CircRAD18通过miR-185-5p/HDGF轴调节急性髓系白血病细胞的柔红霉素耐药性

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作者 孙慧 杨菲菲 唐浩 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第5期1318-1326,共9页

目的:研究环状RNA RAD18(CircRAD18)通过miR-185-5p/肝癌衍生生长因子(HDGF)轴调节急性髓系白血病(AML)细胞柔红霉素(DNR)耐药性的机制。方法:通过实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测人AML细胞系HL-60、U937和人AML耐药细胞系KG1 a中Cir... 目的:研究环状RNA RAD18(CircRAD18)通过miR-185-5p/肝癌衍生生长因子(HDGF)轴调节急性髓系白血病(AML)细胞柔红霉素(DNR)耐药性的机制。方法:通过实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测人AML细胞系HL-60、U937和人AML耐药细胞系KG1 a中CircRAD18、miR-185-5p、HDGF表达。体外培养KG1 a细胞并随机分为对照组、DNR组、DNR+阴性对照组、DNR+CircRAD18敲低组、DNR+CircRAD18敲低+miR-185-5p inhibitor组,分组转染后通过实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测各组细胞CircRAD18、miR-185-5p、HDGF表达,CCK-8法、Ki-67免疫荧光染色检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫印迹实验检测各组细胞增殖、凋亡与耐药相关蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测KG1 a细胞CircRAD18对miR-185-5p及miR-185-5p对HDGF的靶向调节。结果:与HL-60、U937细胞相比,KG1 a细胞CircRAD18表达、HDGF mRNA与蛋白表达均明显升高(均P<0.05),miR-185-5p表达明显降低(P<0.05)。与对照组相比,DNR+CircRAD18敲低组细胞Cir-cRAD18表达、HDGF mRNA与蛋白表达、细胞活力、增殖率、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-gp蛋白表达均明显降低(均P<0.05),miR-185-5p表达、凋亡率、Bax蛋白表达均明显升高(均P<0.05);DNR组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与DNR组相比,DNR+CircRAD18敲低组细胞CircRAD18表达、HDGF mRNA与蛋白表达、细胞活力、增殖率、PCNA、Bcl-2、BCRP、P-gp蛋白表达均明显降低(均P<0.05),miR-185-5p表达、凋亡率、Bax蛋白表达均明显升高(均P<0.05);DNR+阴性对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与DNR+CircRAD18敲低组相比,DNR+CircRAD18敲低+miR-185-5p inhibitor组细胞HDGF mRNA与蛋白表达、细胞活力、增殖率、PCNA、Bcl-2、BCRP、P-gp蛋白表达均明显升高(均P<0.05),miR-185-5p表达、凋亡率、Bax蛋白表达均明显降低(均P<0.05)。CircRAD18可靶向下调KG1 a细胞miR-185-5p表达,且miR-185-5p可靶向下调HDGF表达。结论:敲低CircRAD18可通过上调miR-185-5p来降低HDGF表达,从而减弱AML细胞DNR耐药性,抑制DNR处理下的KG1 a细胞增殖并促使其凋亡。 展开更多

关键词 环状RNA rad18 miR-185-5p/HGDF轴 急性髓系白血病 柔红霉素 耐药性

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氢醌诱导下肝细胞PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA表达的时间效应 被引量：2

2

作者 胡恭华 李锋 +2 位作者 庄志雄 庾蕾 黄海燕 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期83-86,90,共5页

目的研究氢醌(hydroquinone,HQ)诱导下L-02肝细胞PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA表达的时间效应,探讨PCNA、RAD6B及RAD18基因在HQ所致肝细胞毒性过程中的分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导不同时间(6、12、24和48... 目的研究氢醌(hydroquinone,HQ)诱导下L-02肝细胞PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA表达的时间效应,探讨PCNA、RAD6B及RAD18基因在HQ所致肝细胞毒性过程中的分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导不同时间(6、12、24和48 h)后,用Trizol试剂从L-02肝细胞中分离总RNA,而后反转录为cDNA;利用Primer 3软件设计PCNA、RAD6B及RAD18基因及内参照β-ACTIN基因的引物,并进行标准曲线分析和熔解曲线分析,建立和优化定量检测各目的基因在mRNA水平上表达的反应体系和反应条件;最后采用实时荧光定量PCR法检测不同时间点PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA的表达状况。结果在各时间处理组(6、12、24和48 h)中,染毒组L-02肝细胞内PCNA、RAD6B及RAD18基因在mRNA水平上的表达均高于未染毒组。在24 h的时间范围内,PCNA基因在mRNA水平上的表达无论是染毒组(40μmol/L)还是未染毒组(0μmol/L),均具有随时间的延长而增加的趋势;到24 h时,相对表达量达到最大值。RAD6B和RAD18基因在未染毒组中的表达在48 h范围内均有随时间的增加而升高的趋势,它们均在48 h时间点上表达最高,其相对表达量分别为2.66和4.32;但在染毒组中,RAD6B基因和RAD18基因在48 h处的表达则有所下降,其相对表达量分别由3.74和4.83降至2.78和4.61。结论HQ可以诱导PCNA、RAD6B及RAD18基因mRNA的表达上调,并且呈现一定的时序性。 展开更多

