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水产动物源气单胞菌喹诺酮类耐药与PMQR基因、QRDR突变相关性分析 被引量:4
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作者 谭爱萍 邓玉婷 +2 位作者 姜兰 赵飞 张瑞泉 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期102-111,共10页
为了解PMQR基因、QRDR突变与气单胞菌喹诺酮类耐药相关性,以116株水产源气单胞菌为研究对象,采用PCR法检测PMQR基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6′)-Ib-cr)并分析QRDR靶基因gyrA、parC突变情况,用微量二倍稀释法测定萘啶酸(NAL)、环... 为了解PMQR基因、QRDR突变与气单胞菌喹诺酮类耐药相关性,以116株水产源气单胞菌为研究对象,采用PCR法检测PMQR基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6′)-Ib-cr)并分析QRDR靶基因gyrA、parC突变情况,用微量二倍稀释法测定萘啶酸(NAL)、环丙沙星(CIP)、恩诺沙星(ENR)的最小抑菌浓度(MIC)值。结果表明:116株气单胞菌中,有18株(15.52%)菌株携带PMQR基因,其中8株(6.90%)携带qnrS2基因,9株(7.76%)携带aac(6′)-Ib-cr基因,1株同时携带qnrS2、aac(6′)-Ib-cr基因,未检测到qnrA,qnrB和qepA基因;56株(48.28%)菌株发生QRDR靶位点突变,主要突变方式为GyrA:Ser^(83)Ile和GyrA:Ser^(83)Ile+ParC:Ser^(87)Ile;对NAL、CIP及ENR耐药率分别为47.41%、12.07%及11.21%;7株仅携带qnrS2基因菌株未发生QRDR突变,对喹诺酮类药物敏感性略下降,NAL、CIP及ENR的MIC值分别小于4.00、0.50和1.00mg/L;10株携带aac(6′)-Ib-cr基因的菌株均发生QRDR突变并对NAL表现耐药,MIC值均>128.00mg/L,其中8株对CIP和ENR表现耐药,MIC值均≥4.00mg/L;发生gyrA单突变或gyrA和parC双突变菌株均对NAL表现耐药,MIC值均≥64.00mg/L,CIP和ENR的MIC值有的<4.00mg/L,有的≥4.00mg/L。综上,QRDR靶基因突变可影响水产动物源气单胞菌对萘啶酸的药物敏感性,而气单胞菌对氟喹诺酮类药物耐药可能与PMQR和QRDR协同作用有关。 展开更多
关键词 气单胞菌 PMQR基因 qrdr突变 喹诺酮类 耐药
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体外氟喹诺酮类诱导肺炎克雷伯菌耐药与临床分离耐药株QRDR变异的差异研究 被引量:9
2
作者 叶晓光 韩菊梅 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1321-1324,共4页
目的比较体外氟喹诺酮类诱导的肺炎克雷伯菌耐药株和临床分离耐药株的DNA旋转酶A亚单位(gyrA)基因上的喹诺酮类耐药决定区域(QRDR)变异的差异与其耐药性的关系。方法对10株敏感肺炎克雷伯菌经环丙沙星诱导出耐药菌,对其gyrAQRDR进行聚... 目的比较体外氟喹诺酮类诱导的肺炎克雷伯菌耐药株和临床分离耐药株的DNA旋转酶A亚单位(gyrA)基因上的喹诺酮类耐药决定区域(QRDR)变异的差异与其耐药性的关系。方法对10株敏感肺炎克雷伯菌经环丙沙星诱导出耐药菌,对其gyrAQRDR进行聚合酶链反应(PCR)扩增和DNA序列的分析比较,并与临床分离耐药株比较。结果发现诱导耐药菌存在着gyrA的QRDR变异,同氟喹诺酮类耐药性相关的变异有Ser83(TCC)→Phe(TTC)、Ile(ATC);Gln106(CAG)→Leu(CTG);其中Gln106(CAG)→Leu(CTG)的变异是本研究的新发现。结论诱导耐药菌存在着gyrA的QRDR变异,其中Ser 83(TCC)和Gln106(CAG)的变异可能是诱导耐药菌耐药的分子基础。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 氟喹诺酮类 诱导 耐药机制 DNA旋转酶 qrdr
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福氏志贺菌gyrA和parC基因QRDR序列的测定与同源性分析 被引量:5
3
作者 张继瑜 金奇 侯云德 《动物医学进展》 CSCD 2002年第3期47-50,59,共5页
测定了我国痢疾流行病原志贺菌福氏2 a 3 0 1株与喹喏酮类药物耐药性相关的 gyr A( DNA旋转酶 A亚单位 )和 par C(拓扑异构酶IVA亚单位 )基因 ,并将 gyr A和 par C基因QRDR(喹喏酮类药物耐药性决定区 )核苷酸序列与几种动物和人的病原... 测定了我国痢疾流行病原志贺菌福氏2 a 3 0 1株与喹喏酮类药物耐药性相关的 gyr A( DNA旋转酶 A亚单位 )和 par C(拓扑异构酶IVA亚单位 )基因 ,并将 gyr A和 par C基因QRDR(喹喏酮类药物耐药性决定区 )核苷酸序列与几种动物和人的病原菌进行了同源性和遗传进化比较分析。结果显示 ,志贺菌福氏 2 agyr A和 par C基因 QRDR序列分别与宋内氏志贺菌、大肠杆菌 O1 57、大肠杆菌 K1 2、阴沟肠杆菌、坂口肠道杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌、肺炎克氏杆菌、产道克氏杆菌、空肠弯曲杆菌、弗氏柠檬酸杆菌具有显著同源性(均大于 88% ) ,表明 gyr A和 par C是这些细菌中的看家基因 ,推测在各种细菌中具有类似的起源 ,因此对在不同细菌之间进行喹喏酮类药物耐药性的研究非常有利。 QRDR的遗传进化分析表明 ,同属或相近属细菌 gyr A或 par CQRDR的遗传距离明显接近 ,其中与大肠杆菌属的距离最近 ,认为可列到同一个属 ,结果有力支持了近年提出的大肠杆菌与志贺菌属于同族细菌的理论。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 GYRA PARC基因 qrdr序列 测定 同源性分析
