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基于三种不同抗筛细胞及PCR-SSP法对1例抗-Mia引起的交叉配血不合的检测
1
作者 冯婷婷 黄东联 周志忠 《中国医药指南》 2025年第22期125-127,共3页
目的通过3种不同抗筛细胞分析并鉴定1例因抗-Mia抗体引起的交叉配血不合病例。同时,利用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)血型基因分型技术确认血型,探讨不同抗原谱的抗体筛查细胞对抗体检出率的影响,以提升临床对抗-Mia抗体的... 目的通过3种不同抗筛细胞分析并鉴定1例因抗-Mia抗体引起的交叉配血不合病例。同时,利用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)血型基因分型技术确认血型,探讨不同抗原谱的抗体筛查细胞对抗体检出率的影响,以提升临床对抗-Mia抗体的认知。方法采用微柱凝胶法(MGT)对厦门市第三医院2024年6月13日收治的1例患者的血液标本进行ABO与RHD血型鉴定及不规则抗体筛选。同时,利用基因分型技术检测标本的基因型,以确认是否存在亚型。结合试管法进行交叉配血试验,并选取另外两种不同抗体筛查谱细胞进一步进行检测与鉴定。结果PCR-SSP法检测结果显示患者血型为O型。交叉配血盲筛显示,该病例与两袋红细胞交叉主侧与次侧均相合,但与另一袋红细胞交叉时,主侧结果为阳性(++)。该病例标本与两套含有“Mur”抗原的抗体筛查细胞呈阳性反应,而与另一套筛查细胞则呈阴性反应,抗体鉴定结果为抗-Mia抗体。结论PCR-SSP法对鉴定ABO疑难血型的应用价值显著。在本例中,抗-Mia抗体导致抗体筛查结果呈阴性,但交叉配血不合,提示临床输血中应使用含有在中国人群中分布频率较高的Mur抗原的商品抗体筛查细胞,以确保临床输血的安全性与有效性。 展开更多
关键词 抗-Mia 交叉配血 不合 不规则抗体 聚合酶链反应-序列特异性引物法 血型基因分型
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自身淬灭荧光技术定量检测临床分离的淋病奈瑟菌DNA 被引量：1
2
作者 王箭 罗进勇 +1 位作者 王虹 尹一兵 《中国感染控制杂志》 CAS 2007年第4期224-226,230,共4页
目的 探讨自身淬灭荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测临床分离的淋病奈瑟菌DNA的临床应用价值。方法 以建立的淋病奈瑟菌自身淬灭FQ-PCR方法为基础，对59例疑为淋病奈瑟菌感染患者的标本进行检测，并与分离培养法进行分析比较。结果... 目的 探讨自身淬灭荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测临床分离的淋病奈瑟菌DNA的临床应用价值。方法 以建立的淋病奈瑟菌自身淬灭FQ-PCR方法为基础，对59例疑为淋病奈瑟菌感染患者的标本进行检测，并与分离培养法进行分析比较。结果自身淬灭FQ-PCR标准品浓度为10^2～10^7拷贝／μ时，方法能够保持良好的线性关系，标准曲线为：Y=-0．273X＋10．781，相关系数为0．9895。自身淬灭FQ-PCR阳性检出率为64．41％，高于培养法52．54％（χ^2=5．14，P〈0．05）；两者特异性均为100％。结论 自身淬灭FQ-PCR用于临床分离的淋病奈瑟菌DNA检测，敏感性、特异性均高，对淋病的诊断有较高价值，实现了PCR扩增、荧光探针杂交及检测一体化，简便省时。 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 自身淬灭探针 荧光定量聚合酶链反应 实验室技术与方法
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疑难ABO血型标本的表型与相应等位基因的检测 被引量：5
3
作者 王莹 《中国实验诊断学》 2016年第7期1113-1115,共3页
目的探讨分析疑难ABO血型标本与其等位基因的检测,为临床遇到的疑难ABO血型标本提供可靠的血型鉴定方法。方法选取2013年8月到2014年8月期间在笔者就职医院各科室送检的临床病人血液样本9例,首先按照常规血型检测技术进行ABO血型血清学... 目的探讨分析疑难ABO血型标本与其等位基因的检测,为临床遇到的疑难ABO血型标本提供可靠的血型鉴定方法。方法选取2013年8月到2014年8月期间在笔者就职医院各科室送检的临床病人血液样本9例,首先按照常规血型检测技术进行ABO血型血清学试验,确定ABO正反定型,再采用盐酸胍/蛋白酶K裂解提取法对ETDA抗凝处理后的静脉外周血进行DNA提取,再使用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对9例血样进行ABO血型基因分型检测。结果 9例临床病人血清学表型为:AxB 2例、AB亚1例、A亚B亚1例,Ax 2例,B亚3例,9例患者基因型分别为为:A/B 4例,A/O 2例,B/O 3例,通过PCR-SSP检测所得基因型与血清学表型结果相一致。结论利用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对血清学方法鉴定ABO血型结果为正反不定型的疑难血型标本进行基因型检测,能准确地确定患者的血型抗原,为临床疑难ABO血型患者制定安全有效的用血方案提供保障。 展开更多
关键词 疑难ABO血型标本 等位基因 聚合酶链反应-序列特异性引物法
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基于实时荧光定量PCR技术的当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌含量测定方法的开发及比较 被引量：2
4
作者 严维花 曹虹虹 +5 位作者 郭爽 白德涛 陈杰 毛春芹 李林 陆兔林 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期137-144,共8页
