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Pseudoephedrine: A Review and Benefit-Risk Assessment with Reference to the Risk of Posterior Reversible Encephalopathy Syndrome (PRES) and Reversible Cerebral Vasoconstriction Syndrome (RCVS)
1
作者 Ronald Eccles 《Open Journal of Respiratory Diseases》 2025年第1期19-34,共16页
Pseudoephedrine (PSE) is a widely used nasal decongestant. A review by the European Medicines Agency has reported that PSE may be associated with risks of posterior reversible encephalopathy syndrome (PRES) and revers... Pseudoephedrine (PSE) is a widely used nasal decongestant. A review by the European Medicines Agency has reported that PSE may be associated with risks of posterior reversible encephalopathy syndrome (PRES) and reversible cerebral vasoconstriction syndrome (RCVS). PRES and RCVS are rare but serious conditions that affect cerebral blood flow. This review discusses the pharmacology of PSE and potential risks for PRES and RCVS and concludes that considering the common use of PSE, with over 70 million packs of PSE taken each year in the European Union and the United Kingdom, and the rare occurrence of PRES and RCVS, that the risks of developing PRES/RCVS on exposure to PSE are likely to be very low. 展开更多
关键词 Posterior Reversible Encephalopathy Syndrome (pres) Reversible Cerebral Vasoconstriction Syndrome (RCVS) PSEUDOEPHEDRINE European Medicines Agency
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乙型肝炎病毒preS基因突变对乙型肝炎病毒相关肝细胞癌的诊断价值
2
作者 陈秋宇 程倬 +2 位作者 邬亚鑫 邓立功 庞红全 《传染病信息》 2025年第4期313-319,共7页
目的分析乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前表面抗原(preS)基因突变特点,描述HBV preS基因突变对HBV相关HCC的诊断价值。方法回顾性分析2019年9月至2023年9月就诊于... 目的分析乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前表面抗原(preS)基因突变特点,描述HBV preS基因突变对HBV相关HCC的诊断价值。方法回顾性分析2019年9月至2023年9月就诊于达州市中心医院消化内科的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者(CHB组)和HBV相关HCC患者(HCC组)。采用sanger测序法分析preS区突变。结果HCC组的患者年龄更大、基因型为C型的患者更多、HBV DNA水平更低、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)水平更高(P<0.05)。在HCC组及CHB组中,共有24.41%(31/127)的患者发生preS1缺失,preS1区共发现47.90%(57/119)的点突变;共有16.54%(21/127)的患者发生preS2缺失,preS2区共发现65.45%(36/55)的点突变。preS1区W4P/R/Y、D27G/S、N51Y/T/S/Q/P、I/N56H/W、K57Q/K、A60V、D/A62S/T、G73S/N、A90T/S/G、V95A和L108V/I,以及preS2区T125S/N/P、F141V/L/I、V158A点突变在HCC组中的发生率高于CHB组(P<0.05)。基因型为C型、HBV DNA以及W4P/R/Y(preS1)、A90T/S/G(preS1)、L108V/I(preS1)、F141V/L/I(preS2)点突变可独立诊断CHB患者中HCC的发生。结论preS区W4P/R/Y(preS1)、A90T/S/G(preS1)、L108V/I(preS1)、F141V/L/I(preS2)与HCC发生相关,使用这些点突变检测将有助于HBV相关HCC的临床诊断。 展开更多
