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Pokemon基因siRNA逆转录病毒重组表达质粒的构建及鉴定 被引量：11
1
作者 邓一静 倪兵 +3 位作者 姜曼 杨玓 李凡 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期203-205,209,共4页
目的针对Pokemon基因对于许多肿瘤抑制基因和原癌基因上游的作用,将其作为RNAi的靶基因,构建表达这些siRNA的重组逆转录病毒表达质粒。方法利用Ambion公司的网上设计工具设计针对Pokemon肿瘤基因的4条siRNA序列,并化学合成4对互补的siRN... 目的针对Pokemon基因对于许多肿瘤抑制基因和原癌基因上游的作用,将其作为RNAi的靶基因,构建表达这些siRNA的重组逆转录病毒表达质粒。方法利用Ambion公司的网上设计工具设计针对Pokemon肿瘤基因的4条siRNA序列,并化学合成4对互补的siRNA的DNA片段。将此双链DNA片段克隆到pSilencer 5.1-H1 Retro vector的BamHⅠ和HindⅢ位点,构建其逆转录病毒重组表达质粒。结果表达人类Pokemon基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒构建成功。结论我们成功构建了人类Pokemon基因的重组逆转录病毒重组表达质粒,为下一步Pokemon基因的RNA干扰提供了实验依据,并且开辟了肿瘤基因治疗的新思路。 展开更多
关键词 pokemon基因 重组逆转录病毒 RNA干扰
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非小细胞肺癌中pokemon表达与p14^(ARF)、bcl-2的相关性及对预后的影响 被引量：6
2
作者 赵智宏 王胜发 +2 位作者 丛德刚 禹亮 王巨 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期121-124,共4页
目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中pokemon表达和p14ARF、bcl-2表达的关系及其对NSCLC临床病理特征和预后的判定价值。方法:应用SP免疫组织化学方法检测pokemon和p14ARF、bcl-2三种蛋白在62例NSCLC肿瘤组... 目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中pokemon表达和p14ARF、bcl-2表达的关系及其对NSCLC临床病理特征和预后的判定价值。方法:应用SP免疫组织化学方法检测pokemon和p14ARF、bcl-2三种蛋白在62例NSCLC肿瘤组织及20例癌旁正常组织中的表达,分析它们与NSCLC病理学特征的关系,以及pokemon与p14ARF、bcl-2的相关性,并结合随访资料观察上述蛋白表达对NSCLC长期预后的影响。结果:正常肺组织中未见pokemon蛋白表达,p14ARF和bcl-2蛋白阳性表达率分别为95.0%和15.0%;在NSCLC组织中pokemon、p14ARF和bcl-2阳性表达率分别为72.6%、66.1%和53.2%。Pokemon表达与p14ARF表达呈负相关(r=-0.287,P<0.05),与bcl-2表达呈正相关(r=0.293,P<0.05)。Pokemon和p14ARF的表达与TNM分期相关(P<0.05),bcl-2表达与病理分型相关(P<0.05)。Pokemon与bcl-2表达阳性组的5年生存率分别为10.95%和13.74%,显著低于阴性组(P<0.05);p14ARF表达阳性组的5年生存率为21.68%,显著高于阴性组(P<0.05)。结论:NSCLC组织中存在pokemon和p14ARF、bcl-2的表达,pokemon表达与p14ARF表达呈负相关、与bcl-2表达呈正相关,它们对NSCLC的预后评估有一定的临床意义。 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 基因表达 pokemon P14^ARF BCL-2 免疫组织化学 预后
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Pokemon在人贲门癌中的表达及其意义(英文) 被引量：5
3
作者 曹国春 王会 +2 位作者 黄亚玲 王庆玲 侯亚义 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期108-113,共6页
Pokemon基因是一种转录抑制因子,它在癌症发生发展过程中起重要作用.目前已发现Pokemon在人淋巴瘤、乳胶癌、肺癌、结肠癌、前列癌以及膀胱癌中高表达.但是在贲门癌中表达水平未见报道.本研究采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和实时定量... Pokemon基因是一种转录抑制因子,它在癌症发生发展过程中起重要作用.目前已发现Pokemon在人淋巴瘤、乳胶癌、肺癌、结肠癌、前列癌以及膀胱癌中高表达.但是在贲门癌中表达水平未见报道.本研究采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和实时定量多聚酶链反应(real-timePCR)方法检测了56例贲门癌(EGJ)和10例正常人贲门组织标本的Pokemon基因mRNA表达水平.结果显示所有组织标本均表达Pokemon.但是肿瘤组织及其配对的远离肿瘤的瘤旁组织Pokemon基因的mRNA表达水平显著高于正常人的贲门组织(P=0.0002,P=0.0069).结果显示Pokemon基因可能对贲门癌的发生发展及致癌性转化有重要作用. 展开更多
