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大柴胡汤调控PI3K/AKT/AQP9信号通路改善2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病糖脂代谢紊乱
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作者 王营营 王哲 +2 位作者 朱保霖 张传科 张新颖 《河南中医》 2026年第2期181-187,共7页
目的:探讨大柴胡汤改善2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠糖脂代谢紊乱的作用机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组(n=6,常规饲料喂养)和造模组... 目的:探讨大柴胡汤改善2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠糖脂代谢紊乱的作用机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组(n=6,常规饲料喂养)和造模组(1135DM型高脂高糖饲料喂养)。大鼠按照规定饲料饲养8周后,造模组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立模型。将造模成功的大鼠分为模型组、双歧杆菌组(175 mg·kg^(-1)·d^(-1))及大柴胡汤小(8 g·kg^(-1)·d^(-1))剂量组、大柴胡汤中(16 g·kg^(-1)·d^(-1))剂量组、大柴胡汤大(32 g·kg^(-1)·d^(-1))剂量组,每组6只。各给药组大鼠给予相应药物进行灌胃给药,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,连续8周,造模大鼠干预期间持续给予高脂饮食。实验结束后,生化分析仪检测空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(alanine amino-transferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transferase,AST)的水平;HE染色观察各组大鼠肝脏组织病理变化;Western blot检测肝组织磷酸化-磷脂酰肌醇3激酶(phosphorylation-phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化-蛋白激酶B(phosphorylation-protein kinase B,p-PKB,又称p-AKT)、水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠FPG、TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平明显升高,HDL-C水平显著下降,肝脏组织中pPI3K、p-AKT、AQP9蛋白表达水平显著降低;与模型组比较,各给药组大鼠FPG、TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平明显下降,HDL-C水平显著升高,肝脏组织中p-PI3K、p-AKT、AQP9蛋白表达水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示:大柴胡汤各组均可不同程度地减轻肝脏细胞损伤,且大柴胡汤小剂量效果最为显著。结论:大柴胡汤可通过“肠-肝轴”干预糖脂代谢,进而改善大鼠肝脏损伤,该作用可能与其调控PI3K/AKT/AQP9信号通路有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病 大柴胡汤 pi3K/AKT/AQP9信号通路 肠-肝轴 糖脂代谢
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冠心舒通胶囊调节PI3K/AKT/mTOR信号通路保护H9c2心肌细胞机制研究 被引量:1
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作者 后亚芳 刘园 +3 位作者 陆晨曦 段婷婷 任菲菲 杜霞 《陕西中医》 2025年第3期296-300,共5页
目的:本研究探讨冠心舒通胶囊基于PI3K/AKT/mTOR通路防治H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用机制。方法:建立H9c2心肌细胞H/R模型,分为对照组、模型组、冠心舒通胶囊不同浓度组。采用PI染色法(PI)和酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、... 目的:本研究探讨冠心舒通胶囊基于PI3K/AKT/mTOR通路防治H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用机制。方法:建立H9c2心肌细胞H/R模型,分为对照组、模型组、冠心舒通胶囊不同浓度组。采用PI染色法(PI)和酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量评价模型。冠心舒通胶囊组采用梯度浓度对细胞进行预给药处理,采用CCK-8法测定细胞活性,酶标法测定LDH活性、CK-MB含量,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA水平。结果:CCK-8法筛选出缺氧8、16 h细胞用于后续实验检测。PI染色4、8μg/ml冠心舒通胶囊组细胞活性在60%~75%;与模型组相比,经冠心舒通胶囊干预后H/R H9c2心肌细胞活性显著提升,而LDH活性、CK-MB含量降低,PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达降低。结论:冠心舒通胶囊通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制H9c2细胞损伤,对H/R造成的心肌损伤具有一定保护作用。 展开更多
关键词 冠心病 冠心舒通胶囊 H9C2心肌细胞 H/R模型 pi3K/AKT/mTOR信号通路 心肌损伤
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龈沟液中MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值对PI患者早期种植牙失败风险及模型区分度的影响
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作者 杨春山 郑佳 +3 位作者 查建鑫 徐巍 张岳乔 孟琪 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第5期827-830,共4页