关键词 肝细胞癌 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒前表面抗原 基因突变 诊断
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Impact of pre-neoadjuvant radioactive iodine seed marking on pathologic complete response and survival in early-stage breast cancer patients
3
作者 Yihao Geng Qi Zhang +6 位作者 Zhao Bi Zhiqiang Shi Qiuchen Zhao Xiaowei Qi Rongrong Zhao Yongsheng Wang Pengfei Qiu 《Cancer Biology & Medicine》 2026年第1期78-85,共8页
Neoadjuvant therapy(NAT)has become the standard treatment for patients with locally advanced breast cancer and stage II-III HER2-positive(HER2+)or triple-negative breast cancer(TNBC)1,2.It is essential to accurately m... Neoadjuvant therapy(NAT)has become the standard treatment for patients with locally advanced breast cancer and stage II-III HER2-positive(HER2+)or triple-negative breast cancer(TNBC)1,2.It is essential to accurately mark the primary breast tumor and positive axillary lymph nodes(ALNs)prior to NAT to ensure precise surgical excision,guide axillary downstaging,and guarantee reliable lesion retrieval for pathologic evaluation3.The false-negative rate of sentinel lymph node biopsy(SLNB)after NAT can be reduced to<10%by applying modalities,such as the identification of≥3 sentinel lymph nodes(SLNs)with dual-mapping techniques or removal of the marked lymph node with target axillary dissection(TAD)according to the ASCO,NCCN,and CBCS guidelines3-5.However,there is a lack of consensus regarding the optimal methods and materials for accurate marking6,7.Conventional techniques include clip placement,guidewire localization,and carbon or ink tattooing,whereas wireless technologies,such as MagseedR,radiofrequency identification tags,SAVI SCOUTR,and radioactive iodine-125(125I)seeds,have also been adopted.Traditional marking techniques have a localization failure rate of approximately 10%.In contrast,the use of 125I seeds(with a radiation dose of 0.1-0.3 mCi)has significantly improved localization accuracy8,9.Nevertheless,owing to radioactive properties,concerns have been raised regarding the potential