PrPsc检测方法研究进展

1

作者 翁银标 林钟婷 +2 位作者 敖平星 韦伟 高洪 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第12期34-35,共2页

海绵状脑病(prions)是人和动物中的一类致死性中枢神经系统疾病。现尚无理想的早期、快速的检测方法和防治措施。目前,组织病理学检测、动物试验和免疫学检测为较为常用的prions病检测方法,其它一些新兴的检测方法如毛细管电泳、光谱分... 海绵状脑病(prions)是人和动物中的一类致死性中枢神经系统疾病。现尚无理想的早期、快速的检测方法和防治措施。目前,组织病理学检测、动物试验和免疫学检测为较为常用的prions病检测方法,其它一些新兴的检测方法如毛细管电泳、光谱分析和高效液相色谱等也逐渐被开发研制,但因其本身缺陷,暂时无法得到广泛应用。 展开更多

关键词 TSE prpsc 检测方法

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朊病毒蛋白的研究进展 被引量：7

2

作者 尹文 张久聪 宋涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期122-124,127,共4页

关键词 朊病毒蛋白 PRPC PRION prpsc

原文传递

绵羊组织中朊病毒受体37kDa/67kDa LRP/LR mRNA转录水平研究 被引量：1

3

作者 乔俊文 苏晓鸥 +5 位作者 王伊琴 周向梅 杨建民 尹晓敏 马李颖 赵德明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1043-1047,共5页

本研究旨在检测绵羊组织中朊病毒受体37kDa/67kDa LRP/LR mRNA水平并探讨其与朊病毒组织嗜性的关系。选用背景相似的6只内蒙绵羊,提取组织RNA,反转录RT-PCR构建cDNA模板;利用本研究前期构建的标准质粒及标准曲线,对组织中该受体mRNA水... 本研究旨在检测绵羊组织中朊病毒受体37kDa/67kDa LRP/LR mRNA水平并探讨其与朊病毒组织嗜性的关系。选用背景相似的6只内蒙绵羊,提取组织RNA,反转录RT-PCR构建cDNA模板;利用本研究前期构建的标准质粒及标准曲线,对组织中该受体mRNA水平进行Real-time(实时)荧光定量PCR检测。结果表明,大脑皮质中的受体表达水平最高(P<0.05),其次为心脏和脑干,中等表达的器官依次为海马、小脑、脾脏、丘脑、肠系膜淋巴结、肝脏和肾脏,表达量最低为肺脏(P<0.05)。结果提示,朊病毒受体——37kDa/67kDa LRP/LR在绵羊各组织中的表达量高低与朊病毒的复制程度有一定的相关性,受体LRP/LR表达量较高的区域朊病毒复制水平相对较高。结果提示朊病毒入侵机体后,组织器官PrPSc聚集程度可能与受体37kDa/67kDa LRP/LR表达水平相关。 展开更多

关键词 37kDa/67kDa LRP/LR REAL-TIME PCR MRNA 绵羊 prpsc 复制

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朊病毒的生物学研究进展 被引量：3

4

作者 张太翔 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第6期76-78,共3页

朊病是一种人畜共患病,对人和动物的健康影响很大,是一种致死性疾病。由于该病的临床症状和组织病理学变化等已为人们所熟知,作者仅就朊病的病因、发病机理及诊断治疗方法的最新研究进行阐述,并从病原基因遗传结构特点、致病蛋白的结构... 朊病是一种人畜共患病,对人和动物的健康影响很大,是一种致死性疾病。由于该病的临床症状和组织病理学变化等已为人们所熟知,作者仅就朊病的病因、发病机理及诊断治疗方法的最新研究进行阐述,并从病原基因遗传结构特点、致病蛋白的结构特点、诊断方法的提高、治疗的前景作一综述,为该类疾病的防治提供理论依据。 展开更多

关键词 朊病毒 PRPC prpsc PrPres

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朊病毒感染途径的研究进展 被引量：2

5

作者 王辉暖 陈伯安 +2 位作者 周向梅 尹晓敏 杨利峰 《实验动物科学》 2012年第2期58-63,共6页

朊病毒病是一类能够感染人和其他动物的神经退行性传染病,其致死率高达100%,到目前为止尚无有效的治疗方法,该疾病直接威胁着人和动物的生命安全及健康。目前普遍认为该病的致病因子是一种结构异常的朊蛋白(PrPSc),其主要入侵宿主的中... 朊病毒病是一类能够感染人和其他动物的神经退行性传染病,其致死率高达100%,到目前为止尚无有效的治疗方法,该疾病直接威胁着人和动物的生命安全及健康。目前普遍认为该病的致病因子是一种结构异常的朊蛋白(PrPSc),其主要入侵宿主的中枢神经系统,研究发现PrPSc主要通过消化系统、血液循环系统和外周神经系统途径进行复制并传播,然后进入中枢神经系统导致疾病发生。本文对PrPSc从外周组织器官入侵神经系统的途径进行综述,以理解朊病毒神经入侵的机制。 展开更多