关键词 氢醌 PCNA RAD6B rad18 MRNA L-02肝细胞 时间效应

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脑胶质瘤中RAD18的表达与放射治疗抵抗相关性分析 被引量：2

3

作者 徐延斌 麻旭东 +2 位作者 谢晨 詹奇 任付宾 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2017年第4期289-293,共5页

目的探讨RAD18与多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)放射抵抗的相关性,以期为改善脑胶质瘤放射抵抗提供新的治疗靶点。方法将人脑胶质瘤细胞系A172分别转染空白和装有RAD18的质粒载体,应用克隆实验检测经相同剂量射线照... 目的探讨RAD18与多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)放射抵抗的相关性,以期为改善脑胶质瘤放射抵抗提供新的治疗靶点。方法将人脑胶质瘤细胞系A172分别转染空白和装有RAD18的质粒载体,应用克隆实验检测经相同剂量射线照射后两组细胞增殖情况,最后采用qRT-PCR方法检测原发性及放射性粒子近距离治疗后复发性GBM样本中RAD18 mRNA的表达情况,进行统计学分析。结果经转染RAD18质粒过表达的GBM细胞经放射治疗后增殖情况高于转染空白质粒的GBM细胞(P<0.001);经近距离放射性粒子治疗后复发性GBM中RAD18 mRNA的表达水平高于原发性GBM(P<0.01)。结论复发性GBM放射治疗的抵抗性可能与RAD18的蛋白过表达有关。 展开更多

关键词 多形性胶质母细胞瘤 rad18 放射性粒子

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共抑制RAD18和REV1基因显著增加顺铂对肺癌细胞的毒性 被引量：2

4

作者 金君 李坚 袁荣霞 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第2期109-116,共8页

目的:探讨采用基因敲减技术抑制跨损伤合成(translesion synthesis,TLS)通路和范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)通路上游的RAD18基因与TLS通路的REV1基因后增加顺铂对人肺腺癌耐药细胞株(A549/DDP)细胞毒性的可行性及其机制。方法:蛋白质... 目的:探讨采用基因敲减技术抑制跨损伤合成(translesion synthesis,TLS)通路和范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)通路上游的RAD18基因与TLS通路的REV1基因后增加顺铂对人肺腺癌耐药细胞株(A549/DDP)细胞毒性的可行性及其机制。方法:蛋白质印迹法测定顺铂诱导的A549和A549/DDP细胞RAD18和REV1蛋白表达;应用脂质体转染试剂转染针对RAD18基因的siRNAs(RAD18-siRNA),检测A549/DDP细胞转染前后顺铂诱导的FANCD2和PCNA蛋白单泛素化水平;CCK-8法检测分别转染RAD18-siRNA、REV1-siRNA以及两者共转染前后经顺铂处理的A549/DDP细胞的增殖率;流式细胞术检测转染前后A549/DDP细胞凋亡率和细胞周期。结果:A549/DDP细胞转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA后,RAD18和REV1蛋白表达明显降低,表明转染有效,基因敲减成功。转染RAD18-siRNA后顺铂诱导的FANCD2和PCNA蛋白的单泛素化水平明显下降,提示FA通路和TLS通路的激活受到抑制。分别转染RAD18-siRNA或REV1-siRNA均可增强顺铂对A549/DDP的细胞毒性,增加顺铂诱导的细胞凋亡率,并增强细胞周期S/G2期的阻滞效应。共转染RAD18-siRNA和REV1-siRNA后,顺铂对A549/DDP细胞的毒性增强作用较单转染更为显著,顺铂诱导的细胞凋亡进一步增加。结论:敲减A549/DDP细胞的RAD18和REV1基因可通过抑制FA通路和TLS通路的DNA损伤修复功能,增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性;RAD18和REV1基因共敲减对顺铂的这一增敏作用更加明显,显示出A549/DDP细胞对顺铂耐药的逆转效应。 展开更多