impact of 125I seed marking on assessing the pathologic complete response(pCR)after NAT10.Moreover,whether the influence of 125I seed marking on pCR could lead to suboptimal adjuvant treatment decisions and potentially compromise long-term oncologic outcomes has not been established.To investigate the potential impact of 125I seed placement on the pCR rate and long-term outcomes in breast cancer patients receiving NAT,we conducted a retrospective cohort study utilizing propensity score matching(PSM). 展开更多
关键词 surgical excisionguide breast tumor lesion retrieval neoadjuvant therapy nat sentinel lymph node biopsy slnb breast cancer pre neoadjuvant radioactive iodine seed marking pathologic evaluation
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乙型肝炎病毒PreS基因的克隆表达及亲和层析纯化 被引量:10
4
作者 杨敏 刘新平 +4 位作者 韩炯 张晓光 药立波 苏成芝 陈常庆 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第16期1493-1496,共4页
目的 获取乙型肝炎病毒前 S区基因 (HBVpre S) ,序列测定正确后进行融合表达 ,为今后研究其机制及应用创造条件 .方法 利用乙型肝炎病毒基因组为模板体外扩增HBVPre S基因后进行基因克隆 .目的基因经测序正确后克隆入融合表达载体 p R... 目的 获取乙型肝炎病毒前 S区基因 (HBVpre S) ,序列测定正确后进行融合表达 ,为今后研究其机制及应用创造条件 .方法 利用乙型肝炎病毒基因组为模板体外扩增HBVPre S基因后进行基因克隆 .目的基因经测序正确后克隆入融合表达载体 p RSET- C中 ,转化大肠杆菌 JM10 9(DE3) .目的基因经 IPTG诱导 ,由 T7启动子调控表达了氨基端带 6个连续组氨酸残基的 HBV- Pre S蛋白 ,在变性条件下对目的蛋白进行纯化 .结果 成功地扩增到 pre S区全长基因 ,得到融合 6个 His的 HBV- Pre S蛋白纯度大于 90 % .结论 构建了乙型肝炎病毒前 S区基因的重组表达载体 ,获得了稳定表达的工程菌 . 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 pres基因 基因克隆 基因表达 亲和层析纯化
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用T7噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒PreS1相互作用蛋白 被引量:9
5
作者 黄英 张君 +2 位作者 何茂锐 陈维贤 黄爱龙 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第4期340-343,共4页
目的:用T7噬菌体筛选系统筛选乙型肝炎病毒PreS1的相互作用蛋白。方法:应用T7噬菌体展示技术,以通过原核表达的方式得到的乙型肝炎病毒PreS1作为靶分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行生物筛选,对筛选到的克隆进行DNA序列分析及同源性搜... 目的:用T7噬菌体筛选系统筛选乙型肝炎病毒PreS1的相互作用蛋白。方法:应用T7噬菌体展示技术,以通过原核表达的方式得到的乙型肝炎病毒PreS1作为靶分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行生物筛选,对筛选到的克隆进行DNA序列分析及同源性搜索。结果:经鉴定得到1个阳性克隆,确定了能与乙型肝炎病毒PreS1相互作用的蛋白可能为:细胞色素C氧化酶1(Cytochrome c Oxidase Subunit I,COX1)。结论:T7噬菌体展示筛选系统是筛选相互作用蛋白的一种简单、快速和有效的手段,筛选到的相互作用蛋白为进一步探讨PreS1的致病机制提供重要依据。 展开更多
关键词 T7噬菌体展示技术 乙型肝炎病毒pres1 相互作用蛋白
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乙型肝炎病毒preS2蛋白在转基因小鼠肝脏中的表达 被引量:2
6
