期刊文献+
共找到88篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
基于深度学习的PacBio测序数据DNA甲基化检测方法
1
作者 刘亚东 刘忠宇 +3 位作者 崔淼 卢振浩 杨忠博 王亚东 《生物信息学》 2025年第3期175-183,共9页
DNA甲基化是存在于真核细胞中的一种关键的表观遗传修饰形式,它能在不改变碱基序列的前提下控制基因表达,并影响生物的发展进程。研究DNA甲基化有助于揭示发育过程中的表观遗传调控机制,为疾病诊断和精准医疗的发展提供重要支撑。Pacifi... DNA甲基化是存在于真核细胞中的一种关键的表观遗传修饰形式,它能在不改变碱基序列的前提下控制基因表达,并影响生物的发展进程。研究DNA甲基化有助于揭示发育过程中的表观遗传调控机制,为疾病诊断和精准医疗的发展提供重要支撑。Pacific Biosciences(PacBio)的单分子实时测序技术能够进行单分子甲基化检测,无需依赖化学转换过程,保留了更完整的表观遗传信息;并且能够产生平均长度达10000 bp的测序片段,有助于跨越复杂区域并提供更连贯的甲基化信息。然而,现有面向PacBio测序数据的甲基化检测可选工具仍然较少,且存在检测精度不足的瓶颈问题。因此,本研究提出一种基于深度学习技术的面向PacBio测序数据的DNA甲基化检测方法,该方法通过交叉注意力融合机制,并利用Transformer和BiGRU网络融合碱基特征与信号特征,以充分识别潜在的甲基化位点,实现DNA甲基化的高效和精准检测。文中使用GIAB标准品HG002的全基因组PacBio测序数据进行DNA甲基化检测,与当前主流工具相比,本文提出的方法在单片段水平以及基因组水平上均有最高的检测准确性。同时,该方法采用并行处理显著降低了分析时间,并在内存使用上保持了可控性,为大规模人群甲基化的高效检测提供了重要的技术支撑。 展开更多
关键词 DNA甲基化 pacbio测序技术 深度学习
在线阅读 下载PDF
PacBio三代测序技术在血友病A患者基因检测中的应用
2
作者 马玉洁 孙东兰 +6 位作者 魏天颖 胡体凌 陈文琪 窦肇华 刘家恩 张静 胡华莹 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2025年第3期220-226,263,共8页
目的探讨通过PacBio三代测序技术检测血友病A患者及携带者F8基因变异的可行性。方法采集临床上已确诊血友病A的患者外周血样本,采用高分辨染色体核型分析技术,进行细胞遗传学检测,并提取基因组DNA,使用PacBio三代测序技术进行分子遗传... 目的探讨通过PacBio三代测序技术检测血友病A患者及携带者F8基因变异的可行性。方法采集临床上已确诊血友病A的患者外周血样本,采用高分辨染色体核型分析技术,进行细胞遗传学检测,并提取基因组DNA,使用PacBio三代测序技术进行分子遗传学检测,然后通过传统IS-PCR法对检测结果进行验证。结果5例HA家系中,3例为22号内含子远端倒位,1例为22号内含子远端倒位携带者,1例为大片段杂合缺失。结论PacBio三代测序技术检测血友病A的结果与传统方案一致,并且可以直接确定倒位断点,明确变异的重组机制,是一种能够全面检测分析F8基因变异的方法,可全面代替现有方案用于血友病A的遗传筛查。 展开更多
关键词 血友病A F8基因 pacbio三代测序 IS-PCR
暂未订购
利用PacBio三代测序技术鉴定1例B/O血型嵌合体
3
作者 李蕊蕊 崔丛丛 郝萧 《中国输血杂志》 2025年第3期421-425,共5页
