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牡丹PoLEC1基因的克隆及其功能
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作者 常艳婷 胡陶 +4 位作者 张雪 江泽慧 马艳军 邓雅云 张闻博 《林业科学》 北大核心 2025年第9期138-145,共8页
【目的】LEAFYCOTYLEDON1(LEC1)基因是植物胚胎发育中特定表达的转录因子,本研究旨在探索该基因在调控牡丹高频体细胞胚发生的分子机制,为构建牡丹高效、稳定的优质再生体系和遗传转化体系提供理论依据。【方法】基于牡丹‘凤丹’基因... 【目的】LEAFYCOTYLEDON1(LEC1)基因是植物胚胎发育中特定表达的转录因子,本研究旨在探索该基因在调控牡丹高频体细胞胚发生的分子机制,为构建牡丹高效、稳定的优质再生体系和遗传转化体系提供理论依据。【方法】基于牡丹‘凤丹’基因组和实验室前期的转录组数据,从‘凤丹白’中克隆获得牡丹PoLEC1基因,并对其编码的蛋白进行结构和系统进化分析;通过实时定量PCR技术分析PoLEC1基因在牡丹不同组织和种胚不同发育时期中的表达特征;构建PoLEC1基因的过表达载体,采用花序浸染法进行拟南芥遗传转化,获得T3代转基因植株,观察转基因植株表型。【结果】PoLEC1包含CBFD_NFYB_HMF结构域,系统进化分析表明,PoLEC1与葡萄和可可的亲缘关系较近,PoLEC1基因在胚胎发育早期和晚期的表达量较高,在牡丹的各组织中均有表达,在茎中的表达量最高,其次是叶;通过农杆菌介导法将PoLEC1基因在拟南芥中异源过表达,结果显示PoLEC1转拟南芥叶片大小无明显差异,叶片数量略多于野生型,开花晚于野生型。亚细胞定位确定PoLEC1定位于细胞核和细胞质中。【结论】PoLEC1可能参与了体胚发育和开花过程,为牡丹分子育种的研究提供了重要的基因资源。 展开更多
关键词 牡丹 polec1 功能验证 亚细胞定位 体胚发生
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