绞股蓝总苷对正常与高脂血症大鼠体内CYP3A2酶活性影响的差异性研究

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作者 尹卫红 李娇 +2 位作者 王思雯 于超 崔明宇 《中医药学报》 2026年第4期39-44,共6页

目的:利用探针药物法评价绞股蓝总苷(Gyps)对正常和高脂血症大鼠体内CYP3A2酶活性的影响。方法:实验动物分为正常大鼠对照组、正常大鼠Gyps组、高脂大鼠对照组、高脂大鼠Gyps组。对照组及Gyps组分别连续给予空白溶剂及Gyps 7 d。第8天,... 目的:利用探针药物法评价绞股蓝总苷(Gyps)对正常和高脂血症大鼠体内CYP3A2酶活性的影响。方法:实验动物分为正常大鼠对照组、正常大鼠Gyps组、高脂大鼠对照组、高脂大鼠Gyps组。对照组及Gyps组分别连续给予空白溶剂及Gyps 7 d。第8天,各组大鼠均灌胃给予探针药物氨苯砜1次。采用HPLC法测定各组探针药物的血药浓度并计算其药动学参数,分析Gyps对正常和高脂血症大鼠体内CYP3A2酶活性的影响。结果:与正常大鼠对照组和高脂大鼠对照组相比,给予Gyps干预后,正常大鼠Gyps组和高脂大鼠Gyps组中氨苯砜的AUC、C_(max)显著升高,t_(1/2)显著延长,CLz/F显著降低(P<0.01)。高脂大鼠对照组与正常大鼠对照组相比,氨苯砜的AUC显著升高,CLz/F显著下降(P<0.01)。在给予Gyps后,与正常大鼠Gyps组相比,高脂大鼠Gyps组中氨苯砜AUC的升高及CLz/F的下降程度更为显著(P<0.01)。结论:Gyps可抑制大鼠体内CYP3A2酶的活性,提示临床中Gyps与经人体CYP3A4代谢药物联用时,应注意调整药物剂量以规避潜在的药物相互作用风险,在高脂血症状态下更应引起注意。 展开更多

关键词 绞股蓝总苷 高脂血症 CYP3A2酶 探针药物法 药物相互作用

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LC-MS/MS法研究Cocktail探针药物咖啡因、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑及其代谢产物在大鼠血浆中的药代动力学 被引量：15

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作者 徐利云 候丛颂 +1 位作者 杨志宏 孙晓波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期268-275,共8页

目的建立灵敏、快速、稳定的测定大鼠血浆中CYP450探针药物/代谢产物,咖啡因/副黄嘌呤、奥美拉唑/5-羟基奥美拉唑、右美沙芬/右啡烷、咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑的LC-MS/MS方法,并用于其在大鼠体内的药代动力学研究。方法 100μL血... 目的建立灵敏、快速、稳定的测定大鼠血浆中CYP450探针药物/代谢产物,咖啡因/副黄嘌呤、奥美拉唑/5-羟基奥美拉唑、右美沙芬/右啡烷、咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑的LC-MS/MS方法,并用于其在大鼠体内的药代动力学研究。方法 100μL血浆样品加入内标地西泮及乙酸铵溶液,乙酸乙酯进行液液萃取,离心取上清挥干复溶,LC-MS/MS检测。选用Agilent Eclipse Plus-C_(18)色谱柱(50 mm×2.1mm,3.5μm),乙腈和0.01%甲酸(1 mmol·L^(-1)甲酸铵)作为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^(-1),进样量10μL。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应正离子监测模式(MRM+),咖啡因m/z:195.0/138.1;副黄嘌呤m/z:181.1/124.1;奥美拉唑m/z:346.1/198.1;5-羟基奥美拉唑m/z:362.1/214.1;右美沙芬m/z:272.2/147.1;右啡烷m/z:258.1/157.1;咪达唑仑m/z:326.1/291.1;1'-羟基咪达唑仑m/z:342.1/324.1;内标地西泮m/z:285.1/154.0。结果咖啡因、副黄嘌呤、奥美拉唑、5-羟基奥美拉唑、右美沙芬、右啡烷、咪达唑仑和1'-羟基咪达唑仑的线性范围分别为1.95~2 000、0.98~250、0.48~2 000、0.98~250、0.98~2 000、0.48~125、1.95~2 000和1.95~250μg·L^(-1)。RSD<15%且无基质效应。结论该方法快速、灵敏、重现性好,可用于血浆中上述探针药物/代谢产物浓度的测定,便于深入进行代谢酶CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的代谢相关研究。 展开更多