目的 利用PacBio三代测序技术对1例ABO血型正、反定型不符的患者标本进行检测,以明确其血型,探讨血清学方法与分子生物学方法在确定嵌合体血型中的应用。方法 血型血清学试验方法;PCR基因扩增ABO基因第1~7号外显子并进行Sanger法测序;Pa... 目的 利用PacBio三代测序技术对1例ABO血型正、反定型不符的患者标本进行检测,以明确其血型,探讨血清学方法与分子生物学方法在确定嵌合体血型中的应用。方法 血型血清学试验方法;PCR基因扩增ABO基因第1~7号外显子并进行Sanger法测序;PacBio三代测序技术对标本进行ABO基因全长测序及单倍型分析;短串联重复序列(short tandem repeat, STR)分型。结果 患者血型血清学结果疑为B亚型(正定型抗-B:2+mf);Sanger测序结果显示ABO基因第6外显子c.261delG,为ABO^(*)O.01.01纯合型。PacBio三代测序结果显示该患者基因型为ABO^(*)O.01.01/ABO^(*)O.01.01及低比例的ABO^(*)B.01。STR检测结果显示患者20个STR位点中有9个位点显示出3~4种分型,证实其为嵌合体。结论 该患者为B/O血型嵌合体。低比例的ABO^(*)B.01嵌合是导致血清学抗-B混合视野的真正原因。PacBio三代测序技术不仅可以确定ABO基因单倍型还可以检出低比例ABO血型中基因嵌合。 展开更多
关键词 ABO正反不符 嵌合体 Sanger法测序 pacbio三代测序技术 血型血清学
原文传递
三代测序PacBio在转录组研究中的应用 被引量:9
4
作者 钟伟民 张兴坦 +2 位作者 赵茜 马东娜 唐海宝 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第5期524-529,共6页
本文介绍了PacBio测序在转录组学研究中的一些应用及PacBio测序数据分析常用的方法流程,根据PacBio测序的发展综述了PacBio测序经常遇到的一些问题及相应解决方案,并就PacBio测序技术所面临的挑战和未来的发展进行讨论.
关键词 pacbio测序 pacbio应用 pacbio流程
在线阅读 下载PDF
基于纯培养方法和PacBio三代测序技术研究蒙古国传统酸马奶中乳酸菌多样性 被引量:21
5
作者 刘文俊 多拉娜 +3 位作者 刘亚华 任冬艳 张和平 孟和毕力格 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期27-37,共11页
通过纯培养方法结合PacBio三代测序技术对采自蒙古国的12份传统酸马奶中的乳酸菌多样性进行研究。应用传统的纯培养技术从12份传统酸马奶样品中分离出62株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列分析和系统进化关系研究,62株乳酸菌被鉴定为5个属,... 通过纯培养方法结合PacBio三代测序技术对采自蒙古国的12份传统酸马奶中的乳酸菌多样性进行研究。应用传统的纯培养技术从12份传统酸马奶样品中分离出62株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列分析和系统进化关系研究,62株乳酸菌被鉴定为5个属,6个种,分别是:25株瑞士乳杆菌、20株植物乳杆菌、7株产马乳酒乳杆菌、5株屎肠球菌、3株嗜热链球菌和2株粪肠球菌。采用PacBio SMRT测序技术研究其中8份样品中乳酸菌的多样性,宏基因组测序得到的优势菌为乳酸菌,同时也检测到一些痕量的其它种属细菌。共检测到5个乳酸菌的属,分别是:乳杆菌属、乳球菌属、链球菌属、明串珠菌属和肠球菌属,20个乳酸菌的种,即:瑞士乳杆菌、乳酸乳球菌、副乳链球菌、棉子糖乳球菌、肠膜阴串珠球菌和产马乳酒乳杆菌。宏基因组测序相对含量表明:蒙古国酸马奶样品中乳酸菌优势属为乳杆菌属(95.56%),优势种为瑞士乳杆菌(94.64%),纯培养方法和宏基因组三代测序方法都表明瑞士乳杆菌为蒙古国传统酸马奶中的优势菌种。宏基因组测序技术除检测到纯培养获得的菌株外,还获得14个低丰度乳酸菌,如棉籽糖乳球菌、肠膜明串珠球菌和开菲尔乳杆菌等,这些菌在酸马奶中含量较少。通过PacBio SMRT测序技术可以全面了解酸马奶中乳酸菌的多样性,为通过纯培养方法获得低丰度乳酸菌提供指导。 展开更多
关键词 酸马奶 乳酸菌 pacbio SMRT测序技术 生物多样性
在线阅读 下载PDF
基于PacBio测序的对叶百部叶绿体基因组结构及系统发育分析
6
作者 连艳 黄凤 +4 位作者 朱文涛 刘晓芬 吴昊 蒋桂华 尹显梅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期123-132,共10页