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QRDR点突变致解脲脲原体耐巴洛沙星的探讨
4
作者 王堃 罗祎敏 《南华大学学报(医学版)》 2008年第1期15-18,共4页
目的研究解脲脲原体(Uu)编码II型拓扑异构酶的基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变与巴洛沙星耐药的关系。方法对喹诺酮类药物敏感的Uu临床分离株用巴洛沙星进行耐药诱导培养,使之产生第一代和第二代耐药突变株。检测巴洛沙星对Uu标准株、... 目的研究解脲脲原体(Uu)编码II型拓扑异构酶的基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变与巴洛沙星耐药的关系。方法对喹诺酮类药物敏感的Uu临床分离株用巴洛沙星进行耐药诱导培养,使之产生第一代和第二代耐药突变株。检测巴洛沙星对Uu标准株、临床分离株、第一代和第二代耐药突变株的最低抑菌浓度(MIC),并对这些菌株的QRDR进行PCR扩增后测序。结果第一代耐药突变株均在编码拓扑异构酶IV基因的QRDR上发生了点突变;第二代耐药突变株则在继承了前代的点突变之后,均在编码DNA促旋酶基因的QRDR上发生了不同的点突变。结论QRDR的点突变可导致Uu对巴洛沙星产生耐药;巴洛沙星对Uu的首要靶酶是拓扑异构酶IV。 展开更多
关键词 解脲脲原体 巴洛沙星 喹诺酮耐药决定区 突变 耐药
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圈养虎源大肠杆菌QRDR基因检测及分析 被引量:3
5
作者 张艳芳 方瑞 +4 位作者 孟晓俣 陈可心 冯涛 牛鑫鑫 薛原 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 北大核心 2017年第8期124-127,共4页
为了解大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制和喹诺酮耐药决定区GyrA、GyrB、ParC、ParE四种基因的流行情况,采用聚合酶链式反应(PCR)技术对30株虎源大肠杆菌的耐药菌株进行了氟喹诺酮类药物耐药基因的检测,并对目的片段进行测序分析。... 为了解大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制和喹诺酮耐药决定区GyrA、GyrB、ParC、ParE四种基因的流行情况,采用聚合酶链式反应(PCR)技术对30株虎源大肠杆菌的耐药菌株进行了氟喹诺酮类药物耐药基因的检测,并对目的片段进行测序分析。结果表明:GyrA、GyrB、ParC、ParE阳性率分别为40.00%、63.33%、63.33%、40.00%;GyrA亚基发生Ser83→Leu、Asp87→Asn、Glu214→Gly的突变,GyrB亚基发生Ser195→Asn的突变,ParC亚基上氨基酸未发生取代,ParE亚基发生Ser85→Ala的突变。说明GyrA、GyrB亚基上发生的氨基酸替代是耐药菌对氟喹诺酮类药物产生耐药性的主要机制之一。 展开更多
关键词 虎源大肠杆菌 喹诺酮耐药决定区(qrdr) GYRA基因 GyrB基因 PARC基因 ParE基因
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质粒介导的喹诺酮耐药基因在动物源金黄色葡萄球菌的流行分布 被引量:14
6
作者 王丽华 吕殿红 +3 位作者 张荟 杨彪 魏文康 蒋红霞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期606-612,共7页
为了解广东省动物源金黄色葡萄球菌耐药现状、分析耐喹诺酮类金黄色葡萄球菌耐药分子特征,本研究从2010—2011年广东33个养殖场的不同动物来源的样本中分离鉴定出46株金黄色葡萄球菌,采用二倍琼脂稀释法测定对14种抗菌药物的敏感性;采... 为了解广东省动物源金黄色葡萄球菌耐药现状、分析耐喹诺酮类金黄色葡萄球菌耐药分子特征,本研究从2010—2011年广东33个养殖场的不同动物来源的样本中分离鉴定出46株金黄色葡萄球菌,采用二倍琼脂稀释法测定对14种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链式反应(PCR)检测耐喹诺酮金黄色葡萄球菌grlA、grlB、gyrA、gyrB基因在喹诺酮耐药决定区(QRDR)的突变特征、质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因(qnr、aac6′-Ib-cr、oqxA和qepA)的流行分布特征,同时还检测了β-内酰胺酶编码基因(blaCTX-M、blaCMY和blaSHV)、质粒介导金黄色葡萄球菌耐氟苯尼考的基因(cfr和fexA)和万古霉素耐药基因(vanA、vanB和vanC)。结果表明,46株金黄色葡萄球菌对克林霉素耐药率最高为67%,对环丙沙星和氟苯尼考耐药率为52%,对青霉素、氨苄西林、庆大霉素、红霉素、四环素和复方新诺明的耐药率在40%-50%之间,对苯唑西林和氯霉素耐药率为28%,对妥布霉素耐药率为13%,对头孢噻肟的耐药率在10%左右,有2株耐万古霉素。20株耐环丙沙星金黄色葡萄球菌的grlA和gyrA基因的QRDR发生了碱基突变并导致编码的氨基酸发生改变,GrlA氨基酸只有1种突变模式,Ser80→Phe,而GyrA氨基酸存在3种突变模式:Ser84→Leu,Ala或Phe。PMQR基因中,oqxA检出率最高(80%),其次是aac6′-Ib-cr占13%,qnrS1检出3株、qnrD检出2株。检测到2株菌株携带超广谱β-内酰胺酶编码基因blaSHV-12;23株氟苯尼考耐药菌株全部携带fexA基因,其中3株同时携带cfr基因;2株耐万古霉素菌株未检测到相关耐药基因。广东省动物源金黄色葡萄球菌多重耐药现象较为普遍,本研究首次在动物源金黄色葡萄球菌中检测到超广谱质粒编码的喹诺酮耐药基因流行分布广泛,大多数菌株同时携带2种以上质粒编码的耐药基因,提示养殖过程或治疗过程中使用任何一种药物(尤其是动物促生长剂)都可以筛选出耐药菌株。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐药性 PMQR qrdr