关键词 COCKTAIL探针药物法 探针药物 代谢产物 肝代谢酶 CYP450 LC-MS/MS

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Cocktail探针药物法评价羊耳菊对大鼠CYP450酶活性的影响 被引量：11

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作者 宋菲 杨健 +5 位作者 王春 王霞 李维维 潘洁 兰燕宇 刘亭 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期60-67,共8页

目的:采用Cocktail探针药物法考察羊耳菊活性部位提取物(以下均简称为羊耳菊)对6种大鼠细胞色素P450(CYP450)主要亚型酶活性的影响。方法:羊耳菊高、低剂量组大鼠给药剂量分别为8. 127,2. 709 g·kg^-1·d^-1(以生药量计算),分... 目的:采用Cocktail探针药物法考察羊耳菊活性部位提取物(以下均简称为羊耳菊)对6种大鼠细胞色素P450(CYP450)主要亚型酶活性的影响。方法:羊耳菊高、低剂量组大鼠给药剂量分别为8. 127,2. 709 g·kg^-1·d^-1(以生药量计算),分别连续灌胃7,14 d后尾静脉注射Cocktail探针药物咖啡因、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔和氯唑沙宗,不同时间点采集血样,建立超高效液相串联质谱法(UPLC-MS)测定大鼠血浆中6种探针药物的浓度,运用DAS 2. 0软件计算其药动学参数,以考察羊耳菊在大鼠体内对CYP1A2,CYP3A,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1这6种亚型酶代谢活性的影响。结果:与空白组相比,奥美拉唑指标下,给药组的药时曲线下面积AUC0-t和AUC0-∞增大,14 d给药组的半衰期(T1/2)增大,清除率(CL)降低;甲苯磺丁脲指标下,14 d高剂量组的AUC0-t,AUC0-∞和T1/2增大;咖啡因指标下,给药组的T1/2明显增大,14 d给药组的AUC0-t和AUC0-∞增大而CL降低;但以上3个指标的表观分布容积(V)均无明显变化。与空白组相比,咪达唑仑指标下,除7 d低剂量组之外,其他给药组的AUC0-t,AUC0-∞和T1/2明显增大,CL明显降低,V增大;氯唑沙宗和美托洛尔的药动学参数与空白组相比差异没有显著性。结论:羊耳菊对大鼠肝药酶CYP3A,CYP1A2,CYP2C9和CYP2C19的活性具有不同程度的抑制作用,其中对CYP3A的抑制作用最强。 展开更多

关键词 COCKTAIL探针药物法 羊耳菊 活性部位 提取物 细胞色素P450 药物相互作用 咪达唑仑

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HPLC法测定大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物含量及其应用 被引量：5

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作者 王新敏 彭蕴茹 +2 位作者 景欣悦 薛娟 段金廒 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期591-592,共2页

细胞色素P450 1A2亚家族是近年来药物代谢研究领域的热点之一,与许多药物的相互作用有关[1]。非那西丁是CYP1A2酶的特异性底物,被广泛选择作为底物用于体内外测定酶活性[2]。本研究建立大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物对乙酰氨基... 细胞色素P450 1A2亚家族是近年来药物代谢研究领域的热点之一,与许多药物的相互作用有关[1]。非那西丁是CYP1A2酶的特异性底物,被广泛选择作为底物用于体内外测定酶活性[2]。本研究建立大鼠血浆、微粒体中非那西丁与其代谢物对乙酰氨基酚含量的HPLC测定方法,并对血浆样品进行方法学考察,为进一步确证药物及化学异物对CYP1A2酶活性的影响提供可靠的方法学基础。同时,应用所建立的方法以体内、 展开更多

关键词 细胞色素P450酶 CYP1A2 非那西丁 对乙酰氨基酚 探针药物法 活性评价

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Cocktail探针药物法评价半夏泻心汤及不同配伍组对CYP450酶活性的影响 被引量：7

5

作者 肖娟 王莹 +3 位作者 蔡巧玲 王跃 安叡 王新宏 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期181-186,共6页