目的:获得对叶百部Stemona tuberosa高质量叶绿体基因组信息,明确其结构、序列特征,同时确定对叶百部的系统发育地位。方法:采用Illumina NovaSeq 6000和PacBio RSⅡ平台对对叶百部分别进行建库测序,利用生物信息软件将2个测序平台的数... 目的:获得对叶百部Stemona tuberosa高质量叶绿体基因组信息,明确其结构、序列特征,同时确定对叶百部的系统发育地位。方法:采用Illumina NovaSeq 6000和PacBio RSⅡ平台对对叶百部分别进行建库测序,利用生物信息软件将2个测序平台的数据进行混合组装和碱基校正,最终获得高质量叶绿体基因组,随后对其序列特征、重复序列、基因多样性和系统发育进行分析。结果:对叶百部叶绿体基因组大小为154379 bp,叶绿体基因组结构为典型环状四段式,1对27074 bp的反向重复区(IR),1个大小为17924 bp的小单拷贝区(SSC)和1个82307 bp的大单拷贝区(LSC),平均鸟嘌呤和肥嘧啶所占的比率(GC)含量为37.86%;共注释得到121个基因,包括30个tRNA基因,4个rRNA基因和87蛋白编码基因,其中6个tRNA基因和12个蛋白质编码基因中存在内含子;对叶百部叶绿体基因组中共发现49个长重复序列和59个单核苷酸简单重复序列(SSR);4个百部属的叶绿体基因组比较分析表明ycf1和ndhF基因具有高度多样性;基于叶绿体基因组构建的系统发育树与对叶百部目前的分类地位一致。结论:成功组装了对叶百部叶绿体高质量基因组,获得了包括对叶百部在内的4种百部属植物叶绿体基因组的结构及序列特征信息,为百部属药用植物的鉴定、进化和系统发育研究奠定基础。 展开更多
关键词 对叶百部 叶绿体基因组 pacbio测序 系统发育
原文传递
基于PacBio SMRT测序技术评估妊娠期糖尿病人的肠道菌群 被引量:12
7
作者 舒明月 付爱思 +5 位作者 张洁 陈佳 郭静 丁琼 徐焱成 刘天罡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1823-1839,共17页
【目的】肠道菌群是位于人体肠道内的微生物菌群,其组成与人类多种疾病相关。例如,已有研究表明肠道菌群的变化与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病密切相关。因此本研究基于PacBio SMRT测序技术评估及比较了不同... 【目的】肠道菌群是位于人体肠道内的微生物菌群,其组成与人类多种疾病相关。例如,已有研究表明肠道菌群的变化与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病密切相关。因此本研究基于PacBio SMRT测序技术评估及比较了不同民族(汉族和蒙族)及是否患GDM的孕妇的肠道菌群。【方法】本研究利用PacBio SMRT测序技术对97例患有GDM及健康的汉族和蒙族孕妇粪便样本进行了全长16S rRNA测序及分析。【结果】总体来说,处于相同孕期的4组孕妇肠道菌群的组成相似,不同核心菌群展现出不同强弱的相关性。本研究在种的水平上共鉴定到了44个种。在汉族人中,患有妊娠期糖尿病的孕妇肠道菌群中Akkermansia muciniphila菌的相对丰度要显著低于健康孕妇;而在蒙族人中,健康孕妇与GDM孕妇间差异并不明显。在健康对照中发现汉族孕妇肠道菌群中Bacteroides uniformis菌的相对丰度显著高于蒙族孕妇;但在患有GDM组中未找到不同民族分组间的差异。另外,功能预测结果发现四组样本菌群功能组成高度相似,大多数功能基因都与能量代谢有关。汉族GDM患者与健康对照组间没有发现显著差异,但在蒙族GDM患者中发现无机离子运输等功能相对丰度显著高于与蒙族正常孕妇。【结论】在相同的孕期,妊娠期孕妇的核心肠道菌群结构与功能是相对稳定的,而民族差异也不会对妊娠期菌群产生显著性影响。但在四组间可以检测到一些低丰度的差异菌群,如Akkermansia muciniphila,其丰度的变化可能导致了肠道中一些与肠道营养吸收等有关的代谢发生变化,而这些变化可能与妊娠期糖尿病的发生密切相关。本研究将有助于探究肠道菌群在GDM发病机制中的作用。 展开更多
关键词 pacbio SMRT测序技术 妊娠期糖尿病 肠道菌群 微生物多样性 16S RRNA
