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大球盖菇磷酸葡萄糖异构酶(SrPGI)基因的克隆、重组表达及酶学特性分析
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作者 黄磊 石鸿宇 +3 位作者 司灿 何春梅 刘勋成 段俊 《中国食用菌》 2025年第6期81-88,共8页
大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)是联合国粮农组织向发展中国家推荐栽培的食用菌种类之一,近年来在我国广泛栽培。试验首次基于大球盖菇全基因组数据,克隆获得其磷酸葡萄糖异构酶(SrPGI)的基因,成功实现其在大肠杆菌系统中的异源表... 大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)是联合国粮农组织向发展中国家推荐栽培的食用菌种类之一,近年来在我国广泛栽培。试验首次基于大球盖菇全基因组数据,克隆获得其磷酸葡萄糖异构酶(SrPGI)的基因,成功实现其在大肠杆菌系统中的异源表达,并系统解析了重组SrPGI的酶学特性。结果表明,SrPGI发生催化反应的最适pH为8,最适温度为50℃,此条件下对底物6-磷酸果糖具有较高亲和力(K_(m)=0.3063 mmol·L^(-1))。金属离子K^(+)和Mg^(2+)对酶活力有激活作用,而Ni^(2+)、Cu^(2+)、Fe^(3+)、多种有机溶剂和十二烷基硫酸钠(SDS)均显著抑制酶活力。试验结果首次揭示了SrPGI的催化特性,为从分子水平调控其多糖合成提供了新靶点和理论依据。 展开更多
关键词 大球盖菇 磷酸葡萄糖异构酶(pgi) 基因 酶学特性
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亚洲玉米螟Pgi基因全长的同源PCR克隆 被引量:1
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作者 苏国连 和淑琪 +1 位作者 陈斌 李正跃 《贵州农业科学》 CAS 2015年第3期20-23,50,共5页
为从核酸水平上研究亚洲玉米螟 Pgi 基因,以 GenBank 中的鳞翅目昆虫 Pgi 基因 mRNA 序列为参考序列,利用 MEGA 5.0软件、IDT 在线程序及 Primer Primer5.0软件等设计用于扩增亚洲玉米螟Pgi 基因编码序列的引物,同时利用 PCR 扩增... 为从核酸水平上研究亚洲玉米螟 Pgi 基因,以 GenBank 中的鳞翅目昆虫 Pgi 基因 mRNA 序列为参考序列,利用 MEGA 5.0软件、IDT 在线程序及 Primer Primer5.0软件等设计用于扩增亚洲玉米螟Pgi 基因编码序列的引物,同时利用 PCR 扩增及序列分析验证引物的有效性。结果表明:测定的亚洲玉米螟 Pgi 基因编码序列与 Genbank 中美国白蛾、苜蓿黄蝶等鳞翅目昆虫 Pgi 基因 mRNA 序列均具有较高的相似度(达78%~85%),表明,设计的引物均具有较强的有效性,能成功地扩增出亚洲玉米螟 Pgi 基因编码序列。 展开更多
关键词 pgi 基因 编码序列 引物设计 亚洲玉米螟
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亚洲玉米螟6-磷酸葡萄糖异构酶基因(Pgi)全序测定及分析
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作者 苏国连 李正跃 +2 位作者 陈斌 桂富荣 和淑琪 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期201-209,共9页
为进一步从核酸水平上研究亚洲玉米螟Pgi基因相关特性,采用反转录PCR及RACE等技术对该基因编码序列及DNA全序列进行了测定,与Gen Bank中其它昆虫Pgi基因相关信息进行比较分析,并构建了系统发育树。结果表明:亚洲玉米螟Pgi基因编码区序... 为进一步从核酸水平上研究亚洲玉米螟Pgi基因相关特性,采用反转录PCR及RACE等技术对该基因编码序列及DNA全序列进行了测定,与Gen Bank中其它昆虫Pgi基因相关信息进行比较分析,并构建了系统发育树。结果表明:亚洲玉米螟Pgi基因编码区序列长为1671 bp,共编码556个氨基酸;其DNA序列全长为10078 bp(短序列为9311 bp),由12个外显子与11个内含子镶嵌而成;各外显子长度与鳞翅目大部分昆虫相同,介于95~188 bp之间,内含子序列总长度为8407 bp(短序列为7640 bp),各内含子长度介于418~1547 bp之间,且在内含子3、4、5、11上均发现杂合现象。系统发育结果显示,大部分昆虫Pgi基因c DNA严格按物种聚类,除了双翅目的家蝇Musca domestica与黑森瘿蚊Mayetiola destructor出现一定的交叉现象外,其余没有出现交叉现象。 展开更多
关键词 亚洲玉米螟 pgi基因 序列分析
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