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重组Persephin腺病毒对6-OHDA损伤神经干细胞的保护作用 被引量:2
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作者 肖颂华 沈庆煜 +6 位作者 黄仕雄 杨淞然 刘中霖 王莉梅 彭英 邢诒刚 刘军 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期289-292,共4页
【目的】探讨Persephin对6鄄羟基多巴(6鄄OHDA)损伤神经干细胞的保护作用。【方法】用RT鄄PCR法从人胚胎脑获得PersephincDNA,构建重组Persephin腺病毒。用Westernblot方法分析Persephin基因的表达,Hoechst染色和流式细胞术测定6鄄羟基... 【目的】探讨Persephin对6鄄羟基多巴(6鄄OHDA)损伤神经干细胞的保护作用。【方法】用RT鄄PCR法从人胚胎脑获得PersephincDNA,构建重组Persephin腺病毒。用Westernblot方法分析Persephin基因的表达,Hoechst染色和流式细胞术测定6鄄羟基多巴对神经干细胞凋亡的诱导作用。【结果】从人胎脑成功克隆了人PersephincDNA,构建了其腺病毒载体。Westernblot证实重组Persephin腺病毒在神经干细胞中的表达,表达的Persephin可抑制6鄄羟基多巴诱导的神经干细胞凋亡。【结论】Persephin对6鄄羟基多巴损伤神经干细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 persephin基因 神经干细胞 6-羟基多巴 腺病毒载体
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Persephin基因转染对缺氧诱导的神经干细胞凋亡的影响
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作者 沈庆煜 王莉梅 +2 位作者 叶剑虹 黎祥喷 肖颂华 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2007年第4期443-446,共4页
目的:探讨重组腺病毒介导Persephin基因治疗对缺氧状态下对神经干细胞凋亡的作用。方法:体外培养C17.2神经干细胞,建立神经干细胞缺氧模型;将携带人类Persephin基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞;Western-blotting法分析Persephin蛋... 目的:探讨重组腺病毒介导Persephin基因治疗对缺氧状态下对神经干细胞凋亡的作用。方法:体外培养C17.2神经干细胞,建立神经干细胞缺氧模型;将携带人类Persephin基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞;Western-blotting法分析Persephin蛋白的表达;TUNEL法检测凋亡指数,显微镜观察凋亡小体;流式细胞术测定细胞凋亡率的变化。结果:转染pAdPersephin的C17.2神经干细胞成功表达Persephin蛋白;缺氧后神经干细胞凋亡指数为(25.54±4.30)%,而转染pAdPersephin后的细胞凋亡指数显著减少至(10.04±1.32)%(P<0.01),而转染pAdCMVPersephin+Persephin反义寡核脱氧核酸细胞凋亡指数为(24.05±3.05)%,与对照组无显著差异(P>0.05)。结论:腺病毒介导的Persephin基因能高效表达Persephin;外源性Persephin对C17.2神经干细胞具有抗凋亡作用,能够提高C17.2神经干细胞对缺氧的耐受性。 展开更多
关键词 神经干细胞 persephin 细胞凋亡 缺氧
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Persephin基因转染对缺氧诱导神经干细胞凋亡的影响(英文)
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作者 沈庆煜 肖颂华 +2 位作者 黎祥喷 叶剑虹 王艺东 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期4819-4823,共5页
背景:如何抑制或减少神经干细胞凋亡的发生,促进缺氧后神经干细胞的存活,成为脑梗死神经干细胞移植治疗的研究热点。目地:观察在缺氧状态下转染人类persephin基因对神经干细胞凋亡的作用。设计:完全随机分组,对照实验。单位:中山大学附... 背景:如何抑制或减少神经干细胞凋亡的发生,促进缺氧后神经干细胞的存活,成为脑梗死神经干细胞移植治疗的研究热点。目地:观察在缺氧状态下转染人类persephin基因对神经干细胞凋亡的作用。设计:完全随机分组,对照实验。单位:中山大学附属第二医院神经内科。材料:实验于2006-07/2006-12在中山大学附属第二医院林百欣实验中心完成,重组腺病毒pAd persephin由本实验室构建保存,C17.2神经干细胞由美国哈佛大学医学院Snyder教授惠赠。胰蛋白酶、DMEM/F12购自Gibco公司;胎牛血清来自杭州四季青生物工程公司;多聚赖氨酸购自美国Sigma公司;TUNEL检测试剂盒,阳离子脂质体FuGENE购自瑞士Roche公司;S-P免疫组化试剂盒及DAB显色剂购自福建迈新生物工程公司;鼠抗人Nestin单抗,Persephin兔抗人多抗购自美国Santa Crus公司,persephin反义寡核脱氧苷酸由上海生工合成。方法:①实验干预:将携带人类Persephin基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞,分为4组,A组:正常对照组,C17.2神经干细胞不作缺氧处理。B组:缺氧处理组,即置于37℃、体积分数0.95N2,体积分数0.05CO2厌氧培养箱培养。C组:缺氧+pAdpersiphin转染组,即:将携带人类Persephin基因的重组腺病毒感染C17.2神经干细胞,pAdpersiphin转染48h后的细胞置同B组条件的厌氧培养箱培养。