关键词 朊病毒病 神经入侵 prpsc

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Creutzfeldt-Jakob病非侵入性诊断方法研究新进展 被引量：3

6

作者 丁曼 卢祖能 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2016年第4期283-286,共4页

朊病毒是一种非常规意义上的传染性病原体,常导致致命性神经系统疾病,其中以Creutzfeldt-Jakob病(CJD)最为常见。CJD属于一种罕见的神经系统退行性疾病,临床进展迅速,致死性达100%。此疾病有多种类型,其中以散发型最为常见。目前此病的... 朊病毒是一种非常规意义上的传染性病原体,常导致致命性神经系统疾病,其中以Creutzfeldt-Jakob病(CJD)最为常见。CJD属于一种罕见的神经系统退行性疾病,临床进展迅速,致死性达100%。此疾病有多种类型,其中以散发型最为常见。目前此病的最大挑战即临床诊断。到目前为止临床确诊的金标准仍为脑组织活检,但将其作为诊断金标准仍存在一定局限性。随着研究的逐步进展,亟需探讨新的非侵入性的检测(手段),以利于疾病诊断。本文就有关CJD生物标记物检测、基因筛查、影像学检查及电生理检查等非侵入性手段的研究进展进行综述,旨在协助CJD的诊断,为CJD的确诊提供新的思路。 展开更多

关键词 朊病毒病 克-雅综合征 prpsc PRNP

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朊病毒疾病的诊断技术 被引量：1

7

作者 张磊 李宁 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第5期16-19,共4页

朊病毒疾病即海绵状脑病 ,是人和动物中的一类致死性中央神经系统疾病。介绍了朊病毒疾病的诊断技术 :病理诊断、基因诊断、免疫诊断和血液检测。

关键词 朊病毒疾病 prpsc 诊断 抗体

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朊病毒致病机理研究进展 被引量：2

8

作者 乔俊文 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第8期62-66,共5页

朊病毒是一种无核酸但具有感染力的异常朊蛋白,可引起人和动物的神经退行性病变,该病结局是死亡。作者就朊病毒中枢神经系统感染机理,局部组织P rP sc聚集分布与P rP sc对神经组织损伤的关系、朊病中正常P rP c生理功能、细胞死亡可能... 朊病毒是一种无核酸但具有感染力的异常朊蛋白,可引起人和动物的神经退行性病变,该病结局是死亡。作者就朊病毒中枢神经系统感染机理,局部组织P rP sc聚集分布与P rP sc对神经组织损伤的关系、朊病中正常P rP c生理功能、细胞死亡可能机制、朊病中的神经炎—小胶质细胞的反应、补体激活作用;朊病毒外周神经系统感染机理,入侵门户、胞内转运机制、外周感染靶器官、胞内聚集与复制、神经入侵及朊病进程中已发现的几种受体细胞的重要作用等作一综述,为进一步研究该病提供理论依据。 展开更多

关键词 朊病致病机理 中枢神经系统病理 PRPC prpsc 外周神经系统病理

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N2a细胞增殖的痒病小鼠适应毒株RML的致病特性分析

9

作者 吴晓东 邹艳丽 +4 位作者 刘雨田 李金明 张永强 刘珊 王志亮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期257-263,共7页

为鉴定细胞体外增殖的痒病小鼠适应毒株RML的致病特性,包括致病性和株系特征等,用RML感染的N2a(Sc-N2a)细胞裂解物接种C57BL/6J小鼠进行研究。结果显示:经(200±28)d的潜伏期后,C57BL/6J小鼠全部发病死亡,临床症状均表现为共济失调... 为鉴定细胞体外增殖的痒病小鼠适应毒株RML的致病特性,包括致病性和株系特征等,用RML感染的N2a(Sc-N2a)细胞裂解物接种C57BL/6J小鼠进行研究。结果显示:经(200±28)d的潜伏期后,C57BL/6J小鼠全部发病死亡,临床症状均表现为共济失调,而接种N2a细胞裂解物的C57BL/6J小鼠与接种Sc-N2a细胞裂解物的PrP基因敲除小鼠均正常存活。Sc-N2a细胞增殖的PrPSc与发病小鼠脑组织中PrPSc具有同样的糖基化模式,三种糖基化PrPSc具相同的迁移率,而且均是以单糖基化形式为主。发病小鼠的病理学研究结果显示:脑部的海绵状空泡主要分布于脑干、大脑、小脑、丘脑;脑部的PrPSc主要分布于大脑皮质、海马、丘脑,在小脑、四迭体、嗅球有少量的分布。小鼠回归试验表明:Sc-N2a细胞增殖的PrPSc对小鼠具致病性,并保留RML的株系特征,是TSEs研究的理想细胞模型。 展开更多

