHN和HK-2细胞之间没有明显差异。RNA测序结果分析显示,HDW可影响细胞周期相关基因以及控制细胞生长的转录因子E2F和Myc靶基因的表达,并激活p53信号通路;HDW可显著下调ACHN细胞中RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA(P值均<0.000 1)和p-JNK蛋白的表达水平。结论 :HDW可能通过抑制RAP1-JNK信号通路来选择性抑制肾癌细胞ACHN的增殖,促进ACHN细胞MET、周期阻滞和凋亡。 展开更多
关键词 肾肿瘤 白花蛇舌草 上皮-间质转化 细胞运动 rap1-JNK信号通路
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Rap1a高表达对SNL大鼠神经病理性疼痛及星形胶质细胞自噬的影响 被引量:8
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作者 孙树凯 马磊 +1 位作者 张海红 贾栋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期2335-2339,共5页
目的分析L5脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓组织中Rap1a的表达及其对神经病理性疼痛的影响,探讨其作用机制。方法采用L5脊神经结扎法制备SNL大鼠模型,分为假手术(n=6)、SNL模型组(n=30)、生理盐水组(n=6)、Cont-shR组(n=6)、Rap1a-shR组(n=6)... 目的分析L5脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓组织中Rap1a的表达及其对神经病理性疼痛的影响,探讨其作用机制。方法采用L5脊神经结扎法制备SNL大鼠模型,分为假手术(n=6)、SNL模型组(n=30)、生理盐水组(n=6)、Cont-shR组(n=6)、Rap1a-shR组(n=6)、雷帕霉素组(n=6),经由鞘内注射法处理后,采用Von-Frey纤维丝法检测大鼠机械痛阈值,采用RT-PCR和Western blot法检测大鼠脊髓组织和星形胶质细胞中Rap1a的表达、mTOR活性及自噬水平。结果 SNL大鼠脊髓组织中Rap1a的表达水平较生理盐水组显著上升,机械痛阈明显降低(P<0.05)。Rap1a shRNA腺病毒感染后,SNL大鼠机械痛阈明显升高(P<0.05),大鼠脊髓组织及分离培养的星形胶质细胞中细胞自噬标志分子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值升高,p62表达水平下降,细胞自噬水平增加,且mTOR活化水平降低(P<0.05)。细胞自噬诱导剂雷帕霉素作用后,星形胶质细胞及SNL大鼠脊髓组织细胞自噬水平均明显增加,SNL大鼠的机械痛阈显著升高(P<0.05)。结论神经损伤引起的Rap1a高表达对神经病理性疼痛的发展有促进作用,这一过程可能与Rap1a对mTOR信号通路及星形胶质细胞自噬水平的调节有关。 展开更多
关键词 rap1a 神经病理性疼痛 星形胶质细胞自噬 MTOR SNL大鼠
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