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抗生素压力下不同血清型沙门氏菌耐药性研究 被引量:8
7
作者 刘志杰 万冰璐 +3 位作者 杨磊 孟祥芹 付晓平 蒋红霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期230-237,共8页
本研究旨在探讨不同血清型沙门氏菌在环丙沙星抗生素压力下突变频率及在耐药发展过程中靶位基因突变、外排泵及调控基因表达的差异。选取临床分离的印第安纳型、肠炎型和鼠伤寒型沙门氏菌的敏感菌株,在环丙沙星压力下诱导耐药突变,分别... 本研究旨在探讨不同血清型沙门氏菌在环丙沙星抗生素压力下突变频率及在耐药发展过程中靶位基因突变、外排泵及调控基因表达的差异。选取临床分离的印第安纳型、肠炎型和鼠伤寒型沙门氏菌的敏感菌株,在环丙沙星压力下诱导耐药突变,分别获得一系列不同程度的耐药突变株。分别检测不同血清型沙门氏菌突变株的突变频率、靶位基因喹诺酮耐药决定区(QRDRs)和外排泵调控基因ramR-ramA突变及外排泵相关基因的表达水平;同时检测了母株在羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)存在情况下环丙沙星药物的蓄积浓度,以确定母株是否存在外排泵的作用。结果表明,在环丙沙星压力下,印第安纳型沙门氏菌较肠炎型和鼠伤寒型有更高的突变频率,易获得耐药株;印第安纳血清型菌株耐药性的获得主要是由于靶位基因gyrA发生单突变,协同外排泵外排作用增强而获得高水平耐药;肠炎型沙门氏菌耐药性获得主要是由于靶位基因gyrA发生83和87位双位点突变,并随着gyrB和parC基因的多位点同时突变而获得高水平耐药,耐药性的发展过程中没有外排泵作用参与;而鼠伤寒沙门氏菌在抗生素压力下不易发展成耐药菌,耐药性发生主要是由于靶位基因gyrB发生突变,而伴随parC基因突变及微弱的外排泵作用导致耐药水平增加。 展开更多
关键词 血清型 沙门氏菌 药物蓄积 qrdrs 突变频率 荧光定量
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喹诺酮类耐药决定区、外排泵负调控基因对大肠杆菌氟喹诺酮高水平耐药分子机制的影响 被引量:6
8
作者 任艳娜 甄盼盼 +5 位作者 李健 郭玉芳 王丽华 任君玉 张文慧 蒋红霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期11-16,共6页
为了探讨耐喹诺酮类决定区(QRDR)、外排泵负调控基因(acrR、marR和soxR)突变对临床分离株氟喹诺酮(FQs)高水平耐药的影响,本研究对临床分离的18株FQs耐药大肠杆菌(E.coli),采用PCR方法检测QRDR、acrR、marR和soxR的突变情况;通过RT-PCR... 为了探讨耐喹诺酮类决定区(QRDR)、外排泵负调控基因(acrR、marR和soxR)突变对临床分离株氟喹诺酮(FQs)高水平耐药的影响,本研究对临床分离的18株FQs耐药大肠杆菌(E.coli),采用PCR方法检测QRDR、acrR、marR和soxR的突变情况;通过RT-PCR的方法检测外排泵及膜孔蛋白相关基因的表达水平。结果显示,QRDR的突变主要集中在常规突变GyrA(Ser83Leu和Asp87Asn)和ParC(Ser80Ile),同时也检测出稀有突变ParC Glu84Gly、Glu84Lys、Glu84Val和Glu84Ala,ParE Ser458Ala等。ED28在acrR基因存在777bp插入序列;12株菌(包括ATCC25922)在MarR存在Gly103Ser和Tyr137His双突变,其中EP26和EG42存在插入片段;ED40在SoxR存在Thr38Ser、Gly74Arg氨基酸替换。在多突变药菌株中,AcrAB的表达水平明显升高,OmpC和OmpF表达量降低、甚至缺失。 展开更多
关键词 qrdr acrR MARR soxR 耐药 氟喹诺酮
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RamR突变协同靶位基因GyrA突变调控RamA表达水平的研究 被引量:1
9
作者 付晓平 刘志杰 +3 位作者 褚富鑫 杨玲 颜欣 蒋红霞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1200-1205,共6页
为了探讨RamR突变类型及对RamA表达调控的影响,靶位突变与外排泵过表达之间的关联,从临床分离的34株沙门菌中筛选不同RamR突变类型菌株,通过外排泵能量抑制(CCCP)试验和有机溶剂耐受试验(OST)验证外排泵的活性,构建不同RamR突变类型的质... 为了探讨RamR突变类型及对RamA表达调控的影响,靶位突变与外排泵过表达之间的关联,从临床分离的34株沙门菌中筛选不同RamR突变类型菌株,通过外排泵能量抑制(CCCP)试验和有机溶剂耐受试验(OST)验证外排泵的活性,构建不同RamR突变类型的质粒,互补到RamR野生型突变菌株中,采用RT-PCR方法检测各菌株RamA的表达水平。结果表明,15株ramR存在4种突变类型:M83T(n=6),A37S(n=3),T18P(n=3)和氨基酸的缺失(n=3)。CCCP抑制试验和OST试验证实,15株菌株中有10株存在明显的有活力的外排泵作用,4株存在活力微弱的外排泵。RamR三种氨基酸突变类型都上调了RamA的表达水平。靶位基因GyrA第83位的突变协同RamR的A37S或M83T突变均可引起RamA的表达显著增强,而T18P突变没有明显影响。相反,GyrA第87位的突变协同RamR的A37S或M83T突变则下调RamA的表达水平。本研究表明,所有的RamR的突变都可引起RamA表达水平增高,RamR与靶位基因突变协同调控RamA的表达水平,协同GyrA第83位突变可明显促进RamA的表达,而协同GyrA第87位突变则下调RamA的表达。 展开更多
