Rab25过表达介导JAK2/STAT3信号通路对直肠癌细胞HCT116生长、侵袭及迁移的影响

1

作者 李萍 郑亚男 +3 位作者 张吉欣 李璐 孙弟波 王一飞 《解剖学杂志》 2025年第5期417-421,共5页

目的:探究Rab25过表达对直肠癌细胞HCT116生长、侵袭、迁移以及JAK2/STAT3通路的影响。方法:将HCT116细胞随机分为对照组、pcDNA组和Rab25组。RT-qPCR检测细胞Rab25 mRNA水平;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;划痕愈合... 目的:探究Rab25过表达对直肠癌细胞HCT116生长、侵袭、迁移以及JAK2/STAT3通路的影响。方法:将HCT116细胞随机分为对照组、pcDNA组和Rab25组。RT-qPCR检测细胞Rab25 mRNA水平;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;划痕愈合实验检测细胞迁移;免疫印迹检测Ki67、Survivin、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平。结果:与对照组比较,Rab25组Rab25 mRNA水平和蛋白表达水平显著升高,克隆形成数显著降低,Ki67、Survivin蛋白表达水平显著降低,侵袭细胞数显著降低,划痕愈合率显著降低,p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值显著降低,以上结果差异均具有统计学意义。结论:Rab25过表达抑制HCT116细胞增殖、侵袭和迁移,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 直肠癌 rab25蛋白 侵袭 迁移 JAK2/STAT3通路

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Rab25和CLIC3在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量：2

2

作者 王倩 汪素文 +5 位作者 高薇 田斌 曹烨华 程慧 尹朝 刘国涛 《中国现代普通外科进展》 CAS 2014年第6期452-455,共4页

目的:探讨Rab25和CLIC3在胃癌组织中的表达及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学技术,检测20例正常胃黏膜组织和62例胃癌组织中Rab25和CLIC3的表达,分析其与胃癌临床病理因素之间的关系。结果:Rab25和CLIC3在胃癌组织中的阳性表达率... 目的:探讨Rab25和CLIC3在胃癌组织中的表达及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学技术,检测20例正常胃黏膜组织和62例胃癌组织中Rab25和CLIC3的表达,分析其与胃癌临床病理因素之间的关系。结果:Rab25和CLIC3在胃癌组织中的阳性表达率分别为77.4%、74.2%,明显高于正常胃黏膜(5%、5%),差异有统计学意义(P均<0.01)。Rab25和CLIC3的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P均>0.05),而与胃癌组织分化程度、TNM分期、有无淋巴结转移密切相关(P均<0.05)。两种蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.475,P<0.01)。结论:Rab25和CLIC3在胃癌组织中阳性表达,并在胃癌的侵袭转移过程中起重要作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 rab25 CLIC3 免疫组织化学

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Rab25蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：2

3

作者 周璞 刁鑫伟 +3 位作者 汤金梁 彭丽娜 张洪川 陈正堂 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期157-160,共4页

目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤增殖、转移的相关性。方法收集2009年1月-2010年6月第三军医大学新桥医院61例NSCLC组织(鳞癌31例、腺癌26例、腺鳞癌4例)和40例癌旁组织标本作为研究对象。采用免疫组化法检测... 目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤增殖、转移的相关性。方法收集2009年1月-2010年6月第三军医大学新桥医院61例NSCLC组织(鳞癌31例、腺癌26例、腺鳞癌4例)和40例癌旁组织标本作为研究对象。采用免疫组化法检测Rab25在组织标本中的表达情况;分析Rab25表达与临床病理特征(患者性别、年龄、吸烟史,肿瘤组织类型、分化程度、体积、TNM分期、淋巴结转移)的关系。结果 Rab25主要定位于细胞膜和细胞质中,在NSCLC组织的阳性表达率为93.4%,在癌旁组织的阳性表达率为27.5%(P<0.01)。Rab25的表达与肿瘤的TNM分期和大小相关(P<0.05)。结论 Rab25在NSCLC组织中的表达明显升高,NSCLC患者分期越晚、肿瘤直径越大,Rab25表达越高。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 rab25蛋白质 免疫组织化学

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Rab25基因对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响 被引量：1

4

作者 张小彬 陆云飞 +1 位作者 沈桂鑫 吴非 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期361-364,共4页