目的 探讨龈沟液中MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值对PI患者早期种植牙失败风险及模型区分度的影响。方法 选取2021年2月至2023年3月于唐山职业技术学院附属医院治疗的215例PI患者为研究对象,根据PI患者早期种植牙失败的情况,将患者分为失败... 目的 探讨龈沟液中MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值对PI患者早期种植牙失败风险及模型区分度的影响。方法 选取2021年2月至2023年3月于唐山职业技术学院附属医院治疗的215例PI患者为研究对象,根据PI患者早期种植牙失败的情况,将患者分为失败组45例和成功组170例。比较两组种植牙参数、龈沟液MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值。采用多因素Logistic回归模型筛选PI患者早期种植牙失败危险因素,构建预测模型,借助ROC曲线评估所建模型预测能力。结果 失败组龈沟液中MMP-9、sST2及RANKL/OPG水平均显著高于成功组,差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值升高是PI患者早期种植牙失败的危险因素,回归系数β显著(P<0.001),OR值显示,MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值升高会增加PI患者早期种植牙失败的风险,各OR值均具有95%置信区间。基于龈沟液中MMP-9、sST2水平及RANKL/OPG比值构建的PI患者早期种植牙失败风险预测模型,经ROC曲线分析显示,AUC为0.859,95%置信区间0.789~0.923,敏感度94.26%,特异度91.28%。结论 龈沟液MMP-9、sST2及RANKL/OPG比值可作为PI患者早期种植牙失败风险的有效预测指标。 展开更多
关键词 龈沟液 MMP-9 sST2 RANKL/OPG pi 早期种植牙
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蒙药当贡-3通过激活PI3K/Akt信号通路抑制缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞凋亡
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作者 郑力榕 李洋 张海荣 《中国中医急症》 2025年第8期1327-1330,1359,共5页
目的观察蒙药当贡-3(DG3)对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用并探寻其机制。方法构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型,模拟整体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,使用克隆形成实验观察DG3对心肌细胞的保护作用及增殖的影响,并... 目的观察蒙药当贡-3(DG3)对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用并探寻其机制。方法构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型,模拟整体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,使用克隆形成实验观察DG3对心肌细胞的保护作用及增殖的影响,并通过蛋白质印迹法(Western blotting)对关键通路相关蛋白的表达进行体外验证。非靶向代谢组学分析表征DG3干预后的代谢产物,并使用MetScape插件对代谢组学进行整合分析,酶联免疫吸附分析(ELISA)用于验证联合分析网络中的关键节点蛋白。结果Western blotting结果表明,DG3可以激活PI3K/Akt信号通路,联合分析发现对氧磷酶家族(PON)是其中的关键节点;ELISA结果表明,DG3可以上调PON家族蛋白,尤其是PON2的表达水平。结论DG3可以促进PON家族蛋白表达激活PI3K/Akt通路,通过抑制心肌细胞凋亡并促进心肌细胞增殖,进而保护H/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 蒙药当贡3 H9C2细胞 PON家族蛋白 pi3K/AKT信号通路
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抗稻瘟病 Pi2/9/z-t 基因特异性分子标记的开发 被引量:42
5
作者 华丽霞 汪文娟 +5 位作者 陈深 汪聪颖 曾烈先 杨健源 朱小源 苏菁 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期305-310,共6页
通过对已克隆的抗稻瘟病基因Pi2、Pi9以及Piz-t进行序列比对,寻找各自特异的核苷酸差异,成功开发了基于PCR技术以及电泳检测技术的Pi2/Pi9/Piz-t以及Piz-t的基因特异性分子标记,能有效地将Pi2/Pi9/Piz-t与该位点上的其他抗性等位基因及... 通过对已克隆的抗稻瘟病基因Pi2、Pi9以及Piz-t进行序列比对,寻找各自特异的核苷酸差异,成功开发了基于PCR技术以及电泳检测技术的Pi2/Pi9/Piz-t以及Piz-t的基因特异性分子标记,能有效地将Pi2/Pi9/Piz-t与该位点上的其他抗性等位基因及感病等位基因区分开,这为分子标记辅助育种及抗病基因聚合提供有效的分子标记。用Pi2/Pi9/Pizt基因特异性分子标记对来自全国各稻区的共101份水稻品种和育种亲本进行分子检测,结果发现,除2个品种检测到Piz-t带型之外,大部分水稻品种不携带这3个抗性基因,这为有目的地开展品种的抗性改良提供了重要的参考信息。 展开更多
关键词 水稻 稻瘟病 抗性基因 分子标记 分子标记辅助选择育种 pi2/9位点
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黄芪苷Ⅳ通过PI3K/Akt信号通路抗H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化损伤 被引量:11
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作者 张琦 彭洋 +2 位作者 宋君秋 吴艳娜 刘艳霞 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期955-959,共5页