关键词 肺癌细胞 顺铂 耐药 rad18 REV1 SIRNA

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RAD18基因与肿瘤治疗的研究进展

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作者 杨建龙 陈志荣 《医学综述》 2016年第16期3169-3172,共4页

人类对肿瘤发病机制的认识经历了一个漫长的进程,从过去单一的物理致癌、化学致癌、病毒致癌、突变致癌系统上升到多步骤、多因素综合致癌理论,其中癌基因、抑癌基因、DNA损伤修复基因的活性在此过程中起到了关键的作用。RAD18是一种DN... 人类对肿瘤发病机制的认识经历了一个漫长的进程,从过去单一的物理致癌、化学致癌、病毒致癌、突变致癌系统上升到多步骤、多因素综合致癌理论,其中癌基因、抑癌基因、DNA损伤修复基因的活性在此过程中起到了关键的作用。RAD18是一种DNA损伤激活的E3泛素连接酶,在肿瘤细胞的DNA损伤修复中起重要作用。RAD18在多种肿瘤细胞中表达水平升高明显,在放化疗产生抵抗的肿瘤细胞中表达进一步升高,提示RAD18与肿瘤的发生相关,并可作为克服耐药性的一个潜在靶点。 展开更多

关键词 肿瘤 rad18 耐药性

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RAD18基因敲除增强肺腺癌细胞对顺铂的敏感性 被引量：6

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作者 苏晋豫 李坚 +1 位作者 陈永昌 伍敏 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2015年第2期103-108,113,共7页

目的:研究敲除E3泛素连接酶RAD18基因后,人肺腺癌A549细胞株和顺铂耐药A549(A549/DDP)细胞株FA/BRCA途径DNA修复功能的变化及其对顺铂敏感性的改变。方法:合成针对RAD18基因的siRNA(RAD18-siRNA),通过脂质体将其分别转染人A549和A549/DD... 目的:研究敲除E3泛素连接酶RAD18基因后,人肺腺癌A549细胞株和顺铂耐药A549(A549/DDP)细胞株FA/BRCA途径DNA修复功能的变化及其对顺铂敏感性的改变。方法:合成针对RAD18基因的siRNA(RAD18-siRNA),通过脂质体将其分别转染人A549和A549/DDP细胞株。蛋白质印迹法检测经顺铂处理的两种细胞株转染siRNA前后RAD18蛋白表达及FANCD2单泛素化水平;CCK-8法测定经顺铂处理的两种细胞株转染siRNA前后细胞增殖率的变化;免疫荧光测定胞核内FANCD2核聚小体的形成;Annexin V/PI流式细胞术测定转染前后细胞凋亡率。结果:与转染RAD18-siRNA前相比,转染后经顺铂处理的A549和A549/DDP细胞株RAD18表达均明显降低;FANCD2蛋白单泛素化水平下调和核聚小体形成减少;同时细胞增殖率明显降低,细胞凋亡率则明显增加。结论:应用RNA干扰技术敲除RAD18基因可通过抑制A549和A549/DDP细胞株FA/BRCA途径的DNA损伤修复功能,增加这两种细胞株对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 SIRNA rad18基因 肺腺癌 FANCD2 顺铂 敏感性

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siRNA沉默RAD18抑制结肠癌SW480细胞FANCD2蛋白泛素化并增强其对丝裂霉素C的敏感性 被引量：4

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作者 钟雄平 陈业金 +3 位作者 孔红祥 刘超 乐贻军 王红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期1731-1733,共3页