关键词 pokemon 贲门癌 RT-PCR REAL-TIME PCR
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Pokemon、P14ARF蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量：5
4
作者 张健 王磊 +3 位作者 赵智宏 王巨 刘鑫远 禹亮 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第21期4050-4053,共4页
目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell cacinoma,ESCC)组织中Pokemon和P14ARF表达的关系及其对ESCC临床病理特征和预后的判定价值。方法:应用SP免疫组织化学方法检测Pokemon和P14ARF二种蛋白在96例ESCC组织及20例癌旁正常组织中... 目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell cacinoma,ESCC)组织中Pokemon和P14ARF表达的关系及其对ESCC临床病理特征和预后的判定价值。方法:应用SP免疫组织化学方法检测Pokemon和P14ARF二种蛋白在96例ESCC组织及20例癌旁正常组织中的表达,分析它们与ESCC病理学特征的关系,以及Pokemon和P14ARF的相关性,并结合随访资料观察上述蛋白表达对ESCC长期预后的影响。结果:癌旁正常组织中未见Pokemon蛋白表达,P14ARF蛋白阳性表达率为90.0%;在ESCC组织中Pokemon和P14ARF阳性表达率分别为75.0%和30.2%。Pokemon表达与P14ARF表达呈负相关(r=-0.458,P=0.000)。Pokemon和P14ARF的表达与TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05)。Pokemon表达阳性组的5年生存率分别为20.8%,显著低于阴性组(P=0.004);P14ARF表达阳性组的5年生存率为41.4%,显著高于阴性组(P=0.011)。结论:Pokemon蛋白的高表达和P14ARF蛋白低表达可能与ESCC的发生、发展关系密切,它们对于ESCC预后评估有一定的临床意义。 展开更多
关键词 鳞癌 食管肿瘤 pokemon P14ARF 预后
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Pokemon基因表达与胃癌耐药性的关系 被引量：5
5
作者 贾楠 李勇 +3 位作者 范立侨 檀碧波 刘羽 张志栋 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1034-1039,共6页
目的探讨pokemon基因表达与胃癌细胞药敏性及耐药基因的关系。方法取60例胃癌组织和癌旁组织石蜡标本,采用免疫组化技术检测组织中pokemon蛋白及耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)、生存素(surviv... 目的探讨pokemon基因表达与胃癌细胞药敏性及耐药基因的关系。方法取60例胃癌组织和癌旁组织石蜡标本,采用免疫组化技术检测组织中pokemon蛋白及耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)、生存素(survivin)的表达,并分析pokemon蛋白与其他4种蛋白的关系。采用磺酰罗丹明B(SRB)蛋白染色法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、奥沙利铂(L-OHP)对胃癌细胞株SGC7901、胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR、胃上皮细胞株GES-1的抑制作用;qPCR及蛋白质印迹法检测上述3种细胞株中pokemon和耐药基因的表达。合成针对pokemon的siRNA并转染SGC7901/ADR细胞,检测转染前后SGC7901/ADR细胞的化疗药敏性及耐药基因的变化。结果胃癌组织中pokemon、P-gp、MRP1、LRP、survivin蛋白的阳性表达率均高于癌旁组织(P<0.05);pokemon蛋白表达与P-gp、survivin蛋白表达间存在正相关关系(r=0.385 2,P=0.002;r=0.342 4,P=0.007)。Pokemon、P-gp、MRP1、survivin蛋白在SGC7901/ADR细胞株中的表达高于细胞株SGC7901及GES-1;SGC7901/ADR细胞株的耐药性最强,SGC7901次之,GES-1最弱(P<0.01)。Pokemon-siRNA转染SGC7901/ADR细胞后细胞中pokemon mRNA的表达明显受到抑制;转染后化疗药物对细胞的抑制能力增强,P-gp、survivin表达减弱(P<0.05)。结论 Pokemon与P-gp、survivin通过相互调控而促进胃癌耐药性的形成。Pokemon可能成为胃癌靶向治疗的候选基因。 展开更多
