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Cloning and Expression of Pun1 Gene Controlling Pungency of Pepper (Capsicum spp.) 被引量:1
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作者 董雨薇 孙樱燃 +5 位作者 毕然 孙宁莉 阮文渊 李越 王晶莹 郭庆勋 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2016年第11期2483-2488,共6页
[Objective] This study was conducted to investigate cloning and expression of Pun1 gene controlling pungency of pepper. [Method] With Capsicum annuum L as a material, the cDNA sequence of Capunl gene was obtained, wit... [Objective] This study was conducted to investigate cloning and expression of Pun1 gene controlling pungency of pepper. [Method] With Capsicum annuum L as a material, the cDNA sequence of Capunl gene was obtained, with a total length of 1 457 bp, coding 440 amino acids. [Result] Phylogenetic analysis showed that Capunl was closest to Pun1 of C. chinense, with a genetic distance of 0.019 3. Plant expression vector pCAM-Punl-GFP was constructed and transformed into to- bacco, and it was found that the protein coded by fusion gene Punl::GFP was lo- cated on cell membrane. Prokaryotic expression vectors were constructed, and by SDS-PAGE and Western Blot detection, an induced protein with a molecular weight of 63 ku was obtained. It was found by real-time fluorescence quantitative expres- sion that Pun1 gene was expressed at the highest level 30 d after flowering, de- creased then, and could not be detected substantially 40 and 45 d after flowering. [Conclusion] This study provides information and reference for molecular regulation mechanism of Pun1 gene. 展开更多
关键词 PUNGENCY pun1 gene Transient expression Prokaryotic expression
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辣椒Pun1位点对辣椒素酯类物质合成的控制
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作者 Koeun Han Hee-Jin Jeong +7 位作者 Joohee Sung Young Soo Keum Myeong-Cheoul Cho Jeong-Han Kim Jin-Kyung Kwon Byung-Dong Kim Byoung-Cheorl Kang 孔秋生(译) 《辣椒杂志》 2013年第1期38-47,共10页
辣椒由于含有生物碱化合物辣椒素和辣椒素类物质(capsaicinoids)而具有独特的辣味。虽然辣椒素类物质已被证实对人体健康有药理和生理作用,但由于具有辛辣味,使得辣椒素类物质的应用受到限制。在无辣味的辣椒中发现的辣椒素酯类物质(cap... 辣椒由于含有生物碱化合物辣椒素和辣椒素类物质(capsaicinoids)而具有独特的辣味。虽然辣椒素类物质已被证实对人体健康有药理和生理作用,但由于具有辛辣味,使得辣椒素类物质的应用受到限制。在无辣味的辣椒中发现的辣椒素酯类物质(capsinoids)与辣椒素类物质具有非常相近的结构和相似的生物效应。以前的研究表明,p-AMT基因突变与辣椒素酯类物质的产生相关,然而,辣椒素酯类物质的合成途径尚未被完全阐明。在本研究中,我们对F6重组自交系群体进行了遗传分析,以确定辣椒素酯类物质的合成机制。在这个群体中,辣椒素酯类物质的产生与否表现出了与具有Pun1位点的基因型植株的共分离。此外,我们筛选了辣椒素酯类物质的合成模式,以及在p-AMT突变系中Pun1位点与辣椒素酯类物质合成的相关性。在辣椒种质中,我们筛选到p-AMT基因中PLP结合结构域中的氨基酸取代突变体。隐性pun1基因存在时不合成辣椒素酯类物质,同时还发现p-AMT突变型和辣椒素酯类物质的含量之间并无关系。由此认为Pun1基因不仅负责辣椒素类物质合成,同时也控制着辣椒素酯类物质的合成。 展开更多