作者 金艳花 訾晓渊 +8 位作者 姚玉成 熊俊 李建秀 苏小平 王新民 倪文君 丛文铭 杨康鹃 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期175-178,共4页
目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′... 目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠首建者 (founder)及后代 ;免疫组织化学法在蛋白水平检测 pre S2蛋白在这些小鼠中的表达 ;H- E染色分析转基因小鼠肝组织的病理学变化。结果 :经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后 ,共出生 15只新生小鼠 ,其中存活 7只 ,经 PCR检测后获得 2只 founder转基因小鼠 ,命名为 C5 7- Tg N (pre S/ St) 中央人民政府。免疫组织化学检测发现转基因小鼠肝细胞质中有 pre S 2蛋白表达 ,H- E染色发现转基因小鼠肝组织中央静脉周围有淋巴细胞聚集。将这 2只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配 ,进行传代培育 ,PCR法筛选阳性转基因小鼠 ,目前已传至 F2 代。 结论 :本研究成功建立了稳定遗传 3′末端缺失的 pre S/ S基因并表达 pre S2蛋白的转基因小鼠 C5 7- Tg N((pre S/ St) 中央人民政府,它将是体内研究 3′末端缺失的 pre S/ 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 pres2蛋白 转基因小鼠 pres/S基因
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慢性HBV感染患者bcp/pc区点突变模式、pres区缺失及其临床意义 被引量:5
7
作者 张鑫 武彦宁 +4 位作者 张大可 董培玲 范春蕾 李磊 丁惠国 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第3期324-330,共7页
目的阐明HBV(hepatitis B virus,HBV)感染患者不同临床阶段bcp/pc(basic core promoter,BCP/precore,PC)点突变模式及pres区缺失突变规律,并探讨其临床意义。方法慢性HBV感染患者180例,其中,无症状HBV携带者13例,慢性乙型肝炎者75例,HB... 目的阐明HBV(hepatitis B virus,HBV)感染患者不同临床阶段bcp/pc(basic core promoter,BCP/precore,PC)点突变模式及pres区缺失突变规律,并探讨其临床意义。方法慢性HBV感染患者180例,其中,无症状HBV携带者13例,慢性乙型肝炎者75例,HBV相关肝硬化及肝癌分别为62、30例。Qiagen法提取血清HBV-DNA,常规PCR扩增目的基因,纯化PCR产物ABI377DNA自动测序仪直接双向测序。直接测序失败者,回收目的 DNA与PMD-18T载体连接,克隆质粒双向测序。DNAStar软件包的SeqMan软件进行生物信息分析。结果 Bcp/pc区点突变包括nt1753、nt1762、nt1764、nt1776、nt1803、nt1846、nt1896。HBV携带者、慢性乙型肝炎、HBV相关肝硬化及肝癌患者nt 1762(nt 1764)点突变率分别为7.7%、68.0%、72.7%(68.0%)及90.9%(81.8%),肝癌患者G1896A突变频率占54.6%。A1762T+G1764A联合突变占36%;A1762T、G1764A、G1896A联合突变占11%;T1753A/C、A1762T、G1764A、G1896A发生率为7%。克隆测序显示,肝硬化及肝癌患者bcp区起始点A1727G点突变率分别为72%、63%。HBeAg阴性患者存在更多的基因变异(P=0.022),G1776A和G1896A突变是HBeAg阴性的独立预测因素(P<0.05)。Bcp区点突变与HBeAg阴性无明显关系。肝硬化和肝癌患者pres基因缺失突变频率最高,肝癌及肝硬化患者pres1、pres2及pres1+s2缺失频率分别为7.1%、71.4%、7.1%及41.2%、58.8%、29.4%(P<0.05)。结论 A1727G、A1762T、G1764A及A1762T/G1764A联合突变、pres缺失在HBV相关肝硬化及肝癌患者多见,可能是肝脏疾病进展的危险因素,G1776A和G1896A突变是HBeAg阴性的独立预测因素。Bcp/pc点突变及pres区缺失可能为肝癌发生的早期预测因素,值得进一步研究。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 bcp/pc区变异 联合突变 pres缺失
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核酸免疫可特异地诱发小鼠对乙型肝炎病毒表面抗原S+PreS1免疫反应 被引量:10
8
作者 梁雨 田淑芳 +3 位作者 刘文军 李军 阮力 朱既明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期193-199,共7页