目的:研究RAD18特异性siRNA对结肠癌SW480细胞FANCD2泛素化和对化疗药物丝裂霉素C敏感性的影响。方法 :RAD18特异性siRNA转染SW480细胞后用丝裂霉素C处理,通过Western blot检测细胞RAD18及FANCD2泛素化的表达,MTT法检测干扰RAD18后细胞... 目的:研究RAD18特异性siRNA对结肠癌SW480细胞FANCD2泛素化和对化疗药物丝裂霉素C敏感性的影响。方法 :RAD18特异性siRNA转染SW480细胞后用丝裂霉素C处理,通过Western blot检测细胞RAD18及FANCD2泛素化的表达,MTT法检测干扰RAD18后细胞对丝裂霉素C的敏感性。结果:RAD18特异性siRNA转染SW480细胞96 h后,RAD18基因的表达明显降低,导致经丝裂霉素C处理后FANCD2泛素化表达明显降低;siRAD18组细胞对丝裂霉素C的敏感性显著增强。结论 :抑制RAD18蛋白表达能延缓结肠癌细胞FANCD2泛素化表达,并增强SW480细胞对丝裂霉素C的敏感性。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 rad18 FANCD2 RNA干扰 SW480

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RAD18基因rs373572位点多态性与结直肠癌的相关性研究

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作者 顾竹君 王红 +3 位作者 刘超 乐贻军 林云安 王文佳 《胃肠病学》 2015年第12期732-735,共4页

背景：RAD18是一种单链DNA结合蛋白,在维持受损DNA的完整性和细胞基因组稳定等方面起有重要作用。目的：研究RAD18基因单核苷酸多态性（SNPs）位点Arg302Gln（rs373572）与结直肠癌易感性及其临床病理特征的关系。方法：提取109例结直... 背景：RAD18是一种单链DNA结合蛋白,在维持受损DNA的完整性和细胞基因组稳定等方面起有重要作用。目的：研究RAD18基因单核苷酸多态性（SNPs）位点Arg302Gln（rs373572）与结直肠癌易感性及其临床病理特征的关系。方法：提取109例结直肠癌患者和241名健康对照者的外周血基因组DNA,采用PCR测序法对RAD18基因rs373572位点进行基因分型。结果：结直肠癌组与对照组间RAD18基因rs373572位点GG、GA、AA基因型分布差异有统计学意义（P〈0.05）,结直肠癌组AA基因型频率显著高于对照组（16.5%对8.7%,P〈0.05;校正后OR=2.428,95%CI：1.170-5.035）,有远处转移的结直肠癌患者GA基因型频率显著高于无远处转移者（75.0%对41.9%,P〈0.05;校正后OR=7.764,95%CI：0.927-65.206）。rs373572位点多态性与结直肠癌分化程度、肿瘤部位、Duke分期、淋巴结转移均无相关性（P〉0.05）。结论：RAD18基因rs373572位点AA基因型可能是结直肠癌的遗传易感因素,且该位点多态性与结直肠癌的远处转移有关。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 基因 rad18 多态性 单核苷酸 肿瘤转移

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miR-145-5p通过靶向RAD18调控结直肠癌细胞的增殖与NK细胞的细胞毒作用 被引量：3

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作者 李丽 姚红亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期681-688,共8页

目的:探索RAD18影响结直肠癌细胞增殖及调节NK细胞对结直肠细胞的杀伤作用及其可能的机制。方法:采用生物信息学技术分析结直肠癌组织中RAD18和miR-145-5p的表达及两者之间的调控关系、分析RAD18富集通路。采用qPCR法验证RAD18和miR-145... 目的:探索RAD18影响结直肠癌细胞增殖及调节NK细胞对结直肠细胞的杀伤作用及其可能的机制。方法:采用生物信息学技术分析结直肠癌组织中RAD18和miR-145-5p的表达及两者之间的调控关系、分析RAD18富集通路。采用qPCR法验证RAD18和miR-145-5p在结直肠癌细胞中的表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p与RAD18的调控关系。按转染物的不同将SW480、HCT-15细胞分为将si-RAD18组、si-NC组,另向SW480细胞分别转染inhibitor-NC+si-NC、miR-145-5p inhibitor+si-NC或miR-145-5p inhibitor+si-RAD18,采用CCK-8法、克隆形成实验分别检测敲降miR-145-5p和/或RAD18对细胞增殖、克隆形成的影响;将各组细胞分别与经IL-2激活的NK92细胞共培养,采用乳酸脱氢酶释放法、ELISA和免疫荧光染色法分别检测NK细胞的细胞毒性、细胞因子分泌及细胞表面穿孔素和颗粒酶B表达的影响。结果:RAD18在结直肠癌组织和细胞中呈高表达(均P<0.01)。敲降RAD18可以抑制结直肠癌细胞增殖能力(P<0.05)和促进NK细胞活力、细胞毒性、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF分泌及穿孔素和颗粒酶B的表达(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验验证了RAD18-3’UTR与miR-145-5p的结合关系,miR-145-5p在结直肠癌组织和细胞中低表达(P<0.05或P<0.01)。miR-145-5p可以靶向下调RAD18的表达(P<0.05),过表达RAD18可以逆转miR-145-5p过表达对NK细胞杀伤效应的促进作用(均P<0.05)。结论:miR-145-5p可靶向下调RAD18的表达,miR-145-5p/RAD18轴能够影响结直肠癌细胞的增殖和NK细胞对其的细胞毒作用。 展开更多