关键词 沙门菌 外排泵 反转录-聚合酶链反应 qrdr
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鸡和人志贺菌gyrA、parC基因突变与喹诺酮类耐药的关系
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作者 刘红英 薛双 +5 位作者 陈陆 杨霞 王新卫 许兰菊 程增青 王川庆 《中国动物检疫》 CAS 2011年第1期55-57,72,共4页
通过药敏实验检测了鸡鲍氏、人鲍氏和人福氏三株志贺菌对12种常用抗生素的耐药情况,发现三者均未产生对喹诺酮类药物的耐药性。用聚合酶链反应(PCR)分别扩增三株志贺菌的DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因,并对其... 通过药敏实验检测了鸡鲍氏、人鲍氏和人福氏三株志贺菌对12种常用抗生素的耐药情况,发现三者均未产生对喹诺酮类药物的耐药性。用聚合酶链反应(PCR)分别扩增三株志贺菌的DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因,并对其中的耐喹诺酮类决定区(QRDR)进行了分析。发现鸡和人鲍氏志贺菌QRDR区的序列没有发生任何碱基突变,这与药敏试验结果相吻合。人福氏志贺菌虽然也对喹诺酮类无耐药性,但其gyrA基因存在83位Ser83(TCG)→Leu(TTG)的突变,由于只有83位点一处突变,所以尚未表现出耐药性表征,parC基因中存在58位Ser58(AGC)→Ile(ATC)的突变,该突变点与常见的80、84位氯基酸的改变有所不同,却仍在QRDR区域之中,虽然暂时还无法根据这一结果判断该突变与喹诺酮类耐药性之间的关系,但至少表明该菌株正处在耐药性演变进程之中,其在志贺菌耐药性中的确切作用还有待进一步研究。 展开更多
关键词 志贺菌 喹诺酮 耐药性 GYRA基因 PARC基因 qrdr
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牛源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性分析 被引量:8
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作者 王丽娟 王宁宁 +4 位作者 王乐 李芬 刘晓强 王妍 李勤凡 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第2期8-13,共6页
【目的】了解牛源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药特征,为临床合理用药提供理论依据。【方法】从不同牛场采集腹泻犊牛粪样分离鉴定大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法测定大肠杆菌对环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星3种氟喹诺酮类药物的最小抑... 【目的】了解牛源大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药特征,为临床合理用药提供理论依据。【方法】从不同牛场采集腹泻犊牛粪样分离鉴定大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法测定大肠杆菌对环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星3种氟喹诺酮类药物的最小抑菌浓度(MIC),PCR检测质粒介导的喹诺酮类耐药(PMQR)基因(qnrA、qnrB、qnrD、qnrS、aac(6′)-Ib和qepA基因)及喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变(gyrA和parC基因),并选择2株携带PMQR基因的大肠杆菌经恩诺沙星诱导后检测QRDR的gyrA和parC基因突变。【结果】分离鉴定得到75株大肠杆菌,其中60.00%的菌株对至少2种FQs耐药,40.00%的菌株对环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星均耐药,且对恩诺沙星的耐药程度较为严重。75株大肠杆菌均未检测到qnrA、qnrD和qepA基因,但检测出qnrS、aac(6′)-Ib亚型aac(6′)-Ib-cr和qnrB基因,61.33%的菌株至少携带1个PMQR基因,其中以qnrS和aac(6′)-Ib-cr最为常见。58.67%的大肠杆菌发生了QRDR突变,主要突变方式为GyrA:(Ser 83 Leu+Asp 87 Asn)+ParC:Ser 80 Ile,发生突变且携带PMQR基因的大肠杆菌对环丙沙星、恩诺沙星和诺氟沙星均耐药。恩诺沙星诱导后,PMQR阳性菌的gyrA基因发生5处碱基突变,PMQR阴性菌无碱基突变。【结论】大肠杆菌耐氟喹诺酮类药物主要与QRDR突变密切相关,因此兽医临床上应合理使用氟喹诺酮类药物来减缓大肠杆菌的耐药性。 展开更多
关键词 牛源大肠杆菌 氟喹诺酮类药物 PMQR基因 qrdr突变 耐药性
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福建地区鼠伤寒沙门菌喹诺酮耐药基因特征及MLVA分子分型 被引量:2
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作者 邱玉锋 陈建辉 +3 位作者 黄梦颖 徐海滨 杨劲松 翁顺太 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第8期893-896,901,共5页