关键词 胃肿瘤 pokemon 药物敏感性 多药耐药相关蛋白质类
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肾癌组织Pokemon基因表达及其生物学意义的研究 被引量：7
6
作者 侯列军 郑军华 +2 位作者 耿江 顾闻宇 王波 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期836-839,共4页
目的:探讨Pokemon基因在肾细胞癌组织中的表达及其生物学意义。方法:收集47例肾癌手术切除的癌、癌旁及邻近正常组织,用逆转录实时聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法分别从核酸及蛋白水平检测标本中Pokemon基因的表达,并结合... 目的:探讨Pokemon基因在肾细胞癌组织中的表达及其生物学意义。方法:收集47例肾癌手术切除的癌、癌旁及邻近正常组织,用逆转录实时聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法分别从核酸及蛋白水平检测标本中Pokemon基因的表达,并结合性别、年龄、肿瘤大小、病理分级和TNM分期等临床资料进行统计分析,对mRNA和蛋白表达的水平进行相关性研究。结果:Real-time PCR及蛋白质印迹法均检测出Pokemon在肾癌、癌旁及正常对照组织中的表达,差异有统计学意义,P<0.05。肾癌组织中,Pokemon的表达与肿瘤病理分级有关,而与患者的性别、年龄、肿瘤最大直径、TNM及病理类型无明显相关性。肾组织中,Pokemon的mRNA与蛋白的表达呈正相关,r=0.494,P<0.05。结论:Pokemon表达和肾癌的发病及恶性程度有关,有望成为肾癌的预后指标和肾癌靶向治疗的有效靶点。 展开更多
关键词 癌 肾细胞 肾肿瘤 基因 pokemon印迹法 蛋白质
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Pokemon在鼻咽癌中的表达及临床意义 被引量：12
7
作者 高伟 隋军 +2 位作者 李晓江 马静 任艳鑫 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第1期37-41,共5页
目的:研究鼻咽癌组织中原癌基因Pokemon的表达及其与鼻咽癌临床指标间的关系。方法:利用免疫组化SP法分析86例鼻咽癌和30例鼻咽慢性炎中Pokemon的表达,同时利用半定量RT-PCR法分析56例鼻咽癌与30例鼻咽部慢性炎症组织中Pokemon mRNA表... 目的:研究鼻咽癌组织中原癌基因Pokemon的表达及其与鼻咽癌临床指标间的关系。方法:利用免疫组化SP法分析86例鼻咽癌和30例鼻咽慢性炎中Pokemon的表达,同时利用半定量RT-PCR法分析56例鼻咽癌与30例鼻咽部慢性炎症组织中Pokemon mRNA表达情况。结果:Pokemon在86例鼻咽癌组中高表达有67例(77.9%),明显高于在30例鼻咽慢性炎组中表达的7例(23.3%),且两者差异有统计学意义(P<0.05)。Pokemon的表达与鼻咽癌临床病理分期和淋巴结转移有相关性(P<0.05),Pokemon表达与患者性别、年龄、分化程度无统计学相关性(P>0.05)。RT-PCR显示鼻咽癌组织中Pokemon基因mRNA呈阳性表达(阳性率91.1%),而鼻咽部慢性炎症组织中无表达,两组间相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移组mRNA相对表达量高于无淋巴转移组(P<0.05),对于不同TNM分期的患者中Pokemon mRNA相对表达量,早期患者(Ⅰ期+Ⅱ期)的阳性表达率为89.7%,明显低于晚期患者(Ⅲ期+Ⅳ期)阳性率94.1%,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Pokemon在NPC的发生、发展与转移中扮演重要角色,可能成为鼻咽癌早期诊断的分子指标及分子靶向治疗的新靶点。 展开更多
关键词 原癌基因 pokemon 鼻咽肿瘤
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Pokemon在卵巢癌中的表达及临床意义 被引量：8
8
作者 张纪妍 隋丽华 +1 位作者 陈杰 贾长茹 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第2期149-151,共3页