关键词 结直肠癌 miR-145-5p rad18 NK细胞 SW480细胞 HCT-15细胞

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Cas9融合RAD18因子提高HEK293T细胞的定点敲入效率

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作者 黄广燕 王豪强 +2 位作者 李国玲 吴珍芳 张献伟 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期8-18,共11页

【目的】在哺乳动物细胞中,RAD51和RAD18是调节同源定向修复和非同源末端连接的关键因子。本研究目的在于探讨这2个因子在eSpCas9系统中对HEK293T细胞的定点敲入(Knock-in,KI)效率的影响,进而提高KI效率。【方法】通过构建eSpCas9-RAD51... 【目的】在哺乳动物细胞中,RAD51和RAD18是调节同源定向修复和非同源末端连接的关键因子。本研究目的在于探讨这2个因子在eSpCas9系统中对HEK293T细胞的定点敲入(Knock-in,KI)效率的影响,进而提高KI效率。【方法】通过构建eSpCas9-RAD51、eSpCas9-RAD18融合蛋白以及过表达RAD51、RAD18载体,比较它们的KI效率差异。【结果】eSpCas9-RAD18系统可以显著提高HEK293T细胞KI效率,约为原来eSpCas9系统的1.4~1.9倍(P<0.01),而e Sp Cas9-RAD51系统和过表达RAD51/RAD18对KI效率无显著提高作用。【结论】本研究构建的eSpCas9-RAD18系统可以有效地提高HEK293T细胞的KI效率,可为基因编辑、基因治疗及定点转基因提供一种新的辅助整合工具。 展开更多

关键词 基因编辑 CRISPR/Cas9系统 基因敲入 rad18 融合蛋白

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多形性胶质母细胞瘤中RAD18的表达及其与放射抵抗的关系

11

作者 王之涵 曾鸿君 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2021年第S02期46-48,52,共4页

目的探究多形性胶质母细胞瘤中RAD18的表达及其与放射抵抗的关系。方法选取2019年8月至2020年8月收治的50例放射治疗后复发及50例放射治疗后未复发的多形胶质母细胞瘤患者作为研究对象,将人脑胶质瘤细胞系(A172)分别转染空白和装有RAD1... 目的探究多形性胶质母细胞瘤中RAD18的表达及其与放射抵抗的关系。方法选取2019年8月至2020年8月收治的50例放射治疗后复发及50例放射治疗后未复发的多形胶质母细胞瘤患者作为研究对象,将人脑胶质瘤细胞系(A172)分别转染空白和装有RAD18的质粒载体,应用克隆实验检测经相同剂量射线照射后两组细胞增殖情况,对放射治疗后复发性多形性胶质母细胞瘤样本中RAD18 mRNA的表达情况进行检测,探讨RAD18与多形胶质母细胞瘤放射抵抗的相关性。结果在RAD18蛋白表达上,A172与正常人星形胶质细胞(NHAs)比较,差异无统计学意义(P>0.05);在转染后的RAD18蛋白表达上,转染装有RAD18质粒的A172比转染空白质粒载体高(P<0.05);在γ射线照射后细胞克隆形成数量上,转染装有RAD18质粒的A172比转染空白质粒载体RAD18多(P<0.05);复发性多形胶质母细胞瘤的RAD18蛋白表达比原发性多形胶质母细胞瘤高(P<0.05);RAD18与多形胶质母细胞瘤放射抵抗呈正相关(r=0.608,P<0.05)。结论对多形性胶质母细胞瘤采取放射治疗时会导致DNA损伤,增加RAD18表达,导致DNA的修复能力得到极大提升,进而引起患者放射抵抗,因此临床在放射治疗过程中对RAD18进行抑制,能提升治疗效果。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 放射疗法 影像引导 rad18 放射抵抗 复发

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多形性胶质母细胞瘤中RAD18的表达及与放射抵抗的关系

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作者 周亚燕 李子煌 +2 位作者 李壮玲 方敏捷 李先明 《中国实用医药》 2019年第19期69-70,共2页