目的:采用Cocktail探针药物法研究半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响。方法:大鼠连续7 d灌胃半夏泻心汤全方组,甘补组,苦降组和辛组的煎煮液(15 mL.kg-1)后尾静脉注射Cocktail探针药物咖啡因(CYP1A2)、甲苯磺丁脲... 目的:采用Cocktail探针药物法研究半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响。方法:大鼠连续7 d灌胃半夏泻心汤全方组,甘补组,苦降组和辛组的煎煮液(15 mL.kg-1)后尾静脉注射Cocktail探针药物咖啡因(CYP1A2)、甲苯磺丁脲(CYP2C6)、氯唑沙宗(CYP2E1)、咪达唑仑(CYP3A1/2)。建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中4种探针药物的浓度,DAS 2.0软件计算其药动学参数。结果:与空白组相比,全方组中甲苯磺丁脲的AUC0～24 h值明显增大,CL显著减小,说明全方组对大鼠体内CYP2C6起抑制作用,而氯唑沙宗的AUC明显减少,CL增大,说明对CYP2E1起诱导作用;而对CYP1A2,3A1/2无显著性差异。同理,辛开组仅对CYP2C6起抑制作用,对其他的亚型酶无显著性差异;苦降组对CYP1A2,CYP2C6具有显著抑制作用,对CYP2E1有诱导作用,而对CYP3A1/2无显著性差异;甘补组对CYP1A2,CYP2E1有诱导作用,抑制CYP2C6,而对CYP3A1/2亦无显著性差异。结论:半夏泻心汤及不同配伍组对肝脏CYP450酶的活性影响不同,为阐明半夏泻心汤组方配伍的规律用以推测其在联合用药中可能发生的药物相互作用,指导临床合理用药。 展开更多

关键词 COCKTAIL探针药物法 半夏泻心汤 配伍 细胞色素P450

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探针药物法评价苦参对大鼠细胞色素P450 2E1代谢活性的影响 被引量：4

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作者 焦建杰 李芹 +4 位作者 刘洁 汪云 李家男 惠洋洋 娄建石 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1799-1802,共4页

目的以氯唑沙宗作为探针药物,研究苦参对大鼠细胞色素P450 2E1(CYP 2E1)体内代谢活性的影响。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、苦参组、苯巴比妥阳性对照组。苦参组大鼠ig给予苦参颗粒(100 mg/kg)溶液,对照组ig给予等体积的生理盐水,... 目的以氯唑沙宗作为探针药物,研究苦参对大鼠细胞色素P450 2E1(CYP 2E1)体内代谢活性的影响。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、苦参组、苯巴比妥阳性对照组。苦参组大鼠ig给予苦参颗粒(100 mg/kg)溶液,对照组ig给予等体积的生理盐水,阳性对照组ip苯巴比妥注射液50 mg/kg,各组均每日给药1次,连续5 d。第6天各组大鼠尾iv氯唑沙宗(5 mg/kg)溶液,于给药前及给药后不同时间点眼内眦静脉取血0.8 mL,HPLC法测定氯唑沙宗血药浓度。结果与对照组相比,苦参组给予苦参5 d后,氯唑沙宗的AUC和Cmax明显降低(P<0.05、0.01),CL明显升高(P<0.05);而苦参组的主要药动学参数与苯巴比妥组比较无显著差异(P>0.05)。结论苦参可明显诱导大鼠CYP 2E1的体内代谢活性,其作用强度与苯巴比妥相当。 展开更多

关键词 苦参 细胞色素P450 2E1 代谢 探针药物法 氯唑沙宗

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RP-HPLC法同时测定大鼠血浆中4种CYP450探针药物的浓度 被引量：8

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作者 张香凝 李想 刘高峰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1903-1907,1913,共6页

目的:建立大鼠血浆中4种细胞色素P450亚型酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4)的探针药物咖啡因、甲苯磺丁脲、美托洛尔和氨苯砜同时测定的方法,为相关研究提供方法学参考。方法:用一种提取溶剂系统对4种药物同时提取,并用反相高效液相... 目的:建立大鼠血浆中4种细胞色素P450亚型酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4)的探针药物咖啡因、甲苯磺丁脲、美托洛尔和氨苯砜同时测定的方法,为相关研究提供方法学参考。方法:用一种提取溶剂系统对4种药物同时提取,并用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定,选用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相为甲醇-水-冰乙酸-三乙胺(40∶60∶0.4∶0.5);检测波长:咖啡因271 nm,甲苯磺丁脲229 nm,美托洛尔225 nm,氨苯砜295 nm;流速在0～16 min时为0.5 mL.min-1,16 min后为1.4 mL.min-1;柱温35℃。结果:咖啡因、甲苯磺丁脲、美托洛尔和氨苯砜的线性范围分别为0.10～100.0μg.mL-1(r=0.9956),0.25～25.0μg.mL-1(r=0.9997),0.050～20.0μg.mL-1(r=0.9995),0.050～50.0μg.mL-1(r=0.9997);方法回收率分别为71.43%～87.17%,86.22%～97.80%,77.29%～91.26%,67.46%～98.47%。结论:所建立的方法准确、便捷、灵敏度高,可在同一个试验过程中,同时测定大鼠血浆中4种CYP450亚型酶探针药物(咖啡因、甲苯磺丁脲、美托洛尔和氨苯砜)的浓度,可用于同时测定某些受试药物对CYP450的4个主要亚型酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4)的调控作用及相关研究。 展开更多