目的:建立一系列Rab25表达水平不同的乳腺癌细胞裸鼠移植瘤模型,观察不同水平Rab25表达对乳腺癌裸鼠移植瘤的影响。方法:通过分别上调及沉默Rab25基因在乳腺癌细胞中的表达,建立Rab25表达水平不同的乳腺癌细胞的裸鼠移植瘤模型,测量肿... 目的:建立一系列Rab25表达水平不同的乳腺癌细胞裸鼠移植瘤模型,观察不同水平Rab25表达对乳腺癌裸鼠移植瘤的影响。方法:通过分别上调及沉默Rab25基因在乳腺癌细胞中的表达,建立Rab25表达水平不同的乳腺癌细胞的裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,检测肿瘤组织中Rab25表达差异。结果:Rab25转染组较干扰组、原株细胞组及空质粒组对裸鼠细胞致瘤能力明显增强。转染组裸鼠瘤体中Rab25 mRNA表达明显增强,而干扰组瘤体Rab25 mRNA表达明显减弱。结论:Rab25为促癌基因,其高表达可直接增强乳腺癌细胞的增殖侵袭能力,而RNA干扰技术有可能为乳腺癌的肿瘤靶向和基因治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 rab25基因 裸鼠移植瘤

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重组质粒pDNR-Dual-Rab25的构建及其在人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达 被引量：1

5

作者 吴非 张海添 陆云飞 《广西医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第4期550-552,共3页

目的:构建真核表达质粒pDNR-Dual-Rab25,并在人乳腺癌细胞MDA-MB-231(MM231)中表达。方法:采用DNA重组技术将Rab25cDNA片段与载体pDNR-Dual连接,转染至人乳腺癌细胞株MM231中,G418筛选细胞,RT-PCR检测MM231细胞中Rab25基因的表达,MTT法... 目的:构建真核表达质粒pDNR-Dual-Rab25,并在人乳腺癌细胞MDA-MB-231(MM231)中表达。方法:采用DNA重组技术将Rab25cDNA片段与载体pDNR-Dual连接,转染至人乳腺癌细胞株MM231中,G418筛选细胞,RT-PCR检测MM231细胞中Rab25基因的表达,MTT法检测MM231细胞增殖活性,绘制细胞生长曲线。结果:经PCR、酶切及测序鉴定均证实重组质粒pDNR-Dual-Rab25构建成功,转染的人乳腺癌细胞株MM231中能扩增出与Rab25目的基因片段大小一致的DNA片段,说明该质粒经转染后能够在MM231细胞中稳定表达。经MTT法检测,转染重组质粒pDNR-Dual-Rab25的MM231细胞的增殖力明显增强。结论:成功构建真核表达质粒pDNR-Dual-Rab25,转染至MM231细胞后成功表达,且细胞增殖力明显增强,为研究Rab25基因对乳腺癌的影响提供了实验依据。 展开更多

关键词 rab25 乳腺癌 MDA-MB-231

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Rab25-卵巢癌基因治疗的新靶点 被引量：1

6

作者 樊杨 辛晓燕 《中国妇幼健康研究》 2006年第3期239-241,共3页

Rab25属于小G蛋白家族,与Rab11具有同源性,参与细胞的动力过程。新近有研究认为Rab25有可能成为卵巢癌治疗的又一新途径。该文综述了Rab蛋白的结构、功能,特别是囊泡形成、转运、粘附、锚定、融合等不同的运输阶段调控囊泡的运输。目前... Rab25属于小G蛋白家族,与Rab11具有同源性,参与细胞的动力过程。新近有研究认为Rab25有可能成为卵巢癌治疗的又一新途径。该文综述了Rab蛋白的结构、功能,特别是囊泡形成、转运、粘附、锚定、融合等不同的运输阶段调控囊泡的运输。目前已知PIK3CA基因在晚期卵巢癌中表达明显增多,研究发现Rab25表达上调增加PIK3CA的活性,表明Rab25参与了卵巢癌的发病,与疾病的发展及预后密切相关。 展开更多

关键词 rab25 小G蛋白 卵巢癌 治疗

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Rab25蛋白及VEGF在结直肠癌患者血清中的表达情况分析 被引量：5

