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Photobacterium sp.QH氨肽酶的基因克隆及其序列、酶学性质分析
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作者 武翠玲 万兵 +3 位作者 李钰娜 钟妞妞 周静 裴晋红 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第10期1017-1021,1027,共6页
目的克隆盐湖菌株Photobacterium sp.QH(Ps sp.QH)氨肽酶的基因,并对其进行序列及酶学性质分析。方法从青海盐湖采集水样,筛选Ps sp.QH菌株,进行16S rRNA分子生物学测定。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析法从筛选菌株的... 目的克隆盐湖菌株Photobacterium sp.QH(Ps sp.QH)氨肽酶的基因,并对其进行序列及酶学性质分析。方法从青海盐湖采集水样,筛选Ps sp.QH菌株,进行16S rRNA分子生物学测定。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析法从筛选菌株的发酵液中纯化氨肽酶,同时对其进行质谱分析,基因克隆及酶学性质分析。结果获得的菌株Ps sp.QH与Photobacterium halotolerans为同一属。该菌株分泌的氨肽酶属于金属螯合氨肽酶M28家族,全基因序列长1 527 bp,共编码508个氨基酸,预测其全酶分子相对分子质量为55 900,氨基酸序列与Photobacterium halotolerans氨肽酶(KKC99795.1)同源性达98%。该氨肽酶在50℃时酶活最高,40~50℃及pH 8.5时稳定性较好;Co^(2+)对其有激活作用,Mg^(2+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)、Fe^(2+)及Cu^(2+)对其有不同程度的抑制作用;该酶在1~3 mol/L的Na Cl溶液中仍保持较高活性。结论 Ps sp.QH分泌的氨肽酶对高盐有一定的耐受性,具有潜在的工业应用价值。 展开更多
关键词 photobacterium sp.QH 氨肽酶 基因克隆 酶学性质 质谱分析
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大黄鱼(Pseudosciaena crocea)源美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)的分离鉴定及致病性研究 被引量:21
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作者 张飞 苏永全 +3 位作者 王军 覃映雪 马英 鄢庆枇 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1202-1208,共7页
于2010年从宁德患病大黄鱼中分离得到一株优势菌NPL1006,经鉴定该菌株为美人鱼发光杆菌。人工感染实验结果显示该菌对大黄鱼的半致死浓度(LD50)为7.96×103CFU/g体重。药敏性实验结果显示NPL1006对头孢唑啉、头孢噻吩和诺氟沙星等9... 于2010年从宁德患病大黄鱼中分离得到一株优势菌NPL1006,经鉴定该菌株为美人鱼发光杆菌。人工感染实验结果显示该菌对大黄鱼的半致死浓度(LD50)为7.96×103CFU/g体重。药敏性实验结果显示NPL1006对头孢唑啉、头孢噻吩和诺氟沙星等9种药物高度敏感。采用纸片法检测得到NPL1006的胞外产物具有蛋白酶、明胶酶和淀粉酶活性。胞外产物感染斑马鱼研究结果显示其LD50为1.20mg蛋白/kg体重。以上结果表明大黄鱼源美人鱼发光杆菌NPL1006胞外产物含有多种毒力因子,与该菌对大黄鱼的致病性密切相关。 展开更多
关键词 大黄鱼 美人鱼发光杆菌 胞外产物 致病性
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草甘膦对重金属毒性的抑制效应研究——以发光菌(Photobacterium phosphoreum T3)为例 被引量:8
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作者 周垂帆 林静雯 +2 位作者 李莹 王玉军 周东美 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2329-2334,共6页
草甘膦分子(C3H8NO5P)中含有较多配位基团如羧基、氨基、磷酸基,对重金属阳离子有很强的络合能力,可能会影响重金属的生物有效性进而影响其毒性。为了解草甘膦(GPS)和铜(Cu)、镉(Cd)交互对发光菌毒性效应,以明亮发光杆菌T3小种(Photobac... 草甘膦分子(C3H8NO5P)中含有较多配位基团如羧基、氨基、磷酸基,对重金属阳离子有很强的络合能力,可能会影响重金属的生物有效性进而影响其毒性。为了解草甘膦(GPS)和铜(Cu)、镉(Cd)交互对发光菌毒性效应,以明亮发光杆菌T3小种(Photobacterium phosphoreum T3)为例,进行了室内模拟试验研究。结果表明:Cu、Cd对发光菌有很强的毒性(EC50分别为1.28、0.89mg·L-1);没有控制p H的草甘膦能够降低溶液p H,对发光菌亦有较强的毒性(EC50为35.9 mg·L-1);但控制p H值为5.0的草甘膦对发光菌无明显毒性,并且能够显著降低Cu、Cd对发光菌的抑制,同时随着GPS/Cu、GPS/Cd摩尔比值的增大使毒性降低,直至无明显毒性。据此认为,在重金属和农药草甘膦共存的环境当中,草甘膦能够影响重金属的形态,进而影响重金属的生物有效性和毒性。 展开更多
关键词 草甘膦 明亮发光杆菌 复合污染
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条石鲷(Oplegnathus fasciatus)源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)的分离鉴定 被引量:10
