[目的]探究miR-325-3p靶向PRDX4对肾细胞癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。[方法]设肾细胞癌细胞Caki-1组、miR-NC组、miR-325-3p-mimics组(过表达)、miR-325-3p-inhibitor组(低表达),测定各组细胞增殖、单克隆形成数目、凋亡率、侵袭水...[目的]探究miR-325-3p靶向PRDX4对肾细胞癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。[方法]设肾细胞癌细胞Caki-1组、miR-NC组、miR-325-3p-mimics组(过表达)、miR-325-3p-inhibitor组(低表达),测定各组细胞增殖、单克隆形成数目、凋亡率、侵袭水平以及miR-325-3p、PRDX4水平。[结果]miR-325-3p-inhibitor组OD值(0.93±0.03)、存活率(86.58±6.36)%、单克隆形成数目(1062.29±102.78)、穿膜数(1917.34±425.35)、PRDX4 mRNA和蛋白表达水平(4.63±0.28、1.82±0.18)高于miR-325-3p-mimics组[(0.42±0.02)、(42.25±7.20)%、(239.89±35.27)个、(293.85±95.28)个、(2.04±0.24)、(0.38±0.07)](P<0.05),细胞凋亡率(1.12±0.29)%、miR-325-3p表达水平(1.42±0.38)低于miR-325-3p-mimics组(7.14±1.11)%、(5.68±0.37)(P<0.05)。[结论]miR-325-3p上调可以抑制肾细胞癌细胞的增殖(76.59%±7.30%vs 42.25%±7.20%)、迁移侵袭(702.28±111.52 vs 293.85±95.28),同时诱导细胞凋亡(3.46±1.04 vs 7.14±1.11),而这些过程主要是通过miR-325-3p与PRDX4的相互作用实现的。展开更多
目的探讨乳腺癌细胞中过氧化物还原酶4(PRDX4)的表达对增殖和迁移的影响及其机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因型-组织表达(GTEx)数据库中获取泛癌肿瘤样本和正常样本的PRDX4 mRNA数据和相应的临床数据。Wilcoxon检验分析PRDX4基...目的探讨乳腺癌细胞中过氧化物还原酶4(PRDX4)的表达对增殖和迁移的影响及其机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因型-组织表达(GTEx)数据库中获取泛癌肿瘤样本和正常样本的PRDX4 mRNA数据和相应的临床数据。Wilcoxon检验分析PRDX4基因在肿瘤组织和正常组织中的表达差异;Kaplan-Meier法分析PRDX4与癌症患者生存率的关系;免疫组织化学染色分析PRDX4在常见肿瘤及其癌旁组织中的表达。2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFHDA)荧光探针检测细胞内活性氧水平;MTS比色法检测细胞增殖活性;碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞周期变化;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、p-Rb、CyclinE1、CyclinD1、CDK2、CDK4、N-cadherin、Vimentin、基质金属蛋白酶9(MMP9)、ERK1/2和p-ERK1/2等相关蛋白表达水平。结果人体多器官组织芯片结果显示,与癌旁组织(0.01±0.00)相比,乳腺癌组织(0.07±0.01)中PRDX4表达增加,差异有统计学意义,t=6.55,P=0.003。与si-NC组相比,si-PRDX4组上调细胞内活性氧水平(21.92±1.41 vs 31.30±1.41);抑制细胞增殖活性(1.45±0.05 vs 0.85±0.01);下调PCNA(1.00±0.02 vs 0.74±0.03)蛋白表达;并将细胞阻滞在G0/G1期[(47.50±0.42)%vs(56.66±0.05)%];下调p-Rb(1.00±0.01 vs 0.72±0.03)、CyclinE1(1.00±0.02 vs 0.62±0.02)、CyclinD1(1.00±0.02 vs 0.70±0.02)、CDK2(1.00±0.02 vs 0.67±0.01)和CDK4(1.00±0.01 vs 0.65±0.01)蛋白表达。划痕愈合实验结果显示,与si-NC组[(48.79±0.39)%]细胞相比,si-PRDX4组[(21.33±3.14)%]细胞24 h后迁移率降低,差异有统计学意义,t=13.14,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,与si-NC组细胞相比,si-PRDX4组细胞N-cadherin(1.00±0.03 vs 0.48±0.03)、Vimentin(1.02±0.03 vs 0.47±0.02)和MMP9(1.01±0.03 vs 0.67±0.03)表达量下降,差异有统计学意义,t值分别为21.73、16.90和13.71,P值分别为<0.001、<0.001和0.002。加入FR18024抑制ERK通路,与对照组相比,FR18024组细胞增殖相关蛋白PCNA(1.00±0.02 vs 0.74±0.03)表达下调,且迁移相关蛋白N-cadherin(1.00±0.09 vs 0.67±0.04)、Vimentin(1.00±0.12 vs 0.77±0.04)和MMP9(1.00±0.11 vs 0.69±0.05)表达均下调,差异有统计学意义,t值分别为11.61、3.05、3.23和4.15,P值分别为<0.001、0.038、0.032和0.014。结论PRDX4可以通过ERK通路影响细胞增殖和迁移进而促进乳腺癌的恶性进展。展开更多