原文传递
基于PacBio三代测序的高质量汶上芦花鸡基因组的组装 被引量:3
8
作者 薛倩 邢伟杰 +6 位作者 李国辉 周成浩 张会永 殷建玫 蒋一秀 朱云芬 韩威 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3869-3881,共13页
【目的】汶上芦花鸡为中国唯一的芦花羽地方鸡品种资源,芦花基因可伴性遗传,芦花羽性状可用于雏鸡的自别雌雄。试验旨在丰富家鸡基因组信息,获取汶上芦花鸡全基因组序列,为鸡伴性芦花羽分子机制研究提供材料。【方法】以汶上芦花鸡为试... 【目的】汶上芦花鸡为中国唯一的芦花羽地方鸡品种资源,芦花基因可伴性遗传,芦花羽性状可用于雏鸡的自别雌雄。试验旨在丰富家鸡基因组信息,获取汶上芦花鸡全基因组序列,为鸡伴性芦花羽分子机制研究提供材料。【方法】以汶上芦花鸡为试验动物,基于BGI MGISEQ构建小片段文库进行基因组特征评估,利用PacBio三代测序技术、Hi-C技术组装及构建汶上芦花鸡全基因组信息数据库,利用生物信息学方法对获得的基因组序列进行组装和功能注释。【结果】试验共获得BGI二代测序数据量59.70 Gb;获得PacBio三代测序数据量31.13 Gb,reads平均长度为15362 bp;获得Hi-C数据量95.37 Gb;拼接和初步组装得到基因组大小为1.12 Gb,经Hi-C辅助组装后,共有1.07 Gb的序列挂载到41条染色体上,挂载率95.62%,基因组contigs N50为9.61 Mb,scaffold N50为91.29 Mb,BUSCO评估为98.50%,基因组连续性和完整度良好;预测基因组有22.57%的重复序列,有426个tRNAs、56个rRNAs、260个miRNAs和308个snRNAs;共预测得到蛋白编码基因17338个,其中96.00%的基因在数据库中得到了功能注释;组装获得汶上芦花鸡Z染色体长度约88.23 Mb,预测并注释到蛋白编码基因742个,这些基因显著富集于氨基酸、脂肪等代谢相关通路,在汶上芦花鸡Z染色体上准确定位了TYRP 1、CDKN 2 A、SLC 45 A 2等羽色相关基因。【结论】研究获得了汶上芦花鸡高质量染色体水平基因组,丰富了家鸡基因组遗传信息,准确定位了Z染色体上一些羽色相关基因。研究结果可为从全基因组水平挖掘汶上芦花鸡优异性状调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 汶上芦花鸡 基因组组装 pacbio三代测序技术 基因组注释 Z染色体 伴性芦花羽
在线阅读 下载PDF
基于PacBio SMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价 被引量:3
9
作者 边燕飞 席晓霞 +3 位作者 郑艺 侯强川 孙天松 孙志宏 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期212-220,共9页
目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面... 目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面客观的评价。方法:采集6份婴幼儿配方奶粉,使用细菌纯培养、单分子实时测序技术(PacBio SMRT)和微滴式数字PCR(ddPCR)联用技术对其污染微生物组成进行评价。结果:采用纯培养技术在样品中均未检测到大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌和芽孢。使用PacBio SMRT测序技术,在婴幼儿配方奶粉中共鉴定出14个细菌门、138个细菌属和255个细菌种。其中6份样品均存在过嗜冷菌蜡样芽孢杆菌,其平均相对含量高达23.54%,这一灭活的细菌也会影响产品货架期。此外,在IF3、IF4、IF5和IF6样品中,检测到相对含量较低的致病菌大肠杆菌,其相对含量分别为0.06%,0.01%,0.15%和0.05%。