目的研究RAD18与多形性胶质母细胞瘤(GBM)放射抵抗的相关性。方法80例放射治疗的多形性胶质母细胞瘤患者为研究对象,根据是否复发分为观察组(复发)和对照组(原发),各40例。将人脑胶质瘤细胞系A172分别转染空白和装有RAD18的质粒载体,应... 目的研究RAD18与多形性胶质母细胞瘤(GBM)放射抵抗的相关性。方法80例放射治疗的多形性胶质母细胞瘤患者为研究对象,根据是否复发分为观察组(复发)和对照组(原发),各40例。将人脑胶质瘤细胞系A172分别转染空白和装有RAD18的质粒载体,应用克隆实验检测经相同剂量射线照射后两组细胞增殖情况,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测原发性及放射性粒子近距离治疗后复发性多形性胶质母细胞瘤样本中RAD18信使核糖核酸(mRNA)的表达情况,并分析RAD18与多形性胶质母细胞瘤放射抵抗的相关性。结果人脑胶质瘤细胞系A172中RAD18蛋白表达与正常人星形胶质细胞(NHAs)比较差异无统计学意义(P>0.05)。转染RAD18质粒的A172细胞中RAD18蛋白表达及γ射线照射后细胞克隆形成数量分别为(0.91±0.09)和(157.25±15.13),显著高于转染空白质粒的A172细胞的(0.22±0.02)和(55.24±5.31),差异具有统计学意义(P<0.05)。复发性多形性胶质母细胞瘤(观察组)的RAD18蛋白表达为(14.12±1.21),显著高于原发性多形性胶质母细胞瘤(对照组)的(7.18±0.71),差异具有统计学意义(P<0.05)。经直线相关分析, RAD18与多形性胶质母细胞瘤放射抵抗呈正相关(r=0.621, P<0.05)。结论RAD18与多形性胶质母细胞瘤放射抵抗有关, RAD18的细胞修复能力会导致放射抵抗的发生,临床在放射治疗时应针对RAD18进行抑制处理。 展开更多

关键词 多形性胶质母细胞瘤 rad18 放射抵抗 相关性

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RAD18基因在小鼠胚胎中的表达分析 被引量：1

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作者 何金娜 李胜 +2 位作者 雷薇 石德顺 李湘萍 《畜牧与兽医》 北大核心 2015年第5期84-87,共4页

为了研究RAD18基因在小鼠胚胎发育过程中的表达模式,试验以体外培养的FVB小鼠胚胎为材料,采用定量RT-PCR及免疫荧光技术分析RAD18基因在小鼠胚胎中的表达水平。qRT-PCR结果表明,RAD18基因在小鼠植入前各时期胚胎中均有表达,其中与1-细... 为了研究RAD18基因在小鼠胚胎发育过程中的表达模式,试验以体外培养的FVB小鼠胚胎为材料,采用定量RT-PCR及免疫荧光技术分析RAD18基因在小鼠胚胎中的表达水平。qRT-PCR结果表明,RAD18基因在小鼠植入前各时期胚胎中均有表达,其中与1-细胞期胚胎相比,其在2-细胞、8-细胞期胚胎中表达水平较高(P<0.01),在桑葚期和囊胚期胚胎中表达量显著下降(P<0.01)。免疫荧光方法检测结果表明RAD18蛋白在在小鼠植入前各时期胚胎中均有表达。说明RAD18基因在小鼠植入前胚胎中均有表达,推测其与小鼠胚胎的早期发育密切相关。 展开更多

关键词 rad18 FVB小鼠 胚胎发育 基因表达

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Rad18缺失对雄小鼠生殖细胞的影响 被引量：1

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作者 孙婧华 刘立峰 《大连医科大学学报》 CAS 2012年第3期225-229,共5页