7

作者 黄辉文 《中国实用医药》 2020年第9期51-53,共3页

目的探究Rab25蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌患者血清中的表达水平及临床意义。方法选择43例确诊的结直肠癌患者作为实验组,另选择50例同期接受体格检查的健康者作为对照组,对比两组研究对象Rab25蛋白表达阳性率以及血清VEGF... 目的探究Rab25蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌患者血清中的表达水平及临床意义。方法选择43例确诊的结直肠癌患者作为实验组,另选择50例同期接受体格检查的健康者作为对照组,对比两组研究对象Rab25蛋白表达阳性率以及血清VEGF水平。将实验组患者按照病理分期不同分为为早期组(Ⅰ~Ⅱ期, 23例)和晚期组(Ⅲ~Ⅳ期, 20例),对比早期组和晚期组患者Rab25蛋白表达阳性率以及血清VEGF水平。结果实验组患者Rab25蛋白表达阳性率81.40%以及血清VEGF(313.51±20.15)pg/ml均明显高于对照组的6.00%、(163.26±19.56)pg/ml,差异均具有统计学意义(P<0.05)。晚期组患者Rab25蛋白表达阳性率95.00%以及血清VEGF(436.55±23.66)pg/ml均明显高于早期组的69.57%、(206.51±13.69)pg/ml,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 Rab25蛋白及血清VEGF在结直肠癌患者体内呈现明显的高表达状态,同时随着病情加重上述两种物质表达也有明显升高。 展开更多

关键词 结直肠癌 rab25蛋白 血管内皮生长因子 表达情况 分析

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Rab25、Claudin-5和Claudin-7在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量：2

8

作者 刘芳 王志强 《牡丹江医学院学报》 2019年第2期25-29,59,共6页

目的探讨Rab25、Claudin-5和Claudin-7在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达差异及临床意义。方法免疫组化SABC法分别检测53例结直肠癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中Rab25、Claudin-5和Claudin-7蛋白的表达水平,并将各因子的表达情况... 目的探讨Rab25、Claudin-5和Claudin-7在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达差异及临床意义。方法免疫组化SABC法分别检测53例结直肠癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中Rab25、Claudin-5和Claudin-7蛋白的表达水平,并将各因子的表达情况与患者的临床资料进行相关性分析,进而比较各因子之间表达水平的相关性。结果结直肠癌肿瘤组织中Rab25、Claudin-5、Claudin-7的表达水平均显著低于癌旁正常组织(P<0.05)。Rab25低表达与结直肠癌分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05); Claudin-5表达与年龄和淋巴结转移有关(P<0.05); Claudin-7表达与分化程度、浸润深度和淋巴转移有关(P<0.05)。Rab25与Claudin-5、Claudin-5与Claudin-7之间在结直肠癌的表达存在相关性(P<0.05)。结论 Rab25、Claudin-5、Claudin-7的低表达可能促进结直肠癌的发生,且其低表达与结直肠癌进展存在一定相关,Rab25与Claudin-5之间、Claudin-5与Claudin-7之间也存在相关。 展开更多

关键词 结直肠癌 rab25 紧密连接蛋白5 紧密连接蛋白7

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Rab25 siRNA诱导人卵巢癌细胞凋亡及其机制的研究

9

作者 樊杨 辛晓燕 +2 位作者 陈必良 马向东 商莉 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第1期23-26,共4页

目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,探讨Rab25siRNA对肿瘤细胞凋亡的生物学效应及作用机制。方法:构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达,用Hoechst 33258染色和TUNEL法研究Rab25... 目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,探讨Rab25siRNA对肿瘤细胞凋亡的生物学效应及作用机制。方法:构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达,用Hoechst 33258染色和TUNEL法研究Rab25 siRNA诱导细胞的凋亡;用免疫组化法分析抑制Rab25的表达对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果:Rab25 siRNA可诱导肿瘤细胞凋亡;蛋白水平检测表明抑制Rab25表达使Bcl-2表达下降,Bax表达增强。结论:Rab25 siRNA可诱导细胞凋亡,Rab25影响卵巢癌细胞生存途径是通过调节Bcl-2/Bax表达含量发挥作用。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 rab25 小干扰RNA 细胞凋亡 基因BCL-2 基因BAX

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Rab25基因siRNA对人卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响

10

作者 樊杨 辛晓燕 +2 位作者 陈必良 马向东 商莉 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第7期971-974,共4页

目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因siRNA对卵巢癌细胞增殖及诱导凋亡的效果。方法:构建针对Rab25基因的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲... 目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因siRNA对卵巢癌细胞增殖及诱导凋亡的效果。方法:构建针对Rab25基因的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;Hoechst33258荧光染色和透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果:成功构建Rab25的siRNA,稳定转染靶细胞后可显著降低Rab25的表达,细胞生长速度减慢、增殖能力下降;荧光显微镜和电镜观察到细胞胞质浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成。结论:Rab25基因的siRNA能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,为卵巢癌基因治疗开辟新途径。 展开更多