目的探讨Pokemon蛋白在人卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化法检测50例卵巢癌组织中Pokemon蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征(年龄、临床分期、病理分级和淋巴结转移)的关系。选取同期20例卵巢... 目的探讨Pokemon蛋白在人卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化法检测50例卵巢癌组织中Pokemon蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征(年龄、临床分期、病理分级和淋巴结转移)的关系。选取同期20例卵巢交界性肿瘤组织和20例正常卵巢组织作对照。结果 Pokemon的阳性表达定位于细胞核和胞质,其在卵巢癌的阳性表达率高于正常卵巢和卵巢交界性肿瘤(P<0.05),而卵巢交界性肿瘤的亦高于正常卵巢(P<0.05);Pokemon阳性表达在不同临床分期、病理分级及淋巴结转移中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Pokemon在卵巢癌组织中高表达,并与卵巢癌组织分化、临床分期及淋巴结转移有关,对卵巢癌的发生发展有重要作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 pokemon 临床病理特征 临床分期 病理分级
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靶向Pokemon基因shRNA重组质粒的构建及其对HepG2细胞生长的影响 被引量：6
9
作者 王波 张全乐 +3 位作者 晏维 夏丽敏 刘梅 田德安 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第30期3128-3133,共6页
目的:观察携带shRNA的重组质粒对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:设计3对针对Pokemon基因不同位点的shRNA片段的真核表达载体,脂质体介导转染肝癌细胞株HepG2细胞.RT-PCR及Western blot检测转染前后Pokemon m... 目的:观察携带shRNA的重组质粒对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:设计3对针对Pokemon基因不同位点的shRNA片段的真核表达载体,脂质体介导转染肝癌细胞株HepG2细胞.RT-PCR及Western blot检测转染前后Pokemon mRNA及蛋白质的表达,MTT和流式细胞仪分析转染后细胞增殖及凋亡的变化,RT-PCR检测其可能的下游因子β-catenin及H-ras的表达.结果:成功构建含shRNA片段的重组质粒,依次命名为pshRNA1、2、3.转染HepG2细胞后,Pokemon基因的mRNA及蛋白质表达水平明显下调,以pshRNA2最强,抑制率分别为75.2%(RNA水平)和72.61%(蛋白质水平).MTT显示pshRNA2可明显抑制细胞增殖;流式细胞仪测定转染后细胞凋亡增加;RT-PCR显示下游因子H-ras的表达明显降低(P<0.05),而β-catenin的表达没有变化(P>0.05).结论:采用RNAi技术可以特异性阻断Pokemon基因的表达;Pokemon基因有促进肝癌细胞株增殖及抑制其凋亡的作用,该效应可能与下调其下游因子H-ras的表达有关. 展开更多
关键词 pokemon 短发夹状RNA 细胞增殖 细胞凋亡 H-RAS
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Pokemon基因在肝癌细胞中的表达及意义 被引量：6
10
作者 赵心恺 宁巧明 +1 位作者 孙晓宁 田德安 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期137-139,共3页
目的探讨Pokemon在肝癌细胞中的表达及意义,进一步阐明肝细胞癌发生发展过程中的分子机制。方法选择肝癌细胞HepG2、SMMC7721和人胚胎肝细胞LO2细胞株,应用Western blot法检测Pokemon在不同细胞中的表达;应用基因沉默方法抑制Pokemon在... 目的探讨Pokemon在肝癌细胞中的表达及意义,进一步阐明肝细胞癌发生发展过程中的分子机制。方法选择肝癌细胞HepG2、SMMC7721和人胚胎肝细胞LO2细胞株,应用Western blot法检测Pokemon在不同细胞中的表达;应用基因沉默方法抑制Pokemon在肝癌细胞中的表达,应用流式细胞仪观察肝癌细胞的凋亡情况。结果 Pokemon在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达明显高于人胚胎肝细胞LO2;siRNA抑制Pokemon的表达后,肝癌细胞凋亡明显增加。结论原癌基因Poke-mon在肝癌细胞中表达明显增高,Pokemon可能在肝癌的发生、发展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 pokemon基因 肝细胞癌 基因沉默
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人肝癌组织中原癌基因Pokemon的表达及其临床意义 被引量：7
11
作者 王波 田德安 +4 位作者 张全乐 夏丽敏 晏维 王颖 刘梅 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第2期151-153,共3页
