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PvMSP1-19重组蛋白体外对间日疟患者外周血T细胞免疫功能的影响 被引量:1
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作者 李光友 夏惠 +2 位作者 陶志勇 陈勇 方强 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期175-178,共4页
目的探讨PvMSP1-19重组蛋白对间日疟既往感染者外周血T淋巴细胞功能的影响。方法间日疟既往感染者外周血单个核细胞(PBMC),在体外分别以PvMSP1-19重组蛋白和IL-2(刺激组)及IL-2(未刺激组)培养,培养第7d时刺激组细胞再用PvMSP1-19重组蛋... 目的探讨PvMSP1-19重组蛋白对间日疟既往感染者外周血T淋巴细胞功能的影响。方法间日疟既往感染者外周血单个核细胞(PBMC),在体外分别以PvMSP1-19重组蛋白和IL-2(刺激组)及IL-2(未刺激组)培养,培养第7d时刺激组细胞再用PvMSP1-19重组蛋白刺激24h,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群分泌IL-4和IFN-γ的情况;并以CFSE标记法检测T淋巴细胞的增殖反应。结果在分泌IL-4的淋巴细胞中,CD8+T细胞所占的比例刺激组(8.04%)明显高于未刺激组(3.46%);而分泌IFN-(的CD8+T细胞在刺激组(0.82%)与未刺激组(1.05%)间并无显著性差别。分泌IL-4和IFN-(的CD4+T细胞比例在刺激组(1.81%,0.19%)与未刺激组(1.89%,0.05%)间并无显著性差异。此外,CD8+T细胞的增殖指数刺激组(5.65%)也明显高于未刺激组(3.69%)。结论 PvMSP1-19重组蛋白能显著诱导间日疟既往感染者外周血CD8+T细胞增殖和优先分泌IL-4。 展开更多
关键词 间日疟 pvmsp1-19 IL-4 IFN-y
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PvMSP1对树突状细胞分化成熟和功能的影响 被引量:1
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作者 高迎 陶志勇 +4 位作者 夏惠 杨文选 陶莉 方强 买月琴 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2014年第1期51-55,共5页
目的观察间日疟原虫裂殖子主要蛋白1(PvMSP1)对树突状细胞(DC)分化成熟和功能的影响,并探讨该蛋白通过Toll样受体(TLR)通路活化DC的机制。方法选择不同剂量的PvMSP1(1.0、10.0、100.0μg/ml)体外刺激人单核细胞来源的DC,采用流式细胞术... 目的观察间日疟原虫裂殖子主要蛋白1(PvMSP1)对树突状细胞(DC)分化成熟和功能的影响,并探讨该蛋白通过Toll样受体(TLR)通路活化DC的机制。方法选择不同剂量的PvMSP1(1.0、10.0、100.0μg/ml)体外刺激人单核细胞来源的DC,采用流式细胞术分析DC成熟性相关分子CD83、CD86、HLA-DR的表达变化;ELISA检测DC培养上清中IL-10、IL-12的表达水平;RT-PCR检测DC TLR4、TLR9 mRNA的表达水平;MTT法检测DC刺激自体淋巴细胞增殖的能力。同时选择未刺激的DC作为阴性对照组,LPS刺激的DC作为阳性对照组。对所得数据进行方差分析和q检验。结果与未刺激组比较,LPS诱导组CD83、CD86、HLA-DR的百分含量均增加,PvMSP1诱导组CD83、CD86、HLA-DR的表达也均升高(P均<0.05);LPS诱导组IL-10、IL-12的表达量明显增加(P<0.01),PvMSP1诱导组IL-10、IL-12的表达量也均增加(P均<0.05);LPS组DC TLR4 mRNA的表达增加(P<0.05),TLR9 mRNA的表达无明显变化(P>0.05),PvMSP1诱导组DC TLR4 mRNA的表达增加(P<0.01),TLR9 mRNA无明显变化(P>0.05);DC能够刺激自体淋巴细胞增殖。结论 PvMSP1具有促进DC分化成熟的作用,且经其诱导成熟的DC具备抗原递呈功能;PvMSP1可能经TLR4通路而非TLR9通路诱导DC成熟。 展开更多
关键词 间日疟原虫 间日疟原虫裂殖子主要蛋白1(pvmsp1) 树突状细胞(DC) Toll样受体(TLR)通路 TLR4 TLR9 分化
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间日疟原虫pvMSP_(1-19)基因重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建与鉴定 被引量:6
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作者 陈勇 夏惠 +4 位作者 陶志勇 刘丹 高颖 方强 李光友 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第7期507-510,共4页