目的研究黄芪苷Ⅳ对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率,DNA抽提及琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33258染色、caspase-3活性检测细胞凋亡,Western blotting检测... 目的研究黄芪苷Ⅳ对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率,DNA抽提及琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33258染色、caspase-3活性检测细胞凋亡,Western blotting检测t-Akt和p-Akt蛋白的表达。结果与H2O2组比较,10、20mg/L的黄芪苷Ⅳ均显著提高细胞存活率,降低caspase-3活性,减轻细胞凋亡;且均显著上调p-Akt蛋白的表达;PI3K/Akt抑制剂LY294002部分阻断10、20 mg/L黄芪苷Ⅳ的保护作用。结论黄芪苷Ⅳ部分通过PI3K/Akt通路发挥对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。 展开更多
关键词 黄芪苷Ⅳ H2O2 H9C2 细胞凋亡 pi3K/AKT LY294002
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骨形态蛋白9诱导干细胞骨向分化与环氧酶-2及PI3K/Akt的关系研究 被引量:11
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作者 李洋 陈前昭 +4 位作者 邵英 曾于桦 任文艳 刘荣兴 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期908-915,共8页
目的研究骨形态蛋白9(BMP9)诱导干细胞成骨分化过程中对PI3K/Akt信号的激活与环氧酶-2(COX-2)的关系。方法利用组织化学染色法、化学发光法或定量PCR检测碱性磷酸酶(ALP)的水平,Western blot检测骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、COX-2、Akt1/... 目的研究骨形态蛋白9(BMP9)诱导干细胞成骨分化过程中对PI3K/Akt信号的激活与环氧酶-2(COX-2)的关系。方法利用组织化学染色法、化学发光法或定量PCR检测碱性磷酸酶(ALP)的水平,Western blot检测骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、COX-2、Akt1/2和磷酸化Akt1/2(pAkt1/2)水平,RT-PCR检测COX-2的表达,用免疫组化或免疫荧光分别检测COX-2的表达水平以及Akt1/2的磷酸化水平,用茜素红染色检测钙盐沉积。结果 BMP9在C2C12细胞中明显增加ALP活性,促进OPN和OCN表达以及钙盐沉积;BMP9对Akt1/2总蛋白无明显影响,能明显增加Akt1/2磷酸化水平,PI3K抑制剂呈浓度依赖性减弱BMP9诱导ALP活性增加。BMP9在C2C12细胞中促进COX-2表达,抑制COX-2明显减弱BMP9在C2C12细胞中诱导ALP活性增加和钙盐沉积的作用。外源性过表达COX-2促进BMP9诱导p-Akt1/2水平增加,而抑制COX-2则明显减弱BMP9诱导Akt1/2磷酸化水平增加。结论 BMP9在诱导干细胞成骨化过程中对PI3K/Akt信号的激活可能与其促进COX-2表达有关。 展开更多
关键词 骨形态蛋白9 干细胞 成骨分化 成骨标志物 pi3K/AKT 环氧酶-2
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胰岛素激活PI_3K-AKT通路而促进H9c2心肌细胞葡萄糖摄取 被引量:10
8
作者 叶林 陆凯 +1 位作者 张冬颖 覃数 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期538-542,共5页
目的探索胰岛素(Insulin)对H9c2心肌细胞葡萄糖摄取的影响及其与PI3K-AKT信号通路的关系。方法采用不同时间及不同浓度的胰岛素处理H9c2心肌细胞,确定胰岛素处理H9c2细胞的最佳浓度和最适时间。实验分空白对照组(NC组),2-NBDG组,Insulin... 目的探索胰岛素(Insulin)对H9c2心肌细胞葡萄糖摄取的影响及其与PI3K-AKT信号通路的关系。方法采用不同时间及不同浓度的胰岛素处理H9c2心肌细胞,确定胰岛素处理H9c2细胞的最佳浓度和最适时间。实验分空白对照组(NC组),2-NBDG组,Insulin组,Insulin+PI3K-AKT通路抑制剂LY294002组(LY294002组),Insulin+p38MAPK通路抑制剂BIRB796组(BIRB796组),使用荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)检测H9c2心肌细胞葡萄糖摄取能力,以流式细胞仪和荧光酶标仪检测心肌细胞对葡萄糖摄取的变化。通过间接免疫荧光法及激光共聚焦检测H9c2心肌细胞葡萄糖转运体-1(glucose tansporter-1,GLUT-1)及葡萄糖转运体-4(glucose tansporter-4,GLUT-4)的表达。结果 12-NBDG可用于检测H9c2心肌细胞葡萄糖摄取能力。2Insulin处理H9c2心肌细胞最适浓度和时间分别为200μmol/L和30 min。3Insulin组与对照组相比增加H9c2心肌细胞葡萄糖摄取(P<0.05);LY294002组与Insulin组相比降低心肌细胞葡萄糖摄取,两组间差异明显(P<0.05),BIRB796组较Insulin组无统计学差异(P>0.05),提示LY294002可抑制Insulin促进心肌细胞葡萄糖摄取,而BIRB796不能抑制上述作用。4 H9c2心肌细胞膜表达葡萄糖转运体1(GLUT1)和葡萄糖转运体4(GLUT4),Insulin处理H9c2心肌细胞30min后经激光共聚焦成像显示H9c2心肌细胞膜GLUT1和GLUT4表达增加(P<0.05)。结论胰岛素促进H9c2心肌细胞葡萄糖摄取的作用可能与PI3K-AKT通路相关,与p38MAPK通路不相关,胰岛素激活PI3K-AKT信号通路后可能促进H9c2心肌细胞膜上GLUT-1及GLUT-4的表达,从而使H9c2心肌细胞对葡萄糖摄取增加。 展开更多
关键词 胰岛素 2-NBDG H9C2心肌细胞 葡萄糖摄取 pi3K-AKT p38MAPK GLUT1和GLUT4
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Gas6经PI3K/Akt通路对缺氧复氧诱导H9c2细胞凋亡的影响 被引量:12
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作者 符江琳 刘承云 +2 位作者 徐晓 刘存飞 陈星霖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1508-1512,共5页