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作者 王庚申 许文军 +2 位作者 谢建军 汪玮 施慧 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第2期151-157,共7页
2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量... 2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量为5.93×10~4 CFU/g。形态学观察结果显示,菌株OF-1为革兰氏阴性、短杆状,在TCBS培养基上不生长。API 20E细菌鉴定系统、16S r RNA系统发育树分析结果证实,该菌株为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselaesubsp.piscicida)。该菌对庆大霉素、青霉素、氟哌酸、氧氟沙星、氨苄青霉素等药物高度敏感,对红霉素、链霉素、卡那霉素、苯唑青霉素等药物具有抗性。 展开更多
关键词 条石鲷 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 细菌鉴定
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美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)感染对银鲳(Pampus argenteus)肠道微生物的影响
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作者 王飞扬 陈素阳 +3 位作者 解家松 姜建湖 郭建林 张海琪 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期213-222,共10页
银鲳(Pampus argenteus)是我国沿海重要的经济鱼类和水产养殖重要品种,近年来因过度捕捞其野生种群数量日渐减少。美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae,PDD)是多种水产动物发病的主要病原菌,也是银鲳养殖中的一种常见病原微生物,会... 银鲳(Pampus argenteus)是我国沿海重要的经济鱼类和水产养殖重要品种,近年来因过度捕捞其野生种群数量日渐减少。美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae,PDD)是多种水产动物发病的主要病原菌,也是银鲳养殖中的一种常见病原微生物,会引起造成银鲳大规模死亡的出血病,但目前尚不清楚美人鱼发光杆菌感染后对银鲳肠道微生物的影响。通过注射使银鲳感染PDD,在24 h和72 h分别采集健康及患病银鲳的中肠和后肠进行16S rRNA基因扩增子测序,并结合Illumina Nova测序平台进行测序和数据分析,研究PDD感染后不同时间银鲳体内微生物群落组成结构的动态变化。结果表明,PDD感染后在银鲳肠道内大量增殖并占据优势,引起银鲳体内肠道微生物的动态变化。PDD的侵入及在银鲳肠道中的增殖并占据优势,导致银鲳肠道内微生物群落组成结构紊乱。PDD的过度生长与肠道微生物群落构成失调密切相关,显示了肠道微生物群落结构平衡的重要性。研究结果有助于深入探究水产动物肠道微生物的多样性、功能及相互关系,为银鲳养殖业的健康管理提供科学依据。 展开更多
关键词 银鲳(Pampus argenteus) 肠道微生物 美人鱼发光杆菌(photobacterium damselae) 疾病 群落结构平衡
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Development of a Microfluidics-Based Quantitative Real-Time PCR to Rapidly Identify Photobacterium damselae subsp.damselae with Different Pathogenicity by Detecting the Presence of mcp or dly Gene 被引量:1
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作者 ZHANG Zheng YU Yongxiang +5 位作者 CHEN Jing WANG Yingeng JIANG Yong LIAO Meijie RONG Xiaojun ZHANG Hao 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2021年第2期445-453,共9页
As a marine bacterial pathogen, Photobacterium damselae subsp. damselae(PDD) is distributed in seawater worldwide. It can infect different animals as well as humans, even cause deaths. The highly conserved regions of ... As a marine bacterial pathogen, Photobacterium damselae subsp. damselae(PDD) is distributed in seawater worldwide. It can infect different animals as well as humans, even cause deaths. The highly conserved regions of PDD mcp gene on chromosome and dly gene on plasmid were selected as the target fragments to design the specific primers. Recombinant plasmid standard was prepared based on the primers. With GENECHECKER UF-150 qRT-PCR instrument as the platform, a fluorescence-based quantitative real-time PCR(qRT-PCR) method was established for the