D组:缺氧+pAdpersiphin转染组+persiphin反义寡核脱氧苷酸,即pAdpersiphin+persiphin反义寡核脱氧苷酸转染。②实验评估:Western-blotting法分析Persephin蛋白的表达;TUNEL法检测凋亡指数;流式细胞术测定细胞凋亡率的变化。主要观察指标:Persephin蛋白的表达、细胞凋亡指数和凋亡率。结果:①Persephin蛋白表达:C组细胞经Western blot检测可见一特异性蛋白条带存在,Mr约为24000,符合预期结果,说明persiphin成功表达,D组亦可见一Mr 24000的条带,但条带较单纯pAdpersiphin感染组明显为淡,说明反义persiphin反义寡核脱氧苷酸可成功抑制pAdCMVpersiphin的表达。②细胞凋亡指数:C组凋亡细胞明显减少,凋亡指数低于B、D组(P<0.01),但高于A组(P<0.01),表明细胞凋亡未完全避免。③细胞凋亡率:B、D组凋亡率明显高于A组(P<0.01),C组明显较B组、D组低(P<0.01)。结论:腺病毒介导的Persephin基因能高效表达Persephin;外源性Persephin对C17.2神经干细胞具有抗凋亡作用,能够提高C17.2神经干细胞对缺氧的耐受性。 展开更多
关键词 persephin 凋亡 神经干细胞
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Persephin在顺铂诱导的急性肾损伤小鼠中的作用初探
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作者 袁莉 沈晓晔 +3 位作者 陈挺 戴厚永 黄新忠 张义德 《交通医学》 2016年第1期20-23,共4页
目的:观察顺铂诱导急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)模型中肾皮质Persephin(PSP)的变化。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组及模型组,模型组应用顺铂单次腹腔注射(15mg/kg)制备AKI小鼠模型,对照组小鼠予以同等容积的0.9%的生理盐... 目的:观察顺铂诱导急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)模型中肾皮质Persephin(PSP)的变化。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组及模型组,模型组应用顺铂单次腹腔注射(15mg/kg)制备AKI小鼠模型,对照组小鼠予以同等容积的0.9%的生理盐水单次腹腔注射,造模3天后观察各组小鼠肾功能变化、肾脏病理学改变、实时PCR法及Western印记法检测肾脏皮质PSP的表达。结果 :与对照组相比,模型组小鼠出现精神萎靡不振,反应迟钝,活动减少,造模后第3天尿素氮明显上升(P<0.05),肾脏病理改变中模型组肾小管管型计数(0.63±0.62个/HPF)及坏死计数(3.71±1.14个/HPF)均高于正常对照组(P<0.05)。PSP在模型组肾皮质的表达高于对照组(P<0.05)。结论:AKI模型中肾脏皮质PSP表达升高,提示PSP可能参与了AKI的病程,但其相关作用机制尚需进一步研究。 展开更多
关键词 急性肾损伤 顺铂 persephin 实时PCR法 WESTERN印迹法
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Persephin的研究进展
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作者 肖颂华 邢诒刚 《国外医学(内科学分册)》 2004年第8期362-365,共4页
ersephin是转化生长因子 2 β家族中的一个新亚族 ,该亚族还有新发现的三个成员 :胶质细胞源性神经营养因子、neurturin(NRTN/NTN)、enovin/artemin(EVN/ART)。它们均不同程度地对多巴胺神经元、脊髓前角运动神经元、后根神经节、颈上... ersephin是转化生长因子 2 β家族中的一个新亚族 ,该亚族还有新发现的三个成员 :胶质细胞源性神经营养因子、neurturin(NRTN/NTN)、enovin/artemin(EVN/ART)。它们均不同程度地对多巴胺神经元、脊髓前角运动神经元、后根神经节、颈上神经节等有生长促进作用。Persephin与其它三种胶质细胞源性神经营养因子具有许多共同点 ,但Persephin的基因结构、分布、对多巴胺能神经元的生理作用及信号转导途径具有其独特的一面 。 展开更多
关键词 persephin 神经营养因子 神经元
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重组Persephin慢病毒对多巴胺能神经元的保护作用 被引量:1
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作者 相恒伟 唐顺花 +3 位作者 刘凯 阴晓峰 邓文帅 孙鹏 《青岛大学医学院学报》 CAS 2015年第4期420-422,共3页
目的探讨重组慢病毒介导的Persephin基因治疗对6-OHDA制备的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法将64只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、6-OHDA组、空病毒+6-OHDA组、Persephin慢病毒预处理+6-OHDA组,并给予相应处理... 目的探讨重组慢病毒介导的Persephin基因治疗对6-OHDA制备的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法将64只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、6-OHDA组、空病毒+6-OHDA组、Persephin慢病毒预处理+6-OHDA组,并给予相应处理。6-OHDA注射21d后检测大鼠的旋转行为,免疫荧光检测黑质多巴胺能神经元数目,Western blot检测Persephin及酪氨酸羟化酶(TH)在脑内黑质区的表达。结果Persephin慢病毒黑质注射4周后,多巴胺能神经元成功表达Persephin蛋白(F=5.451,q=3.228~4.736,P〈0.05)。6-OHDA注射21d后,Persephin慢病毒预处理+6-OHDA组旋转次数明显低于6-OHDA组和空病毒+6-OHDA组(F=7.551,q=4.228、5.336,P〈0.05),多巴胺能神经元数目和TH表达水平显著高于6-OHDA组和空病毒+6-OHDA组(F=6.251、5.251,q=3.228~5.736,P〈0.05)。结论 Persephin对6-OHDA制备的PD模型大鼠多巴胺能神经元具有保护作用。 展开更多