目的:观察外源性重组人生长停滞特异性蛋白6(Gas6)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞系凋亡的影响,并初步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的关系。方法:对体外培养的H9c2细胞进行缺氧复氧(3 h/3 h),模拟大鼠心肌缺血再灌... 目的:观察外源性重组人生长停滞特异性蛋白6(Gas6)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞系凋亡的影响,并初步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的关系。方法:对体外培养的H9c2细胞进行缺氧复氧(3 h/3 h),模拟大鼠心肌缺血再灌注模型,将细胞随机分为4组:正常对照组(control组)、缺氧/复氧组(A/R组)、缺氧/复氧+Gas6预处理组(A/R+Gas6组)及缺氧/复氧+Gas6预处理+PI3K/Akt特异性阻断剂LY294002干预组(A/R+Gas6+LY294002组)。分别采用MTT法检测心肌细胞活力,生化法检测细胞中caspase-3活性水平,Annexin V/PI双染法及流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western免疫印迹法检测胞内磷酸化Akt(p-Akt)蛋白含量表达情况。结果:A/R组较control组细胞活力下降,caspase-3活性、凋亡率及p-Akt水平均较control组增加(P<0.05)。但经Gas6预处理后,细胞活力及p-Akt表达水平较A/R组显著增加,caspase-3活性、凋亡率均减少(P<0.05),而Gas6的这些作用能被PI3K/Akt阻断剂抑制。结论:Gas6能减少缺氧复氧诱导的H9c2细胞凋亡,此作用机制可能是通过提高Akt磷酸化水平而激活PI3K/Akt通路实现的。 展开更多
关键词 生长停滞特异性蛋白6 缺氧复氧 H9C2细胞 pi3K/AKT通路 细胞凋亡
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左西孟旦对缺氧复氧诱导的H9c2细胞凋亡、PTEN和PI3K/Akt信号通路的影响 被引量:5
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作者 李晓玲 王丹 +2 位作者 肖扬 李春燕 汪砚雨 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2022年第11期942-948,共7页
[目的]研究左西孟旦对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡的影响及相关机制。[方法]体外培养H9c2细胞,将细胞分为空白对照组、H/R组、左西孟旦低剂量组、左西孟旦中剂量组、左西孟旦高剂量组。采用四甲基偶氮噻唑蓝法检测H9c2细胞增殖;流... [目的]研究左西孟旦对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡的影响及相关机制。[方法]体外培养H9c2细胞,将细胞分为空白对照组、H/R组、左西孟旦低剂量组、左西孟旦中剂量组、左西孟旦高剂量组。采用四甲基偶氮噻唑蓝法检测H9c2细胞增殖;流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒分别检测SOD活性及MDA含量;荧光探针法检测活性氧(ROS)水平;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路蛋白表达。[结果]与空白对照组比较,H/R组H9c2细胞增殖抑制率、凋亡率、MDA含量、ROS水平、PTEN蛋白表达均显著升高(P<0.05),PCNA、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均显著降低,Bax显著升高(P<0.05)。与H/R组比较,左西孟旦低剂量组、左西孟旦中剂量组、左西孟旦高剂量组H9c2细胞增殖抑制率、凋亡率、MDA含量、ROS水平、PTEN蛋白表达均显著降低(P<0.05),PCNA、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均显著升高,Bax显著降低(P<0.05);且左西孟旦剂量越高,上述指标的相应变化越明显。[结论]左西孟旦可能通过抑制PTEN并激活PI3K/Akt信号通路,促进H/R条件下H9c2细胞增殖,抑制细胞氧化应激和凋亡。 展开更多
关键词 左西孟旦 缺氧复氧 H9C2细胞 细胞凋亡 磷酸酶及张力蛋白同源物 pi3K/AKT信号通路
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滋膵通脉饮通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路减轻高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤的实验研究 被引量:1
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作者 吴刚强 袁春云 +7 位作者 袁思斯 毛叶 陈琪 温小凤 谭军 卜献春 李非 李洁花 《河北医学》 CAS 2023年第1期31-36,共6页
目的:通过对高糖诱导的H9c2心肌细胞自噬和凋亡可能涉及的信号通路(PI3K-Akt-mTOR)进行研究,探讨滋膵通脉饮抑制心肌细胞凋亡的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白血浆组、滋膵通脉饮组,每组10只。连续灌胃7d,制备相应的含药血浆。滋膵... 目的:通过对高糖诱导的H9c2心肌细胞自噬和凋亡可能涉及的信号通路(PI3K-Akt-mTOR)进行研究,探讨滋膵通脉饮抑制心肌细胞凋亡的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白血浆组、滋膵通脉饮组,每组10只。连续灌胃7d,制备相应的含药血浆。滋膵通脉饮组药物浓度为4.4g/mL,灌胃量为10mL·kg^(-1)·d^(-1);空白血浆组采用等剂量的灭菌超纯水灌胃(给药体积为10mL/kg)。把H9c2心肌细胞分为正常组、空白血浆组和含药血浆组,分别加入胎牛血清,空白血浆和含药血浆,每组均设置5%、10%、15%的浓度梯度。通过CCK-8法比较各组H9c2心肌细胞增殖情况,计算细胞存活率,筛选含药血浆。将高糖诱导的H9c2心肌细胞随机分成3组:模型组、滋膵通脉饮含药血浆组和恩格列净组,加上正常组,共4组,给药24h后,IF检测LC3B在H9c2心肌细胞的表达。Western blot法检测PI3K-Akt-mTOR信号通路蛋白和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。结果:含药血浆及空白血浆在10%的药物浓度水平对细胞增殖无明显影响,作为本次含药血浆实验干预的浓度。与正常组比较,模型组心肌细胞LC3BⅡ/LC3BⅠ表达明显降低,PI3K、P-Akt、mTOR和Caspase-3的蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,滋膵通脉饮含药血浆组与恩格列净组LC3BⅡ/LC3BⅠ表达明显升高,PI3K、P-Akt、mTOR和Caspase的蛋白表达明显降低(P<0.05);滋膵通脉饮含药血浆组与恩格列净组LC3BⅡ/LC3BⅠ表达、PI3K、P-Akt、mTOR和Caspase-3的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:滋膵通脉饮可激活心肌细胞自噬而抑制心肌细胞凋亡,这可能与抑制PI3K/P-Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 滋膵通脉饮 H9C2心肌细胞 自噬 凋亡 pi3K-Akt-mTOR