采用ddPCR技术对SMRT测序方法检测到的致病菌蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌进行定量分析,发现每克奶粉样品中蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌的平均拷贝数取对数后分别为5.45和4.89。结论:在6份婴幼儿配方奶粉中均未检出致病菌,符合食品安全国家标准,然而奶粉中被灭活的蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌可能增加产品腐败的风险,影响产品的货架期。本研究结合多个技术全面评价婴幼儿配方奶粉的微生物污染情况,初步建立婴幼儿配方奶粉的微生物检测技术。 展开更多
关键词 婴幼儿配方奶粉 污染微生物 纯培养 ddPCR pacbio SMRT测序
在线阅读 下载PDF
基于PacBio三代测序的香瓜茄(人参果)基因组的组装 被引量:3
10
作者 司诚 钟启文 杨世鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期180-190,共11页
香瓜茄又名人参果,具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等多种生物活性。为丰富茄科作物基因组信息及进化发育历程,获取香瓜茄全基因组序列信息,同时为香瓜茄相关分子研究奠定基础。以香瓜茄植物组织为试验材料,基于Illumina HiSeq构建小片段... 香瓜茄又名人参果,具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等多种生物活性。为丰富茄科作物基因组信息及进化发育历程,获取香瓜茄全基因组序列信息,同时为香瓜茄相关分子研究奠定基础。以香瓜茄植物组织为试验材料,基于Illumina HiSeq构建小片段文库进行基因组特征评估,利用PacBio三代测序技术、Hi-C技术构建及组装香瓜茄全基因组数据库。利用生物信息学方法对获得的基因组序列进行组装、功能注释以及进化分析研究。结果表明,获得54.11 Gb Illumina HiSeq数据;获得55.08 Gb PacBio数据,reads平均长度为14 179 bp;获得Hi-C数据量约143 Gb;拼接得到该基因组contig序列总长为1.16 Gb,Hi-C纠错后contig N50为22.63 Mb;Hi-C挂载染色体,共有1.12 Gb长度的序列可以挂载到12条染色体上,占比97.16%;其中,能够确定顺序和方向的序列长度为1.08 Gb,占定位染色体序列总长度的96.11%,得到基因组大小1.25 Gb;预测有64.22%的重复序列,41 571个基因,99.06%的基因可以注释到NR、GO、KEGG等数据库中;预测得到4 360个tRNA、5 677个rRNA、154个miRNA;得到449个假基因。香瓜茄与马铃薯的进化时间大约在12.82 MYA。 展开更多
关键词 香瓜茄 基因组 pacbio三代测序技术 基因注释
在线阅读 下载PDF
自然发酵酸马奶对人体肠道菌群的影响——基于PacBio SMRT测序技术 被引量:7
11
作者 温永平 侯强川 张和平 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期4-7,共4页
采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在... 采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在大量的"肠道核心微生物群",饮用酸马奶会使志愿者肠道中硬壁菌门的相对含量升高。在种的水平上,饮用酸马奶可以促进部分有益生菌如柔嫩梭菌群、多形拟杆菌的生长,这可能是酸马奶具有众多益生作用的原因之一。 展开更多
关键词 酸马奶 肠道菌群 pacbioSMRT测序技术
在线阅读 下载PDF
扬子鳃蛭线粒体基因组全序列测定及其系统学地位——基于Pacbio和Illumina技术 被引量:1
12
作者 谷生丽 刘谏君 +2 位作者 孙恩涛 湛孝东 聂刘旺 《吉首大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第3期28-35,共8页
