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Puumala病毒核酸探针的制备 被引量:1
1
作者 华育平 王永林 《野生动物》 1993年第2期36-38,32,共4页
依据已知的病毒核酸序列,采用异羟基毛地黄毒脱氧三磷酸尿苷(DIG-UTP)加尾方法进行标记,制备了针对Puumala病毒核酸M和S片段的20个核酸探针,对属于Puumala病毒的CG18-20和Hallnas两个毒株的细胞培养RNA提取物进行测定,其探针具有良好的... 依据已知的病毒核酸序列,采用异羟基毛地黄毒脱氧三磷酸尿苷(DIG-UTP)加尾方法进行标记,制备了针对Puumala病毒核酸M和S片段的20个核酸探针,对属于Puumala病毒的CG18-20和Hallnas两个毒株的细胞培养RNA提取物进行测定,其探针具有良好的特异性和敏感性,RNA含量为15ng时仍可显示出明显的阳性反应。 展开更多
关键词 puumala病毒 核酸探针 制备
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聚合酶链反应法进行Puumala病毒RNA扩增的研究
2
作者 华育平 王永林 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期86-90,共5页
应用PCR技术进行Puumala病毒核酸片段的特异性扩增.将为进一步研究Puumala病毒和相关病毒.以及检测此类病毒感染提供更加特异、敏感、快速的方法。依据已知的Puumala病毒核酸序列,从M节段选出5对寡核苷酸... 应用PCR技术进行Puumala病毒核酸片段的特异性扩增.将为进一步研究Puumala病毒和相关病毒.以及检测此类病毒感染提供更加特异、敏感、快速的方法。依据已知的Puumala病毒核酸序列,从M节段选出5对寡核苷酸作为PCR反应中的引物,以Puumala病毒RNA作为模板。做PCR。PCR产物分别经凝胶电泳和核酸杂交的方法进行测定,结果表明。目的核酸片段得到了很好的扩增。 展开更多
关键词 puumala病毒 检测 聚合酶链反应 动物
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汉坦病毒属Puumala型病毒感染——小儿不明原因高热的可能病因
3
作者 Van Der Werff Ten Bosch J. Heyman P. +1 位作者 Potters D. 李开 《世界核心医学期刊文摘(儿科学分册)》 2005年第3期13-13,共1页
由Puumala病毒引起的汉坦病毒性感染常导致流行性肾病,该病以高热、血常规异常、轻微肾功能障碍和眼功能异常为主要特征。在大部分欧洲地区,已少见该病毒感染流行,但某些地区仍有流行现象。儿童汉坦病毒属感染更为少见。本文报道1例诊... 由Puumala病毒引起的汉坦病毒性感染常导致流行性肾病,该病以高热、血常规异常、轻微肾功能障碍和眼功能异常为主要特征。在大部分欧洲地区,已少见该病毒感染流行,但某些地区仍有流行现象。儿童汉坦病毒属感染更为少见。本文报道1例诊断为汉坦病毒感染的女性患儿。患者以高热、蛋白尿、血尿和眼损害为主要特征,但缺乏血小板减少、肾脏功能障碍等典型特征。结论:本例病例资料证明:对于长期不明原因高热患儿,有必要考虑汉坦病毒感染。可根据血清学检测来加以确诊。 展开更多
关键词 汉坦病毒属 病毒感染 puumala 可能病因 肾脏功能 肾功能 血清学 流行现象
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Small mammal community composition impacts bank vole (Clethrionomys glareolus) population dynamics and associated seroprevalence of Puumala orthohantavirus 被引量:1
4
作者 Felicitas Maria BUJNOCH Daniela REIL +4 位作者 Stephan DREWES Ulrike MROSENFELD Rainer G.ULRICH Jens JACOB Christian IMHOLT 《Integrative Zoology》 SCIE CSCD 2024年第1期52-65,共14页
Rodents are important reservoirs for zoonotic pathogens that cause diseases in humans.Biodiversity is hypoth-esized to be closely related to pathogen prevalence through multiple direct and indirect pathways.For exampl... Rodents are important reservoirs for zoonotic pathogens that cause diseases in humans.Biodiversity is hypoth-esized to be closely related to pathogen prevalence through multiple direct and indirect pathways.For example,the presence of non-host species can reduce contact rates of the main reservoir host and thus reduce the risk of transmission(“dilution effect”).In addition,an overlap in ecological niches between two species could lead to increased interspecific competition,potentially limiting host densities