关键词 N2A细胞 痒病小鼠适应毒株RML prpsc 致病性 株系特征

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感染性朊蛋白的毒性与糖磷脂酰肌醇(GPI)的相关性

10

作者 张太翔 田国宁 +1 位作者 张金玲 田国华 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第9期141-142,共2页

海绵状脑病(朊病)是一类神经退行性脑病,目前是世界上研究的热点问题之一。引起该病的病原是一种朊蛋白质,它与宿主自身的正常朊蛋白的一级结构相同,只是二级结构的构象有所不同。对海绵状脑病的致病机理至今仍不太清楚,作者针对目前研... 海绵状脑病(朊病)是一类神经退行性脑病,目前是世界上研究的热点问题之一。引起该病的病原是一种朊蛋白质,它与宿主自身的正常朊蛋白的一级结构相同,只是二级结构的构象有所不同。对海绵状脑病的致病机理至今仍不太清楚,作者针对目前研究的朊蛋白的致病性与GPI的关系作一综述。 展开更多

关键词 朊蛋白 GPI prpsc PRPC 致病机理

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朊蛋白同源蛋白Doppel的分子生物学研究进展

11

作者 徐琨 董小平 楚雍烈 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期481-483,486,共4页

关键词 朊蛋白 分子生物学 同源蛋白 可传播性海绵状脑病 退行性疾病 prpsc 中枢神经系统 蛋白质组成

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免疫治疗朊病的前景

12

作者 张太翔 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第5期86-87,共2页

神经元的死亡被认为是朊病的特点,这是由于细胞表面的唾液酸糖蛋白由正常的含有大量α螺旋的结构变成了异常的β折叠丰富的、具有蛋白酶抗性的结构。最近的研究结果表明,朊病的复制可以被抗PrP的单克隆抗体所抑制,能延长朊病毒的潜伏期... 神经元的死亡被认为是朊病的特点,这是由于细胞表面的唾液酸糖蛋白由正常的含有大量α螺旋的结构变成了异常的β折叠丰富的、具有蛋白酶抗性的结构。最近的研究结果表明,朊病的复制可以被抗PrP的单克隆抗体所抑制,能延长朊病毒的潜伏期,这增加了人们用抗体来治疗朊病的信心。 展开更多

关键词 中文关键词 抗朊蛋白的抗体 细胞凋亡 PRPC prpsc

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SMB-S15细胞中朊病毒PMCA方法的建立及对白藜芦醇抗朊病毒作用的评价 被引量：2

13

作者 周冬花 王晶 +3 位作者 肖康 武月章 石琦 董小平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期183-188,共6页

朊病毒是一类能引起人或动物神经退行性疾病的感染因子。蛋白质错误折叠循环扩增(Protein misfolding cy-clic amplification,PMCA)是一种常见的朊病毒体外扩增技术。白藜芦醇是一种具有较高研究价值的植物抗菌素。为了建立SMB-S15细胞... 朊病毒是一类能引起人或动物神经退行性疾病的感染因子。蛋白质错误折叠循环扩增(Protein misfolding cy-clic amplification,PMCA)是一种常见的朊病毒体外扩增技术。白藜芦醇是一种具有较高研究价值的植物抗菌素。为了建立SMB-S15细胞中朊病毒的PMCA体系,并探索PMCA技术在评价白藜芦醇抗朊病毒作用的意义,本研究以朊病毒感染细胞系SMB-S15细胞匀浆为种子,健康小鼠脑组织匀浆为底物,建立PMCA技术平台。将不同浓度的白藜芦醇导入PMCA体系,通过Western Blot方法检测PMCA产物中异常朊蛋白(PrPSc)的生成和变化。结果显示:SMB-S15细胞中PrPSc可以在建立的PMCA体系有效地复制。新生成的PrPSc分子的糖基化特征与原始细胞中的PrPSc不同,其双糖基化分子比例明显增加。同时也有别于羊瘙痒因子139A和ME7感染小鼠脑组织中的PrPSc分子。加入白藜芦醇后,PrPSc在PMCA体系中的复制明显被抑制,呈现出剂量依赖效应,其EC50约为4.616μM。这些结果表明:SMB-S15细胞中的PrPSc可以通过PMCA大量扩增,建立的PMCA技术可有效地反映白藜芦醇对PrPSc在体外复制的抑制作用。 展开更多