关键词 细胞色素P450 反相高效液相色谱法 咖啡因 甲苯磺丁脲 美托洛尔 氨苯砜 探针药物法

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体内、体外相结合评价CYP2E1酶活性的方法学研究 被引量：5

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作者 王新敏 景欣悦 +2 位作者 彭蕴茹 薛娟 段金廒 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第24期187-193,共7页

目的:以氯唑沙宗(chlorzoxazone,CZX)为"探针药物",建立一种快速、准确的体内、体外相结合评价细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)酶活性的HPLC-DAD检测方法。方法:体内实验为大鼠静脉注射CZX,剂量20 mg.kg-1,按... 目的:以氯唑沙宗(chlorzoxazone,CZX)为"探针药物",建立一种快速、准确的体内、体外相结合评价细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)酶活性的HPLC-DAD检测方法。方法:体内实验为大鼠静脉注射CZX,剂量20 mg.kg-1,按时间点眼眶取血,检测CZX与其代谢产物6-羟基氯唑沙宗(6-hydroxy chlorzoxazone,6-OHCZX)的血浆药物浓度。体外实验为不同浓度CZX与大鼠肝微粒体温孵后,检测温孵体系中6-OHCZX的浓度,计算酶动力学参数来评价CYP2E1酶的活性。采用Agilent Extend-C18色谱柱(6 mm×100 mm,5μm),以非那西丁为内标,流动相为乙腈-0.6%乙酸水溶液,流速1.0 mL.min-1,紫外检测波长290 nm,柱温30℃。结果:体内、体外实验结果发现CZX,6-OHCZX的线性范围、日内和日间精密度、相对回收率、稳定性均符合生物样品的检测要求。结论:大鼠血浆及肝微粒体温孵体系中的其他内源性物质不干扰待测物的测定。该方法快速、稳定、灵敏度高,适合CZX及其代谢产物6-OHCZX的测定。 展开更多

关键词 CYP2E1酶活性 氯唑沙宗 探针药物法

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刺五加注射液对大鼠肝微粒体四种CYP450亚型酶活性的影响 被引量：17

9

作者 曾超 刘艳 +1 位作者 刘高峰 李想 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第2期164-170,共7页

目的:研究刺五加注射液在大鼠体外肝微粒体中对CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4活性的影响,为临床合理联合用药提供参考。方法:在大鼠体外肝微粒体中分别加入四种亚型酶的探针药物甲苯磺丁脲(TB)、右美沙芬(DM)、氯唑沙宗(CLZ)、睾酮(TS... 目的:研究刺五加注射液在大鼠体外肝微粒体中对CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4活性的影响,为临床合理联合用药提供参考。方法:在大鼠体外肝微粒体中分别加入四种亚型酶的探针药物甲苯磺丁脲(TB)、右美沙芬(DM)、氯唑沙宗(CLZ)、睾酮(TS)和低、中、高剂量的刺五加注射液,温孵后用HPLC法测定各空白对照组和不同剂量刺五加注射液给药组中各探针药物代谢产物的浓度并比较代谢率的差异,以评价刺五加注射液对各亚型酶活性的影响;中剂量组活性显著降低的亚型酶进一步考察抑制作用的强弱(即IC50和Ki值)。结果:与空白对照组比较,刺五加注射液低、中、高剂量给药组对CYP3A4活性的影响均有统计学意义(P<0.01),抑制率分别为10.22%、19.00%、30.29%,其IC50和Ki值分别为3.96%和2.74%(V/V);低、中、高剂量给药组对CYP2D6活性的影响均无统计学差异(P>0.05);低剂量给药组对CYP2C9、CYP2E1活性的影响无统计学差异(P>0.05),中、高剂量给药组对两个亚型的抑制作用有统计学差异(P<0.05),但中剂量给药组抑制率均小于8.50%,高剂量给药组抑制率均小于12.00%。结论:刺五加注射液对大鼠体外肝微粒体CYP3A4有抑制作用,且符合混合型抑制模型;对CYP2C9、CYP2E1抑制作用较弱;对CYP2D6活性无影响。 展开更多

关键词 刺五加注射液 CYP450酶 探针药物 肝微粒体法 抑制作用

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超高效液相色谱法检测6种探针底物代谢产物并评价人细胞色素P450同工酶活性 被引量：6

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作者 陆苑 谢玉敏 +2 位作者 潘洁 黄勇 王永林 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第6期560-565,共6页