detection of PDD. This method can specifically detect PDD and distinguish the highly virulent strains. Additionally, the test results can be qualitatively judged by visualization, while the quantitative detection can be achieved through the standard curve calculation. The minimum limit of detection was 1.0×101 copies μL-1, and the detection time was less than 20 min. In summary, this new method has outstanding advantages, such as strong specificity, high sensitivity, and low site requirements. It is a rapid on-site detection technology for highly virulent PDD strains. 展开更多
关键词 MARICULTURE photobacterium damselae microfluidics PATHOGENICITY rapid detection
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Rapid Screening of chloramphenicol in Turbot with photobacterium phosphoreum DB 被引量:1
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作者 朱兰兰 Wang Jingxue +3 位作者 Lin Hong Wang Yaqun Wang Jing Mei Cexia 《High Technology Letters》 EI CAS 2009年第2期214-219,共6页
A new,simple,rapid microbial assay was put forward for the detection of chloramphenicol(CAP)residues in Turbot muscles using luminescent bacteria DB(Photobacterium phosphoreum)as test organ-ism.By the luminescence inh... A new,simple,rapid microbial assay was put forward for the detection of chloramphenicol(CAP)residues in Turbot muscles using luminescent bacteria DB(Photobacterium phosphoreum)as test organ-ism.By the luminescence inhibition of DB,the concentrations of CAP were determined.CAP spiked inTurbot muscle tissues ranging from 0.5 to 100μg/kg was extracted using ethyl acetate and hexane.Themethod had a good recovery of 93.69% with a minimum detection limit of 0.65μg/kg.It can be per-formed within 30min following simple extraction.The method therefore proved to be advantageous overchromatographic procedures as it was inexpensive,quite sensitive and can be adopted for rapid screeningof CAP in Turbot tissues. 展开更多
关键词 CHLORAMPHENICOL photobacterium phosphoreum microbial assay TURBOT
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Evaluation and QSAR Study of Joint Toxicity of Substituted Phenols and Cadmium to Photobacterium phosphoreum
8
作者 SU Li-min YUAN Xing MU Chun-fang YAN Ji-chang ZHAO Yuan-hui 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2008年第3期281-284,共4页
The single toxicity of cadmium(Cd) or 9 substituted phenols to Phtobacterium phosphoreum was determined, respectively. The results indicate that the single toxicity was related to group variety, group sum and substi... The single toxicity of cadmium(Cd) or 9 substituted phenols to Phtobacterium phosphoreum was determined, respectively. The results indicate that the single toxicity was related to group variety, group sum and substitutive positions. On the basis of single toxicity, the joint toxicity of Cd and 9 