关键词 rab25 RNA干扰 增殖 凋亡

原文传递

Rab25 siRNA对人卵巢上皮性癌细胞生长和增殖的作用

11

作者 樊杨 辛晓燕 +2 位作者 陈必良 马向东 商莉 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第4期477-479,共3页

目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因的siRNA对肿瘤细胞的生长和增殖作用。方法:构建针对Rab25基因的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;... 目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因的siRNA对肿瘤细胞的生长和增殖作用。方法:构建针对Rab25基因的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;克隆形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力。结果:成功构建Rab25基因的siRNA,稳定转染靶细胞后可显著降低Rab25的表达,细胞生长速度减慢、增殖能力下降。结论:Rab25基因的siRNA对肿瘤细胞的抑制作用,为卵巢癌基因治疗开辟新途径。 展开更多

关键词 rab25 SIRNA 细胞生长 细胞增殖 克隆形成

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Rab25基因siRNA表达载体的构建鉴定及在人卵巢癌细胞A2780中的表达

12

作者 樊杨 辛晓燕 +3 位作者 陈必良 马向东 王珑 商莉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第15期1822-1825,共4页

目的为研究Rab25基因的功能及卵巢癌的基因治疗,构建针对Rab25基因的siRNA表达载体,转染细胞A2780后观察其对Rab25基因表达的抑制作用,为探索卵巢癌基因治疗的新途径打好基础。方法根据基因库上的Rab25mRNA序列,设计并合成两端含有酶切... 目的为研究Rab25基因的功能及卵巢癌的基因治疗,构建针对Rab25基因的siRNA表达载体,转染细胞A2780后观察其对Rab25基因表达的抑制作用,为探索卵巢癌基因治疗的新途径打好基础。方法根据基因库上的Rab25mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/Rab25siRNA)进行酶切及序列鉴定,后转染卵巢癌细胞A2780,RT-PCR检测转染前后Rab25的表达情况。结果双酶切证实Rab25siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。RT-PCR检测显示转染卵巢癌细胞A2780后有效抑制了Rab25基因的表达。结论成功构建Rab25siRNA表达载体,为卵巢癌基因治疗开辟新途径。 展开更多

关键词 rab25 SIRNA 载体构建 鉴定 卵巢癌 表达

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猪瘟病毒NS2、NS3和NS5A与猪Rab25蛋白的亚细胞定位分析

13

作者 徐盼盼 侯玉凤 +3 位作者 王凯 罗弼豪 范昱鑫 郭抗抗 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期673-680,共8页

为了研究NS5A与Rab25的亚细胞定位及作用基因区段,先构建pDsRed1-N1-Rab25红光载体,利用经过改造并加GFP的pcDNA3.1(+)-NS2、pcDNA3.1(+)-NS3和pcDNA3.1(+)-NS5A载体,将pDsRedN1-Rab25红光载体与这3种绿光载体分别共转染于猪血管内皮细... 为了研究NS5A与Rab25的亚细胞定位及作用基因区段,先构建pDsRed1-N1-Rab25红光载体,利用经过改造并加GFP的pcDNA3.1(+)-NS2、pcDNA3.1(+)-NS3和pcDNA3.1(+)-NS5A载体,将pDsRedN1-Rab25红光载体与这3种绿光载体分别共转染于猪血管内皮细胞(SUVEC),通过共聚焦显微镜观察显示Rab25和NS2、NS3共定位现象不明显而与NS5A存在着明显共定位。为了进一步研究NS5A与Rab25作用基因区段,构建NS5A的3个分段基因载体:pEGFP-C1-NS5A-1-84、pEGFP-C1-NS5A-84-804和pEGFP-C1-NS5A-804-1491,转染SUVEC并观察共定位情况,结果显示Rab25与NS5A的804~1491 bp存在明显共定位,而与1~84,84~804 bp的共定位现象不明显。结果说明Rab25与NS5A基因的804~1491 bp存在共定位,这为继续研究Rab25与NS5A的关键作用位点及互作奠定基础。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 非结构蛋白5A(NS5A) 猪血管内皮细胞(SUVEC) rab25蛋白 亚细胞定位