关键词 辣椒素合成酶 辣椒属 辣味 pun1 拟转氨酶
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Pun1蛋白的辣椒素合酶活性及其作为辣椒素积累决定因素的证据
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作者 Kana Ogawa Katsunori Murota +6 位作者 Hanako Shimura Misaki Furuya Yasuko Togawa Takeshi Matsumura Chikara Masuta 马义花 孔秋生 《辣椒杂志》 2015年第2期42-50,共9页
背景:辣椒素类物质,包括辣椒素及其类似物,是导致辣椒果实辛辣的原因。尽管辣椒素为人熟知并且每天都会用到,但是对于辣椒素合成途径中的相关基因并不是完全了解。已有研究表明,p AMT和Pun1编码的蛋白分别催化辣椒素合成途径中的第二步... 背景:辣椒素类物质,包括辣椒素及其类似物,是导致辣椒果实辛辣的原因。尽管辣椒素为人熟知并且每天都会用到,但是对于辣椒素合成途径中的相关基因并不是完全了解。已有研究表明,p AMT和Pun1编码的蛋白分别催化辣椒素合成途径中的第二步和最后一步反应,并且Pun1编码的蛋白具有辣椒素合酶活性。然而,并没有直接的证据证明Pun1具有辣椒素合酶活性。结果:为了证明Pun1蛋白在辣椒素合成中的作用,我们利用大肠杆菌合成了抗Pun1蛋白抗体,利用该抗体拮抗内源的Pun1活性。同时通过病毒介导的基因沉默技术靶定了Pun1的m RNA,以确认抗Pun1抗体的特异性。在Pun1下调表达的胎座组织中,利用该抗体进行western blot,检测到Pun1蛋白的积累减少,同时辣椒素在胎座中的积累量也降低。从胎座组织中分离得到原生质体,在体外进行辣椒素的从头合成,加入抗Pun1抗体之后,辣椒素的合成受到抑制。通过分析不同辣椒品种的p AMT和Pun1的表达,我们发现辣椒素的高水平积累总是伴随着p AMT和Pun1的高水平表达,也就是说这两个基因对辣椒素合成很重要。比较有辣味辣椒和无辣味辣椒的香草基胺(辣椒素合成的前体物质)和辣椒素的积累水平,结果表明:在辛辣味辣椒中香草基胺的含量很低,推测可能是香草基胺合成之后,Pun1把香草基胺快速转化为辣椒素;而在无辣味辣椒中由于缺乏Pun1,香草基胺的含量积累到很高的水平。结论:对辣椒素从头合成途径和抗Pun1抗体进行原生质体试验,证明了Pun1基因及其产物参与了辣椒素的合成。与辣椒素的积累相比较,分析香草基胺的积累过程,揭示了Pun1是辣椒素和香草基胺积累水平的决定因素。 展开更多
关键词 CAPSICUM pAMT pun1 原生质体试验 辛辣 香草基胺 病毒介导的基因沉默
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辣椒的辣味遗传控制与辣椒素生物合成研究进展 被引量:16
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作者 张正海 毛胜利 +1 位作者 王立浩 张宝玺 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1821-1832,共12页
辣椒的辣味源于其果实胎座中合成的辣椒素和二氢辣椒素等生物碱类物质。就辣椒辣味的遗传特征,影响因素,辣椒素类物质生物合成途径及相关基因进化,辣味性状QTL定位,Pun1和pAMT基因分子标记辅助选择进行了综述。
关键词 辣椒 辣味 辣椒素类物质 辣椒素酯类物质 pun1基因
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一个与辣椒素含量高低紧密连锁的KASP标记及应用 被引量:4
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作者 欧立军 吕俊恒 汤冰倩 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期8158-8162,共5页
辣椒素是辣椒特有的物质,含量的高低是影响辣椒果实品质的重要因素。本研究拟建立1个与辣椒素含量高低紧密连锁的分子标记,从而有利于快速检测辣椒素含量,避免因口尝等传统方法带来的不便。Pun1是辣椒素合成途径中关键基因,以Pun1基因... 辣椒素是辣椒特有的物质,含量的高低是影响辣椒果实品质的重要因素。本研究拟建立1个与辣椒素含量高低紧密连锁的分子标记,从而有利于快速检测辣椒素含量,避免因口尝等传统方法带来的不便。Pun1是辣椒素合成途径中关键基因,以Pun1基因序列为参考,进一步根据基因变异设计KASP分子标记。利用KASP高通量分子标记分型系统对自然群体材料进行基因分型发现,采用该标记对85份自然群体材料进行鉴定,符合率达到100%。本标记为辣椒素含量高低紧密连锁的分子标记,可以为快速鉴定自然群体材料辣椒素含量高低提供依据。 展开更多
关键词 辣椒素 pun1基因 KASP 应用
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贵州省辣椒品种辣椒素含量控制基因克隆研究 被引量:2
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作者 韩畅 蒋琪 +3 位作者 高智席 吕朝燕 胡海军 古荣斌 《南方农业》 2019年第8期151-153,共3页