substituted phenols was measured. The result indicates that the joint toxicity was basically a simple addition of the single toxicity of them or close to simple addition of the single toxicity of them. QSAR equations were built from the joint toxicity and molecular structural descriptors of substituted phenols under the different Cd concentrations. It was shown that the joint toxicity under different Cd concentrations was related to the identical descriptors, the logarithm of n-octanol/water partition coefficient(lgP) and the heat of formation(△Hf), with R2=0.855, 0.878 and 0.780, respectively. Good agreement between the predicted and observed values was found with R2=0.837. 展开更多
关键词 QSAR photobacterium phosphoreum Synergism ANTAGONISM
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Evaluation and Prediction of Joint Toxicity of Aniline and Its Derivatives to Photobacterium Phosphoreum
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作者 YUANXing SULi-min SONGLi-li 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期32-35,共4页
The single toxicity of aniline and its derivatives and the joint toxicity of the binary mixtures of aniline and each of its derivatives with the toxic unit ratios of 1∶1, 1∶4, 4∶1 to photobacterium phosphoreum were... The single toxicity of aniline and its derivatives and the joint toxicity of the binary mixtures of aniline and each of its derivatives with the toxic unit ratios of 1∶1, 1∶4, 4∶1 to photobacterium phosphoreum were determined, respectively. The toxic unit and the additive index were used to evaluate the joint toxicity. The result shows that the joint toxicity of each of the binary mixtures of aniline and each of its derivatives is mainly simple addition of the toxicities of the two compounds. On this basis, the QSAR equation that was built from the single toxicity of aniline was used to predict the toxicity of the derivatives of aniline in the mixtures. Good agreement between the predicted and experimental values was found with R 2=0.921. 展开更多
关键词 QSAR photobacterium phosphoreum Joint toxicity Simple addition
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UV-A Coexposure Enhances the Toxicity of AromaticHydrocarbons, Munitions, and Metals to Photobacterium phosphoreum
10
作者 DarrylP.ARFSTEN RichardDAVENPORT 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 1994年第2期101-108,共8页
Johnson et al. (1993) showed that coexposure to UV-A between 300-400 nm enhanced the toxicity of nitrotoluenes to Phoiobacterium phosphoreum, a marine bioluminescent bacteria used in the Microtox test (Microbics Inc.)