关键词 朊病毒病 朊病毒 SMB-S15细胞 蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA) 异常朊蛋白(prpsc) 白藜芦醇

原文传递

克雅氏病的实验室检测技术研究进展 被引量：3

14

作者 王环茹 滕峥 +1 位作者 石琦 张曦 《微生物与感染》 CAS 2022年第6期395-400,共6页

克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)是一种在人类中最为常见的海绵状脑病,其致病因子为朊病毒。由于该病的致死率为100%,且具有传播风险,CJD的早期诊断对疾病防控具有重要意义。临床上一般依据患者的临床症状与体征以及相应的实... 克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)是一种在人类中最为常见的海绵状脑病,其致病因子为朊病毒。由于该病的致死率为100%,且具有传播风险,CJD的早期诊断对疾病防控具有重要意义。临床上一般依据患者的临床症状与体征以及相应的实验室检测来进行CJD的鉴别诊断。本文主要围绕现有的CJD实验室检测技术展开综述,包括朊病毒的直接与间接检测、疾病标志物的检测以及疾病相关基因PRNP的检测与分析等,旨在为进一步推广和规范CJD的实验室检测提供参考与技术依据。 展开更多

关键词 克雅氏病 prpsc蛋白 连续蛋白质错误折叠循环扩增技术 实时震动诱导转化技术 14-3-3蛋白 PRNP基因

暂未订购

蛋白质错误折叠循环扩增及其在朊病毒蛋白检测中的应用研究进展 被引量：1

15

作者 王海霞 石国庆 +2 位作者 刘怡孝 万鹏程 管峰 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1141-1146,共6页

朊病毒蛋白(prion protein,PrP)是传染性海绵状脑病的病原体,其检测是该病诊断的重要依据。该文从原理、方法、影响因素和检测应用方面对蛋白质错误折叠循环扩增(protein mis-folding cyclic amplification,PMCA)这种朊病毒蛋白新型检... 朊病毒蛋白(prion protein,PrP)是传染性海绵状脑病的病原体,其检测是该病诊断的重要依据。该文从原理、方法、影响因素和检测应用方面对蛋白质错误折叠循环扩增(protein mis-folding cyclic amplification,PMCA)这种朊病毒蛋白新型检测技术做了介绍,旨在为朊病毒蛋白的检测和发病机制研究提供理论参考。 展开更多

关键词 朊病毒蛋白(PrP) PRPC prpsc 蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA) 检测

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Protein A磁珠检测朊病毒方法的建立 被引量：2

16

作者 李奇 杨阳 +3 位作者 吕鹏 宋博翠 白宗瑞 陈志宝 《黑龙江八一农垦大学学报》 2009年第3期73-75,94,共4页

建立Protein A磁珠法检测朊病毒,将朊病毒抗体IH2包被后的Protein A磁珠与蛋白酶K消化过的攻毒小鼠脑组织匀浆液混合,经免疫沉淀缓冲液温和洗脱杂蛋白,再经0.2M甘氨酸将目的蛋白洗脱并且利用聚丙酰胺凝胶电泳检测。通过聚丙酰胺凝胶电... 建立Protein A磁珠法检测朊病毒,将朊病毒抗体IH2包被后的Protein A磁珠与蛋白酶K消化过的攻毒小鼠脑组织匀浆液混合,经免疫沉淀缓冲液温和洗脱杂蛋白,再经0.2M甘氨酸将目的蛋白洗脱并且利用聚丙酰胺凝胶电泳检测。通过聚丙酰胺凝胶电泳检测出25KD的目的蛋白带,经与正常未消化的朊蛋白条带相比较,证实检测出朊病毒。Protein A磁珠具有高效特异的与抗体IgG结合的特点,与多克隆抗体混合后可有效结合IgG。该方法较免疫组织化学和Western-blot技术简便快速,且磁珠可以回收再使用,使成本低廉。 展开更多

关键词 Protein A磁珠 朊蛋白(PrPC) 朊病毒(prpsc) 免疫沉淀

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传染性海绵状脑病污染环境引发的风险 被引量：1

17

作者 张茜茜 周向梅 +1 位作者 赵德明 杨利峰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期75-78,共4页