目的探讨肝癌组织中Pokemon基因的表达,并分析其与肿瘤的大小、分化程度、TNM分期等临床资料的相关性。方法收集30例原发性肝癌患者的肿瘤及其癌旁组织,用逆转录酶聚合链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)的方法分别从核酸及蛋白水... 目的探讨肝癌组织中Pokemon基因的表达,并分析其与肿瘤的大小、分化程度、TNM分期等临床资料的相关性。方法收集30例原发性肝癌患者的肿瘤及其癌旁组织,用逆转录酶聚合链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)的方法分别从核酸及蛋白水平检测标本中Pokemon基因的表达,并对其与患者的性别、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤的TNM分期等临床资料进行统计分析。结果RT-PCR检测肝癌和癌旁组织mRNA表达的相对强度分别为0.71±0.03、0.17±0.01。Western blot检测蛋白水平的相对表达强度分别为10.64±0.92、1.06±0.18,两者比较有统计学意义(P<0.05),肝癌组织中Pokemon的表达与肿瘤的大小有关,而与患者的年龄、肿瘤的分化程度、淋巴结转移及肿瘤TNM分期等无关。结论Pokemon的表达上调在肝癌的增殖中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 pokemon 肝癌 原癌基因
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POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的信号调控 被引量：4
12
作者 赵心恺 宁巧明 +1 位作者 孙晓宁 田德安 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期32-37,共6页
目的:旨在探讨原癌基因POKemon和核因子-κB(nuclearfactor-kappa B,NF-κB)p65在肝癌细胞中的信号调控作用。方法:采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法分别检测POKemon、NF-κB p65 m... 目的:旨在探讨原癌基因POKemon和核因子-κB(nuclearfactor-kappa B,NF-κB)p65在肝癌细胞中的信号调控作用。方法:采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法分别检测POKemon、NF-κB p65 mRNA和蛋白在肝癌细胞株HepG2和SMMC7721及人胚胎肝细胞LO2中的表达情况;随后应用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)法依次分别抑制POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的表达,观察二者在肝癌细胞中的变化,并应用FCM法检测对肝癌细胞凋亡的影响。结果:POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞HepG2和SMMC7721中的表达量明显高于人胚胎肝细胞LO2;特异性针对POKemon基因的siRNA抑制POKemon的表达后,NF-κB p65在HepG2和SMMC7721细胞中的表达量也明显下降,转染前后分别为2.12±0.14vs1.37±0.11和2.08±0.16vs1.35±0.13,差异有统计学意义(P<0.05),且肝癌细胞凋亡明显增加分别为(5.07±0.46)%vs(39.65±3.75)%和(5.71±0.83)%vs(33.21±3.66)%,差异有统计学意义(P<0.05);特异性针对NF-κB基因的siRNA抑制NF-κBp65的表达后,POKemon在HepG2和SMMC7721细胞中的表达则无明显变化,其表达量转染前后分别为1.86±0.12vs1.90±0.13和1.91±0.11vs1.85±0.11,差异无统计学意义(P>0.05),但明显提高HepG2和SMMC7721细胞的凋亡率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:原癌基因POKemon可通过调控NF-κB p65的表达而阻遏肿瘤细胞凋亡,促进肝癌的发生、发展。 展开更多
关键词 肝肿瘤 pokemon 核因子-ΚB RNA干扰 细胞凋亡
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Pokemon蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：6
13
作者 赵智宏 王胜发 张铁娃 《中国肺癌杂志》 CAS 2007年第6期491-494,共4页