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Development of Specific DNA Markers for Detecting the Rice Blast Resistance Gene Alleles Pi2/9/z-t
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作者 Jing SU Wenjuan WANG +4 位作者 Shen CHEN Congying WANG Jianyuan YANG Aiqing Feng Xiaoyuan ZHU 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2020年第5期9-12,17,共5页
Specific molecular markers for detecting the alleles of Pi2/Pi9/Piz-t,designated as Pi2 SNP,Pi9 SNP and Pizt-PA,respectively,have been successfully developed through sequence comparison method.These three specific mar... Specific molecular markers for detecting the alleles of Pi2/Pi9/Piz-t,designated as Pi2 SNP,Pi9 SNP and Pizt-PA,respectively,have been successfully developed through sequence comparison method.These three specific markers can distinctly distinguish target genes from others mapped on Pi2/9 locus,which facilitates the molecular marker-assistant selection and the development of pyramiding cultivars combined with other allele R genes.Additionally,101 main cultivars and breeding parents collected from different rice-planting areas have been diagnosed with these three specific markers,and the results showed that only 2 out of the 101 cultivars carried Piz-t,but neither Pi2 nor Pi9 band had been detected.It indicates that most of the main cultivars and breeding parents in China do not carry Pi2/Pi9/Piz-t.These results provide important information for the application of Pi2/Pi9/Piz-t in the blast resistance breeding programs. 展开更多
关键词 Rice BLAST Resistance gene Molecular marker MAS pi2/9 locus
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参芎葡萄糖注射液通过激活PI3K/AKT通路拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡 被引量:18
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作者 陆定艳 李靖 +6 位作者 孙佳 薛维娜 何彬 李勇军 王永林 林昌虎 刘亭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期3773-3779,共7页
探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,An... 探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin/PI法检测细胞凋亡率,基因芯片技术检测细胞表达谱的变化,荧光定量PCR技术(qRTPCR)检测PIK3CA,Bcl-2,Bax,caspase-3,GAPDH mRNA的表达,Western blot法检测PIK3CA,AKT,P-AKT,Bcl-2,Bax,caspase-3蛋白的表达水平,用试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和丙二醛(MDA)含量。结果显示,不同浓度的参芎葡萄糖注射液可显著提高H2O2诱导的H9c2细胞存活率(P<0. 01),明显逆转H2O2诱导的细胞凋亡情况(P<0. 01)。芯片实验发现,参芎葡萄糖注射液处理后,H9c2细胞有138个基因表达发生改变,其中与PI3K/AKT通路相关的PIK3CA差异表达倍数较高,为3. 59倍。qRT-PCR和Western blot结果表明,参芎葡萄糖注射液可下调H2O2处理后H9c2细胞中caspase-3的mRNA和蛋白表达水平(P<0. 01),上调PIK3CA和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平(P<0. 01),并上调AKT蛋白的磷酸化水平(P<0. 01)。在PI3K/AKT通路抑制剂LY294002作用下,参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2细胞损伤作用显著降低。结果表明,参芎葡萄糖注射液可能是通过调控PI3K/AKT信号通路来抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 参芎葡萄糖注射液 H9C2细胞 细胞凋亡 基因芯片 pi3K/AKT通路