运用改造后的乙型肝炎病毒表面抗原S+PreS1融合基因(将PreS1区肝细胞受体结合位点(21-47aa)编码基因融合到S蛋白C端223位残基下游),构建了一系列真核表达载体,并在CHO细胞上有效表达了分泌型的、具有... 运用改造后的乙型肝炎病毒表面抗原S+PreS1融合基因(将PreS1区肝细胞受体结合位点(21-47aa)编码基因融合到S蛋白C端223位残基下游),构建了一系列真核表达载体,并在CHO细胞上有效表达了分泌型的、具有S+PreS1双重抗原性的融合蛋白颗粒。用上述质粒DNA肌肉免疫C57BL/6J小鼠,成功地检测到了抗-HBs和抗-PreS1抗体,加强免疫能显著改善免疫效果。本研究还建立了检测抗-PreS1的竞争抑制法和羊抗人HBsAg封闭法,两种方法符合率达96%,但后者更为敏感。用羊抗人HBsAg封闭法测得抗-PreS1滴度最高可达1:1280以上。 展开更多
关键词 乙型肝炎 表面抗原 核酸免疫 pres1抗体
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毕赤酵母表达的HBV全长Pres蛋白的分离纯化 被引量:2
9
作者 韩雪 叶林柏 +6 位作者 李宝宗 佘应龙 叶力 郑竑 高博 郜金荣 吴正辉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期708-712,共5页
巴斯德毕赤酵母工程菌株GS115PreS经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长PreS蛋白。Westernblot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kD的PreS蛋白和蛋白质颗粒,蛋白质颗粒主要成分为48kD的全长Pres蛋白和28kD的S蛋白,电镜观察发现... 巴斯德毕赤酵母工程菌株GS115PreS经发酵在甲醇诱导下可高效表达分泌型全长PreS蛋白。Westernblot证明发酵液中存在着可溶性的分子量为48kD的PreS蛋白和蛋白质颗粒,蛋白质颗粒主要成分为48kD的全长Pres蛋白和28kD的S蛋白,电镜观察发现蛋白质颗粒直径为30nm。发酵液经过脱盐、浓缩处理后,上清液经DEAESFF阴离子交换柱得到纯化的PreS蛋白;超速离心和蔗糖密度梯度离心得到蛋白颗粒。该颗粒的主要组分为全长PreS蛋白(PreS1+PreS2+S),还有少量的主蛋白(S)。ELISA检测证明全长PreS蛋白和蛋白颗粒有着良好的抗原性,PN显示蛋白颗粒的抗原性比PreS蛋白的抗原性高。 展开更多
关键词 HBV全长pres蛋白 发酵 分离纯化 免疫原性
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慢性乙型肝炎患者HBsAg和HBsAb共阳性与preS区及S区突变关系的研究 被引量:3
10
作者 邬兰 杜同信 +4 位作者 焦杰 王自正 瞿卫 颜宁 俞杨 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第1期16-19,共4页
目的探讨HBsAg、HBsAb共阳性慢性乙型肝炎患者HBVpreS及S基因突变的关系。方法对6例HBsAg、HBsAb共阳性慢性乙型肝炎患者(试验组)、9例HBsAg阳性、HBsAb阴性慢性乙型肝炎患者(对照组)进行HBVDNA的提取及HBV基因组preS和S基因的PCR扩增... 目的探讨HBsAg、HBsAb共阳性慢性乙型肝炎患者HBVpreS及S基因突变的关系。方法对6例HBsAg、HBsAb共阳性慢性乙型肝炎患者(试验组)、9例HBsAg阳性、HBsAb阴性慢性乙型肝炎患者(对照组)进行HBVDNA的提取及HBV基因组preS和S基因的PCR扩增和测序,比较组间突变率差异。结果试验组与对照组所感染HBV均为B型或C型。试验组未检出preS区缺失突变,对照组检出1例preS1区15bp缺失。试验组与对照组比较,preS/S、preS、preS1、preS2区核酸点突变率无统计学差异(P>0.05),S区核酸点突变率有统计学差异(P<0.05)。在氨基酸水平上,试验组与对照组preS/S、preS、S、preS1、preS2区及α决定簇点突变率比较无统计学差异(P>0.05)。结论 HBVpreS基因的缺失及S基因的氨基酸突变均不是B型或C型慢性乙型肝炎患者出现HBsAg、HBsAb共阳性的决定性因素。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 HBV S基因 HBV pres基因 基因缺失
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乙型肝炎病毒3’末端缺失的preS/S基因在转基因小鼠中的表达 被引量:2
11
作者 姚玉成 雷章恒 +4 位作者 王忠华 李建秀 王新民 李红 胡以平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第11期941-946,共6页