目的体外扩增间日疟原虫pvMSP1-19基因,构建大肠埃希菌-穿梭质粒PMV261/pvMSP1-19和电转化耻垢分枝杆菌。方法采用聚合酶链反应(PCR),体外扩增间日疟原虫的pvMSP1-19基因,克隆入PMD19-T载体,构建亚克隆PMV/pvMSP1-19大肠埃希菌-分枝杆... 目的体外扩增间日疟原虫pvMSP1-19基因,构建大肠埃希菌-穿梭质粒PMV261/pvMSP1-19和电转化耻垢分枝杆菌。方法采用聚合酶链反应(PCR),体外扩增间日疟原虫的pvMSP1-19基因,克隆入PMD19-T载体,构建亚克隆PMV/pvMSP1-19大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒;电转化方法将PMV/pvMSP1-19穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌中。并热诱导此重组分枝杆菌,SDS-PAGE电泳观察pvMSP1-19蛋白的表达,Western blot鉴定其免疫学活性。结果成功扩增了间日疟原虫pvMSP1-19基因,并且正确构建PMV/pvMSP1-19穿梭质粒和转化耻垢分枝杆菌。采用Westernblot证实该重组耻垢分枝杆菌表达的pvMSP1-19蛋白能被间日疟患者的血清识别。结论构建的重组耻垢分枝杆菌能表达pvMSP1-19蛋白,该蛋白具有免疫反应性,为pvMSP1-19基因重组BCG疫苗的研制提供了必要的基础。 展开更多
关键词 疟原虫 间日 pvmsp1-19 耻垢分枝杆菌 表达 免疫反应性
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The genetic polymorphism of Plasmodium vivax genes in endemic regions of Thailand 被引量:1
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作者 Varakorn Kosaisavee Ian Hastings +1 位作者 Alister Craig Usa Lek-Uthai 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2011年第12期931-936,共6页
Objective:To investigate the genetic polymorphism of Plasmodium vivax(P.vivax) PvCSP and PvMSP1 genes from field isolates at four endemic regions(North,East,West and South) of Thailand.Methods:The 152 P.vivax injected... Objective:To investigate the genetic polymorphism of Plasmodium vivax(P.vivax) PvCSP and PvMSP1 genes from field isolates at four endemic regions(North,East,West and South) of Thailand.Methods:The 152 P.vivax injected cases from dried blood spots were DMA extracted and confirmed by species-specific primer sets using multiplex PCR method.PvMSPI fragments F2 and F3:PvCSP were gcnotvped using RFLP-PCR method.Resuits:Totally amplified DNA which was multiple genotypes for PvMSP1 F2 and PvMSP1 F3 were 12.50%and 8.55%.respectively while PvCSP was 3.95%.The overall frequency of multiple genotypes was 25%.There were 12 allele tvpes of PvMSP1 F2 using AluI enzyme digestion and 8 size variations were found in P\MSP1 F3.The isolates from western region was highly genetic diverse when compare among all isolates.The predominant variant type of PvCSP gene was \ K2I0 type.Conclusions:The niulliple genotypes are common found in Thailand and it might hide the real genotype.PvCSP does not have extensive genetic diversity in this study.However.PvMSPI marker due to multiple genotypes is difficult In be analyzed.The multiple genotypes findings might stem from population migration and vector species findings. 展开更多
关键词 Genetic POLYMORPHISM PLASMODIUM VIVAX pvmsp1 PvCSP
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