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牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对破骨细胞EphA2基因表达的调控 被引量：6
1
作者 高爱超 于海燕 +4 位作者 李娜 侯玉帛 戚欣 于小琳 于维先 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期268-271,275,共5页
目的:研究小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7在破骨分化过程中,Pg-LPS对破骨细胞EphA2表达的影响。方法:用终浓度10mg/L的Pg-LPS刺激RAW264.7细胞后,分别在1、3、5d,应用RT-PCR检测破骨细胞中EphA2基因和破骨细胞相关基因(破骨细胞内基质金属... 目的:研究小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7在破骨分化过程中,Pg-LPS对破骨细胞EphA2表达的影响。方法:用终浓度10mg/L的Pg-LPS刺激RAW264.7细胞后,分别在1、3、5d,应用RT-PCR检测破骨细胞中EphA2基因和破骨细胞相关基因(破骨细胞内基质金属蛋白酶(MMP9)、ACP5、c-fos、组织蛋白酶K(CtsK)、NFATc1)的表达,并且通过酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色观察实验组和对照组破骨细胞的分化成熟情况。结果:RT-PCR检测10mg/L的Pg-LPS在第3天和5天,实验组比对照组EphA2基因表达分别增高2.4倍和1.2倍,两组之间存在显著差异(P<0.01);同时也能够促进破骨相关基因c-fos、NFATc1、CtsK、ACP5、MMP9的表达,实验组与对照组相比差异有显著性;TRAP染色结果显示:实验组比对照组的TRAP阳性多核细胞数目明显增多。结论:10mg/L的Pg-LPS对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,在破骨分化的中期和晚期均能够促进EphA2基因的表达,但是在破骨分化早期对EphA2基因的表达无明显作用。 展开更多
关键词 pg-lps 破骨细胞 EphA2基因
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IL-10对Pg-LPS刺激下兔枯否氏细胞凋亡的影响 被引量：2
2
作者 许雯静 李艳芬 +2 位作者 闫福华 吴春芳 游晓庆 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第7期636-639,共4页
目的:探讨IL-10对Pg-LPS刺激下兔枯否氏细胞凋亡的影响。方法:新西兰兔3只,收集枯否氏细胞(Kupffer cell,KC),分为空白对照组:RPMI1640+KC,Pg-LPS组:1mg/LPg-LPS+KC,IL-10+Pg-LPS组:0.1mg/L IL-10+1mg/L Pg-LPS+KC,刺激24h后,荧光定量PC... 目的:探讨IL-10对Pg-LPS刺激下兔枯否氏细胞凋亡的影响。方法:新西兰兔3只,收集枯否氏细胞(Kupffer cell,KC),分为空白对照组:RPMI1640+KC,Pg-LPS组:1mg/LPg-LPS+KC,IL-10+Pg-LPS组:0.1mg/L IL-10+1mg/L Pg-LPS+KC,刺激24h后,荧光定量PCR法检测凋亡相关基因Caspase-3、Fas、p53的表达量。结果:1mg/L Pg-LPS可促进兔KC的凋亡,Caspase-3、Fas、p53表达量增多(P<0.05);IL-10干预处理可减少兔KC的凋亡,抑制Caspase-3、Fas的表达(P<0.05),但对p53的表达无明显作用。结论:Pg-LPS可通过外源性/内源性凋亡途径导致兔KC凋亡,而IL-10可能主要通过抑制外源性死亡受体途径从而达到抑制KC凋亡的作用。 展开更多
关键词 pg-lps IL-10 枯否氏细胞 凋亡 CASPASE-3 FAS P53
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基于ROS/TXNIP/NLRP3通路探讨槲皮素对Pg-LPS诱导RAW264.7细胞炎症因子表达的影响 被引量：8
3
作者 刘兰宁 唐焕珍 李晓媛 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4049-4052,共4页
目的探讨槲皮素调控活性氧(ROS)/硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/NOD样受体相关蛋白3(NLRP3)信号通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法采用1 mg/L Pg-LPS刺激RAW264.7巨噬细胞构建细胞炎症模型,分为对... 目的探讨槲皮素调控活性氧(ROS)/硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/NOD样受体相关蛋白3(NLRP3)信号通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法采用1 mg/L Pg-LPS刺激RAW264.7巨噬细胞构建细胞炎症模型,分为对照组、模型组及槲皮素低、中、高剂量组(5、25、50μmol/L),MTT法检测细胞活力,倒置显微镜观察各组细胞形态变化,RT-qPCR法检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β、TNF-α、诱导型NO合酶(iNOS)、环氧合酶(COX-2)mRNA表达,荧光分光光度计检测细胞中ROS水平,Western blot法检测TXNIP、NLRP3蛋白表达。结果0~50μmol/L槲皮素对RAW264.7细胞活力无明显影响(P>0.05)。与对照组比较,模型组细胞形成伪足所占比例升高(P<0.05),IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS、COX-2 mRNA及TXNIP、NLRP3蛋白表达上调(P<0.05),ROS水平增加(P<0.05);与模型组比较,槲皮素各剂量组细胞形成伪足所占比例降低(P<0.05),IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS、COX-2 mRNA及TXNIP、NLRP3蛋白表达下调(P<0.05),ROS水平减少(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论槲皮素可抑制Pg-LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子表达,其机制可能与抑制ROS/TXNIP/NLRP3信号通路活性有关。 展开更多