原文传递

Rab25基因对人乳腺癌细胞的生物学行为的影响及其与Her-2/neu基因的关系

14

作者 李杰华 吴非 陆云飞 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期624-628,共5页

目的:探讨Rab25基因表达水平对乳腺癌细胞生物学活性的影响以及其作用与Her-2/neu基因的关系。方法:通过质粒转染和RNA干扰采用,升高或降低不同的乳腺癌细胞株Rab25基因表达,以及升高或降低稳定表达Rab25基因的不同乳腺癌细胞株Her-2/ne... 目的:探讨Rab25基因表达水平对乳腺癌细胞生物学活性的影响以及其作用与Her-2/neu基因的关系。方法:通过质粒转染和RNA干扰采用,升高或降低不同的乳腺癌细胞株Rab25基因表达,以及升高或降低稳定表达Rab25基因的不同乳腺癌细胞株Her-2/neu基因表达。检测各组细胞的增殖活性、克隆形成率和转移侵袭力。结果:不同细胞株Rab25转染组的增殖活性、克隆形成率、转移侵袭力均较其Rab25干扰组、原株细胞组及阴性对照组有明显增强(均P<0.05)。在稳定表达Rab25基因的不同乳腺癌细胞系中无论升高或降低Her-2/neu基因表达,其增殖活性、克隆形成率、转移侵袭力均无明显改变(均P>0.05)。结论:Rab25基因在乳腺癌细胞中发挥着促进癌细胞生长、增强其增殖及侵袭的作用,且Her-2/neu基因的表达水平不能影响其发挥作用。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 rab25 基因 ERBB-2 细胞增殖 肿瘤侵润

原文传递

Rab25 siRNA抑制人卵巢癌细胞粘附侵袭的实验研究

15

作者 樊杨 辛晓燕 +2 位作者 陈必良 马向东 商莉 《中国妇产科临床杂志》 2007年第3期195-198,共4页

目的通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因沉默对卵巢癌A2780细胞的生物学效应,探讨Rab25基因沉默对卵巢癌侵袭及转移能力的影响。方法根据基因库上的Rab25 mRNA序列,构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A278... 目的通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因沉默对卵巢癌A2780细胞的生物学效应,探讨Rab25基因沉默对卵巢癌侵袭及转移能力的影响。方法根据基因库上的Rab25 mRNA序列,构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达,利用粘附实验和transwell小室实验检测其对细胞的粘附力及侵袭能力的影响。结果成功构建Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染靶细胞后可显著降低Rab25的表达,并且与对照相比,Rab25 siRNA可显著影响卵巢癌细胞的侵袭粘附能力(P<0.01)。结论成功构建Rab25 siRNA显著抑制肿瘤细胞的侵袭粘附能力,对Rab25的研究有望为卵巢癌的基因治疗开辟新途径。 展开更多

关键词 rab25 SIRNA 细胞粘附 细胞侵袭 卵巢癌

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Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

16

作者 樊杨 辛晓燕 +2 位作者 陈必良 马向东 商莉 《宁夏医学杂志》 CAS 2008年第9期776-778,共3页

目的通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,建立裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率、移植... 目的通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,建立裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率、移植瘤组织病理学观察。结果成功建立裸小鼠移植瘤模型,观察30-45d后,发现转染了Rab25 siRNA细胞体内成瘤能力显著下降,与正常对照组及转染空载体组相比,抑瘤率为50.78%、50.64%。结论阻断细胞内Rab25的表达,可诱导细胞凋亡,缓慢癌细胞生长速度。基于Rab25基因的RNA i技术靶向诱导癌细胞凋亡可望作为卵巢癌治疗的重要辅助手段。 展开更多

关键词 rab25 SIRNA 细胞凋亡 裸鼠 移植瘤 卵巢癌

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Rab25基因3'UTR荧光素酶报告基因载体及突变体的构建