目的了解福建地区鼠伤寒沙门菌喹诺酮耐药状况及其分子分型机制。方法采用微量肉汤稀释法测定萘啶酸、环丙沙星和左氧氟沙星对83株鼠伤寒沙门菌的最小抑菌浓度(MIC);PCR扩增沙门菌的喹诺酮耐药区(QRDR)基因(gyrA,parC)和质粒介导的喹诺... 目的了解福建地区鼠伤寒沙门菌喹诺酮耐药状况及其分子分型机制。方法采用微量肉汤稀释法测定萘啶酸、环丙沙星和左氧氟沙星对83株鼠伤寒沙门菌的最小抑菌浓度(MIC);PCR扩增沙门菌的喹诺酮耐药区(QRDR)基因(gyrA,parC)和质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)(aac(6’)-Ib-cr,oqxA,oqxB);采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)比较菌株间的遗传相似性。结果 83株鼠伤寒沙门菌对萘啶酸、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为27.7%(23/83),13.2%(11/83)和4.8%(4/83),QRDR基因突变率为25.3%(21/83)。21株基因突变株存在gyrA和parC两个突变类型,突变氨基酸类型分别为Ser83Tyr、Ser83Phe、Asp87Tyr和Asp87Asn,其中以第87位氨基酸突变为主,占总突变数的52.4%(11/21)。parC基因突变菌1株,为第80位氨基酸突变Ser80Arg,该菌株同时为gyrA:Ser83Phe突变。PMQR基因(aac(6’)-Ib-cr,oqxA,oqxB)在83株鼠伤寒沙门菌中的检出率分别为20.5%(17/83)、15.7%(13/83)和16.9%(14/83)。72株鼠伤寒沙门菌经MLVA分型后遗传关联度介于42.3%~100%之间,按照100%的相似度可分为18个型别,其中次优势型MT5菌株耐药基因与MLVA分型表现出一定的关联性。结论福建地区鼠伤寒沙门菌对喹诺酮类药物的耐药率不高,但环丙沙星和左氧氟沙星中度敏感菌中存在耐药基因突变,并具有一定的聚集性,需继续加强检测。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 qrdr基因突变 PMQR基因 MLVA分子分型
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猪源大肠埃希菌中质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因的多样性研究 被引量:3
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作者 郭晶晶 侯思梦 +2 位作者 刘连杰 邱芳 刘晓强 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1611-1617,共7页
为研究陕西省关中猪源大肠埃希菌的耐药情况及质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR)基因的流行性与多样性,于2017年4月—2018年11月从陕西关中地区数个养猪场分离获得470株大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法测定其对包括3种氟喹诺酮类药物在内的6类... 为研究陕西省关中猪源大肠埃希菌的耐药情况及质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR)基因的流行性与多样性,于2017年4月—2018年11月从陕西关中地区数个养猪场分离获得470株大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法测定其对包括3种氟喹诺酮类药物在内的6类抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),PCR扩增检测其携带的PMQR基因,并分析PMQR基因阳性菌株gyrA和parC基因的质粒介导喹诺酮耐药决定区(QRDR)的突变情况。结果显示,陕西猪源大肠埃希菌对阿莫西林和土霉素的耐药率高达100%和98.51%,对阿米卡星、氟苯尼考、替米考星和头孢噻呋的耐药率分别为60.64%、52.98%、50.85%和44.47%,且89.58%为多重耐药菌株。对3种氟喹诺酮类药物恩诺沙星、普多沙星和环丙沙星的耐药率分别为89.58%、57.66%和56.80%。对美罗培南最为敏感,未发现耐药菌株,但有9株大肠埃希菌对美罗培南的敏感性为中介。对氟喹诺酮类药物耐药的菌株中,PMQR基因qnrS、aac(6′)-Ib-cr、qnrB、qnrA、qnrD和qepA的检出率分别为36.52%、30.14%、17.38%、11.45%和2.49%,且55.30%的菌株携带1种PMQR基因,37.90%携带2种PMQR基因,6.40%携带3种PMQR基因,0.35%携带4种PMQR基因。在282株携带PMQR基因的菌株中,279株发生QRDR突变,其中以gyrA基因的Ser83Leu突变为主。132株PMQR基因阳性菌株parC基因发生Ser80Ile或Ser80Ile+Glu84Val突变。随着菌株所携带PMQR基因的增多,gyrA和parC基因的突变位点也相应增加,细菌的耐药水平也随之增加。 展开更多
关键词 氟喹诺酮类药物 大肠埃希菌 耐药性 PMQR基因 qrdr突变
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河北地区淋球菌分离株对常见6种抗菌药物的耐药性分析 被引量:1
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作者 赵星海 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第7期637-641,646,共6页