... Johnson et al. (1993) showed that coexposure to UV-A between 300-400 nm enhanced the toxicity of nitrotoluenes to Phoiobacterium phosphoreum, a marine bioluminescent bacteria used in the Microtox test (Microbics Inc.). This paper reports that UV-A photoenhanced the toxicity of polynuclear aromatic hydrocarbons, other types of organic compounds, and some transition metals to P. phosphoreum. Coexposure to 400 μw/cm2 for 15 min increased the toxicity of psoralen, α-terthienyl, anthracene, acridine, fluoranthene,TNT, Cu2+, As3+, Ni2, and Cd2+. Phenanthrene was photoenhanced after 30 min coexposure at 400 μw/cm2+, and Mn2+ at 800 μw/cm2 aftef 15 min. Naphthalene was not enhanced at 800 μw/cm2 for 30 min 展开更多
关键词 NM UV-A Coexposure Enhances the Toxicity of AromaticHydrocarbons Munitions and Metals to photobacterium phosphoreum
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我国华南沿海海水养殖鱼类病原菌美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)分离株的毒力基因和耐药性分析 被引量:4
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作者 邓益琴 徐力文 +2 位作者 张亚秋 郭志勋 冯娟 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2606-2619,共14页
【目的】为探讨我国华南沿海海水养殖鱼类病原菌美人鱼发光杆菌的非典型毒力基因和耐药性的时空变化,解析影响其毒力和耐药性变化的可能环境因素,为该菌所引起的病害防控提供建议。【方法】本研究以分离自我国广东和海南沿海患病海水鱼... 【目的】为探讨我国华南沿海海水养殖鱼类病原菌美人鱼发光杆菌的非典型毒力基因和耐药性的时空变化,解析影响其毒力和耐药性变化的可能环境因素,为该菌所引起的病害防控提供建议。【方法】本研究以分离自我国广东和海南沿海患病海水鱼的35株美人鱼发光杆菌为研究对象,利用普通PCR扩增技术,分析5个非典型毒力基因在菌株中的分布情况,并采用纸片扩散法(K-B)分析菌株对15种抗生素的耐药性。【结果】19株菌含有1–2个被检测的非典型毒力基因,尤其是hlyA和vvh的检出率均高于20%。35株菌多重耐药指数为0.00–0.67,表现出27种耐药谱,多重耐药率(菌株耐抗生素种类>3)达到60.00%,尤其对万古霉素、阿莫西林、麦迪霉素和利福平的耐药率均高于50%,但对庆大霉素、诺氟沙星、环丙沙星、氯霉素和氟苯尼考的耐药率均低于10%。非典型毒力基因含量和耐药性,呈现一定的随年份增加而增强以及海南>广东的时空差异,尤其是耐药性中的谱型丰富度、多重耐药率、某一菌株的最多耐药数量以及多重耐药指数,海南(分别是1.00,69.23%,10,0.32)均大于广东(分别是0.82,54.55%,9,0.25)。【结论】美人鱼发光菌的非典型毒力基因可能是通过水平基因转移获得,海南与广东区域美人鱼发光菌毒力基因与耐药的差异主要受到温度和抗生素使用的影响。 展开更多
关键词 美人鱼发光杆菌 非典型毒力基因 耐药性 时空差异
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许氏平鲉感染美人鱼发光杆菌美人鱼亚种后的生理与炎症反应特征分析
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作者 张岩 于永翔 +5 位作者 王春元 王印庚 荣小军 廖梅杰 张志琪 张正 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第6期249-260,共12页
本研究以黄渤海地区深远海养殖许氏平鲉(Sebastes schlegelii)为对象,针对其季节性高发的败血性皮肤溃疡症的主要致病原美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae,PDD),采用组织病理、细胞、生理及免疫检测等... 本研究以黄渤海地区深远海养殖许氏平鲉(Sebastes schlegelii)为对象,针对其季节性高发的败血性皮肤溃疡症的主要致病原美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae,PDD),采用组织病理、细胞、生理及免疫检测等多种技术方法,从细胞、组织、酶活性及免疫等多个层面,研究了许氏平鲉对PDD侵染的响应机制。结果显示,许氏平鲉感染PDD后引起肠道、脾脏及肝脏结构病变,血液中白细胞数量显著下降,肝脏的抗氧化性能(SOD、CAT、MDA、PO和MPO)、非特异性免疫性能(LZM、ACP、AKP和SIgA)以及消化酶指标(α-AL、PAMY和LPS)规律较好;qRT-PCR结果显示,感染后的许氏平鲉肠道紧密连接蛋白相关基因(CLDN3、CLDN15和ZO-1)及抗炎因子基因(IL-10和IL-12b)相对表达量均显著下调(P<0.05),肠道炎症因子(IL-8、IL-15和IL-1β)相对表达量显著上调(P<0.05),相关炎症通路基因(NF-κBp65、NLRC3.2和MyD88)相对表达量显著下调(P<0.05)。研究表明,许氏平鲉感染PDD造成生长和抗氧化性能降低,肠道、肝脏、脾脏组织结构损伤,导致组织病变发生,血液中白细胞数量降低,肠道紧密连接蛋白和抗炎因子基因相对表达量下调,而炎症因子基因相对表达量上调。本研究为建立深远海养殖环境下许氏平鲉的健康评价体系和开发相应的免疫保护技术提供了科学依据。 展开更多
关键词 许氏平鲉 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种 炎症反应 免疫 生理代谢
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flgK对美人鱼发光杆菌美人鱼亚种生理生化和分子调控机制
