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Effects of Paranosema locustae(Microsporidia) on the development and morphological phase transformation of Locusta migratoria(Orthoptera: Acrididae) through modulation of the neurotransmitter taurine
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作者 LI Ao-mei YIN Yue +5 位作者 ZHANG Yu-xin ZHANG Liu ZHANG Kai-qi SHEN Jie TAN Shu-qian SHI Wang-peng 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第1期204-210,共7页
Neurotransmitters are important in the maintenance of phase transformation of Locusta migratoria(Arthropoda: Orthoptera). Here, the effects of the entomopathogen Paranosema locustae on the neurotransmitter taurine in ... Neurotransmitters are important in the maintenance of phase transformation of Locusta migratoria(Arthropoda: Orthoptera). Here, the effects of the entomopathogen Paranosema locustae on the neurotransmitter taurine in migratory locusts were studied using biochemical methods. After inoculation with P. locustae, the taurine content of infected locusts significantly declined, but F/C values(ratio between the length of hind femur and the width of the head of locust) increased significantly, compared to healthy locusts. Meanwhile, F/C values of infected locusts that were injected with 2 μg of taurine showed no significant differences from those of healthy locusts, demonstrating that supplemental taurine inhibited the changes in morphological phase caused by P. locustae. Paranosema locustae infection also caused longer developmental durations and lower body weights of locusts, but these changes were unaffected after injection with taurine. These results provided new insights into the mechanisms by which microsporidian parasites affected their locust hosts. 展开更多
关键词 Locusta migratoria paranosema locustae NEUROTRANSMITTER TAURINE morphological characteristics
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蝗虫微孢子虫套式PCR检测方法的建立及应用 被引量:4
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作者 扈鸿霞 马宇轩 +3 位作者 王艳红 林峻 李占武 季荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期4239-4245,共7页
【目的】建立一种灵敏、快捷的检测蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)的套式PCR方法,为运用微孢子虫防治蝗虫提供技术支持。【方法】以GenBank数据库中公布的保守性高的微孢子虫小核糖体亚单位RNA为目的基因,采用PrimerSelect软件设计... 【目的】建立一种灵敏、快捷的检测蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)的套式PCR方法,为运用微孢子虫防治蝗虫提供技术支持。【方法】以GenBank数据库中公布的保守性高的微孢子虫小核糖体亚单位RNA为目的基因,采用PrimerSelect软件设计两对特异的套式PCR引物P.L.-F1/P.L.-R1和P.L.-F2/P.L.-R2,将微孢子虫液用0.2 mol·L^(-1) KOH处理后得到的发芽液作为模板进行PCR扩增,建立以P.L.-F1/P.L.-R1为外侧引物、P.L.-F2/P.L.-R2为内侧引物的套式PCR,扩增产为分别为298和242 bp。对引物浓度、退火温度及循环数进行优化,建立套式PCR方法,以此方法对梯度稀释的微孢子虫液进行灵敏性检测,并对采自哈密地区巴里坤北山的蝗虫样品进行检测。同时对提取的微孢子虫液进行传统的显微镜检测,并比较两种方法的灵敏度。