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恶性疟原虫PfSET5的生物信息学分析及蛋白纯化
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作者 朱文菊 李亚楠 +6 位作者 张俊梅 刘娇 谢金晶 张欣 董宏杰 尹昆 王琦 《中国病原生物学杂志》 北大核心 2026年第1期66-72,共7页
目的PfSET5属于SET家族,是一种包含SET结构域的组蛋白甲基转移酶。恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)PfSET5可以通过介导组蛋白H3的第64位赖氨酸(H3K64)的甲基化修饰,影响染色质结构并参与基因表达调控。本研究通过对PfSET5进行生物信... 目的PfSET5属于SET家族,是一种包含SET结构域的组蛋白甲基转移酶。恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)PfSET5可以通过介导组蛋白H3的第64位赖氨酸(H3K64)的甲基化修饰,影响染色质结构并参与基因表达调控。本研究通过对PfSET5进行生物信息学分析以及重组蛋白的表达纯化,阐明PfSET5蛋白的理化特性和结构特征,为后续的功能研究和靶向药物的开发奠定基础。方法从NCBI数据库获取PfSET5的氨基酸序列,采用Expasy,TMHMM,SignalP,NetPhos3.1等软件分析PfSET5的理化性质、跨膜区、信号肽、疏水性以及磷酸化位点预测。通过分子克隆构建pET28a-MBP-PfSET5重组蛋白,在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,高压破碎后依次采用镍离子亲和层析、阴离子亲和层析以及分子筛排阻层析进行蛋白纯化。结果PfSET5蛋白共由178个氨基酸组成,带正电荷,无跨膜区,无信号肽,弱亲水性;系统发育树和多序列对比分析显示PfSET5在进化过程中比较保守;成功构建pET28a-MBP-PfSET5重组蛋白并获得大量高纯度蛋白。结论本研究成功实现了PfSET5蛋白的高效表达及纯化,为PfSET5蛋白甲基化分子机制的进一步研究和靶向药物开发奠定基础。 展开更多
关键词 pfset5 异源表达 重组蛋白 蛋白纯化
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