目的：建立同时测定非那西丁（CYP1A2）、氯唑沙宗（CYP2E1）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、奥美拉唑（CYP2C19）、睾酮和咪达唑仑（CYP3A4）6种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,评价药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。方法：人... 目的：建立同时测定非那西丁（CYP1A2）、氯唑沙宗（CYP2E1）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、奥美拉唑（CYP2C19）、睾酮和咪达唑仑（CYP3A4）6种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,评价药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。方法：人肝微粒体与6种探针底物在还原系统NADPH的作用下,37℃共同孵育;以蛋白沉淀法处理样品,采用超高效液相色谱系统（UPLC-MS/MS）,建立Cocktail混合探针,对药物的6种代谢物进行定量分析,并分析药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。结果：6种探针底物物代谢产物乙酰氨基酚（0.26~8.35μmol/L）、6-羟基氯唑沙宗（3.02~96.63μmol/L）、5-羟基奥美拉唑（0.10~3.09μmol/L）、羟基甲苯磺丁脲（0.15~4.88μmol/L）、6β-羟基睾酮（3.67~117.37μmol/L）和α-羟基咪达唑仑（1.64~52.37μmol/L）线性关系良好,各成分相关系数（R2）〉0.996,准确度为95.96%~103.10%,日内和日间精密度RSD（%）〈15%,提取回收率、基质效应RSD（%）〈11%,稳定性好。结论：UPLC-MS/MS准确、灵敏度高,可作为研究受试药物对CYP450酶影响及相关研究的分析测定方法。 展开更多

关键词 色谱法 液相 细胞色素P450酶系统 肝微粒体 COCKTAIL探针药物法

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以混合探针药的方法评价白藜芦醇对人体细胞色素酶P450活性的影响 被引量：2

11

作者 吴俏玉 袁洪 陆瑶 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第4期426-432,共7页

目的:采用混合探针法研究白藜芦醇对人细胞色素酶P450五种亚型CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9、CYP3A4和CYP2C19的影响。方法:采用随机对照研究,将26名男性健康受试者随机分为安慰剂组和白藜芦醇组,分别予以口服安慰剂/白藜芦醇每次1 g,每日一... 目的:采用混合探针法研究白藜芦醇对人细胞色素酶P450五种亚型CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9、CYP3A4和CYP2C19的影响。方法:采用随机对照研究,将26名男性健康受试者随机分为安慰剂组和白藜芦醇组,分别予以口服安慰剂/白藜芦醇每次1 g,每日一次,连续服药14 d,再口服咖啡因、氯沙坦、奥美拉唑、右美沙芬和咪达唑仑五种探针药物,采集不同时间的血样,检测咪达唑仑、咖啡因、奥美拉唑三种探针药物的血药浓度。并收集0~8 h尿液,记录尿量,检测氯沙坦及右美沙芬的代谢速率。比较两组之间的药代动力学差异。结果:与对照组相比,白藜芦醇组CYP1A2的探针药物咖啡因AUC0-12、AUC0-∞、Cmax分别增加32.10%(P<0.001)、71.52%(P<0.001)、10.62%(P=0.004),同时T1/2也显著增加(P=0.002);CYP2C19的探针药物奥美拉唑和CYP3A4的探针药物咪达唑仑的药代动力学参数AUC0-12、AUC0-∞、T1/2和Cmax均未见显著改变(P>0.05);CYP2C9探针药物右美沙芬与其代谢产物去甲右美沙芬比率(DTM/DT)的比率增加了79.91%(P=0.003);CYP2D6探针药物氯沙坦与其代谢产物E-3174的比率(losartan/E-3174)增加了531.34%(P<0.001)。结论:白藜芦醇多次给药后,能显著抑制CYP1A2、CYP2D6和CYP2C9的酶活性,而对CYP3A4和CYP2C19的酶活性无显著影响。 展开更多

关键词 白藜芦醇 细胞色素酶P450 药代动力学 “Cocktail”探针药物法 药物相互作用

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CYP2C19基因多态性检测方法的建立 被引量：5

12

作者 黄杰 于婷 +3 位作者 张喆 蔡从利 高尚先 曲守方 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1562-1567,共6页

