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牡丹花青素合成基因PqMYB113启动子克隆及上游调控因子筛选
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作者 牛迎安 张玥 罗建让 《福建农业学报》 北大核心 2026年第1期13-22,共10页
【目的】PqMYB113转录因子是促进卵叶牡丹(Paeonia qiui)叶片花青素合成的关键基因,但其上游调控机制尚不明确,挖掘PqMYB113的上游调控因子,为揭示花青苷合成机理和培育牡丹新品种提供理论参考。【方法】以卵叶牡丹叶片为试验材料,通过G... 【目的】PqMYB113转录因子是促进卵叶牡丹(Paeonia qiui)叶片花青素合成的关键基因,但其上游调控机制尚不明确,挖掘PqMYB113的上游调控因子,为揭示花青苷合成机理和培育牡丹新品种提供理论参考。【方法】以卵叶牡丹叶片为试验材料,通过Gateway技术构建酵母单杂交cDNA文库,克隆PqMYB113基因的启动子,在氨基酸缺陷培养基中添加3-氨基-1,2,4-三唑(3-amino-1,2,4-triazole, 3-AT)对启动子进行自激活验证和浓度筛选,利用酵母单杂交技术筛选与该基因启动子结合的上游调控因子。【结果】PqMYB113的自激活抑制浓度为90 mmol·L^(-1) 3-AT,构建的cDNA表达文库库容5.5×10^(6) CFU·mL^(-1),总克隆数为1.1×10^(7) CFU,通过酵母单杂试验筛选到93个PqMYB113的上游调控因子,包含2个转录因子,1个染色质重塑因子互作因子,1个染色质重塑因子,发现其启动子中含有光、胁迫等环境响应元件和脱落酸、茉莉酸、乙烯等激素应答元件,并包含MYB、MYC等多个转录因子的结合位点。【结论】该研究构建了卵叶牡丹酵母单杂cDNA文库,通过对PqMYB113的上游调控因子进行筛选,并预测其启动子上的作用元件,初步解析PqMYB113的上游调控机制,为进一步研究牡丹花青素合成的调控机理和优良牡丹品种育种提供分子基础。 展开更多
关键词 卵叶牡丹 pqmyb113 启动子 CDNA文库 酵母单杂交
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