目的测定河北地区2009~2013年分离的118株淋球菌的基因序列,并分析其对常见6种抗菌药物的耐药性。方法分离自妇科患者泌尿生殖道分泌物的淋球菌118株,用琼脂稀释法测定6种临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度。分别对耐药株QRDR基因,mtrR... 目的测定河北地区2009~2013年分离的118株淋球菌的基因序列,并分析其对常见6种抗菌药物的耐药性。方法分离自妇科患者泌尿生殖道分泌物的淋球菌118株,用琼脂稀释法测定6种临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度。分别对耐药株QRDR基因,mtrR基因和mtrC基因进行检测和序列分析。结果 118株淋球菌中113株对环丙沙星耐药,占95.8%;19株对阿奇霉素耐药,占16.1%;66株四环素(TRNG)高度耐药,占55.9%;106株对青霉素耐药,占89.8%;5株对头孢曲松耐药,占4.2%。未检出大观霉素耐药株。序列分析淋球菌耐药株QRDR基因中gyrA和parC发生位点突变,其中gryA突变位点发生在S91F、S91Y、D95G、D95N氨基酸;parC突变位点发生在D86N,S87R,S88P,E91S氨基酸。结论淋球菌对青霉素、四环素以及环丙沙星(氟喹诺酮类)等抗菌药物耐药,其机制为gyrA和parC位点氨基酸发生变异,但对阿奇霉素、头孢曲松以及大观霉素的耐药机制尚不明确,有待进一步观察。 展开更多
关键词 淋球菌 抗菌药物 qrdr基因
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医院ICU分离株肺炎克雷伯菌基因进化分析和耐药性研究 被引量:4
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作者 徐陶 胡丽蓉 薛钰婷 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第10期941-945,共5页
目的研究医院ICU分离株肺炎克雷伯菌耐药和基因关键位点突变情况,为肺炎克雷伯菌感染治疗提供依据。方法对分离株肺炎克雷伯菌采用琼脂扩散法做15种常见抗生素的药敏试验,方法及标准参照2013版美国临床实验室标准化委员会药敏试验标准(... 目的研究医院ICU分离株肺炎克雷伯菌耐药和基因关键位点突变情况,为肺炎克雷伯菌感染治疗提供依据。方法对分离株肺炎克雷伯菌采用琼脂扩散法做15种常见抗生素的药敏试验,方法及标准参照2013版美国临床实验室标准化委员会药敏试验标准(CLSI);按照CLSI对超广谱β酰胺酶进行检测和验证,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR扩增I类整合酶基因;对QRDR(喹诺酮耐药决定区)耐药株基因gyrA和parC进行检测并与疫苗株比对。结果药敏试验显示,ICU分离株肺炎克雷伯菌对亚胺培南,美罗培南,阿米卡星的耐药率分别为1.4%、2.7%和4.0%。对复方新诺明和庆大霉素耐药率分别为68.0%和62.7%,对其他抗生素耐药率在10%-60%之间。采用琼脂扩散法检出23株产ESBLs,占30.7%;采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶6株阳性,占8.0%;PCR检测I类整合子21株阳性,占28.0%。耐药株QRDR基因检测和序列分析显示,gyrA基因编码产物第83位由丝氨酸(Ser)变异为苯丙氨酸(Phe)S83F,第87位天冬氨酸(Asp)变异为谷氨酸(Asn)D87N,parC基因编码产物第80位由丝氨酸(Ser)变异为异亮氨酸(Ile)S80I。结论本组分离菌中带有I类整合子和产碳青霉烯酶检出率较低,分离株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南和阿米卡星耐药率低于10%,上述药物可作为一线药物用于肺炎克雷伯菌的感染治疗。对QRDR基因检测发现gyrA和parC基因突变引起细菌对环丙沙星和左氧氟沙星耐药,因此氟喹诺酮类药物应慎用。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 耐药性 超广谱β酰胺酶 碳青霉烯酶 喹诺酮耐药决定区
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Determinants of quinolone resistance in Escherichia coli causing community-acquired urinary tract infection in Bejaia,Algeria 被引量:8
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作者 Yanat Betitra Vinuesa Teresa +1 位作者 Vinas Miguel Touati Abdelaziz 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2014年第6期462-467,共6页
Objective:To investigate the mechanisms of quinolone resistance and the association with other resistance markers among Esherichia coli(E.coli) strains isolated from outpatient with urinary tract infection in north of... Objective:To investigate the mechanisms of quinolone resistance and the association with other resistance markers among Esherichia coli(E.coli) strains isolated from outpatient with urinary tract infection in north of Algeria.Methods:A total of 30 nalidixic acid-resistant E.coli isolates from outpatient with urinary tract infections from January 2010 to April 2011 in north of Algeria(Bejaia) were studied.Antimicrobial susceptibility was determined by disc diffusion assay,minimal inhibitory