【结果】建立了蝗虫微孢子虫的套式PCR快速特异性检测方法,优化后的PCR反应体系均为20μL:Buffer(10×)2.0μL,d NTPs(10 mmol·L^(-1))0.3μL,TaqDNA酶(250 U)0.3μL,上、下游引物(10μmol·L^(-1))各0.3μL,微孢子虫发芽液(第2轮以第1轮产物10×稀释液为模板)1μL,加水补充至20μL;PCR反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,第1轮60℃退火(第2轮62℃退火)30 s,72℃延伸20 s,共35个循环;72℃延伸10 min,10℃保存。灵敏度试验显示,检测的微孢子虫数量可以达到12.2个孢子/μL(DNA量为1.07 pg·μL^(-1))。应用建立的套式PCR方法,对采自新疆哈密地区巴里坤北山的240头蝗虫样品进行了微孢子虫检测,检测结果为23.3%的阳性,而显微镜检测结果阳性仅为3.8%。【结论】研究建立的套式PCR方法能够快速特异地检测蝗虫微孢子虫的感染,为蝗虫微孢子虫致病性研究及田间应用提供了技术支持。 展开更多
关键词 蝗虫微孢子虫 套式PCR 检测
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蝗虫微孢子与昆虫生长调节剂协同控制草原蝗虫作用机制 被引量:2
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作者 星学军 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期184-188,共5页
蝗虫微孢子(Paranosema locustae,PL)是重要的防蝗生物制剂,其与昆虫生长调节剂(insect growth regulator,IGR)协同使用有利于蝗虫可持续治理。本文通过田间超低喷雾和扫网调查等方法在青海蝗区开展协调应用PL和IGR防治草原蝗虫的作用... 蝗虫微孢子(Paranosema locustae,PL)是重要的防蝗生物制剂,其与昆虫生长调节剂(insect growth regulator,IGR)协同使用有利于蝗虫可持续治理。本文通过田间超低喷雾和扫网调查等方法在青海蝗区开展协调应用PL和IGR防治草原蝗虫的作用及其机理研究。首先明确青海蝗区的主要蝗虫种类为宽须蚁蝗Myrmeleotettix palpalis、小翅雏蝗Chorthippus fallax、狭翅雏蝗Chorthippus dubius、毛足棒角蝗Dasyhippus harbipes、鼓翅皱膝蝗Angaracris barabensis等;结果证明PL与IGR协调应用,可有效抑制草原蝗虫种群增长,且可保持存活蝗虫感病率在较高水平,对优势种宽须蚁蝗和小翅雏蝗等的持续控制作用明显。结果明确了微生物制剂和IGR协同防治蝗虫的短期与长期、速效与长效的协同作用,为防治高密度蝗虫提供新的绿色防控策略。 展开更多
关键词 蝗虫 生物防治 协同作用 感病率 蝗虫微孢子 卡死克
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蝗虫微孢子TaqMan探针Real-time PCR检测新方法
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作者 扈鸿霞 郑秋英 +2 位作者 叶小芳 赵贝 季荣 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期796-802,共7页
蝗虫微孢子已被广泛运用于蝗虫防治。本研究采用蝗虫微孢子保守性高的小核糖体亚单位RNA为目的基因,将其克隆到pMD18-T载体上构建重组质粒,制备质粒标准品。设计一对特异性引物和TaqMan探针,并对引物浓度、探针浓度分别进行了优化,建立... 蝗虫微孢子已被广泛运用于蝗虫防治。本研究采用蝗虫微孢子保守性高的小核糖体亚单位RNA为目的基因,将其克隆到pMD18-T载体上构建重组质粒,制备质粒标准品。设计一对特异性引物和TaqMan探针,并对引物浓度、探针浓度分别进行了优化,建立了蝗虫微孢子TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。该检测方法的灵敏度达1.29×105 copies/L,各浓度质粒标准品的组内和组间重复的变异系数均小于1%。这里建立的蝗虫微孢子TaqMan探针荧光定量PCR检测方法较快速、简便和准确,适用于生产中蝗虫微孢子的快速检测。 展开更多
关键词 蝗虫微孢子 REAL-TIME PCR TAQMAN探针
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高寒地区草地蝗虫绿色防控技术研究
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作者 于红妍 侯秀敏 唐炳民 《青海草业》 2021年第3期6-8,56,共4页
为在高寒地区了解蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)对草地蝗虫的绿色防治技术。通过直升飞机施药,结果表明,施药30 d后,蝗虫微孢子感染率达到72%,感染指数为47.5%。与对照区相比,防控后蝗虫虫口数量显著降低,虫口减退率达到71.15%。... 为在高寒地区了解蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)对草地蝗虫的绿色防治技术。通过直升飞机施药,结果表明,施药30 d后,蝗虫微孢子感染率达到72%,感染指数为47.5%。与对照区相比,防控后蝗虫虫口数量显著降低,虫口减退率达到71.15%。防控后蝗虫种群虫口数量明显下降,表现出了可持续性防控效果,对高寒地区草地蝗虫综合治理具有重要意义。 展开更多
关键词 蝗虫微孢子 草地蝗虫 感染率 绿色防控技术
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蝗虫微孢子虫和绿僵菌不同配方饵剂对短星翅蝗和宽须蚁蝗的室内生测研究 被引量:3
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作者 张靓 宋丽梅 +4 位作者 王广君 王惠萍 江中东 于凤春 班丽萍 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期171-177,共7页