[目的]了解Rad18敲除雄小鼠生殖细胞的变化。[方法]用免疫组织化学方法检测2、6、12月龄Rad18-/-雄小鼠生精小管生殖细胞的特异性标记物TRA98的表达及分布,并与野生(WT)雄小鼠比较;用原位杂交技术检测Rad18在1周龄WT雄小鼠生精小管未分... [目的]了解Rad18敲除雄小鼠生殖细胞的变化。[方法]用免疫组织化学方法检测2、6、12月龄Rad18-/-雄小鼠生精小管生殖细胞的特异性标记物TRA98的表达及分布,并与野生(WT)雄小鼠比较;用原位杂交技术检测Rad18在1周龄WT雄小鼠生精小管未分化精原细胞中的表达。[结果]缺失TRA98标记的早期精原细胞的生精小管比例在12月龄Rad18-/-和WT雄小鼠中分别为39.50%和2.76%,差异有显著性意义(P<0.05);但Rad18-/-退化生精小管中保留正常的Sertoli细胞,其附睾中未见TRA98阳性的生殖细胞,且精子形态正常;1周龄WT小鼠睾丸未分化精原细胞中有Rad18蛋白表达。[结论]Rad18可能对精原干细胞有维持作用。 展开更多

关键词 rad18-/- 小鼠 TRA98 精原干细胞

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RAD18在结肠癌中的表达及与PCNA的相关性研究

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作者 郑冰 史刚刚 +3 位作者 韩梅 李帅 郑琳樾 王晖 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2024年第5期442-448,共7页

目的研究RAD18在结肠癌中的表达及与增殖细胞核抗原(PCNA)的相关性。方法收集2013年11月至2023年11月天津医科大学第二医院接受手术治疗患者(73例)的结肠癌组织及癌旁正常组织蜡块的玻璃切片,在基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库中分析RA... 目的研究RAD18在结肠癌中的表达及与增殖细胞核抗原(PCNA)的相关性。方法收集2013年11月至2023年11月天津医科大学第二医院接受手术治疗患者(73例)的结肠癌组织及癌旁正常组织蜡块的玻璃切片,在基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库中分析RAD18在结肠癌组织及癌旁正常组织中的表达,并采用免疫组织化学染色法进行验证;分析RAD18表达与结肠癌患者临床病理特征的关系;体外培养HCT116和HT29细胞,分别设置对照组和转染组(转染RAD18 shRNA敲低RAD18),通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和Western Blot实验评估RAD18的表达;采用克隆形成实验和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验探究RAD18对结肠癌细胞增殖的影响;通过GEPIA和免疫组织化学染色法研究RAD18与PCNA的相关性。结果GEPIA数据库分析显示,RAD18在结肠癌组织(n=275)中的表达明显高于癌旁正常组织(n=349,P<0.05)。RAD18在结肠癌组织中的表达高于癌旁正常组织,在癌旁正常组织中未见高表达。RAD18低表达组和高表达组与患者肿瘤大小密切相关(P=0.015),而与年龄(P=0.115)、性别(P=0.665)和肿瘤分化(P=0.733)无关。与对照组比较,转染组HCT116和HT29细胞中RAD18表达水平均降低(均P<0.05)。与对照组比较,转染组HCT116和HT29细胞的克隆细胞数和吸光度(A)值均下降(均P<0.05)。GEPIA数据库分析显示,RAD18与PCNA具有相关性(R=0.27,P<0.05),且PCNA在结肠癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织。结论RAD18在结肠癌组织中表达较高,可能通过影响PCNA来促进结肠癌的增殖。 展开更多

关键词 结肠癌 rad18 增殖细胞核抗原 临床病理特征 细胞增殖 预后

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跨损伤DNA合成通路中关键基因在食管鳞癌中的表达研究 被引量：2

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作者 朱孝中 俞力超 +3 位作者 施舜缤 邱鹏 钱永跃 陈勇兵 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期127-130,共4页

目的研究跨损伤DNA合成通路中的关键基因RAD6、RAD18、PCNA和UBC13在人食管鳞癌与癌旁组织中的表达差异。方法采用SYBRGreen实时定量PCR技术检测60例食管鳞癌患者癌组织和其中的24例癌旁组织中RAD6、RAD18、PCNA和UBC13基因表达情况。结... 目的研究跨损伤DNA合成通路中的关键基因RAD6、RAD18、PCNA和UBC13在人食管鳞癌与癌旁组织中的表达差异。方法采用SYBRGreen实时定量PCR技术检测60例食管鳞癌患者癌组织和其中的24例癌旁组织中RAD6、RAD18、PCNA和UBC13基因表达情况。结果 RAD6和UBC13在食管鳞癌与癌旁组织中的表达差异均无统计学意义(均P>0.05);RAD18和PCNA的表达在食管鳞癌中均显著上升,与癌旁组织相比差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。结论 RAD18和PCNA的表达升高可能是食管鳞癌的一个特征。RAD18和PCNA表达的升高可能与食管鳞癌中跨损伤DNA合成途径作用增强有关。 展开更多