17

作者 周建国 张钰 +7 位作者 吕水萍 王菲 王怡 柏玉举 苟晓丽 张廷友 沈刚 马虎 《合肥医学院学报》 2016年第1期30-34,共5页

目的针对Rab25基因3＇端非翻译区（untranslated region,3＇UTR）构建Rab25荧光素酶报告基因载体及突变体,为研究miR-125a-5p在肺癌耐药中调控其靶基因RAB25提供有效的工具。方法 PCR扩增包含Rab25的3＇UTR的DNA片段,克隆至荧光素酶载体... 目的针对Rab25基因3＇端非翻译区（untranslated region,3＇UTR）构建Rab25荧光素酶报告基因载体及突变体,为研究miR-125a-5p在肺癌耐药中调控其靶基因RAB25提供有效的工具。方法 PCR扩增包含Rab25的3＇UTR的DNA片段,克隆至荧光素酶载体GV306,构建GV306/Rab25＇UTR载体;通过Trget Scan Release 6.2查找Rab25与miR-125a-5p结合区域并设计突变序列,参照构建GV306/Rab25＇UTR载体方法构建GV306/Rab25＇UTR突变载体。结果通过获得Rab25与miR-125a-5p的种子区域及侧翼部分120~126 nt,并上下延伸150 bp,合成Rab25＇UTR,并且在120~126 nt区域设计突变序列,构建了GV306/Rab25 3＇UTR及其突变载体。结论成功构建了含Rab25基因3＇UTR区的荧光素酶报告基因载体及突变体,为进一步研究Rab25在非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药中的作用打下基础。 展开更多

关键词 rab25 miR-125a-5p 荧光素酶报告基因质粒 非小细胞肺癌 基因调节

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Rab25 siRNA表达载体的构建与鉴定

18

作者 樊杨 蚜晓燕 +2 位作者 陈必良 马向东 王珑 《宁夏医学院学报》 2007年第2期113-114,120,F0002,共4页

目的构建Rab25 siRNA表达载体,探索卵巢癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的Rab25 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSU... 目的构建Rab25 siRNA表达载体,探索卵巢癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的Rab25 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/Rab25 siRNA)进行酶切及序列鉴定。结果双酶切证实Rab25 siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。结论成功构建Rab25 siRNA表达载体,为卵巢癌基因治疗提供实验室依据。 展开更多

关键词 rab25 SIRNA 遗传载体 基因治疗

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Rab25蛋白在结肠癌中的表达及临床意义 被引量：7

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作者 关明珺 任笑云 +5 位作者 王大路 殷红专 梁逸超 吴迪 王鹤令 苏琪 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第12期1935-1937,共3页

目的:探讨Rab25蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测56例结肠癌组织和对应癌旁组织中Rab25蛋白的表达情况,分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系。结果:56例结肠癌组织中Rab25蛋白阳性表达率73.2%(41/56)... 目的:探讨Rab25蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测56例结肠癌组织和对应癌旁组织中Rab25蛋白的表达情况,分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系。结果:56例结肠癌组织中Rab25蛋白阳性表达率73.2%(41/56),癌旁组织中Rab25蛋白阳性表达率28.6%(16/56)。在癌组织与癌旁组织之间,Rab25蛋白的表达存在显著性差异(P<0.05)。Rab25表达与结肠癌的组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Rab25在结肠癌组织中存在显著高表达,提示Rab25的异常高表达在结肠癌的发生发展中起重要作用。 展开更多

关键词 结肠癌 免疫组化 rab25

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Rab25在非小细胞肺癌厄洛替尼获得性耐药中的作用 被引量：2

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作者 王旭东 王江 +3 位作者 赵凤仪 韩静 孙建国 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期681-686,共6页

目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)厄洛替尼获得性耐药中的作用。方法传代培养PC9及其厄洛替尼耐药PC9/ER细胞,采用CCK-8法检测PC9/ER细胞的耐药指数。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)... 目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)厄洛替尼获得性耐药中的作用。方法传代培养PC9及其厄洛替尼耐药PC9/ER细胞,采用CCK-8法检测PC9/ER细胞的耐药指数。应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,q PCR)及Western blot检测对比同等厄洛替尼浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)处理条件下,Rab25在两种细胞中的mRNA及蛋白表达差异,并以免疫荧光法定位Rab25在细胞中的分布。用小干扰RNA(siRab25)转染PC9/ER细胞,并以流式细胞仪及CCK-8法分别检测Rab25敲减后PC9/ER细胞的增殖指数(proliferation index,PI)及厄洛替尼IC50值的变化。结果 PC9/ER细胞的耐药指数是68.82±21.42。相同厄洛替尼浓度处理48 h后,PC9/ER细胞Rab25 mRNA及蛋白水平均高于PC9细胞(P<0.05),增高的Rab25蛋白主要表达于细胞膜。而且PC9/ER细胞Rab25蛋白水平随厄洛替尼处理浓度(0.1、0.2、0.3μmol/L)递增而增高。siRab25在PC9/ER细胞中成功转染后,转染组的厄洛替尼IC50值及PI均明显低于对照组(P<0.05)。结论Rab25在NSCLC厄洛替尼获得性耐药细胞中高表达,起着促进耐药的作用。 展开更多

关键词 rab25 非小细胞肺癌 厄洛替尼 抗药性 肿瘤

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