关键词 persephin 慢病毒属 帕金森病 多巴胺能神经元 大鼠 Wistar
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Lentivirus-mediated Persephin overexpression in Parkinson's disease rats 被引量:2
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作者 Xiao-feng Yin Hua-min Xu +6 位作者 Yun-xia Jiang Yun-lai Zhi Yu-xiu Liu Heng-wei Xiang Kai Liu Xiao-dong Ding Peng Sun 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第11期1814-1818,共5页
Persephin, together with glial cell line-derived neurotrophic factor and neurturin, has a neurotrophic effect and promotes the survival of motor neurons cultured in vitro. In this study, dopaminergic neurons in the su... Persephin, together with glial cell line-derived neurotrophic factor and neurturin, has a neurotrophic effect and promotes the survival of motor neurons cultured in vitro. In this study, dopaminergic neurons in the substantia nigra of rats were transfected with the Persephin gene. One week later 6-hydroxydopamine was injected into the anterior medial bundle to establish a Parkinson's disease model in the rats. Results found that the number of dopaminergic neurons in the substantia nigra increased, tyrosine hydroxylase expression was upregulated and concentrations of dopamine and its metabolites in corpus striatum were increased after pretreatment with Persephin gene. In addition, the rotating effect of the induced Parkinson's disease rats was much less in the group pretreated with the Persephin gene. Persephin has a neuroprotective effect on the 6-hydroxydopamine-induced Parkinson's disease through protecting dopaminergic neurons. 展开更多
关键词 nerve regeneration persephin LENTIVIRUS Parkinson's disease dopaminergic neurons gene therapy OVER-EXPRESSION TRANSFECTION STRIATUM neural regeneration
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人重组PSP及其生物活性研究
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作者 陈哲宇 郑兴东 +3 位作者 何志勇 黄爱军 路长林 吴祥甫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第5期626-630,共5页
为了获得人重组 persephin( PSP)并研究其生物学活性 ,从人胎脑组织中提取总 RNA,以RT- PCR方法获取编码人 PSP成熟蛋白 c DNA.将人 PSP c DNA插入含 T7启动子的质粒 p ET-2 8a( + ) ,构建表达质粒 p ET- PSP,转化大肠杆菌 BL 2 1 ( DE3... 为了获得人重组 persephin( PSP)并研究其生物学活性 ,从人胎脑组织中提取总 RNA,以RT- PCR方法获取编码人 PSP成熟蛋白 c DNA.将人 PSP c DNA插入含 T7启动子的质粒 p ET-2 8a( + ) ,构建表达质粒 p ET- PSP,转化大肠杆菌 BL 2 1 ( DE3)获得表达菌株 BLPSP,经 IPTG诱导表达的 PSP形成包含体 .凝胶自动扫描分析表明 ,PSP表达量约占菌体总蛋白 2 0 %以上 .用Ni2 + - NTA树脂一步法纯化目的蛋白 ,纯度达 85%以上 .纯化和复性的 PSP蛋白能显著促进脊髓神经元的存活 . 展开更多
关键词 人重组PSP 脊髓神经元 神经营养因子 生物活性
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