and reducing density-dependent pathogen transmission processes.In this study,we investigated the relative impact of population-level regulation of direct and indirect drivers of the prevalence of Puumala orthohantavirus(PUUV)in bank voles(Clethrionomys glareolus)during years with high abundance.We compiled data on small mammal community composition from four regions in Germany between 2010 and 2013.Structural equation modeling revealed a strong seasonality in PUUV control mechanisms in bank voles.The abundance of shrews tended to have a negative relationship with host abundance,and host abundance positively influenced PUUV seroprevalence,while at the same time increasing the abundance of competing non-hosts like the wood mouse(Apodemus sylvaticus)and the yellow-neckedfield mouse(Apodemusflavicollis)were associated with reduced PUUV seroprevalence in the host.These results indicate that for PUUV in bank voles,dilution is associated with increased interspecific competition.Anthropogenic pressures leading to the decline of Apodemus spp.in a specific habitat could lead to the amplification of mechanisms promoting PUUV transmission within the host populations. 展开更多
关键词 bank vole BIODIVERSITY puumala orthohantavirus small mammals
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在我国发现普马拉病毒新亚型 被引量:7
5
作者 唐丽华 张全福 +5 位作者 修梅红 扈光伟 沈博 杨显达 梁米芳 李德新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期320-325,共6页
对我国东北地区捕获的157份棕背鼠平的肺组织进行普马拉病毒检测。其中免疫荧光检测出阳性标本1份,PCR检测出核苷酸阳性标本7份。对PCR产物进行测序后发现,其核苷酸的序列与报道的普马拉病毒核苷酸序列存在着差异。系统进化分析表明,我... 对我国东北地区捕获的157份棕背鼠平的肺组织进行普马拉病毒检测。其中免疫荧光检测出阳性标本1份,PCR检测出核苷酸阳性标本7份。对PCR产物进行测序后发现,其核苷酸的序列与报道的普马拉病毒核苷酸序列存在着差异。系统进化分析表明,我国发现的这株普马拉病毒,在进化树上形成了一个新的分支,为一新亚型。并且与在韩国和日本发现的普马拉病毒亲缘关系最为接近。 展开更多
关键词 普马拉病毒 S片段 M片段 核苷酸序列分析
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辽宁省普马拉病毒检测及基因特征分析 被引量:4
6
作者 耿英芝 姚文清 +6 位作者 刘芸 孙英伟 王博 韩仰欢 李鑫 陈静乙 赵卓 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第6期426-428,共3页
目的研究辽宁省境内棕背鼠平体内普马拉病毒(PUUV)的基因特征及分布情况。方法收集辽宁省抚顺和本溪地区棕背鼠平的肺组织标本,采用间接免疫荧光法(IFA)检测PUUV抗原,RT-PCR方法扩增标本中PUUV S基因片段,并测序,进行同源性比对和系统... 目的研究辽宁省境内棕背鼠平体内普马拉病毒(PUUV)的基因特征及分布情况。方法收集辽宁省抚顺和本溪地区棕背鼠平的肺组织标本,采用间接免疫荧光法(IFA)检测PUUV抗原,RT-PCR方法扩增标本中PUUV S基因片段,并测序,进行同源性比对和系统发生分析。结果共采集38份棕背鼠平肺组织标本,IFA检测PUUV抗原阳性2份,RT-PCR扩增PUUV S基因阳性4份,测序表明均为PUUV特异性序列。系统进化分析显示,本次检出的抚顺和本溪病毒株与吉林省的抚松株属于同一亚型,核苷酸同源性为95.2%~96.9%,在进化树上形成一个新的分支,在亲缘关系上与日本PUUV株较近。结论辽宁省可能存在PUUV的一个新亚型。 展开更多
关键词 棕背砰 普马拉病毒 基因序列 系统发生分析
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吉林省普马拉病毒的RT-PCR检测与序列分析 被引量:6
7
作者 吴东林 王慧 +2 位作者 沈博 扈光伟 李德新 《中国卫生工程学》 CAS 2008年第5期259-261,共3页