目的:建立检测CYP2C19基因多态性的PCR-荧光探针法,为预测CYP2C19代谢药物的疗效提供新的检测试剂盒。方法:应用Primer Express 3.0软件针对人类CYP2C19基因CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17多态性位点设计引物和探针。以经测序确认为... 目的:建立检测CYP2C19基因多态性的PCR-荧光探针法,为预测CYP2C19代谢药物的疗效提供新的检测试剂盒。方法:应用Primer Express 3.0软件针对人类CYP2C19基因CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17多态性位点设计引物和探针。以经测序确认为杂合突变型、纯合突变型或野生型的人类全血基因组DNA(genomic DNA,g DNA)样本为模板,应用荧光PCR法筛选合适的引物和探针,建立和优化CYP2C19基因多态性检测荧光PCR法。然后用特定浓度且基因型已知的人类全血g DNA样本作为质控品评价该方法的准确性、灵敏度和特异性。最后用100例临床样本验证该方法的临床适用性,并与直接测序结果进行比较,计算Kappa值。结果:建立的CYP2C19基因多态性检测PCR-荧光探针法,能准确地检测出CYP2C19*2、*3和*17多态性位点杂合突变型和纯合突变型;灵敏度为每个反应体系约1 ng;以基因型已知为野生型的全血g DNA为模板进行检测的结果显示均为野生型。临床样本的检测结果显示与测序结果的一致性较好,Kappa值为1.00。结论:建立的CYP2C19基因多态性检测方法具有很好的准确性、灵敏度和特异性,且具有很好的临床适用性,可以用于CYP2C19代谢的药物疗效的预测。 展开更多

关键词 基因多态性检测 细胞色素P450 S-美芬妥英-4-羟化酶 CYP2C19酶 荧光聚合酶链式反应 PCR-荧光探针法 药物疗效检测

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荧光定量PCR探针熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用 被引量：34

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作者 胡春梅 郭晶 +2 位作者 严虹 施旭东 张侠 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第1期38-41,共4页

目的应用荧光定量PCR探针熔解曲线法检测耐多药结核病患者的临床分离菌株对一线抗结核药物的耐药基因突变。方法于2009年1月1日至2012年12月31日留取南京市胸科医院结核科门诊部或住院的所有肺结核患者痰液标本，每人3～5ml，均进行痰... 目的应用荧光定量PCR探针熔解曲线法检测耐多药结核病患者的临床分离菌株对一线抗结核药物的耐药基因突变。方法于2009年1月1日至2012年12月31日留取南京市胸科医院结核科门诊部或住院的所有肺结核患者痰液标本，每人3～5ml，均进行痰结核分枝杆菌培养、鉴定和药物敏感性试验（简称“药敏试验”），分离出结核分枝杆菌菌株67株。应用荧光定量PCR探针熔解曲线法，根据靶序列熔点变化，实时PCR检测结核病患者的临床分离标本对利福平、异烟肼、乙胺丁醇及链霉素的耐药情况；通过与传统药敏试验进行对比，对2种结果不一致的菌株进行基因测序分析，探讨其发生突变的位点差异，并观察在治疗中的变化。结果利福平和异烟肼的表型和基因型检测具有较高的一致性，分别为99％（66／67）和97％（65／67），不一致的菌株都是表型检测法为耐药，而基因型检测为敏感，测序未检测到突变。乙胺丁醇和链霉素的表型和基因型检测一致性较低，分别为60％（40／67）和75％（50／67）。测序发现，乙胺丁醇的突变发生在embB306和embB406位点上；链霉素突变发生在rrs基因517位点和907位点，以及rpsL43耐药密码子。结论应用荧光定量PCR探针熔解曲线法，能快速筛查结核分枝杆菌对一线抗结核药物的耐药情况。 展开更多

关键词 探针熔解曲线法 结核 肺 抗药性 多种 细菌 耐药基因 突变

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钯离子荧光探针的研究进展 被引量：3

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作者 李海东 姚起超 +2 位作者 樊江莉 杜健军 彭孝军 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1099-1114,共16页

钯是一种重要的贵金属,在制药、燃料电池、电子电气和珠宝等行业得到广泛的应用。然而,它的大量使用不可避免会造成其在环境中的残留,产生毒害,因此对钯的检测与识别具有重要的意义。荧光探针具有较高的选择性、较高灵敏度、对设备依赖... 钯是一种重要的贵金属,在制药、燃料电池、电子电气和珠宝等行业得到广泛的应用。然而,它的大量使用不可避免会造成其在环境中的残留,产生毒害,因此对钯的检测与识别具有重要的意义。荧光探针具有较高的选择性、较高灵敏度、对设备依赖小、操作简单、检测限低等优点。本文综述了近年应用于低浓度检测钯离子荧光分子探针的设计方法及作用机制。按照荧光探针检测钯离子的响应模式,主要分为淬灭型、增强型、比率型3种方式进行评述。尽管钯离子探针的研究在分子设计上取得了重要进展,但荧光染料与钯离子的响应时间尚且不能人为控制,尤其对于复杂体系中钯离子的检测效果尚待进一步改进。因此,开发钯离子响应时间短、灵敏度高、专一识别性高并能应用于复杂体系的荧光探针,可能是今后主要发展方向。 展开更多

