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石榴花色苷相关基因(PgANS、PgCHS、PgACT)的克隆与序列分析 被引量：2
1
作者 吴忠红 杜鹃 +3 位作者 阿塔吾拉.铁木尔 周江 许静 吴斌 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期88-94,共7页
【目的】获得石榴果实PgANS、PgCHS和PgACT基因,并对这三个基因进行序列分析。【方法】以喀什甜石榴为试材,通过酚-氯仿法提取籽粒中的总RNA,用TIANScript cDNA试剂盒反转录合成第一链cDNA,并用特异引物对其RT-PCR扩增,将得到的cDNA片... 【目的】获得石榴果实PgANS、PgCHS和PgACT基因,并对这三个基因进行序列分析。【方法】以喀什甜石榴为试材,通过酚-氯仿法提取籽粒中的总RNA,用TIANScript cDNA试剂盒反转录合成第一链cDNA,并用特异引物对其RT-PCR扩增,将得到的cDNA片段连接到PMD19-T载体上,然后将该载体转到DH5α,并对阳性克隆进行序列分析。【结果】PgANS基因片段长度为474bp,Genbank登录号为KT779433,与NCBI数据库中KF841619、GU376749两种石榴核苷酸的同源性均为99%,与甘薯核苷酸(GU59821)、白桑核苷酸(JF499385)、草莓核苷酸(AY695817)的同源性分别为85%、79%、76%;PgCHS和PgACT基因片段长度分别为140bp和148bp,分别与NCBI数据库中JF747148、GU376750两种石榴核苷酸同源性为99%和93%。【结论】获得PgANS、PgCHS和PgACT基因片段,为进一步研究贮藏条件对石榴籽粒花色苷的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 花色苷 PgANS PgCHS pgact 克隆
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