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基于mitoKATP/PI3K/mTOR探讨芪参益气滴丸影响H9C2心肌细胞损伤后钙稳态及炎性环境的机制 被引量:6
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作者 詹玲君 秦伟彬 +4 位作者 何贵新 莫霄云 张清伟 林琳 玉黎燕 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2087-2090,共4页
目的基于mitoKATP/PI3K/mTOR探讨芪参益气滴丸的心肌保护作用及其线粒体钙稳态调控机制研究,并从细胞分子水平进行深层次验证。方法SD大鼠进行灌胃给药,连续灌胃7天,于最后一天1h取血后离心取上清,后续实验分组为5组,分别对过氧化氢处... 目的基于mitoKATP/PI3K/mTOR探讨芪参益气滴丸的心肌保护作用及其线粒体钙稳态调控机制研究,并从细胞分子水平进行深层次验证。方法SD大鼠进行灌胃给药,连续灌胃7天,于最后一天1h取血后离心取上清,后续实验分组为5组,分别对过氧化氢处理大鼠H9C2心肌细胞进行处理后流式检测细胞表面标记物CD80、CD86、CD11b,ELISA检测细胞炎症因子,WB检测相关蛋白表达情况。结果不同浓度芪参益气滴丸含药血清对过氧化氢处理大鼠H9C2心肌细胞CD80、CD86和CD11b表达下调,与模型组相比,不同浓度芪参益气滴丸含药血清5HD对过氧化氢处理大鼠H9C2心肌细胞CD80和CD11b表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,芪参益气滴丸各组IL-1β、TNF-α表达下调,IL-10表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,模型组PI3K、AKt、mTOR、iNOS、RyR2、Cav1、Arg1、SERCA2α蛋白表达上调。与模型组相比,芪参益气滴丸各组PI3K、AKt、mTOR、iNOS、RyR2、Cav1、Arg1、SERCA2α蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芪参益气滴丸在AMI后发挥心肌改善作用与mi-toKATP/PI3K/mTOR及其线粒体钙稳态调控机制有着密切联系。 展开更多
关键词 mitoKATP/pi3K/mTOR H9C2 芪参益气滴丸 钙稳态 机制研究
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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路的三七总皂苷调控自噬抗H9c2细胞缺氧/复氧损伤机制研究 被引量:14
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作者 王飘 郑晴 +3 位作者 胡婷 张海银 许言午 包怡敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2021年第8期87-92,共6页
目的探讨三七总皂苷(PNS)能否通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬从而减轻H9c2细胞缺氧/复氧损伤机制。方法将H9c2细胞分为正常组、缺氧/复氧(A/R)组、A/R+PNS组、A/R+PNS+雷帕霉素(Rapa)组、A/R+Rapa组、A/R+羟氯喹(HCQ)组、A/R+3-甲... 目的探讨三七总皂苷(PNS)能否通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬从而减轻H9c2细胞缺氧/复氧损伤机制。方法将H9c2细胞分为正常组、缺氧/复氧(A/R)组、A/R+PNS组、A/R+PNS+雷帕霉素(Rapa)组、A/R+Rapa组、A/R+羟氯喹(HCQ)组、A/R+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组。通过缺氧6 h、复氧2 h建立H9c2细胞A/R模型。CCK-8法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞损伤,Western blot检测自噬相关蛋白Atg5、p62、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白PI3K、Akt、mTOR的表达,荧光法观察细胞自噬流。结果与正常组比较,A/R组H9c2细胞存活率明显下降,细胞损伤率明显升高(P<0.05),自噬相关蛋白Atg5、Beclin-1表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P<0.05),自噬体和自噬溶酶体数量显著增加,自噬流显著增强(P<0.05);与A/R组比较,用PNS预处理后,H9c2细胞存活率明显上升,细胞损伤率明显降低(P<0.05),自噬相关蛋白Atg5、Beclin-1表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低(P<0.05),p62蛋白表达明显升高,与自噬抑制剂HCQ、3-MA作用相似,荧光结果显示,PNS对自噬流有明显抑制作用(P<0.05);PNS预处理后p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论PNS能有效减轻H9c2细胞A/R损伤,其机制与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路从而抑制自噬流相关。 展开更多
关键词 三七总皂苷 缺氧/复氧损伤 自噬 pi3K/Akt/mTOR信号通路 H9C2细胞
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Apelin-13通过PI3K/Akt信号通路抑制尼古丁诱导的H9c2细胞凋亡 被引量:3
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作者 张海增 全慧 +4 位作者 单晓琼 田秋云 张福坤 范小芳 龚永生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1352-1358,共7页