关键词 钯 荧光探针 染料 检测方法 环境检测 药物残留 研究进展 生物成像

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药物对人肝CYP450酶诱导和抑制作用体外评价体系的建立与验证 被引量：9

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作者 孙鲁宁 吴春勇 +4 位作者 赵舜波 刘瑞娟 王雷 丁黎 王永庆 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1924-1932,共9页

建立药物对CYP450酶诱导与抑制作用的体外评价方法并进行验证。LC-MS/MS法测定人肝微粒体CYP450酶7种主要亚型的8个底物代谢产物;在优化的温孵条件下,底物法测定人肝微粒体CYP450酶的活性;应用已知抑制剂对所建立的温孵体系进行验证。LC... 建立药物对CYP450酶诱导与抑制作用的体外评价方法并进行验证。LC-MS/MS法测定人肝微粒体CYP450酶7种主要亚型的8个底物代谢产物;在优化的温孵条件下,底物法测定人肝微粒体CYP450酶的活性;应用已知抑制剂对所建立的温孵体系进行验证。LC-MS/MS法测定人肝细胞CYP450酶3种主要亚型的底物代谢产物;底物法测定人原代肝细胞CYP450酶的活性,同时收集温孵后的人肝细胞,应用Taqman荧光探针法测定主要亚型m RNA的表达量;应用已知诱导剂对所建立的温孵体系进行验证。建立的LC-MS/MS分析方法符合生物分析要求;已知抑制剂和诱导剂在本实验温孵体系下均表现出明显的抑制作用或诱导作用。建立的实验方法准确、可靠,可用于体外评价药物对CYP450酶的诱导或抑制作用。 展开更多

关键词 人肝微粒体 人原代肝细胞 CYP450酶 诱导作用 抑制作用 探针底物法 LC—MS MS 药物相互作用

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Cocktail探针法评价仙茅不同炮制品对CYP450亚型酶的影响

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作者 鞠成国 李媛媛 +1 位作者 王巍 贾天柱 《中国药师》 CAS 2021年第8期409-413,共5页

目的:研究仙茅不同炮制品对4种大鼠CYP450亚型酶活性的影响。方法:各组大鼠给药1周后给予混合探针药物,不同时间点采集血样,HPLC法检测探针药物在体内的代谢情况,通过DAS3.0软件计算药动学参数并进行统计分析。结果:与空白组相比,各给... 目的:研究仙茅不同炮制品对4种大鼠CYP450亚型酶活性的影响。方法:各组大鼠给药1周后给予混合探针药物,不同时间点采集血样,HPLC法检测探针药物在体内的代谢情况,通过DAS3.0软件计算药动学参数并进行统计分析。结果:与空白组相比,各给药组茶碱和氯唑沙宗的t_(1/2)、AUC_((0-∞))和AUC_((0-∞))均显著降低,CLZ/F显著升高(P<0.05);酒仙茅组、萸仙茅组、姜仙茅组氨苯砜的AUC_((0-∞))和AUC_((0-∞))均显著降低,CLZ/F显著升高(P<0.05),而盐仙茅组氨苯砜t_(1/2)、AUC_((0-t))和AUC_((0-∞))均显著升高,Tmax、CLZ/F显著降低(P<0.05);生品组、酒仙茅组、姜仙茅组甲苯磺丁脲的t_(1/2)均显著降低,而盐仙茅组甲苯磺丁脲的t_(1/2)、CLZ/F均显著降低,AUC_((0-t))和AUC_((0-∞))均显著增加(P<0.05)。结论:仙茅各炮制品对CYP1A2及CYP2E1活性有诱导作用;酒、萸、姜制仙茅对CYP3A4活性有诱导作用,盐仙茅对CYP3A4活性有抑制作用;盐仙茅对CYP2C9活性有抑制作用,其余3组对CYP2C9活性无显著影响。 展开更多

关键词 仙茅 炮制品 COCKTAIL探针药物法 细胞色素P450

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羟基喜树碱的代谢与CYP450的相关性研究

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作者 胡巍 胡文晋 方芸 《药学与临床研究》 2014年第5期412-415,共4页