为了解蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)和绿僵菌(Metarhizium anisopliae‘acridum’)对蝗虫的防治情况,在农业部锡林郭勒草原有害生物科学观测实验站,对短星翅蝗(Calliptamus abbreviatus)和宽须蚁蝗(Myrmeleotettix palpalis)分别... 为了解蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)和绿僵菌(Metarhizium anisopliae‘acridum’)对蝗虫的防治情况,在农业部锡林郭勒草原有害生物科学观测实验站,对短星翅蝗(Calliptamus abbreviatus)和宽须蚁蝗(Myrmeleotettix palpalis)分别进行蝗虫微孢子虫、绿僵菌及两种药剂混合处理后,进行室内生测,记录28d的死虫数,并检测其感染情况。结果显示:单施蝗虫微孢子虫防治短星翅蝗,每头蝗虫的施用量为4.44×105个孢子,防治效果达65.09%。单施蝗虫微孢子虫防治宽须蚁蝗,每头蝗虫的施用量为4.44×104个孢子,防治效果达55.64%。混合施用蝗虫微孢子虫和绿僵菌防治草原蝗虫时,二者对每头蝗虫的施用量分别为4.44×104和1.11×106个,防效均可达到100%。与短星翅蝗相比,蝗虫微孢子虫对宽须蚁蝗的防效更好。 展开更多
关键词 蝗虫微孢子虫 绿僵菌 短星翅蝗 宽须蚁蝗 死亡率 感染率
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微孢子感染东亚飞蝗实时定量PCR内参基因的筛选 被引量:5
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作者 魏笑佳 何岚 +2 位作者 阿地拉·阿吉 季荣 扈鸿霞 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期108-116,共9页
【目的】筛选出微孢子Paranosema locustae感染条件下东亚飞蝗Locusta migratoria实时定量PCR最适内参基因。【方法】本研究应用实时荧光定量PCR技术测定东亚飞蝗甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(Glyceralde-hyde-3-phosphate dehydrogenase,GA... 【目的】筛选出微孢子Paranosema locustae感染条件下东亚飞蝗Locusta migratoria实时定量PCR最适内参基因。【方法】本研究应用实时荧光定量PCR技术测定东亚飞蝗甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(Glyceralde-hyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、18s核糖体RNA(18s RNA)、微管蛋白基因(Tubulin,TUB)、肌动蛋白基因(Actin,ACT)和延伸因子1基因(Elongation factor1,EF1)5个候选基因在3个微孢子浓度(1×10^(4)、1×10^(6)和1×10^(8)个孢子/头)感染12 d后的表达稳定性;应用ge Norm、Bestkeeper和Normfinder 3个软件综合分析5个内参基因的稳定性。【结果】ge Norm软件对5个内参基因在不同微孢子虫浓度感染下稳定性分析结果表明:18S基因稳定性最低,平均表达稳定性值M值最高为0.6584,TUB基因稳定性最高,M值最低为0.2784。Norm Finder软件分析在不同微孢子虫浓度感染下的5个内参基因的稳定值分别为0.152(EF1)、0.181(ACT)、0.212(TUB)、0.329(GAPDH)和0.395(18S),可知内参基因稳定性顺序为:EF1>ACT>TUB>GAPDH>18S。由Best Keeper软件分析表明5个候选内参基因的SD值均小于1.0,表达均较稳定。根据其变异系数值CV的大小可知,ACT基因最为稳定。【结论】综合3种软件分析结果,在不同微孢子虫浓度感染下,可选择的较为稳定的内参基因ACT、EF1和TUB基因作为相对定量的参照基因。 展开更多
关键词 微孢子 东亚飞蝗 内参基因 实时定量PCR 表达稳定性
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基于TMT蛋白质组学技术分析蝗虫微孢子虫感染飞蝗后的差异蛋白
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作者 张慧慧 康晗晔 +6 位作者 刘惠 张金锐 霍帆 郭玮琦 叶小芳 季荣 扈鸿霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第24期4884-4893,共10页
【目的】通过串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)技术测定飞蝗(Locusta migratoria)感染蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)前后蛋白质组变化,筛选差异表达的免疫和代谢相关蛋白,探索蝗虫微孢子虫的致病机制,为今后更好地利用蝗虫微孢... 【目的】通过串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)技术测定飞蝗(Locusta migratoria)感染蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)前后蛋白质组变化,筛选差异表达的免疫和代谢相关蛋白,探索蝗虫微孢子虫的致病机制,为今后更好地利用蝗虫微孢子虫治蝗提供科学依据。【方法】采用实验室孵化获得的健康蝗蝻,接种5μL 1×10^(6)孢子/mL蝗虫微孢子虫。未感染的蝗蝻作为对照组与感染组置于相同条件饲养。