对16份贵州省主要辣椒品种的辣椒素含量进行鉴定,并成功克隆了导致辣椒素含量差异性状的PUN1(AT3)基因的2个等位基因(AT3-D1和AT3-D2)。实验结果表明:在16个辣椒品种中,辣椒素含量最高的是单生理想和正椒12号,分别达到3323.11ng·mL... 对16份贵州省主要辣椒品种的辣椒素含量进行鉴定,并成功克隆了导致辣椒素含量差异性状的PUN1(AT3)基因的2个等位基因(AT3-D1和AT3-D2)。实验结果表明:在16个辣椒品种中,辣椒素含量最高的是单生理想和正椒12号,分别达到3323.11ng·mL^-1和3160.52ng·mL^-1;最低的是干椒3号和辛香15号,分别只有759.3ng·mL^-1和583.28ng·mL^-1。选取单生理想和辛香15号作为材料克隆控制辣椒素含量的关键基因(AT3-D1和AT3-D2),AT3-D1比AT3-D2在蛋白质的N端少了100个氨基酸,但是在此后序列中具有较高的同源性,整体一致性达到67.35%;二者的蛋白分子量分别为37.79kD和49.68kD,等电点(pI)分别为6.95和7.09,均属于稳定蛋白和非分泌蛋白,且都不属于跨膜蛋白。 展开更多
关键词 辣椒素 高效液相色谱 pun1基因 基因克隆
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Chemical-analytical characterization and Pun1 gene expression variability analysis of ten selected Capsicum varieties
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作者 Eva Kovacikova Lucia Urbanova +5 位作者 Lenka Kuzelova Jana Lakatosova Ivona Janco Julius Arvay Jana Ziarovska Hana Duranova 《Food Bioscience》 2025年第3期556-567,共12页
This study aimed to identify chilli pepper varieties with bioactive compounds that may enhance the anticancer properties of medium-chain triglyceride(MCT)oil.Ten chilli varieties cultivated in Slovakia were analysed f... This study aimed to identify chilli pepper varieties with bioactive compounds that may enhance the anticancer properties of medium-chain triglyceride(MCT)oil.Ten chilli varieties cultivated in Slovakia were analysed for capsaicin(CAP),dihydrocapsaicin(DHC),capsaicin synthase(CS)expression,antioxidant activity(AA),and other bioactive compounds.CAP content ranged from 0.53 to 62.81 g/kg DW,with Carolina Reaper exhibiting the highest levels and Peito de Moca the lowest.A strong positive correlation between CAP and DHC(r=0.987;p<0.001)highlighted interconnected biosynthetic pathways.Carolina Reaper also showed the highest expression of the Pun1 gene(8.51-fold greater than in Habanero Red),correlating with its high CAP levels.Polyphenol content varied significantly,with rutin trihydrate reaching 211.63 mg/kg in Orange Coral.Total phenolic content(TPC)ranged from 7.51 to 25.07 mg GAE/g,highest in Carolina Reaper.Increased CAP production negatively correlated with trans-caffeic acid synthesis(r=-0.943;p<0.05),while CS expression positively correlated with TPC(r=0.806;p<0.01)and capsaicinoids(CAP:r=0.733;DHC:r=0.745).AA ranged from 2.24 to 5.50 mg TEAC/g DW,with Carolina Reaper again showing the highest levels.These findings highlight the unique biochemical profile of Carolina Reaper,excelling in capsaicinoid production and antioxidant capacity.It will be utilized in future research exploring its potential to enhance the anticancer properties of MCT oil,which will be tested on human cancer cell lines. 展开更多
关键词 Capsicum Chilli Capsaicin pun1 Polyphenols Antioxidants
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