文摘[目的]探究miR-325-3p靶向PRDX4对肾细胞癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。[方法]设肾细胞癌细胞Caki-1组、miR-NC组、miR-325-3p-mimics组(过表达)、miR-325-3p-inhibitor组(低表达),测定各组细胞增殖、单克隆形成数目、凋亡率、侵袭水平以及miR-325-3p、PRDX4水平。[结果]miR-325-3p-inhibitor组OD值(0.93±0.03)、存活率(86.58±6.36)%、单克隆形成数目(1062.29±102.78)、穿膜数(1917.34±425.35)、PRDX4 mRNA和蛋白表达水平(4.63±0.28、1.82±0.18)高于miR-325-3p-mimics组[(0.42±0.02)、(42.25±7.20)%、(239.89±35.27)个、(293.85±95.28)个、(2.04±0.24)、(0.38±0.07)](P<0.05),细胞凋亡率(1.12±0.29)%、miR-325-3p表达水平(1.42±0.38)低于miR-325-3p-mimics组(7.14±1.11)%、(5.68±0.37)(P<0.05)。[结论]miR-325-3p上调可以抑制肾细胞癌细胞的增殖(76.59%±7.30%vs 42.25%±7.20%)、迁移侵袭(702.28±111.52 vs 293.85±95.28),同时诱导细胞凋亡(3.46±1.04 vs 7.14±1.11),而这些过程主要是通过miR-325-3p与PRDX4的相互作用实现的。
文摘目的探讨乳腺癌细胞中过氧化物还原酶4(PRDX4)的表达对增殖和迁移的影响及其机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因型-组织表达(GTEx)数据库中获取泛癌肿瘤样本和正常样本的PRDX4 mRNA数据和相应的临床数据。Wilcoxon检验分析PRDX4基因在肿瘤组织和正常组织中的表达差异;Kaplan-Meier法分析PRDX4与癌症患者生存率的关系;免疫组织化学染色分析PRDX4在常见肿瘤及其癌旁组织中的表达。2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFHDA)荧光探针检测细胞内活性氧水平;MTS比色法检测细胞增殖活性;碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞周期变化;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、p-Rb、CyclinE1、CyclinD1、CDK2、CDK4、N-cadherin、Vimentin、基质金属蛋白酶9(MMP9)、ERK1/2和p-ERK1/2等相关蛋白表达水平。结果人体多器官组织芯片结果显示,与癌旁组织(0.01±0.00)相比,乳腺癌组织(0.07±0.01)中PRDX4表达增加,差异有统计学意义,t=6.55,P=0.003。与si-NC组相比,si-PRDX4组上调细胞内活性氧水平(21.92±1.41 vs 31.30±1.41);抑制细胞增殖活性(1.45±0.05 vs 0.85±0.01);下调PCNA(1.00±0.02 vs 0.74±0.03)蛋白表达;并将细胞阻滞在G0/G1期[(47.50±0.42)%vs(56.66±0.05)%];下调p-Rb(1.00±0.01 vs 0.72±0.03)、CyclinE1(1.00±0.02 vs 0.62±0.02)、CyclinD1(1.00±0.02 vs 0.70±0.02)、CDK2(1.00±0.02 vs 0.67±0.01)和CDK4(1.00±0.01 vs 0.65±0.01)蛋白表达。划痕愈合实验结果显示,与si-NC组[(48.79±0.39)%]细胞相比,si-PRDX4组[(21.33±3.14)%]细胞24 h后迁移率降低,差异有统计学意义,t=13.14,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,与si-NC组细胞相比,si-PRDX4组细胞N-cadherin(1.00±0.03 vs 0.48±0.03)、Vimentin(1.02±0.03 vs 0.47±0.02)和MMP9(1.01±0.03 vs 0.67±0.03)表达量下降,差异有统计学意义,t值分别为21.73、16.90和13.71,P值分别为<0.001、<0.001和0.002。加入FR18024抑制ERK通路,与对照组相比,FR18024组细胞增殖相关蛋白PCNA(1.00±0.02 vs 0.74±0.03)表达下调,且迁移相关蛋白N-cadherin(1.00±0.09 vs 0.67±0.04)、Vimentin(1.00±0.12 vs 0.77±0.04)和MMP9(1.00±0.11 vs 0.69±0.05)表达均下调,差异有统计学意义,t值分别为11.61、3.05、3.23和4.15,P值分别为<0.001、0.038、0.032和0.014。结论PRDX4可以通过ERK通路影响细胞增殖和迁移进而促进乳腺癌的恶性进展。
