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草鱼免疫相关基因Prkrip1的克隆和表达分析 被引量:1
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作者 董锋 廖兰杰 +1 位作者 朱作言 汪亚平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期728-734,共7页
随着草鱼养殖规模的扩大,草鱼的病毒性疾病极大地影响着草鱼的产量。开展鱼类病毒免疫反应相关功能基因的研究意义重大。研究首先通过同源克隆的方法从草鱼中克隆到了一段Prkrip1基因的EST序列,进一步通过RACE、长片段PCR和Genome walk... 随着草鱼养殖规模的扩大,草鱼的病毒性疾病极大地影响着草鱼的产量。开展鱼类病毒免疫反应相关功能基因的研究意义重大。研究首先通过同源克隆的方法从草鱼中克隆到了一段Prkrip1基因的EST序列,进一步通过RACE、长片段PCR和Genome walking的方法获得了该基因的全长cDNA序列、基因组DNA序列和启动子区序列。氨基酸序列分析显示,Prkrip1含有3个核定位信号和一个双链RNA结合区,并具有与PKR结合的保守N端区;荧光报告基因的表达证实我们所克隆到的启动子区是有活性的,可用于后续该基因的转录调控分析;Real-time PCR分析发现,Prkrip1基因在草鱼的肝和血中表达量最高,GCRV感染后在大部分免疫组织中均上调表达,说明该基因确实与病毒感染相关。研究结果为Prkrip1基因在硬骨鱼类的功能研究提供了线索,也为鱼类天然免疫反应中调控PKR信号通路的系统研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 prkrip1 PKR 克隆 表达 病毒感染
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微囊藻毒素-LR对草鱼组织病理和Prkrip1基因表达的影响
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作者 金舒怡 孙飞扬 +1 位作者 李夏 覃江凤 《现代农业科技》 2024年第24期152-156,共5页
鱼类养殖水体易出现富营养化,其中的微囊藻毒素会严重影响渔业生产力的发展。因此,开展鱼类免疫相关基因的研究意义重大。基于此,以草鱼为试验对象,根据注射微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间(0.5、1.0、3.0、6.0、12.0、24.0 h)不同共分6个染毒... 鱼类养殖水体易出现富营养化,其中的微囊藻毒素会严重影响渔业生产力的发展。因此,开展鱼类免疫相关基因的研究意义重大。基于此,以草鱼为试验对象,根据注射微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间(0.5、1.0、3.0、6.0、12.0、24.0 h)不同共分6个染毒组,以注射等体积生理盐水作为对照组。草鱼腹腔注射100μg/kg BW MC-LR后,采用常规石蜡切片技术和qPCR技术对各样品进行分析。结果表明:利用光学显微镜对石蜡切片进行观察,MC-LR导致肾脏和脾脏的病理损伤严重,各染毒组都有出血的现象,MC-LR注射时间越长,出血症状越严重;通过qPCR技术分析,草鱼注射MC-LR后,各染毒组Prkrip1基因的表达都显著上扬。以上结果说明,草鱼感染MC-LR后,肾脏和脾脏会受到严重损伤,但鱼体可以通过调节Prkrip1基因的表达以抵抗和减弱组织损伤效应。 展开更多
关键词 微囊藻毒素-LR 草鱼 组织病理 prkrip1基因 表达
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