背景与目的原癌基因Pokemon是ARF特异性转录抑制剂,通过ARF-P53途径调节细胞生长和分化。Pokemon是多种肿瘤抑制基因和原癌基因的上游基因,因此有望成为重要的肿瘤监视靶点。本研究旨在探讨Pokemon基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的临... 背景与目的原癌基因Pokemon是ARF特异性转录抑制剂,通过ARF-P53途径调节细胞生长和分化。Pokemon是多种肿瘤抑制基因和原癌基因的上游基因,因此有望成为重要的肿瘤监视靶点。本研究旨在探讨Pokemon基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的临床意义及其对预后的影响。方法应用SP免疫组化方法检测Pokemon蛋白在92例NSCLC肿瘤组织及20例癌旁组织中的表达,分析其与NSCLC临床病理学特征及预后的关系。结果Pokemon在癌旁组织中不表达,92例肺癌组织中66例呈阳性表达(占71.7%)。Pokemon表达与肺癌患者TNM分期有密切关系(P=0.011)。Pokemon阴性表达者生存率显著高于Pokemon阳性表达者(P=0.0015)。Pokemon表达是影响患者预后的独立因素。结论NSCLC中存在Pokemon的表达,它有望作为NSCLC新的诊断标志。Pokemon高表达可能预示NSCLC患者预后较差。 展开更多
关键词 肺肿瘤 pokemon 免疫组化 预后
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siRNA表达载体对SW480细胞原癌基因Pokemon的抑制 被引量：6
14
作者 郭睿 李喜霞 解军 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期7-13,共7页
观察siRNA表达载体对SW480细胞中Pokemon原癌基因的抑制效应,为进一步研究该基因的功能奠定基础。构建针对Pokemon基因的RNAi质粒表达载体,脂质体法转染人结直肠癌SW480细胞系,观察转染效率及细胞表型变化。稳定转染后,实时荧光定量PCR... 观察siRNA表达载体对SW480细胞中Pokemon原癌基因的抑制效应,为进一步研究该基因的功能奠定基础。构建针对Pokemon基因的RNAi质粒表达载体,脂质体法转染人结直肠癌SW480细胞系,观察转染效率及细胞表型变化。稳定转染后,实时荧光定量PCR和Western blot检测SW480细胞中Pokemon mRNA及蛋白质的表达情况;MTT法检测siRNA对SW480细胞恶性增殖的影响;流式细胞仪分析细胞凋亡改变。镜下观察阳性转染率约36%,转染表达载体后细胞形态发生了显著变化;Pokemon mRNA及蛋白质的表达受到明显抑制:与阴性对照组相比,表达质粒产生的siRNA对Pokemon mRNA的抑制率在转染后24h和48h分别为34.2%和67.7%;对蛋白的抑制率在48h和72h分别为48.3%和73.6%。MTT法检测细胞生长曲线表明Pokemon抑制可使SW480细胞生长速度明显减慢;流式细胞仪分析显示转染Pokemon siRNA表达质粒后SW480细胞凋亡增加。构建的RNAi表达载体可以有效抑制SW480细胞中Pokemon基因的表达,并对SW480细胞的生长具有明显抑制及诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 pokemon SW480 基因表达
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原癌基因pokemon mRNA及其蛋白在非小细胞肺癌中的表达和意义 被引量：5
15
作者 李喜霞 郎旭宇 +2 位作者 乔从进 崔慧林 郭睿 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期89-93,共5页
目的探讨原癌基因PokemonmRNA及其编码蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC发生的关系。方法应用RT-PCR和原位杂交技术检测pokemon mRNA在NSCLC组织和癌旁正常组织中的相对表达量及细胞定位;... 目的探讨原癌基因PokemonmRNA及其编码蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC发生的关系。方法应用RT-PCR和原位杂交技术检测pokemon mRNA在NSCLC组织和癌旁正常组织中的相对表达量及细胞定位;利用免疫组织化学染色分析NSCLC组织和癌旁正常组织标本中Pokemon蛋白的表达。结果半定量RT-PCR显示,pokemon mRNA在NSCLC组织中高表达(0.916±0.424),在对应的癌旁正常组织中低表达(0.408±0.307),两组之间具有显著的统计学差异(P<0.05);原位杂交结果显示,pokemon转录本在NSCLC细胞胞质中呈阳性表达,而癌旁正常组织不表达或低表达;免疫组织化学染色分析结果显示,NSCLC组织和对应的癌旁正常组织中Pokemon蛋白阳性表达率分别为87.5%(35/40)和15%(6/40),两组之间具有显著的统计学差异(X2=42.076,P<0.005)。Pokemon蛋白主要定位在癌细胞胞质内,少量定位在胞核中,呈颗粒状分布。结论原癌基因poke-mon mRNA及其编码蛋白在NSCLC中的高表达很可能与NSCLC的发生密切相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 pokemon 半定量RT-PCR 免疫组织化学