目的:研究小分子活性肽apelin-13对尼古丁诱导的心肌细胞凋亡的作用,探讨其可能的调节机制。方法:建立尼古丁诱导的大鼠H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组相比,... 目的:研究小分子活性肽apelin-13对尼古丁诱导的心肌细胞凋亡的作用,探讨其可能的调节机制。方法:建立尼古丁诱导的大鼠H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组相比,尼古丁组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),凋亡相关蛋白Bax和cleaved caspase-3的表达显著上调, Bcl-2、p-Akt、p-PI3K和APJ蛋白的表达显著下调(P<0.01);(2)与尼古丁组相比,apelin-13+尼古丁组细胞的凋亡率明显降低(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达显著降低(P<0.01), Bcl-2、p-Akt、p-PI3K和APJ蛋白的表达显著升高(P<0.01);(3)与apelin-13+尼古丁组相比,apelin-13+尼古丁+PI3K/Akt抑制剂LY294002组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达显著增加(P<0.01), Bcl-2、p-Akt和p-PI3K蛋白的表达显著下调(P<0.01)。结论:Apelin-13通过PI3K/Akt信号通路抑制尼古丁诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 APELIN-13 尼古丁 细胞凋亡 H9C2细胞 pi3K/AKT信号通路
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蒙花苷通过PI3K-Akt/m-TOR信号通路保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤 被引量:12
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作者 张敏敏 陈文 刘冲 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第6期1445-1450,共6页
目的:探索蒙花苷对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用机制,并探寻抑制心肌细胞凋亡可能的信号通路。方法:H9c2心肌细胞分为正常细胞对照组、缺氧复氧损伤模型组、不同浓度蒙花苷(12.50、25.00、50.00、100.00、200.00μg/mL)组、LY294... 目的:探索蒙花苷对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用机制,并探寻抑制心肌细胞凋亡可能的信号通路。方法:H9c2心肌细胞分为正常细胞对照组、缺氧复氧损伤模型组、不同浓度蒙花苷(12.50、25.00、50.00、100.00、200.00μg/mL)组、LY294002(50.00μg/mL)组、蒙花苷(50.00μg/mL)+LY294002(50.00μg/mL)组,共9组。检测相应组别细胞增殖活力和心肌细胞中MDA、SOD、LDH水平;采用Western blot检测PI3K/Akt/mTOR通路中关键蛋白的表达情况。结果:细胞增殖活力检测结果显示蒙花苷对细胞无毒性;H9c2心肌细胞缺氧复氧各4 h后,与正常对照组比较,模型组LDH、MDA水平显著升高,SOD水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,蒙花苷组p-PI3K表达及Akt磷酸化程度及凋亡蛋白Bcl-2表达显著升高,Bax表达显著降低(P<0.05)。蒙花苷对缺氧复氧损伤H9c2细胞的保护作用可被抑制剂LY294002抑制。结论:蒙花苷可通过PI3K/Akt/m-TOR信号通路抑制H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 蒙花苷 H9C2 细胞凋亡 pi3K/Akt/m-TOR信号通路
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水稻康丰B抗稻瘟病基因Pi-kf2(t)的克隆与功能验证
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作者 韦新宇 曾跃辉 +5 位作者 肖长春 黄建鸿 阮宏椿 杨旺兴 邹文广 许旭明 《中国水稻科学》 北大核心 2025年第3期352-364,共13页
【目的】稻瘟病是一种由丝状子囊菌稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的世界性真菌病害,严重影响水稻的品质和产量,培育和种植抗性品种是控制稻瘟病发生最经济有效的措施,而抗性基因的挖掘和利用是选育抗病品种的基础和关键。本研究以... 【目的】稻瘟病是一种由丝状子囊菌稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的世界性真菌病害,严重影响水稻的品质和产量,培育和种植抗性品种是控制稻瘟病发生最经济有效的措施,而抗性基因的挖掘和利用是选育抗病品种的基础和关键。本研究以三明市农业科学研究院选育且具有广谱抗性的优质籼型杂交稻保持系康丰B(KFB)为研究材料,对其抗稻瘟病基因Pi-kf2(t)进行抗谱分析、克隆和功能验证。【方法】利用来自全国不同地区的100个稻瘟病菌株对KFB[Pi-kf2(t)]、75-1-127(Pi9)、C101A51(Pi2)、IRBLzt-T(Piz-t)、EBZ(Pi50)和GM 4(Pigm)3~4叶期幼苗进行喷雾接菌;结合半定量PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对Pi-kf2(t)两个候选基因Pi-kf2(t)-NBS2和Pi-kf2(t)-NBS4进行表达模式分析;采用同源克隆技术并构建系统进化树对Pi-kf2(t)基因进行克隆以及分析Pi-kf2(t)与Pi9、Pi2、Piz-t、Pi50和Pigm之间的进化关系;通过转基因互补试验对Pi-kf2(t)候选基因进行功能验证。【结果】Pi-kf2(t)与Pi9、Pi2、Piz-t、Pi50和Pigm存在明显的抗谱差异,其抗谱分别为93%、90%、91%、78%、95%和96%;候选基因Pi-kf2(t)-NBS2在KFB苗期叶片具有较高的表达水平且不受稻瘟病菌诱导,属于组成型表达,而Pi-kf2(t)-NBS4表达量极低;多重氨基酸序列比对分析表明,Pi-kf2(t)-NBS2与Pi9、Pi2、Piz-t、Pi50和Pigm蛋白分别存在45、31、34、2和2个氨基酸的差异;系统进化树分析表明,Pi-kf2(t)-NBS2与Pi50和Pigm具有更近的亲缘关系和更高的同源性;另外,转基因互补试验进一步验证了候选基因Pi-kf2(t)-NBS2即为Pi-kf2(t)抗稻瘟病基因。【结论】Pi-kf2(t)为Pi2/Pi9基因家族中一个新的稻瘟病抗性基因,本研究为Pi-kf2(t)后期抗病机理研究提供了理论基础,同时为选育抗稻瘟病水稻新品种提供了重要种质资源。 展开更多