传染性海绵状脑病（TSEs）又称朊蛋白疾病（Prion diseases）,是一组能够感染人和动物的慢性、致死性、神经退行性疾病。目前普遍认为是由体内正常的朊蛋白（PrPC）错误折叠成具有部分蛋白酶抗性的PrPSc引起的。该病可引起多种动物与人... 传染性海绵状脑病（TSEs）又称朊蛋白疾病（Prion diseases）,是一组能够感染人和动物的慢性、致死性、神经退行性疾病。目前普遍认为是由体内正常的朊蛋白（PrPC）错误折叠成具有部分蛋白酶抗性的PrPSc引起的。该病可引起多种动物与人发病,如人类克雅氏病（Creutzfeldt-Jakob,CJD）、格氏病（Gerstmann-Scheinker,GSS）. 展开更多

关键词 传染性海绵状脑病 污染环境 神经退行性疾病 风险 引发 prpsc 蛋白酶抗性 错误折叠

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朊粒蛋白PrP^(Sc)寡聚体的形成与跨膜毒性 被引量：1

18

作者 衡杰 吴琦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期109-115,共7页

朊粒蛋白(prionprotein,PrP)传染致病机制一直是朊粒(prion)研究领域的焦点.由正常型朊粒蛋白(PrPC)向致病型朊粒蛋白(PrPSc)的转变是致病的关键步骤.本文综述了近年来PrPC向PrPSc转变的结构变化特征、PrPSc由单体形成寡聚体的组装机制... 朊粒蛋白(prionprotein,PrP)传染致病机制一直是朊粒(prion)研究领域的焦点.由正常型朊粒蛋白(PrPC)向致病型朊粒蛋白(PrPSc)的转变是致病的关键步骤.本文综述了近年来PrPC向PrPSc转变的结构变化特征、PrPSc由单体形成寡聚体的组装机制、以及PrPSc寡聚体的跨膜机制与细胞毒性间的关系等方面的研究进展. 展开更多

关键词 朊粒蛋白 淀粉样纤维 朊粒蛋白prpsc寡聚体 细胞毒性

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羊瘙痒因子263K感染的金黄仓鼠脑中PrP^(Sc)的动态沉积特点 被引量：5

19

作者 韩俊 高建梅 +5 位作者 李冰玲 肖新莉 高晨 张宝云 马贵平 董小平 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期26-30,共5页

目的　观察羊瘙痒因子 2 63K感染的金黄仓鼠脑中PrPSc的沉积特点。方法　颅内接种羊瘙痒因子 2 63K感染金黄仓鼠 ,分别于接种后第 2 0天、40天、50天、60天和 70天取脑组织 ,用免疫组化法检测PrPSc的沉积 ,HE染色观察病理变化 ,Westernb... 目的　观察羊瘙痒因子 2 63K感染的金黄仓鼠脑中PrPSc的沉积特点。方法　颅内接种羊瘙痒因子 2 63K感染金黄仓鼠 ,分别于接种后第 2 0天、40天、50天、60天和 70天取脑组织 ,用免疫组化法检测PrPSc的沉积 ,HE染色观察病理变化 ,Westernblot检测蛋白酶抗性PrPSc。结果　颅内接种 2 63K后第 2 0天 ,脑组织中即可检测到耐热和耐蛋白酶K的PrPSc的沉积 ,呈散在分布 ;第 40天可见细胞内PrPSc的沉积 ,第 50天脑组织中出现灶性、颗粒状、细胞内PrPSc的沉积 ,累及部位扩大 ,第60 - 70天可见弥漫性呈桑葚状、斑块状沉积物。PrPSc主要沉积于大脑皮质Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层 ,海马锥体细胞层 ,小脑皮质颗粒层。HE染色结果显示大脑皮质海绵样病变在接种后 40天出现 ,随着接种时间的延长而加剧。Westernblot检测显示PrPSc在接种后 40天即可检出 ,PrP总量和PrPSc含量随着接种时间的延长而增加。结论　随着接种时间延长 ,羊瘙痒因子 2 63K感染的金黄仓鼠脑中PrPSc沉积累及的范围、程度扩大 ,IHC检测脑组织中PrPSc的沉积早于临床症状的出现 ,甚至其它检测方法的检出。 展开更多

关键词 羊瘙痒因子263K感染 金黄仓鼠 脑 PrP^sc 动态沉积特点 免疫组化 海绵样病变

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