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毛竹PheNAC4互作蛋白的筛选与分析
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作者 谢丽华 姚鹏强 +4 位作者 刘佳雪 王哲 朱楠楠 程世平 程占超 《园艺学报》 北大核心 2025年第10期2677-2690,共14页
前期试验表明毛竹(Phyllostachys edulis)PheNAC4基因在盐胁迫后下调表达,且与胁迫相关NAC基因的蛋白序列具有较高的相似性,过表达PheNAC4降低转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性。本研究中以PheNAC4为诱饵,采用酵母双杂交系统筛选与其相互... 前期试验表明毛竹(Phyllostachys edulis)PheNAC4基因在盐胁迫后下调表达,且与胁迫相关NAC基因的蛋白序列具有较高的相似性,过表达PheNAC4降低转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性。本研究中以PheNAC4为诱饵,采用酵母双杂交系统筛选与其相互作用的蛋白,并进一步探究其调控机制。试验结果显示,PheNAC4对酵母细胞无毒性,具有自激活活性。添加1000 ng·L^(-1)金担子素A抑制剂能抑制PheNAC4的自激活活性。通过筛选和序列分析,得到36个与PheNAC4互作的候选蛋白,这些候选蛋白可能与毛竹对干旱、盐胁迫的响应以及衰老调控密切相关。为验证相互作用,选择2个与胁迫相关的候选蛋白(PheR40C1和PheF3HL),通过酵母双杂交回转和双分子荧光互补试验(bimolecular fluorescence complementation,BiFC),验证PheNAC4能够与PheR40C1和PheF3HL在酵母细胞和植物细胞中形成异源二聚体。对盐胁迫后PheR40C1和PheF3HL基因的表达模式进行分析,结果表明PheR40C1的表达与PheNAC4在胁迫后的12 h具有一致性,但PheF3HL与PheNAC4呈相反的表达模式,以上结果表明PheNAC4可能通过与这两个基因互作参与毛竹的盐胁迫响应。 展开更多
关键词 毛竹 蛋白互作 胁迫 phenac4 酵母双杂交
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