目的：研究羟基喜树碱（HCPT）在体外小鼠肝微粒体中对 CYP450活性的影响，为临床合理联合用药提供参考。方法：在小鼠体外肝微粒体中分别加入六种亚型酶的探针药物对乙酰氨基酚、非那西丁、双氯芬酸钠、睾酮、酒石酸美托洛尔、奥美拉... 目的：研究羟基喜树碱（HCPT）在体外小鼠肝微粒体中对 CYP450活性的影响，为临床合理联合用药提供参考。方法：在小鼠体外肝微粒体中分别加入六种亚型酶的探针药物对乙酰氨基酚、非那西丁、双氯芬酸钠、睾酮、酒石酸美托洛尔、奥美拉唑和羟基喜树碱溶液，在优化的孵育体系下温孵。用 HPLC 法测定各空白对照组和羟基喜树碱溶液中各探针药物代谢产物的浓度并比较代谢率的差异，以评价羟基喜树碱对各亚型酶活性的影响。结果：在代谢反应过程中，在50~200μmol＆#183;L-1内，羟基喜树碱的浓度与孵育体系中 CYP3A4的特异性底物睾酮、CYP2E1的特异性底物对乙酰氨基酚的剩余药量呈正比例关系，且具显著性差异（P＜0.05），与其他四种探针药物的剩余药量无明显的浓度依存关系（P＞0.05）。结论：HCPT 在肝微粒体的代谢反应过程中受代谢酶 CYP3A4和 CYP2E1的作用，竞争性地抑制了睾酮和对乙酰氨基酚在肝微粒体中的代谢。 展开更多

关键词 羟基喜树碱 CYP450 酶 探针药物 肝微粒体法

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抗感冒中药对肝药酶P450及其亚型作用研究 被引量：4

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作者 楼云雁 杜伟锋 +2 位作者 张婷 应泽茜 葛卫红 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2018年第12期16-19,共4页

目的:研究3种常见抗感冒中药对肝药酶P450及其亚型是否具有诱导或抑制作用,认识中药的药理作用机制以指导临床合理用药。方法:通过CO还原差示光谱法测定大鼠细胞色素P450酶含量的变化,通过“cocktail”探针药物法研究细胞色素P450重要... 目的:研究3种常见抗感冒中药对肝药酶P450及其亚型是否具有诱导或抑制作用,认识中药的药理作用机制以指导临床合理用药。方法:通过CO还原差示光谱法测定大鼠细胞色素P450酶含量的变化,通过“cocktail”探针药物法研究细胞色素P450重要同工酶CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1活性。结果:三种抗感冒中药均显著性降低了CYP450的含量,且三组之间对CYP450的影响无统计学差异;板蓝根组可以明显抑制CYP1A2(P<0.05),芙朴组可以明显诱导CYP3A4(P<0.05),三组给药组均明显抑制了CYP2E1的活性(P<0.01)。结论:三种抗感冒中药都有抑制细胞色素P450的作用,且药理作用机制存在一定的差异。 展开更多

关键词 抗感冒中药 肝药酶P450 探针药物法 相互作用

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中药注射剂对CYP450酶的影响研究进展 被引量：8

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作者 曹铭晨 黄欣 方孟香 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第20期2097-2102,共6页

通过查阅、整理和分析近年来国内外有关中药注射剂对CYP450酶影响的文献,研究中药注射剂对CYP450酶的影响,从代谢性相互作用角度讨论中药注射剂在临床应用中的安全性问题。关于中药注射剂对CYP450酶影响的研究较少,部分中药注射剂对CYP... 通过查阅、整理和分析近年来国内外有关中药注射剂对CYP450酶影响的文献,研究中药注射剂对CYP450酶的影响,从代谢性相互作用角度讨论中药注射剂在临床应用中的安全性问题。关于中药注射剂对CYP450酶影响的研究较少,部分中药注射剂对CYP450酶存在不同程度的影响。深入分析研究中药注射剂对CYP450酶活性的影响,预测可能发生的药物相互作用,对指导中药注射剂的合理使用,减少由药物联用所致不良反应具有重要意义。 展开更多

关键词 中药注射剂 CYP450酶 COCKTAIL探针药物法 药物相互作用 不良反应

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Cocktail法研究CYP450酶活性影响因素的探讨 被引量：20

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作者 孙冰婷 居文政 谈恒山 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期558-562,共5页

细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)是药物代谢的重要酶系,研究CYP450对阐明药物代谢通路、相互作用、代谢多态性、指导临床合理用药等方面具有重要意义。混合探针底物法(Cocktail法)在研究CYP450亚型酶活性应用广泛,具有高效、准... 细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)是药物代谢的重要酶系,研究CYP450对阐明药物代谢通路、相互作用、代谢多态性、指导临床合理用药等方面具有重要意义。混合探针底物法(Cocktail法)在研究CYP450亚型酶活性应用广泛,具有高效、准确、灵敏、高通量的特点。但CYP450亚型酶存在种属差异、性别差异、探针药物的特异性等方面的问题。查阅国内外相关文献,探讨Cocktail法研究CYP450酶活性的影响因素。 展开更多

关键词 细胞色素P450酶 Cocktail法 探针药物 种属差异 性别差异

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