从乙型肝炎病毒 adr亚型的基因组 DNA中分离 3’末端缺失的preS/S基因的 DNA片段,构建了由CMV启动子控制的真核表达载体。采用受精卵显微注射方法,获得了基因组整合有3’末端缺失的preS/S基因的2个转基因... 从乙型肝炎病毒 adr亚型的基因组 DNA中分离 3’末端缺失的preS/S基因的 DNA片段,构建了由CMV启动子控制的真核表达载体。采用受精卵显微注射方法,获得了基因组整合有3’末端缺失的preS/S基因的2个转基因小鼠品系。在不同的时间点采取血清进行了ELISA分析,发现在这2个小鼠品系中3’末端缺失的preS/S基因可被表达,而且呈稳定状态。此小鼠品系的建立,对于探讨乙型肝炎病毒3’末端缺失的preS/S基因的表达产物在体内的生物学作用及其与肝细胞内细胞癌基因的转录激活之间的关系有重要意义。 展开更多
关键词 乙肝病毒 3'末端缺失 pres/S基因 基因表达 肝癌
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HBV DNA与preS1抗原均阳性患者HBeAg阴性的原因探讨 被引量:25
12
作者 刁奇志 王贵学 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期346-347,共2页
目的探讨导致HBVDNA阳性、preS1抗原阳性标本ELISA检测HBeAg阴性的原因。方法筛选76例HBeAg阴性而preS1及HBVDNA阳性的血清分别进行(1)血清1∶100稀释后重新用ELISA测定HBeAg;(2)用单克隆抗-HBe固相ELISA检测血清HBeAg/IC;(3)用寡核苷... 目的探讨导致HBVDNA阳性、preS1抗原阳性标本ELISA检测HBeAg阴性的原因。方法筛选76例HBeAg阴性而preS1及HBVDNA阳性的血清分别进行(1)血清1∶100稀释后重新用ELISA测定HBeAg;(2)用单克隆抗-HBe固相ELISA检测血清HBeAg/IC;(3)用寡核苷酸探针斑点杂交法测定HBV前C区的基因突变。结果76份血清稀释后重测5例HBeAg阳性;38例HBeAg/IC阳性;24例HBV前C区存在基因突变。结论后带效应、HBeAg/IC、前C区基因突变是HBVDNA阳性血清HBeAg阴性的主要原因;HBVDNA阳性、HBeAg阴性标本多为野生型毒株感染,只是由于形成了HBeAg/IC使常规ELISA检测不出HBeAg。 展开更多
关键词 HBV DNA HBEAG pres1
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乙型肝炎病毒PreS1抗原、丙氨酸氨基转移酶和HBV-DNA相关性分析 被引量:5
13
作者 方伟祯 蔡振华 +2 位作者 陈梅 叶宇聪 丁鹤林 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第8期1357-1359,共3页
目的:探讨PreS1抗原、丙氨酸氨基转移酶(ALT)分别与HBV-DNA定量表达的相互关系。方法:选取住院和门诊受检者4439例血清标本,分别用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,ELISA法检测PreS1抗原,速率法检测ALT;从其中选取HBV-DNA阳性186例作为定量检... 目的:探讨PreS1抗原、丙氨酸氨基转移酶(ALT)分别与HBV-DNA定量表达的相互关系。方法:选取住院和门诊受检者4439例血清标本,分别用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,ELISA法检测PreS1抗原,速率法检测ALT;从其中选取HBV-DNA阳性186例作为定量检测对象,并计算PreS1抗原相对滴度值和HBV-DNA常用对数值。结果:4439例标本中PreS1抗原阳性率为21.27%,ALT异常率为21.36%,与HBV-DNA的阳性率(21.76%)都无显著差异(P>0.05);186例HBV-DNA阳性标本中PreS1相对滴度(17.53±14.17)、ALT(64.96±175.89)与HBV-DNA定量对数值(6.27±1.14)均不相关。结论:检测PreS1抗原可以作为HBV病毒感染和复制的较好的新指标,但不能说明复制量情况;联合检测ALT对HBV感染患者的诊断、治疗有重要的价值。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 HBV-DNA pres1抗原 ALT
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HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达 被引量:3
14
作者 郭晓兰 邓健康 +1 位作者 朱道银 唐恩洁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期548-551,共4页