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作者 刘浩哲 张志琪 +6 位作者 于永翔 王春元 王印庚 荣小军 廖梅杰 罗璋 张正 《微生物学报》 北大核心 2025年第8期3583-3599,共17页
美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae,PDD)是一种广泛存在于海水中的致病菌,能够感染多种经济鱼类,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。鞭毛基因flgK可编码鞭毛钩蛋白FlgK,该蛋白对细菌鞭毛的正常形成至... 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae,PDD)是一种广泛存在于海水中的致病菌,能够感染多种经济鱼类,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。鞭毛基因flgK可编码鞭毛钩蛋白FlgK,该蛋白对细菌鞭毛的正常形成至关重要。【目的】系统解析flgK基因对PDD感染宿主毒力作用的影响机制。【方法】采用高效自杀质粒介导的同源重组方法构建PDD的flgK基因缺失突变株(ΔflgK-PDD),并通过基因测序证实突变成功。对ΔflgK-PDD在生物学特性、毒力基因表达及致病性等方面与野生株(WT-PDD)的差异进行比较分析。【结果】ΔflgK-PDD的生长能力、溶血活性、磷脂酶活性与WT-PDD无显著差异。然而,ΔflgK-PDD的运动能力和生物被膜形成能力较WT-PDD显著下降。透射电子显微镜观察显示,ΔflgK-PDD未能形成鞭毛结构。通过人工感染实验发现ΔflgK-PDD对许氏平鲉的LD50为WT-PDD的557%,致病性显著降低。实时荧光定量PCR结果进一步表明,与WT-PDD株相比,ΔflgK-PDD的鞭毛相关基因fliK和flgL,II型分泌系统(type Ⅱ secretion system,T2SS)相关基因gspC和gspD以及毒力基因hlyApl表达显著下调;而鞭毛相关基因fliH,T2SS相关基因gspE,外膜相关基因ompP、flhB和脂多糖相关基因lapB表达显著上调,其余基因未见显著变化。【结论】flgK基因的突变可导致ΔflgK-PDD无法形成完整的鞭毛结构,并显著改变鞭毛相关基因的相对表达水平,从而降低其运动性和定殖能力,最终导致其致病性显著下降。 展开更多
关键词 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种 flgK基因 致病性 分子机制
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美人鱼发光杆菌抑菌中草药的筛选及应用试验
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作者 梁一帆 吴建绍 +4 位作者 李慧耀 杨求华 郭松林 李昭杰 林琪 《水产科学》 北大核心 2025年第2期274-283,共10页
为筛选出可安全、高效防治仿刺参腐皮综合征的中草药,采用MH培养基、2216E液体培养和抑菌圈法及改良微量二倍稀释法,将诃子、大黄、板蓝根、夏枯草、乌梅、黄柏、虎杖、秦皮、黄连、白芍、五倍子、赤芍、穿心莲、五味子、青蒿、金银花... 为筛选出可安全、高效防治仿刺参腐皮综合征的中草药,采用MH培养基、2216E液体培养和抑菌圈法及改良微量二倍稀释法,将诃子、大黄、板蓝根、夏枯草、乌梅、黄柏、虎杖、秦皮、黄连、白芍、五倍子、赤芍、穿心莲、五味子、青蒿、金银花、白头翁、黄岑、石榴皮、大青叶等20种中草药粉碎过筛,取2 g药粉置于150mL双蒸水浸泡30min,大火煮沸,小火煮20min,大火浓缩至20mL,测定其对仿刺参源美人鱼发光杆菌的体外抑菌效果和筛选出的抑菌效果较好的中草药对体质量(0.40±0.15)g仿刺参的毒性,用筛选出的抑菌中草药拌饲投喂体质量(18.5±5.4)g的仿刺参28d后,计算人工攻毒感染的相对保护率。试验结果显示,诃子、大黄、秦皮、黄连、五倍子、石榴皮等6种中草药水提物对仿刺参源美人鱼发光杆菌有抑菌效果。五倍子的抑菌和杀菌效果最强,最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度分别为1.56g/L和6.25g/L;其次是石榴皮,最小抑菌质量浓度和最小杀菌质量浓度为3.13g/L和25 g/L;诃子、大黄、秦皮、黄连等中草药水提物的最小杀菌质量浓度分别为6.25~25.00g/L,抑菌效果良好。3种中草药对仿刺参幼参的急性毒性依次为:五倍子>诃子>石榴皮,诃子24、48、72、96h的半致死质量浓度分别为0.417、0.209、0.174、0.145g/L,石榴皮24、48、72、96h的半致死质量浓度分别为0.670、0.318、0.211、0.172g/L。抗病力测试结果显示,对照组15d累积死亡率为40%,第15天药物添加组相对保护率依次为3%添加组>1%添加组>5%添加组,分别为92.0%、75.0%和58.4%。试验结果表明,石榴皮可以显著提高仿刺参抗病力,以3%添加量的投喂效果最佳。 展开更多
关键词 仿刺参 美人鱼发光杆菌 中草药 急性毒性 抗病力
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珍珠龙胆石斑鱼源美人鱼发光杆菌的分离鉴定与致病性分析
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作者 钟小飘 陈政思 +5 位作者 李一 陈华谱 黄瑜 王蓓 简纪常 蔡佳 《广东农业科学》 2025年第4期88-97,共10页