取飞蝗血淋巴作为样本,利用TMT技术对感染组和对照组的飞蝗血淋巴进行定量蛋白质组学分析,鉴定差异蛋白。通过Gene Ontology(GO)方法,对差异蛋白的生物过程、分子功能和细胞组成进行分析。通过Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway网站对差异蛋白代谢通路进行注释。【结果】感染组和对照组之间共有128个蛋白的丰度存在显著差异。与对照组相比,66个蛋白在感染组上调,62个蛋白在感染组下调。GO分析结果显示,差异蛋白主要参与代谢过程等,且主要分布于细胞。KEGG分析结果显示,有16种蛋白在5条通路上显著富集。在免疫相关蛋白中,6个谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)、1个超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、4个热休克蛋白(heat shock protein,HSP)及2个过氧化物酶(peroxide dismutase,POD)发生了明显含量变化。在代谢相关蛋白中,6个糖代谢相关蛋白、2个氨基酸代谢相关蛋白和1个脂代谢相关蛋白的水平发生改变。【结论】飞蝗感染微孢子虫前后蛋白质组差异显著。筛选出具有不同功能的多个差异表达蛋白,主要分布于细胞。筛选出免疫相关的谷胱甘肽S-转移酶、热休克蛋白、超氧化物歧化酶和过氧化物酶等蛋白显著上调,表明免疫和刺激应答相关蛋白质在蝗虫宿主体内的免疫防御中发挥了重要作用。代谢相关蛋白的显著性提高暗示蝗虫微孢子虫感染促进宿主代谢,为其增殖提供能量。 展开更多
关键词 蝗虫微孢子虫 飞蝗 血淋巴 蛋白质组学 免疫相关蛋白 代谢相关蛋白
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环境对蝗虫微孢子虫孢子能量代谢和应激反应的影响
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作者 郭玮琦 康晗晔 +4 位作者 霍帆 张航悦 张娜 季荣 扈鸿霞 《微生物学报》 北大核心 2025年第5期2229-2239,共11页
蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)作为一种环境友好的生物防治剂,在蝗虫生物防治中具有广阔的应用潜力。然而,在实际应用中,其效果会受到多种环境因素的影响。因此了解蝗虫微孢子虫对不同环境的抗性差异,对其在生物防治中的应用至关... 蝗虫微孢子虫(Paranosema locustae)作为一种环境友好的生物防治剂,在蝗虫生物防治中具有广阔的应用潜力。然而,在实际应用中,其效果会受到多种环境因素的影响。因此了解蝗虫微孢子虫对不同环境的抗性差异,对其在生物防治中的应用至关重要。【目的】探究不同环境条件对蝗虫微孢子虫能量代谢和应激反应,为蝗虫微孢子虫的环境适应性提供理论基础。【方法】将蝗虫微孢子虫孢子制剂暴露于3种可控的实验环境中,分别是40℃干燥环境、20℃水环境以及干燥条件下紫外线(≥100μW/cm^(2))辐照不同时间。通过酶标仪、激光共聚焦显微镜和相差显微镜,分别测定处理后的蝗虫微孢子虫感染蝗虫的生存曲线、孢子发芽率、ATP含量、蛋白量、活性氧(active oxygen,ROS)水平以及海藻糖含量。【结果】在20℃水环境中处理后,蝗虫微孢子虫的发芽率降低,感染蝗虫的中位生存时间延长;同时,其ATP和ROS水平显著上升。在40℃干燥环境下,孢子的ATP浓度和ROS水平无显著变化,发芽率以及感染蝗虫的生存曲线与对照组相比也无显著差异。此外,在高强度紫外线照射(≥100μW/cm^(2))下,蝗虫微孢子虫的ATP浓度也显著上升,ROS反应增强,但发芽率以及感染蝗虫的生存曲线未出现显著变化。【结论】干燥状态的蝗虫微孢子虫对环境具有更强的抗性,而长时间处于液体环境中会导致孢子活力降低甚至丧失。这些结果为蝗虫微孢子虫生物治蝗制剂的保存方法和应用提供了思路,并为其环境适应性研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 蝗虫微孢子虫 环境适应性 ATP ROS 海藻糖
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深色和浅色两种表型东亚飞蝗对蝗虫微孢子的敏感性比较
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作者 魏红爽 孙语晴 +3 位作者 高益凡 石旺鹏 陈宏灏 谭树乾 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期115-121,共7页
为验证群居型飞蝗深浅2种表型对蝗虫微孢子Paranosema locustae的敏感性差异,本研究以东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis为研究对象,测定并比较了深色型和浅色型2种表型的东亚飞蝗经蝗虫微孢子侵染后其发育历期、死亡率、免疫血淋... 为验证群居型飞蝗深浅2种表型对蝗虫微孢子Paranosema locustae的敏感性差异,本研究以东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis为研究对象,测定并比较了深色型和浅色型2种表型的东亚飞蝗经蝗虫微孢子侵染后其发育历期、死亡率、免疫血淋巴细胞数量以及免疫基因表达量等变化情况。结果显示,浅色型东亚飞蝗的发育历期因蝗虫微孢子侵染而延长近1.0 d左右,比深色型东亚飞蝗多延长0.5 d;浅色型东亚飞蝗发死亡率明显高于深色型的;浅色型东亚飞蝗的免疫血淋巴细胞数量低于深色型的;蝗虫微孢子侵染后,深色型东亚飞蝗免疫基因toll基因和attacin基因的表达量上升,而浅色型东亚飞蝗的toll基因表达量无明显变化,attacin基因的表达量甚至出现下调。而且,蝗虫微孢子在浅色型飞蝗体内增殖更多。表明深色型东亚飞蝗在应对蝗虫微孢子侵染时较浅色型更有优势,浅色型东亚飞蝗较深色型对蝗虫微孢子更敏感。 展开更多
关键词 颜色表型 东亚飞蝗 蝗虫微孢子 免疫力
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