目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1... 目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1 S2S rhGM CSF ,并在HepG2细胞中表达。结果 :经酶切、PCR及DNA测序鉴定 ,融合基因表达质粒HB VpreS2S rhGM CSF成功地构建。将其转染HepG2细胞后 ,目的基因的转录通过RT PCR得到证实 ,而且表达的融合蛋白能与抗 HBs、抗 preS2和抗 GM CSF单克隆抗体 (mAb)均产生特异性反应。结论 :融合基因表达载体pcDNA3.1 S2S rhGM CSF的成功构建并表达 。 展开更多
关键词 HBV pres2 GM-CSF 融合基因
原文传递
免疫接种后HBV感染者PreS2基因变异的情况 被引量:3
15
作者 龙云 杨莉 +1 位作者 曹向红 李晓进 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第4期547-555,共9页
目的:本课题应用PCR和基因测序等技术,观察免疫接种后慢性乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,H B V)感染者的PreS2基因变异情况,进而初步探讨乙型肝炎疫苗免疫失败与P r e S2基因变异之间的相互关系;为进一步探索新的HBV抗病毒基因治疗靶... 目的:本课题应用PCR和基因测序等技术,观察免疫接种后慢性乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,H B V)感染者的PreS2基因变异情况,进而初步探讨乙型肝炎疫苗免疫失败与P r e S2基因变异之间的相互关系;为进一步探索新的HBV抗病毒基因治疗靶点提供理论基础.方法:收集昆明市延安医院和昆明市第三人民医院免疫接种后慢性HBV感染者的血液标本共47例,从血清标本中提取HBV DNA;用PCR法扩增Pre S2基因片段;扩增后的基因片段进行DNA序列分析.扩增出PCR产物的有35例,上海生工测序最终完成测序的有32例,其中男18例,女14例,年龄19-56岁,平均年龄32.75岁±10.22岁.32份样本的HBV Pre S2基因片段测序后,以Gen Bank数据库中登录号为NC_003977.1的HBV DNA全基因序列为参照,用Chromas软件分析测序图及BLASTN对测序结果进行比对分析后,采用SPSS11.5统计软件进行统计分析.结果:32例标本中Pre S2基因全部出现点突变(100%),其中2例出现缺失突变(6.3%),提示可能存在Ile、Tyr、Phe、Gly、Arg等氨基酸的缺失,32例标本均未发现Pre S2起始密码子ATG的变异,点突变共发生517次,Pre S2基因碱基突变有11种类型:G-A、A-G、T-C、A-T、G-T、C-T、G-C、A-C、C-G、C-A、T-A.11种不同类型的点突变在突变例数率及突变次数率方面均不全相同,其中A-T的突变例数较多,G-A的突变次数较多,差异有统计学意义(P<0.05).Pre S2基因不同部位点突变比较结果显示Pre S2基因前端、中段、末端点突变率不全相同,其中中段(nt45-99),即Pre S2基因的56-110位点突变率较高,前端突变率较低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:Pre S2基因变异与免疫失败可能存在相关关系,这将为今后深入研究乙型肝炎疫苗免疫失败的发生机制并用于指导临床实践提供理论基础.同时,进一步确定Pre S2基因变异位点,并针对这些靶点设计相应的基因治疗方法,也可能成为今后乙型肝炎疫苗免疫研究的新方向. 展开更多
关键词 乙型肝炎疫苗 免疫接种 乙型肝炎病毒感染 pre S2基因变异
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乙型肝炎病毒 preS 抗原在大肠杆菌中的高效表达与鉴定 被引量:1
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作者 陈章国 马大龙 +4 位作者 张颖妹 李建远 狄春辉 宋泉声 万艳平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期142-145,共4页
利用PCR和基因重组技术构建了乙型肝炎病毒(HBV)完整preS抗原高效表达克隆(pMIP),该克隆在大肠杆菌中表达一分子量约31kD的融合蛋白(MS2-preS),由MS2、白细胞介素3(IL-3)N端14个氨基酸... 利用PCR和基因重组技术构建了乙型肝炎病毒(HBV)完整preS抗原高效表达克隆(pMIP),该克隆在大肠杆菌中表达一分子量约31kD的融合蛋白(MS2-preS),由MS2、白细胞介素3(IL-3)N端14个氨基酸(aa)接头和preS抗原组成,在IL-3N端与MS2连接处有凝血酶识别位点,可被该酶切开。MS2-preS和带IL-3N端14个aa的preS均具有preS1和preS2抗原表位以及多聚人血清白蛋白(PHSA)受体活性,均能诱导动物产生抗preS抗体。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 pres抗原 大肠杆菌 表达 融合蛋白
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HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化 被引量:4