关键词 槲皮素 牙龈卟啉单胞菌脂多糖(pg-lps) ROS/TXNIP/NLRP3通路 炎症因子
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Pg-LPS对束缚应激大鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响
4
作者 李榕卿 林实 +1 位作者 李艳芬 赵欣 《临床口腔医学杂志》 2008年第6期335-338,共4页
目的:检测牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)对束缚应激大鼠腹腔巨噬细胞凋亡情况的影响,初步探讨应激影响牙周疾病的机制。方法:采用束缚应激方式,将大鼠随机分为正常对照组、应激组,于应激结束时处死动物,常规收集腹腔液。巨噬细胞于贴壁纯化... 目的:检测牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)对束缚应激大鼠腹腔巨噬细胞凋亡情况的影响,初步探讨应激影响牙周疾病的机制。方法:采用束缚应激方式,将大鼠随机分为正常对照组、应激组,于应激结束时处死动物,常规收集腹腔液。巨噬细胞于贴壁纯化后分别用RPMI-1640培养液,RPMI-1640培养液+0.01μg/mlPg-LPS,RPMI-1640培养液+1μg/mlPg-LPS继续培养。于24h后收集细胞爬片,采用荧光染色法、原位末端标记法(TUNEL)观察巨噬细胞凋亡情况。结果:1μg/mlPg-LPS刺激后,正常对照组及应激组巨噬细胞的凋亡率明显增加,应激组巨噬细胞凋亡率显著高于正常对照组。结论:一定浓度的Pg-LPS刺激后,大鼠腹腔巨噬细胞发生凋亡;束缚应激能加重这种异常。 展开更多
关键词 应激 pg-lps 巨噬细胞 凋亡
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束缚应激对Pg-LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子的影响 被引量：1
5
作者 李榕卿 林实 +1 位作者 李艳芬 赵欣 《临床口腔医学杂志》 2013年第8期460-463,共4页
目的:检测束缚应激对牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)诱导的大鼠腹腔巨噬细胞释放IL-Iβ、IL-2、IL-6、IL-10等细胞因子的影响,初步探讨应激影响牙周疾病的机制。方法:采用束缚应激方式,将大鼠随机分为正常对照组、应激组,于应激结束时处死,... 目的:检测束缚应激对牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)诱导的大鼠腹腔巨噬细胞释放IL-Iβ、IL-2、IL-6、IL-10等细胞因子的影响,初步探讨应激影响牙周疾病的机制。方法:采用束缚应激方式,将大鼠随机分为正常对照组、应激组,于应激结束时处死,常规收集腹腔液。巨噬细胞于贴壁纯化后用RPMI-1640培养液,RPMI-1640培养液+1μg/mL Pg-LPS继续培养。于24 h后分别收集上清,用Luminex100检测仪测定上清液中IL-Iβ、IL-2、IL-6、IL-10等的水平。结果:①12 d应激组大鼠腹腔巨噬细胞数量较无应激组及1 d应激组显著下降。②1天应激组各细胞因子水平与无应激组比较均无显著差异。12 d应激组的IL-1β水平比无应激组显著增加(P<0.05)、IL-6水平比无应激组显著降低(P<0.05);IL-2水平比1天应激组显著降低(P<0.05)。IL-10在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢性束缚应激可引起大鼠腹腔巨噬细胞总量减少;慢性束缚应激可改变应激宿主对牙龈卟啉单胞菌感染的反应,这可能是慢性应激引起牙周疾病的机制之一。 展开更多
关键词 pg-lps 应激 巨噬细胞 细胞因子
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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对成骨细胞EphA2表达的调控 被引量：2
6
作者 王习超 高爱超 +3 位作者 于海燕 李娜 王晓龙 于维先 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第7期618-621,共4页
目的:研究小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1在成骨分化过程中,牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对EphA2表达的影响。方法:使用终浓度1mg/L的Pg-LPS与MC3T3-E1共培养,分别在第3、7、14天3个时间点,采用RT-PCR和Western-Blot技术测定EphA2的表达和... 目的:研究小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1在成骨分化过程中,牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对EphA2表达的影响。方法:使用终浓度1mg/L的Pg-LPS与MC3T3-E1共培养,分别在第3、7、14天3个时间点,采用RT-PCR和Western-Blot技术测定EphA2的表达和成骨相关基因的表达,并通过PNPP法测定碱性磷酸酶活性。结果:RT-PCR结果提示,在第3天和第7天,实验组比对照组EphA2基因表达分别增高4.5倍和1.3倍,两组之间存在显著差异(P<0.05)。同时成骨标志物ALP和Sp7基因表达降低,与对照组相比差异有显著性,但Runx2和ColⅠ基因的表达则无明显差异。但是在第14天,实验组和对照组之间EphA2和成骨相关基因表达均无显著性差异。Western-Blot结果提示,在第7天实验组比对照组EphA2蛋白表达增加。结论:Pg-LPS对前成骨细胞系MC3T3-E1细胞,在成骨分化的早期和中期能够促进EphA2的表达,但是在成骨分化晚期对EphA2的表达则无明显作用。 展开更多
关键词 pg-lps 成骨细胞 EPHA2
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