关键词 食管鳞癌 跨损伤DNA合成 实时荧光定量PCR rad18 PCNA

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东方蜜蜂微孢子虫RRDRP的分子特性及系统进化分析

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作者 张凯遥 冯佩林 +6 位作者 宓诗雨 郭思佳 张艺琼 荆欣 陈大福 郭睿 付中民 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期371-376,共6页

【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的Rad18-like重组与DNA修复蛋白(Rad18-like recombination and DNA repair protein,RRDRP)进行系统进化分析,为进一步研究其功能提供理论依据。【方法】利用Protparam、ProtScale和SWISS-mode... 【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的Rad18-like重组与DNA修复蛋白(Rad18-like recombination and DNA repair protein,RRDRP)进行系统进化分析,为进一步研究其功能提供理论依据。【方法】利用Protparam、ProtScale和SWISS-model等软件分析RRDRP的理化性质、亲水性和三级结构。利用SignalP 4.1 Server、NetPhos 3.1 Server、TMHMM和SOPMA等软件预测RRDRP的信号肽、磷酸化位点、跨膜结构域及二级结构。使用PSORTⅡ软件预测RRDRP蛋白的亚细胞定位。使用MEME软件预测东方蜜蜂微孢子虫和其他物种RRDRP的保守基序。通过Mega 11.0软件对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的RRDRP进行氨基酸序列多重比对,并采用邻接法构建系统进化树。【结果】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP基因含有2928个核苷酸,可编码975个氨基酸,分子质量约11.50 ku,脂溶系数93.58,等电点6.63,分子式C_(5135)H_(8253)N_(1377)O_(1545)S_(34),平均亲水系数为-0.627,可同时定位于细胞核、细胞质、过氧化物酶体和细胞骨架;RRDRP包含55个磷酸化位点、678个α-螺旋、99条延长链、22个β-转角及176个无规则卷曲;RRDRP不含信号肽与跨膜结构域。东方蜜蜂微孢子虫、兔脑炎微孢子虫、颗粒病微粒子虫等11个物种的RRDRP中均含有5个相同的保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3、Motif 4和Motif 5)。东方蜜蜂微孢子虫与颗粒病微粒子虫在进化树上聚为一支,同源性较高。【结论】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP是潜在的亲水性蛋白和胞内蛋白,在东方蜜蜂微孢子虫以及其他微孢子虫和真菌中高度保守。【目的】通过对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的Rad18-like重组与DNA修复蛋白(Rad18-like recombination and DNA repair protein, RRDRP)进行系统进化分析,为进一步研究其功能提供理论依据。【方法】利用Protparam、ProtScale和SWISS-model等软件分析RRDRP的理化性质、亲水性和三级结构。利用SignalP 4.1 Server、NetPhos 3.1 Server、TMHMM和SOPMA等软件预测RRDRP的信号肽、磷酸化位点、跨膜结构域及二级结构。使用PSORT Ⅱ软件预测RRDRP蛋白的亚细胞定位。使用MEME软件预测东方蜜蜂微孢子虫和其他物种RRDRP的保守基序。通过Mega 11.0软件对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的RRDRP进行氨基酸序列多重比对,并采用邻接法构建系统进化树。【结果】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP基因含有2 928个核苷酸,可编码975个氨基酸,分子质量约11.50 ku,脂溶系数93.58,等电点6.63,分子式C5135H8253N1377O1545S34,平均亲水系数为-0.627,可同时定位于细胞核、细胞质、过氧化物酶体和细胞骨架;RRDRP包含55个磷酸化位点、678个α-螺旋、99条延长链、22个β-转角及176个无规则卷曲;RRDRP不含信号肽与跨膜结构域。东方蜜蜂微孢子虫、兔脑炎微孢子虫、颗粒病微粒子虫等11个物种的RRDRP中均含有5个相同的保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3、Motif 4和Motif 5)。东方蜜蜂微孢子虫与颗粒病微粒子虫在进化树上聚为一支,同源性较高。【结论】东方蜜蜂微孢子虫RRDRP是潜在的亲水性蛋白和胞内蛋白,在东方蜜蜂微孢子虫以及其他微孢子虫和真菌中高度保守。 展开更多

关键词 东方蜜蜂微孢子虫 染色体结构维持蛋白 rad18-like重组和DNA修复蛋白 分子特性 系统进化

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