目的:对当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌的变化情况进行定量分析。方法:建立了实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR),对不同产地、不同收集企业、不同储藏时间当归饮片中金黄色葡萄球菌进行定量分析。荧光定量反应体系为SYBR Pr... 目的:对当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌的变化情况进行定量分析。方法:建立了实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR),对不同产地、不同收集企业、不同储藏时间当归饮片中金黄色葡萄球菌进行定量分析。荧光定量反应体系为SYBR Premix Ex Taq Ⅱ10μL,正向引物、反向引物(10μmol·L-1)各0.8μL,模板/基因组DNA 1μL,双蒸水7.4μL。荧光定量反应条件为①扩增曲线:94℃预变性30 s,94℃变性10 s,60℃退火12 s,72℃延伸30 s,循环45次,72℃单点检测信号;②熔解曲线:72℃开始检测,以0.5℃为台阶温度停留15 s采集荧光。根据Real-time PCR的测定结果,分别从生当归、酒当归和土炒当归中选择具有代表性的样品进行平板计数法测定,并与Real-time PCR检测结果进行比较。结果:不同炮制品中金黄色葡萄球菌含量排序为生当归>土炒当归>酒当归;在不同产地的当归饮片中均以甘肃渭源地区样品所含的金黄色葡萄球菌含量为最低;与零售企业相比,生产销售企业的生当归和酒当归中金黄色葡萄球菌含量较低;不同储藏时间对生当归和酒当归中金黄色葡萄球菌含量有一定的影响,随储藏时间的增加,金黄色葡萄球菌的含量增加。对部分代表性样品进行检测时发现,平板计数法检测结果数量级较Real-time PCR低3~4个数量级。结论:建立的Real-time PCR的特异性、灵敏度、准确性以及报告周期均优于平板计数法,可为当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌的快速、准确定量检测提供有效技术手段。 展开更多
关键词 当归饮片 炮制品 金黄色葡萄球菌 实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR) 致病菌 特异性引物 平板计数法
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儿童病毒性脑炎124例临床及病毒病原学分析 被引量：4
5
作者 吕有道 《临床合理用药杂志》 2013年第7期49-50,共2页
目的分析不同年龄段病毒性脑炎患儿的临床表现及脑脊液(CSF)病毒病原学特点。方法选取124例病毒性脑炎患儿,据年龄分为A组(<3岁)52例、B组(3～6岁)26例、C组(>6岁)46例。分析不同年龄段患儿的临床表现特点;应用多重引物聚合酶链... 目的分析不同年龄段病毒性脑炎患儿的临床表现及脑脊液(CSF)病毒病原学特点。方法选取124例病毒性脑炎患儿,据年龄分为A组(<3岁)52例、B组(3～6岁)26例、C组(>6岁)46例。分析不同年龄段患儿的临床表现特点;应用多重引物聚合酶链式反应(PCR)方法对CSF进行病毒病原学检测,包括肠道病毒(EV)和疱疹病毒(HSV)I、II型及EB病毒(EBV)、巨细胞病毒(CMV),分析各病毒的季节与年龄分布的特点。结果 3组患儿均有发热、嗜睡、烦躁、淡漠等症状;A、B组伴有惊厥48例(61.5%),C组伴头痛44例(95.7%)。CSF病毒病原学检测阳性者78例(62.9%),其中以EV为主[36例(46.2%)],其次为HSV-Ⅱ型[18例(23.1%)],HSV-Ⅰ型未检出,CMV及EBV主要分布于4～9月;B组患儿病原检出率最高(76.9%)。结论 (1)除发热、嗜睡外不同年龄段病毒性脑炎患儿伴随症状不同;(2)应用多重引物PCR方法早期检测CSF病毒病原阳性率较高。 展开更多
关键词 脑炎 病毒性 多重引物聚合酶链式反应法 病毒病原学
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MLCT、PCR-SSP检测HLA-B_(27)的比较 被引量：2
6
作者 申卫东 周燕 +2 位作者 莫秋红 李恒聪 何保仁 《广西医学》 CAS 2007年第12期1856-1857,共2页
目的比较强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27检测方法的特点。方法采用最常见的微量淋巴细胞毒试验(MLCT)、引物特异性聚合酶链反应(PCR-SSP),对30例AS患者及200例无偿献血者的HLA-B27抗原进行检测。结果两种方法之间的HLA-B27检出阳性率差异... 目的比较强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27检测方法的特点。方法采用最常见的微量淋巴细胞毒试验(MLCT)、引物特异性聚合酶链反应(PCR-SSP),对30例AS患者及200例无偿献血者的HLA-B27抗原进行检测。结果两种方法之间的HLA-B27检出阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结果两种检测方法均准确可靠,且各具特点。HLA-B27检测对AS的早期诊断及鉴别诊断有重要意义。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 HLA-B27 微量淋巴毒试验 引物特异性聚合酶链反应
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一种适用于批量筛选和鉴定拟南芥突变体的快速DNA提取方法 被引量：6
7
作者 张小明 勾雪娇 +3 位作者 梁鹏 林华明 赵晋洁 胡向阳 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期909-915,共7页
DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南... DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南芥叶片,以少量试剂,通过简单的研磨、离心、沉降和干燥等步骤便能快速制备用于PCR检测的DNA模板.采用本方法个人提取单个样品DNA仅需15 min左右,每小时可提取48个DNA样品.研究采用该方法提取了一批待鉴定拟南芥突变体的DNA样品,利用三引物法对其进行PCR检测,结果表明DNA样品浓度高,DNA扩增成功率高达100%,且目的条带清晰,说明该方法在拟南芥突变体的筛选和鉴定上是适用且高效的,可广泛应用于实验室突变体库的建立. 展开更多
关键词 拟南芥 DNA提取 SDS抽提法 聚合酶链式反应 突变体鉴定 三引物法
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