concentrations(MIC) of quinolone were determined by microdilution.Mutations in the Quinolone Resistance-Determining Region(QRDR) of gyra and parC genes and screening for qnr(A,B and S) and bla genes were done by PCK and UNA sequencing.Results:Most of the E.coli isolates(56.66%) were shown to carry mutations in gyrA and parC,igyra:Ser83Leu + Asp87Asn and parC:Ser80Iler.While.16.66 had only an alteration in gyrA:Ser83Leu.One isolate produced qnrB-like and two qnrS-like.Four isolates were CTXM-15 producers associated with TEM-1 producing in one case.Co-expression of bla_(LTV,M)_(15) and qnrB was determined in one E.coli isolate.Conclusions:Our findings suggested the community emergence of gyrA and parC alterations and Qnr determinants that contributed to the development and spread of fluoroquinolone resistance in Algerian E.coli isolates. 展开更多
关键词 ESCHERICHIA coli COMMUNITY-ACQUIRED urinary TRACT infection qrdr QNR ESBL
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广州市鸡肉中科瓦利斯沙门菌的耐药性及分子分型研究 被引量:2
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作者 刘海霞 邬雨倩 +6 位作者 詹泽强 黄雪欢 瞿孝云 马叶本 叶存栋 廖明 张建民 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期75-80,共6页
为了分析2016年广州市农贸市场所售的鸡肉中科瓦利斯沙门菌(Salmonella corvallis)耐药性及流行特征,参照国标检测方法(GB4789.4—2016),对广州市农贸市场采集的鸡肉样品进行沙门菌分离鉴定和血清学分型,用Kirby-Bauer法进行14种抗菌药... 为了分析2016年广州市农贸市场所售的鸡肉中科瓦利斯沙门菌(Salmonella corvallis)耐药性及流行特征,参照国标检测方法(GB4789.4—2016),对广州市农贸市场采集的鸡肉样品进行沙门菌分离鉴定和血清学分型,用Kirby-Bauer法进行14种抗菌药物的耐药试验,用PCR方法检测携带的耐药基因,根据沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型试验方案进行分子分型。结果显示,21株科瓦利斯沙门菌中,对磺胺异噁唑耐药性最高(95.2%),其次为萘啶酸(90.5%)、四环素(66.7%),对环丙沙星的耐药率为19%,多重耐药菌检出率为81%。21株科瓦利斯沙门菌中喹诺酮类耐药决定区(QRDR)基因parC的突变率为100%,其第57位氨基酸苏氨酸突变为丝氨酸(Thr57→Ser),并且在质粒介导的喹诺酮类耐药(PMQR)基因中检出了qnrS、aac(6′)-Ib-cr和qnrB,检出率分别为90.5%、23.8%和9.5%。21株科瓦利斯沙门菌经PFGE分型后,结果显示其可分为7个血清型,其中具有1个优势克隆型(11株)。研究结果表明,广州市农贸市场鸡肉源科瓦利斯沙门菌分离株呈现耐药模式多样,多重耐药菌株严重,PFGE分子型别呈多态性,有同源菌株存在,提示存在共同来源或者交叉污染,应加强鸡肉中科瓦利斯沙门菌监测,同时为进一步做好食品中沙门菌的防控提供数据支持。 展开更多
关键词 科瓦利斯沙门菌 耐药性 PMQR qrdr PFGE
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Resistance to Fluoroquinolones and Other Antimicrobials in Culture-Positive <i>Salmonella typhi</i>Isolates in Gulbarga, South India
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作者 Kavita Nagshetty N. G. Manjula +3 位作者 Girish C. Math Arali Sagar Mohan C. T. Shivannavar S. M. Gaddad 《Advances in Microbiology》 2021年第1期16-26,共11页