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作者 刘照惠 邵丽君 +5 位作者 李猛 金立杰 李利 谷丽娟 赵晓琳 杨屹 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期435-438,共4页
目的优化HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达条件。方法通过改变重组质粒的宿主菌、培养基、诱导温度、诱导剂、诱导剂浓度、诱导时间等条件,利用SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件,分析以上条件改变对表达产物表达量的影响。将重... 目的优化HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达条件。方法通过改变重组质粒的宿主菌、培养基、诱导温度、诱导剂、诱导剂浓度、诱导时间等条件,利用SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件,分析以上条件改变对表达产物表达量的影响。将重组质粒连续传100代,检测融合蛋白的表达稳定性。结果重组质粒在大肠杆菌BL21菌株、GS培养基、28℃、0.5mmol/L IPTG或1.5mmol/L乳糖诱导4h时,目的蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的43.5%。重组质粒传代100代,融合蛋白的表达稳定。结论已确定出了融合蛋白在大肠杆菌中表达的最佳条件。 展开更多
关键词 HBV pres2-MBP融合蛋白 大肠杆菌 表达条件
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重庆地区HBV流行株PreS/S、EnhⅡ/CP/PreC基因标准参照序列的初步建立 被引量:1
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作者 许红梅 任红 +2 位作者 凌宁 彭明利 卿玉玲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第1期39-42,共4页
目的:建立重庆地区HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC基因标准参照序列,为HBV变异的研究奠定基础。方法:测定15例无症状携带者HBV的PreS/S、EnhII/CP/PreC序列,应用同源性分析和对齐比较等方法确定基因型/血清型,并拟定标准参照序列。结... 目的:建立重庆地区HBV流行株PreS/S、EnhII/CP/PreC基因标准参照序列,为HBV变异的研究奠定基础。方法:测定15例无症状携带者HBV的PreS/S、EnhII/CP/PreC序列,应用同源性分析和对齐比较等方法确定基因型/血清型,并拟定标准参照序列。结果:9株基因型B/血清型;adw2、3株基因型B/M清型ayw1、3株基因型C/血清型adrq+;建立的重庆地区HBV流行株(基因型B/血清型adw2)PreS/S、EnhII/CP/PreC标准参照序列与华东华南地区同亚型的标准参照序列比较分别有6个、1个核苷酸差异。结论:初步建立了重庆地区HBV流行株PreS/S、EnhIICP/PreC基因标准参照序列。 展开更多
关键词 重庆 HBV 流行株 pres/S EnhII/CP/preC 基因 乙型肝炎病毒
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乙肝病毒PreS1抗原的临床应用 被引量:11
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作者 李步荣 李丽华 李妙羡 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第5期442-444,共3页
目的:评价检测乙肝病毒PreS1抗原的临床应用价值.方法:将临床送检的1000份乙肝病毒表面抗原(HBsAg阳性的血清标本进行PreS1抗原检测,同时用FQ-PCR进行HBV-DNA测定.结果:PreS1总阳性率为52.0%,HBV-DNA阳性率为50.8%,HBeAg阳性率为21.0%.P... 目的:评价检测乙肝病毒PreS1抗原的临床应用价值.方法:将临床送检的1000份乙肝病毒表面抗原(HBsAg阳性的血清标本进行PreS1抗原检测,同时用FQ-PCR进行HBV-DNA测定.结果:PreS1总阳性率为52.0%,HBV-DNA阳性率为50.8%,HBeAg阳性率为21.0%.PreS1总阳性率明显高于HBeAg阳性率.PreS1与HBV-DNA的总符合率为94.4%.结论:PreS1抗原作为乙肝感染和复制的血清学指标敏感性高于HBeAg,对提示乙肝患者的病情发展和转归有重要临床意义.PreS1可以作为一项新的乙肝病毒复制的传染性指标. 展开更多
关键词 乙肝病毒 DNA pres1抗原 临床意义
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