【目的】分离鉴定1株来自患病珍珠龙胆石斑鱼的病原菌,并对该菌的类型、生理生化特性、药敏特性和致病性开展研究,为其病害防控提供理论基础。【方法】在湛江市某养殖场发现患病石斑鱼,无菌条件下从脾脏中分离得到1株优势菌(OR539201),... 【目的】分离鉴定1株来自患病珍珠龙胆石斑鱼的病原菌,并对该菌的类型、生理生化特性、药敏特性和致病性开展研究,为其病害防控提供理论基础。【方法】在湛江市某养殖场发现患病石斑鱼,无菌条件下从脾脏中分离得到1株优势菌(OR539201),对该菌株开展形态学观察、16S rRNA基因序列分析及生理生化特性鉴定,进一步开展药敏试验、回归感染试验,并检测其毒力基因。【结果】根据分离菌株的形态学观察、16S rRNA序列分析和生理生化鉴定结果,确定菌株OR539201为美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae)。该菌株在LB平板上呈圆形菌落,形态饱满,光滑均匀。系统发育树结果表明,菌株OR539201与美人鱼发光杆菌聚为一支,亲缘关系最近,同为弧菌属。生化鉴定结果显示,氧化酶活性、尿素、赖氨酸等反应呈阳性,水杨苷、甘露醇等反应呈阴性。药敏试验结果表明,该菌株对多粘菌素、丁胺卡那、头孢曲松等6种抗生素中等敏感,对氧氟沙星、环丙沙星、头孢氨苄等13种抗生素敏感。回归感染试验结果表明,该菌株对石斑鱼具有致病性,人工感染后出现体表溃疡、红色增生结节、肝脏肿大、肠道糜烂、脑部红肿等与自然感染相同的症状。载菌量测定结果显示,试验组石斑鱼脾脏及肝脏菌量明显高于对照组。毒力基因检测结果显示,该致病菌具有磷脂酶活性相关基因(plpV)。【结论】成功从患病石斑鱼中分离得到1株潜在致病菌,鉴定为美人鱼发光杆菌美人鱼亚种,该菌株具有明显致病性,可诱发明显病变、引起鱼类死亡。 展开更多
关键词 石斑鱼 美人鱼发光杆菌 生化特性 药敏试验 回归感染 致病性 载菌量 毒力基因
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半滑舌鳎病原菌(发光杆菌杀鱼亚种)的分离与鉴定(英文) 被引量:31
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作者 王燕 韩茵 +2 位作者 李筠 陈吉祥 张晓华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期763-768,共6页
2006年夏,山东青岛某渔场养殖半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther)大量死亡。症状主要表现为体表溃烂,鳍基部出血等,解剖可见胆囊发黑,肾脏发黄。从患病半滑舌鳎胆囊分离出优势菌并命名为WY06。人工感染试验证实WY06对半滑舌鳎及... 2006年夏,山东青岛某渔场养殖半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Gunther)大量死亡。症状主要表现为体表溃烂,鳍基部出血等,解剖可见胆囊发黑,肾脏发黄。从患病半滑舌鳎胆囊分离出优势菌并命名为WY06。人工感染试验证实WY06对半滑舌鳎及模式动物斑马鱼都具有很强的致病性,其半数致死量分别为5.5×103cfu/克鱼(5.2×105cfu/条鱼)和1.9×103cfu/克鱼(8.9×102cfu/条鱼)。该病原菌革兰氏染色阴性,菌体呈杆状。综合该菌在形态、生理生化特征及16S rDNA同源性等方面的结果,确认WY06为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)。该菌对头孢呋肟、菌必治等抗生素敏感。美人鱼发光杆菌杀鱼亚种在美国、日本、欧洲的海水养殖中为常见的病原菌,但作为鱼类病原菌在中国属首次报道。 展开更多
关键词 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 photobacterium damselae
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美人鱼发光杆菌杀鱼亚种感染卵形鲳鲹的病理学观察 被引量:15
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作者 苏友禄 冯娟 +2 位作者 郭志勋 徐力文 王江勇 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期75-81,共7页
病原菌美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)分离自发病的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus),本实验利用腹腔注射和浸泡的感染途径,观察卵形鲳鲹发光杆菌病的病理变化。感染发病鱼呈现急性和慢性临床症状,主要... 病原菌美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)分离自发病的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus),本实验利用腹腔注射和浸泡的感染途径,观察卵形鲳鲹发光杆菌病的病理变化。感染发病鱼呈现急性和慢性临床症状,主要急性症状为鳃盖周围轻微出血,腹腔积水和内脏器官多灶性坏死;主要慢性症状为脾脏、肾脏和心脏内能观察到直径为0.5~1.0 mm的白色粟米样结节;利用光学显微镜和透射电镜观察的组织病理显示:急性病理症状主要表现为鳃、肝和肾发生变性及凝固性坏死,肾管微绒毛紊乱,线粒体的嵴脱落,脾淋巴细胞增生,核染色质边集,心肌细胞发生多灶性坏死,线粒体增生,肠道的病变较轻微。慢性病理症状主要表现为鳃丝上皮细胞坏死,脾淋巴细胞线粒体、高尔基体和内质网溶解,肾小管上皮细胞的微绒毛脱落,心肌纤维Z带排列紊乱,线粒体变性,肝脏、肾脏、脾脏、心脏和肠道出现典型的肉芽肿病变。相比之下,脾脏、肾脏和心脏的病变是所有器官中最严重的。 展开更多
关键词 卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(photobacterium damselae subsp.piscicida) 病理学
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一株病原发光杆菌的分离与鉴定 被引量:3
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作者 徐加涛 阎斌伦 +3 位作者 张晓君 白雪松 秦蕾 毕可然 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1457-1464,共8页