目的建立检测普马拉病毒的RT—PCR方法,确认吉林省存在普马拉病毒,并对病毒的基因片段进行分析。方法采用RT—PCR方法,对吉林省抚松地区棕背([鼠平])鼠肺标本进行检测。对S片段核蛋白基因编码序列进行序列比较分析,绘制系统发生... 目的建立检测普马拉病毒的RT—PCR方法,确认吉林省存在普马拉病毒,并对病毒的基因片段进行分析。方法采用RT—PCR方法,对吉林省抚松地区棕背([鼠平])鼠肺标本进行检测。对S片段核蛋白基因编码序列进行序列比较分析,绘制系统发生树。结果研究表明在吉林省抚松地区存在普马拉病毒,采集于2005年和2006年的标本阳性率分别为7.34%和14.29%,呈逐年上升趋势。序列分析表明与其他普马拉病毒核苷酸序列同源性只有81.1%~83.3%。系统发生分析揭示,该病毒与在日本、韩国分离的普马拉病毒亲缘关系相对接近,并且在进化过程中处于更古老的节点。结论在吉林省抚松地区可能存在普马拉病毒的一个新亚型。 展开更多
关键词 普马拉病毒 序列测定 系统发生分析
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普马拉病毒重组核蛋白用于流行性出血热病人IgG抗体检测 被引量:1
8
作者 吴东林 王慧 +2 位作者 沈博 扈光伟 侯祥 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第3期584-585,共2页
目的:检测出血热病人的IgG抗体及发现在我国可能存在的普马拉病毒感染者。方法:用普马拉病毒重组核蛋白作抗原建立间接ELISA法,检测出血热病人血清中特异性IgG。结果:检测了吉林省抚松地区37份临床诊断出血热患者血清,4份血清抗普马拉... 目的:检测出血热病人的IgG抗体及发现在我国可能存在的普马拉病毒感染者。方法:用普马拉病毒重组核蛋白作抗原建立间接ELISA法,检测出血热病人血清中特异性IgG。结果:检测了吉林省抚松地区37份临床诊断出血热患者血清,4份血清抗普马拉病毒核蛋白IgG抗体阳性。结论:我国有可能存在普马拉病毒感染者。 展开更多
关键词 普马拉病毒 重组核蛋白 ELISA 流行性出血热 肾综合征出血热 抗体检测 感染者 检测结果 吉林省 汉滩病毒
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湖北地区汉滩病毒与普马拉病毒及多布拉伐病毒的血清学交叉反应研究 被引量:1
9
作者 李晴 罗凡 杨占秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期438-441,共4页
目的研究湖北地区汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)与普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多布拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV)血清学交叉反应。方法以酵母菌表达的PUUV、DOBV、HTNV重组核衣壳蛋白(recombinant nucleocapsid protein,rNP)为包... 目的研究湖北地区汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)与普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多布拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV)血清学交叉反应。方法以酵母菌表达的PUUV、DOBV、HTNV重组核衣壳蛋白(recombinant nucleocapsid protein,rNP)为包被抗原,ELISA法定性、定量分析湖北地区HTN型急性/恢复期血清中IgA、IgG、IgM抗体,比较疾病早晚期血清学交叉反应变化。结果DOB-rNP与HTN型血清中IgA、IgG、IgM抗体交叉反应性较高,PUU-rNp对HTN型血清交叉反应很低;IgA、IgG抗体交叉反应在恢复期血清中均增高,且IgA抗体交叉反应更多更强。结论湖北地区HTN型血清与DOBV存在广泛交叉反应,与PUUV交叉反应少。各交叉反应在恢复期增高对汉滩病毒血清学研究具重要意义。 展开更多
关键词 汉滩病毒 普马拉病毒 多布拉伐病毒 ELISA 血清学交叉反应
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普马拉病毒核蛋白基因片段原核表达及产物纯化
10
作者 吴东林 王慧 +2 位作者 沈博 扈光伟 侯祥 《中国卫生工程学》 CAS 2010年第1期6-8,共3页
目的通过原核表达获得普马拉病毒重组核蛋白。方法采用RT-PCR方法,从感染普马拉病毒的鼠肺标本中扩增得到编码核蛋白1-117 aa的基因片段。将截短的核蛋白基因片段插入原核表达载体PQE30构建重组质粒,转化至大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,... 目的通过原核表达获得普马拉病毒重组核蛋白。方法采用RT-PCR方法,从感染普马拉病毒的鼠肺标本中扩增得到编码核蛋白1-117 aa的基因片段。将截短的核蛋白基因片段插入原核表达载体PQE30构建重组质粒,转化至大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,利用N i-NTA Agarose对表达产物进行纯化。结果重组蛋白得到了高效表达。表达产物分子量15 000,在菌体中主要以可溶性蛋白形式存在。通过亲和层析,得到了纯化的重组蛋白。结论普马拉病毒重组核蛋白基因片段得到了有效表达。 展开更多
关键词 普马拉病毒 原核表达 重组核蛋白
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普马拉类病毒分子流行病学研究进展 被引量:3
11
作者 杨鹏飞 邹洋 +1 位作者 陈化新 张永振 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1045-1048,共4页