关键词 水稻 稻瘟病 pi2/pi9 抗性基因 NBS-LRR
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姜黄素调控PI3K/Akt信号通路抑制H9c2心肌细胞的炎症损伤 被引量:10
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作者 伍龙玫 刘春艳 《上海中医药杂志》 2018年第7期75-79,88,共6页
目的探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症损伤的保护效应,并对其作用机制进行初步研究。方法将H9c2心肌细胞分为对照组、LPS组和姜黄素干预组。除对照组外,其余各组构建LPS诱导的心肌细胞炎症损伤模型。姜黄素干预组分别以10μmo... 目的探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症损伤的保护效应,并对其作用机制进行初步研究。方法将H9c2心肌细胞分为对照组、LPS组和姜黄素干预组。除对照组外,其余各组构建LPS诱导的心肌细胞炎症损伤模型。姜黄素干预组分别以10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L姜黄素处理细胞。培养24 h后,CCK8法检测各组细胞的存活率,ELISA法检测各组细胞分泌炎症因子IL-6和TNF-α的水平,Western blot法检测各组细胞PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平。采用PI3K抑制剂LY294002(5μmol/L)预先处理细胞4 h后,加入LPS诱导细胞损伤,再以20μmol/L姜黄素干预细胞,检测各组(对照组、LPS组、LPS+抑制剂组、LPS+姜黄素组和抑制剂+LPS+姜黄素组)细胞的相对存活率、炎症因子水平及PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS组细胞的相对存活率显著降低(P<0.05),细胞上清中炎症因子IL-6和TNF-α水平显著升高(P<0.05),且PI3K和p-AKT蛋白表达量显著降低(P<0.05)。与LPS组细胞相比,不同浓度姜黄素干预后,H9c2细胞相对存活率显著升高(P<0.05),细胞分泌的IL-6和TNF-α水平显著降低(P<0.05),且PI3K和p-AKT蛋白表达量显著升高(P<0.05)。与LPS+姜黄素组相比,抑制剂LY294002干预细胞后,姜黄素对LPS诱导的H9c2细胞炎症损伤的保护作用减弱,细胞存活率明显下降(P<0.05),IL-6和TNF-α水平显著升高(P<0.05),且PI3K和p-AKT蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论姜黄素对LPS诱导的H9c2心肌细胞炎症损伤具有保护效应,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 姜黄素 H9C2心肌细胞 炎症 pi3K/AKT
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miR-1通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对高糖诱导的H9c2心肌细胞自噬的影响 被引量:3
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作者 赵瑞翔 赵芯晨 +2 位作者 陆佳 陈贤格 毛学 《广东医学》 CAS 2021年第12期1442-1447,共6页
目的探讨miR-1对高糖诱导的H9c2心肌细胞自噬及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法 H9c2细胞随机分为4组。正常组使用普通培养基培养,未转染;诱导组使用含33 mmol/L葡萄糖的培养... 目的探讨miR-1对高糖诱导的H9c2心肌细胞自噬及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法 H9c2细胞随机分为4组。正常组使用普通培养基培养,未转染;诱导组使用含33 mmol/L葡萄糖的培养基诱导,未转染;miR-1 NC组使用含33 mmol/L葡萄糖的培养基诱导,转染miR-1 NC;miR-1 inhibitor组使用含33 mmol/L葡萄糖的培养基诱导,转染miR-1 inhibitor。在加入葡萄糖诱导前48 h,使用Lipofectamine 3000转染试剂盒进行转染。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测H9c2细胞和高糖诱导的H9c2细胞中miR-1表达水平;CCK-8法检测各组H9c2细胞增殖活性;蛋白免疫印记法(Western blot)检测各组H9c2细胞中Beclin1、p65、PI3K蛋白表达水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值以及AKT、mTOR蛋白磷酸化水平;生物信息学预测和双萤光素酶验证miR-1和PI3K的靶向关系。结果与正常组相比,诱导组的H9c2细胞中,miR-1表达水平显著升高(P<0.05),PI3K蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与正常组相比,诱导组H9c2细胞Beclin1蛋白表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,自噬小体增多,细胞增殖率、p62蛋白表达以及PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05);与诱导组和miR-1 NC组相比,miR-1 inhibitor组H9c2细胞miR-1水平、Beclin1蛋白表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低,自噬小体减少,细胞增殖率、p62蛋白表达以及PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05);miR-1和PI3K间存在靶向关系。结论在高糖诱导的H9c2细胞中,miR-1表达水平升高,抑制miR-1,可通过靶向激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制高糖诱导的H9c2心肌细胞自噬。 展开更多
关键词 MIR-1 pi3K/AKT/MTOR H9C2细胞 自噬
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