<b>Background:</b> Typhoid fever is a major public health concern in developing countries. The upsurge in the occurrence of bacterial isolates that are resistant to nalidixic acid;with reduced susceptibili... <b>Background:</b> Typhoid fever is a major public health concern in developing countries. The upsurge in the occurrence of bacterial isolates that are resistant to nalidixic acid;with reduced susceptibility to ciprofloxacin in typhoidal <i>Salmonellae</i> constitutes a challenge to the clinician. <b>Methods:</b> In order to better understand the epidemiology of <i>Salmonella</i> infections in South India, <i>Salmonella typhi</i> isolates were screened from various healthcare centers. <i>Salmonella</i> isolates were identified by using standard phenotypic, serological, antibiotic susceptibility and molecular methods. <b>Results:</b> Among a total of 100 <i>S. typhi</i> isolates 9% were found to be multidrug resistant and 30% were nalidixic acid resistant. Isolates with reduced susceptibility to ciprofloxacin displays single base mutations in the gyrA gene. A very low rate of 1% resistance was found to ciprofloxacin. The only one isolate with ciprofloxacin MIC ≥ 4 μg/ml also showed single mutation in the QRDR of the gyrA gene in <i>S. typhi</i> (GenBank accession no. HQ176349-HQ176368). <b>Conclusions:</b> A very low rate of nalidixic acid resistance with reduced susceptibility to ciprofloxacin was observed in comparison to other endemic areas in isolates of <i>S. typhi</i> from Gulbarga, South India, with steadily increasing NAR <i>S. typhi</i> but decreasing MDR isolations over the study period. This is most likely due to an increased use of ciprofloxacin as a first line drug of choice over more traditional antimicrobial agents for the treatment of typhoid fever. 展开更多
关键词 Salmonella typhi FLUOROQUINOLONES MDR NAR GYRA qrdr
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耐环丙沙星鲍氏不动杆菌中喹诺酮耐药相关基因分析
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作者 周振江 罗燕萍 +5 位作者 郭景玉 吕瑞辰 李艳君 杨瑞馥 黄新祥 宋亚军 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期510-513,共4页
目的研究鲍氏不动杆菌(ABA)临床分离株对喹诺酮类抗生素耐药机制。方法收集来自6家医院的114株耐环丙沙星ABA临床分离菌株,PCR扩增喹诺酮类抗生素结合靶基因(gyrA、gyrB、parC和parE),并进行序列测定,与参考菌株ATCC17978基因组进行比对... 目的研究鲍氏不动杆菌(ABA)临床分离株对喹诺酮类抗生素耐药机制。方法收集来自6家医院的114株耐环丙沙星ABA临床分离菌株,PCR扩增喹诺酮类抗生素结合靶基因(gyrA、gyrB、parC和parE),并进行序列测定,与参考菌株ATCC17978基因组进行比对,确定其喹诺酮耐药决定区是否存在耐药相关突变;PCR扩增9个质粒介导的喹诺酮类耐药基因[qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、aac(6')-Ⅰb-cr、oqxA和oqxB],并对阳性扩增产物进行测序以确定基因亚型。结果绝大部分菌株(113/114,99.1%)的gyrA基因发生了Ser83Leu突变,其中67株菌(67/114,58.8%)同时发生了parC基因的Ser80Leu突变,以上两种突变是常见的喹诺酮耐药相关突变。与标准菌株进行比对,受试菌株gyrB基因Arg393Ser、Arg393Cys、Thr401Ala、Pro406Ser、Val430Phe、Cys440Ser和Gly480Arg突变率分别为95.6%、0.9%、96.5%、96.5%、100%、96.5%和96.5%;parE基因在7个位点发生了同义突变,突变率>96%。83.3%(95/114)的菌株中检出aac(6')-Ⅰb基因,但不存在"cr"突变,其余质粒介导的喹诺酮类耐药基因扩增均为阴性。结论该研究耐环丙沙星ABA中未发现质粒介导的喹诺酮耐药基因,在gyrB和parE基因中发现的突变可能与环丙沙星耐药性无关,实验菌株的环丙沙星耐药性主要与染色体上的喹诺酮耐药决定区GyrASer83Leu和ParC-Ser80Leu两种突变相关。 展开更多
关键词 环丙沙星 鲍氏不动杆菌 喹诺酮耐药决定区 质粒介导喹诺酮耐药
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