普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)属于布尼亚病毒科(Bunyaviridae)的汉坦病毒属(Hantavirus,HV),1980年首次在芬兰的普马拉地区欧洲棕背屠乎(Myodes glareolus)中发现。随着分子流行病学及分子进化等学科应用于HV的研究,不... 普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)属于布尼亚病毒科(Bunyaviridae)的汉坦病毒属(Hantavirus,HV),1980年首次在芬兰的普马拉地区欧洲棕背屠乎(Myodes glareolus)中发现。随着分子流行病学及分子进化等学科应用于HV的研究,不仅在欧洲及俄罗斯发现8个亚型的PUUV,在日本,韩国和中国的吉林省也发现PUUV类病毒的存在。国际病毒分类委员会将最先在日本北海道棕背鼠平(M.rufocanus)上发现的HV命名为北海道病毒(HOKV),而在韩国的东北绒鼠(M.regulus)上发现的Hv命名为Muju病毒(MUJV)。与其他型HV一样,PUUV不影响宿主动物的生长繁殖,并与宿主共进化,但能引起人较轻的肾综合征出血热(HFRS)。为更深入全面地了解其遗传特征、演化规律等生物学特性,有效地预防控制PUUV及相关病毒的感染,本文综述如下。 展开更多
关键词 普马拉类病毒 分子流行病学 临床研究 治疗方法
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普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR方法的建立 被引量:1
12
作者 杨鹏飞 燕清丽 +4 位作者 张丽萍 徐焕洲 王玉春 甄维 胡孔新 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2013年第4期220-222,227,共4页
目的建立一种适应国境口岸地区特定鼠种中普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法利用Beacon Designer7.0软件设计引物和探针,以人工合成普马拉病毒S基因的片段作为模板,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并验证该方法的灵敏度及特异性... 目的建立一种适应国境口岸地区特定鼠种中普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法利用Beacon Designer7.0软件设计引物和探针,以人工合成普马拉病毒S基因的片段作为模板,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并验证该方法的灵敏度及特异性。结果模板的Ct值与模板稀释浓度的对数存在良好的线性关系,标准曲线y=-3.122x+38.605,R2=0.995,PCR扩增效率为109.1%,其最低检出限为31.6copies/μl。结论建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,适合于普马拉病毒的快速检测。 展开更多
关键词 普马拉病毒 定量 实时荧光RT-PCR
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双重荧光RT-RAA检测引起肾综合征出血热汉坦病毒方法的建立 被引量:2
13
作者 周冬根 罗洁 +2 位作者 许恒毅 童淑梅 胡群 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2022年第4期253-256,263,共5页
目的 建立汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul virus,SEOV)、普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多不拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV)4种引起肾综合征出血热病毒的快速筛查、诊断方法。方法 分析确定上述4种病毒的保守基因作为... 目的 建立汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul virus,SEOV)、普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多不拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV)4种引起肾综合征出血热病毒的快速筛查、诊断方法。方法 分析确定上述4种病毒的保守基因作为靶标区域,设计4组特异性引物和探针,组合成两组双重荧光重组酶介导等温扩增(RTRAA)反应体系。分别用4种病毒的体外转录RNA验证方法的灵敏度,采用登革病毒I-Ⅳ型、基孔肯雅病毒、黄热病毒疫苗株、乙型脑炎病毒、甲型流感病毒3型、甲型H1N1流感病毒以及乙型流感病毒核酸及4种病毒体外转录RNA进行特异性验证,分别采用中浓度(10^(4)拷贝/μl)、低浓度(10^(2)拷贝/μl)的体外转录RNA验证双检测体系的重复性。结果 通过生物信息学分析,将4种病毒组合成HTNV+SEOV组合以及PUUV+DOBV双重荧光RT-RAA检测体系,均在39℃检测15 min,检测灵敏度为1-10^(2)拷贝/μl,均与其他病毒无交叉反应。4种病毒对10^(4)拷贝/μl体外转录RNA检出率均达到100.0%,10^(2)拷贝/μl体外转录RNA检出率也能达到66.7%。结论 本研究建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于人体及鼠类样本的诊断与筛查. 展开更多
关键词 重组酶介导等温扩增 汉滩病毒 汉城病毒 普马拉病毒 多不拉伐病毒
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