从三疣梭子蟹育苗场发病且大量死亡的大眼幼体中分离到优势生长的菌株SX1,人工感染试验证明,SX1对健康三疣梭子蟹大眼幼体及Ⅲ期幼蟹有较强的致病性;对菌株SX1进行了形态特征、理化特性等表型生物学特性检验,并进行了菌株SX1的16S rRNA... 从三疣梭子蟹育苗场发病且大量死亡的大眼幼体中分离到优势生长的菌株SX1,人工感染试验证明,SX1对健康三疣梭子蟹大眼幼体及Ⅲ期幼蟹有较强的致病性;对菌株SX1进行了形态特征、理化特性等表型生物学特性检验,并进行了菌株SX1的16S rRNA、gyrB和rpoA 3种基因的同源性检索与系统发育学分析。结果显示,菌株SX1具有发光杆菌属的特征,且16S rRNA、gyrB和rpoA 3种基因序列均与发光杆菌具有较高的同源性,在系统发育树中与Photobacteriumganghwense聚为一个分支,自举数据值达100%。综合菌株SX1的形态特征、理化特性及3种基因的同源性检索与系统发育学分析,研究表明菌株SX1与P.ganghwense亲缘关系更近,鉴定SX1为P.ganghwense且为本次引起三疣梭子蟹大眼幼体大量死亡的病原菌。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 photobacterium ganghwense 16S RRNA基因 gyrB基因 rpoA基因
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卢氏发光杆菌κ-卡拉胶酶Cgk483的重组表达及其酶解产物的体外降脂功能
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作者 陈菁 潘旭思 +5 位作者 黄浩阳 刘浩 汪卓 赵巧丽 戴梓茹 钟赛意 《食品科学》 北大核心 2025年第18期73-82,共10页
本研究旨在探讨卢氏发光杆菌(Photobacterium rosenbergii)中κ-卡拉胶酶Cgk483的重组表达及其在卡拉胶寡糖制备中的应用,并对得到的卡拉胶寡糖进行结构表征以及体外降脂效果分析。通过基因克隆和异源表达,成功获得电泳纯的重组酶Cgk483... 本研究旨在探讨卢氏发光杆菌(Photobacterium rosenbergii)中κ-卡拉胶酶Cgk483的重组表达及其在卡拉胶寡糖制备中的应用,并对得到的卡拉胶寡糖进行结构表征以及体外降脂效果分析。通过基因克隆和异源表达,成功获得电泳纯的重组酶Cgk483,其分子质量为35.89 kDa,纯化后的酶活力提升10倍,达到489.88 U/mg。酶学性质研究表明,重组酶Cgk483的最适反应温度和pH值分别为40℃和8.0,在40℃以下和pH 5.0~10.0范围内具有较好稳定性,Fe^(2+)、Na^(+)和Ba^(2+)能提升重组酶Cgk483的活性。利用重组酶Cgk483成功制备得到κ-卡拉胶寡糖,由新卡拉二糖、新卡拉四糖和新卡拉六糖组成。结构分析显示酶解未破坏其主链,但使其羟基等基团暴露,提高了κ-卡拉胶寡糖的溶解性。体外降脂研究表明,κ-卡拉胶寡糖能显著抑制氧化型低密度脂蛋白引起的RAW264.7巨噬细胞泡沫化,减少脂质蓄积。本研究制备了高效制备κ-卡拉胶寡糖的工具酶,并揭示了其酶解产物在降脂方面的应用潜力,可为κ-卡拉胶寡糖的高效制备及动脉粥样硬化防治拓展新思路。 展开更多
关键词 κ-卡拉胶酶 卡拉胶寡糖 降脂 卢氏发光杆菌
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酞酸酯DMP、DEP和DBP对明亮发光杆菌的毒性研究
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作者 李海燕 王平 +2 位作者 刘雯 王心春 尉腾达 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期121-125,共5页
酞酸酯(PAEs,phthalate acid esters)是目前最普遍的有机污染物之一,一定剂量的酞酸酯会产生生殖和发育毒性等健康危害。以明亮发光杆菌(Photobacterium phosphoreum T3)为受试生物,评价了甲醇和3种PAEs[dimethyl phthalate(DMP),... 酞酸酯(PAEs,phthalate acid esters)是目前最普遍的有机污染物之一,一定剂量的酞酸酯会产生生殖和发育毒性等健康危害。以明亮发光杆菌(Photobacterium phosphoreum T3)为受试生物,评价了甲醇和3种PAEs[dimethyl phthalate(DMP),diethyl phthalate(DEP),dibutyl phthalate(DBP)]对其剂量—效应关系,以期为酞酸酯暴露风险评价提供一定理论依据。结果表明,采用Logit和Weibull非线性函数(全浓度区间)分别对甲醇和3种PAEs的浓度—效应曲线进行拟合,效果均优于线性函数(局部浓度区间)拟合。其中,甲醇的线性与Logit函数拟合r^2分别为0.959 2和0.986 3,两者EC50分别为1.185和1.044 mol·L^-1,结果相近。数据结果表明,采用明亮发光杆菌测试PAEs急性毒性时,以甲醇为助溶剂(浓度〈0.247 mol·L^-1,毒性效应可忽略)是可行的。在一定浓度范围内,首次以甲醇为助溶剂,以DMP、DEP和DBP 3种PAEs对明亮发光杆菌进行毒性测试。线性拟合DMP、DEP和DBP对明亮发光杆菌的浓度-效应曲线,拟合r^2分别为0.926 2、0.921 4、0.933 9,其EC50分别为2.64E-04、2.79E-04和1.14E-05 mol·L^-1。与此同时,3组PAEs毒性数据均能以Weibull函数进行非线性拟合,r^2分别为0.974 9、0.974 2和0.964 8,效果良好,其EC50分别为1.49E-04、2.72E-04和9.00E-06 mol·L^-1。两种拟合结果表明,Weibull函数非线性拟合效果更优,半致死浓度EC50结果相近。由上述结果可知,以甲醇为助溶剂时,DMP、DEP和DBP分别在6.14E-9-6.14E-3、5.04E-5-2.52E-3和3.76E-9-3.76E-5 mol·L^-1浓度范围内,3种PAEs对明亮发光杆菌的急性毒性强弱为DBP〉DMP〉DEP。在上述浓度范围内,DMP、DEP和DBP对明亮发光杆菌的抑制率分别为96.87%、95.24%和88.35%。 展开更多
关键词 酞酸酯(PAEs) DMP DEP DBP 明亮发光杆菌(photobacterium phosphoreum)
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