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Pokemon蛋白在乳腺癌中的表达及意义 被引量：23
16
作者 崔明 徐海 杨彦 《临床外科杂志》 2007年第6期399-401,共3页
目的探讨乳腺癌中Pokemon(POK erythroid ontogenic factor)蛋白的表达及其意义。方法采用免疫组织化学SP法检测52例乳腺癌、20例癌旁正常组织、20例乳腺增生组织Poke-mon蛋白的表达,并对其与临床病理特征的关系进行分析。结果①Pokemo... 目的探讨乳腺癌中Pokemon(POK erythroid ontogenic factor)蛋白的表达及其意义。方法采用免疫组织化学SP法检测52例乳腺癌、20例癌旁正常组织、20例乳腺增生组织Poke-mon蛋白的表达,并对其与临床病理特征的关系进行分析。结果①Pokemon蛋白表达于乳腺癌细胞核和细胞质。乳腺癌细胞核Pokemon蛋白高表达率为71.2%(37/52),显著高于癌旁正常乳腺组织40%(8/20)、乳腺增生组织25%(5/20),P<0.05。②乳腺癌组织中有腋窝淋巴结转移组细胞核Pokemon蛋白高表达率(82.8%)显著高于无腋窝淋巴结转移组(56.5%),P<0.05。结论Pokemon蛋白高表达可能在乳腺癌发生中起重要作用且与腋窝淋巴结转移相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 pokemon蛋白 免疫组织化学
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Pokemon mRNA在乳腺癌中的表达及与c-myc相关性分析 被引量：4
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作者 付朝江 崔明 +1 位作者 徐衍 王应霞 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第1期33-36,共4页
目的:探讨人乳腺癌中原癌基因c-myc和Pokemon mRNA在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌发生、转移的相关性。方法:收集浸润性导管癌组织、癌旁乳腺组织、正常乳腺组织各45、20和20例,用原位杂交法检测Pokemon mRNA表达,并用免疫组织化学... 目的:探讨人乳腺癌中原癌基因c-myc和Pokemon mRNA在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌发生、转移的相关性。方法:收集浸润性导管癌组织、癌旁乳腺组织、正常乳腺组织各45、20和20例,用原位杂交法检测Pokemon mRNA表达,并用免疫组织化学法检测浸润性导管癌c-myc表达,并进行统计分析。结果:乳腺癌细胞质Pokemon mRNA的表达率为71.2%(37/45),显著高于癌旁正常乳腺组织40%(8/20)、乳腺增生组织25%(5/20),三者有显著性差异(P<0.05),细胞质c-myc阳性率分别为86.67%、60.0%、50.0%,三者有显著性差异(P<0.05)。细胞质Pokemon mRNA表达与乳腺癌淋巴结转移、组织学分级相关(P<0.05)。细胞质c-myc表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移相关(P<0.05)。45例乳腺癌细胞质Pokemon mRNA与c-myc表达呈正相关(γ=0.585,P<0.05)。结论:Pokemon mRNA的表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,c-myc的过度表达可能与乳腺癌Pokemon基因转录激活有关。 展开更多
关键词 pokemon MRNA c—myc蛋白 乳腺癌 原位杂交 免疫组织化学
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miRNA干扰Pokemon基因对大肠癌细胞增殖的影响及机制 被引量：3
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作者 白玉贤 刘磊 +2 位作者 隋红 魏孝礼 苑珩珩 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2011年第11期970-973,共4页
目的探索miRNA干扰Pokemon基因后对大肠癌细胞系LoVo增殖和细胞周期的作用。方法构建靶向Pokemon基因的miRNA重组质粒并转染LoVo细胞,设重组质粒组、阴性对照质粒组和脂质体空白对照组,运用实时荧光定量PCR(QPCR)检测干扰后LoVo细胞中Po... 目的探索miRNA干扰Pokemon基因后对大肠癌细胞系LoVo增殖和细胞周期的作用。方法构建靶向Pokemon基因的miRNA重组质粒并转染LoVo细胞,设重组质粒组、阴性对照质粒组和脂质体空白对照组,运用实时荧光定量PCR(QPCR)检测干扰后LoVo细胞中Pokemon mRNA的表达,MTT法和流式细胞仪技术分析转染后细胞的增殖和周期变化。结果成功构建含miRNA片段的重组质粒,依次命名为mR22-1、mR22-2、mR22-3和mR22-4;分别转染LoVo细胞后,PokemonmRNA表达水平明显下调,以mR22-1最强,干扰效率为50%。MTT检测显示,mR22-1可明显抑制细胞增殖,24、48和72h的抑制率分别为(23±2.1)%、(47±3.0)%和(69±2.5)%,呈时间依赖性;流式细胞仪测定转染后LoVo细胞周期阻滞在G1期。结论采用RNAi技术可以特异性阻断Pokemon基因的表达;Pokemon基因有促进大肠癌细胞株LoVo增殖的作用。 展开更多
