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氢醌诱导下肝细胞PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA表达的时间效应 被引量:2
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作者 胡恭华 李锋 +2 位作者 庄志雄 庾蕾 黄海燕 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期83-86,90,共5页
目的研究氢醌(hydroquinone,HQ)诱导下L-02肝细胞PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA表达的时间效应,探讨PCNA、RAD6B及RAD18基因在HQ所致肝细胞毒性过程中的分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导不同时间(6、12、24和48... 目的研究氢醌(hydroquinone,HQ)诱导下L-02肝细胞PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA表达的时间效应,探讨PCNA、RAD6B及RAD18基因在HQ所致肝细胞毒性过程中的分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导不同时间(6、12、24和48 h)后,用Trizol试剂从L-02肝细胞中分离总RNA,而后反转录为cDNA;利用Primer 3软件设计PCNA、RAD6B及RAD18基因及内参照β-ACTIN基因的引物,并进行标准曲线分析和熔解曲线分析,建立和优化定量检测各目的基因在mRNA水平上表达的反应体系和反应条件;最后采用实时荧光定量PCR法检测不同时间点PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA的表达状况。结果在各时间处理组(6、12、24和48 h)中,染毒组L-02肝细胞内PCNA、RAD6B及RAD18基因在mRNA水平上的表达均高于未染毒组。在24 h的时间范围内,PCNA基因在mRNA水平上的表达无论是染毒组(40μmol/L)还是未染毒组(0μmol/L),均具有随时间的延长而增加的趋势;到24 h时,相对表达量达到最大值。RAD6B和RAD18基因在未染毒组中的表达在48 h范围内均有随时间的增加而升高的趋势,它们均在48 h时间点上表达最高,其相对表达量分别为2.66和4.32;但在染毒组中,RAD6B基因和RAD18基因在48 h处的表达则有所下降,其相对表达量分别由3.74和4.83降至2.78和4.61。结论HQ可以诱导PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA的表达上调,并且呈现一定的时序性。 展开更多
关键词 氢醌 PCNA rad6b RAD18 MRNA L-02肝细胞 时间效应
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氢醌对人L-02肝细胞泛素结合酶Rad6B表达的影响
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作者 胡恭华 庄志雄 +2 位作者 杨建平 黄海燕 杨淋清 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期352-354,共3页
目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞中泛素结合酶Rad6B表达的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)的HQ处理24h之后,采用实时荧光定量PCR技术检测Rad6B在mRNA水平上的表达;采用Western blot方法检测Rad6B... 目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞中泛素结合酶Rad6B表达的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)的HQ处理24h之后,采用实时荧光定量PCR技术检测Rad6B在mRNA水平上的表达;采用Western blot方法检测Rad6B在蛋白质水平上的表达。结果在0~160μmol/L的范围内,HQ可诱导Rad6B在mRNA和蛋白质水平上表达的增加,具有随着剂量的增加而升高的趋势;并且各染毒剂量组(5、10、20、40、80和160μmol/L组)肝细胞Rad6B在mRNA和蛋白质水平上的表达均明显地高于对照组(0μmol/L组)(P<0.01);当HQ的作用浓度达到160μmol/L时,Rad6B的表达水平达到最大值,其mRNA和蛋白质表达的相对定量值分别为4.35和0.85。结论HQ可使L-02肝细胞的Rad6B表达增加。 展开更多
关键词 氢醌 L-02肝细胞 rad6b 实时荧光定量PCR 泛素结合酶
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Loss of the ubiquitin-conjugating enzyme Rad6B disturbs mitochondrial function and cellular homeostasis in mouse skin
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作者 LINGHUI YU RONG SHEN +4 位作者 YANAN GUO YANXUAN GUO CHEN LI YANFENG SONG DEGUI WANG 《BIOCELL》 SCIE 2021年第3期761-772,共12页
Various factors can induce cell degeneration by altering the phenotype and metabolism of cells.Mitochondria play an essential role in cellular homeostasis and function,rendering aging processes highly associated with ... Various factors can induce cell degeneration by altering the phenotype and metabolism of cells.Mitochondria play an essential role in cellular homeostasis and function,rendering aging processes highly associated with mitochondrial function and status.Herein,we describe an aging-prone phenotype of murine skin cells caused by depletion of Rad6B(Ube2b),an E2 ubiquitin-conjugating enzyme.In this study,using Masson’s trichrome,we showed that loss of Rad6B causes physiological structure changes in mouse skin with age.In addition,a combination of western blotting experiments,transmission electron microscopy and employment of immunofluorescence staining revealed that depletion of Rad6B was characterized by an abnormal mitochondrial metabolic profile,including decreased mitochondrial biosynthesis and mitochondrial complex activities,increased ROS production and suppressed mitophagy resulting in metabolic disorders.Taken together,these results highlight an important relationship between Rad6B and skin senescence,suggesting that Rad6B plays an indispensable role in maintaining a healthy mitochondrial network and intracellular homeostasis. 展开更多
关键词 rad6b SKIN MITOCHONDRIA Respiratory chain SENESCENCE
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