关键词 pokemon基因 大肠癌 RNA干扰
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晚期非小细胞肺癌患者血清Pokemon表达水平及其在评估化疗效果和预后中的价值 被引量：3
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作者 张全乐 邢喜芝 +4 位作者 李静 邢雅娟 刘三香 张立英 刘刚 《广西医学》 CAS 2017年第12期1801-1804,共4页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中Pokemon的表达水平及其评估化疗效果、预后的价值。方法选取61例晚期NSCLC患者(NSCLC组)和60例健康人(对照组)为研究对象,采用酶联免疫吸附试验检测两组血清中Pokemon的表达水平。比较两组间Poke... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中Pokemon的表达水平及其评估化疗效果、预后的价值。方法选取61例晚期NSCLC患者(NSCLC组)和60例健康人(对照组)为研究对象,采用酶联免疫吸附试验检测两组血清中Pokemon的表达水平。比较两组间Pokemon表达差异,分析影响NSCLC患者Pokemon表达的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估Pokemon预测预后的最佳临界值;对比不同Pokemon表达水平NSCLC患者化疗的疗效,并分析影响NSCLC患者预后的因素。结果 NSCLC组血清中Pokemon表达水平高于对照组(P<0.05)。多因素分析结果显示,肿瘤大小、TNM分期是NSCLC患者Pokemon表达水平的影响因素(P<0.05)。NSCLC患者治疗前Pokemon预测预后的ROC曲线下面积为0.831,最佳临界值为135.09 ng/ml,治疗前Pokemon<135.09 ng/ml组患者疗效优于Pokemon≥135.09 ng/ml组(P<0.05)。生存分析结果显示,有淋巴结转移、治疗前Pokemon表达水平高是影响NSCLC患者生存情况的独立危险因素(P<0.05)。结论晚期NSCLC患者血清Pokemon表达水平明显升高,其可用于NSCLC的化疗效果和预后评估。 展开更多
关键词 pokemon 非小细胞肺癌 晚期 化疗 预后
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Pokemon在小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：2
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作者 赵智宏 王胜发 +4 位作者 姜久仰 高大登 王巨 常浩 曲俊峰 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第36期7147-7150,7063,共5页
目的:检测Pokemon在小细胞肺癌(SCLC)中的表达情况,并探讨其在SCLC发生、发展中的作用及临床意义。方法:应用SP免疫组化方法检测Pokemon在52例SCLC肿瘤组织及20例病灶旁正常组织中的表达。结果:Pokemon在正常肺组织中不表达,52例SCLC组... 目的:检测Pokemon在小细胞肺癌(SCLC)中的表达情况,并探讨其在SCLC发生、发展中的作用及临床意义。方法:应用SP免疫组化方法检测Pokemon在52例SCLC肿瘤组织及20例病灶旁正常组织中的表达。结果:Pokemon在正常肺组织中不表达,52例SCLC组织中,35例呈阳性表达,占67.3%。Pokemon的表达与SCLC患者的性别、年龄、吸烟、淋巴结转移情况均无关(P>0.05),而与TNM分期显著相关(P<0.05)。Pokemon阳性表达者生存期明显短于阴性表达者,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示TNM分期、Pokemon的表达与SCLC患者的预后相关;多因素分析结果显示仅Pokemon的表达与SCLC患者的预后显著相关(P=0.013)。结论:Pokemon在SCLC组织中呈高表达,预示SCLC患者的预后较差,Pokemon表达可能作为SCLC的独立预后预测因素。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 pokemon 表达 预后
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