利用Illumina和Pacbio测序技术对扬子鳃蛭(Ozobranchus jantseanus)线粒体基因组全序列进行测序及注释,并与NCBI数据库中蛭纲(Hirudinea)其他物种的线粒体全序列的排列方式和系统进化关系进行了比较,以确定其系统学地位.结果显示:获得... 利用Illumina和Pacbio测序技术对扬子鳃蛭(Ozobranchus jantseanus)线粒体基因组全序列进行测序及注释,并与NCBI数据库中蛭纲(Hirudinea)其他物种的线粒体全序列的排列方式和系统进化关系进行了比较,以确定其系统学地位.结果显示:获得的线粒体基因组序列长度为14868 bp,蛋白编码基因存在2种起始密码子,分别为ATG和ATT;终止密码子共有4种,分别为TAA,TAG,TA和T;蛭纲10个物种的线粒体基因组全序列基因排序可分为2种类型,其差异表现在tRNAs的互换和长非编码区的长度的不同;扬子鳃蛭所属的吻蛭目(Rhynchobdellida)均为b型,绝大部分无吻蛭目(Arhynchobdellida)的排列方式为a型.基于蛭纲物种的13个蛋白编码基因(PCGs)的Neighbor-Joining(NJ)树进化分析显示,扬子鳃蛭与其他吻蛭目物种聚类. 展开更多
关键词 扬子鳃蛭 线粒体基因组全序列 蛭纲 pacbio和Illumina测序
在线阅读 下载PDF
基于PacBio Iso-Seq构建低温胁迫后中华蜜蜂工蜂全长转录组 被引量:1
13
作者 姚丹 周文才 +4 位作者 詹洪平 于瀛龙 贺兴江 万炜 韦小平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期611-621,共11页
【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana是东方蜜蜂Apis cerana在中国地区分布最广泛的亚种,在地理适应和生态多样性方面有显著优势。中华蜜蜂的低温适应性优于西方蜜蜂A.mellifera,可用于高海拔高山地区和冬季蜜源的采集,该性能在生产方... 【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana是东方蜜蜂Apis cerana在中国地区分布最广泛的亚种,在地理适应和生态多样性方面有显著优势。中华蜜蜂的低温适应性优于西方蜜蜂A.mellifera,可用于高海拔高山地区和冬季蜜源的采集,该性能在生产方面有重要作用,探究中华蜜蜂低温耐受性可有助于优良品系的筛选,为农业经济创造更大价值。【方法】收集分别在常温(25.0±0.2)℃(对照)和低温(4.0±0.2)℃下处理6 h时的中华蜜蜂3,10和21日龄工蜂6组样本,进行转录组二代测序(Illumina RNA-Seq)和全长转录组三代测序(PacBio Iso-Seq),利用二代测序数据对三代测序数据进行校正,基于高质量的测序数据对比NR,NT,Pfam,KOG/COG,Swiss-Prot,KEGG和GO数据库,对新转录本和新基因进行功能注释。【结果】中华蜜蜂工蜂6组样本全长转录组测序分别获得71.17,42.76,58.82,53.45,40.33和42.79 Gb读段,平均N50达到205895 bp,质控后得到164194条一致性序列;通过比对到东方蜜蜂参考基因组可获得21519条新转录本,与中华蜜蜂物质代谢、神经系统和信号转导等密切相关,且不同日龄中华蜜蜂受低温胁迫后,物质代谢、细胞发育、寿命及神经发育等受到影响,同时还鉴定到28647条长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),其中lincRNA和sense_intronic两种类型LncRNA的占比最多,分别为35%和45%。【结论】本研究利用矫正后的中华蜜蜂工蜂PacBio Iso-Seq转录组数据鉴定到大量未注释的新基因和新转录本,并对其进行了功能注释,分析了LncRNA的数量和类型,研究结果完善了东方蜜蜂参考基因组,为中华蜜蜂抗寒机制的探究提供了良好的数据背景。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 低温 转录组 参考基因组 发育阶段 pacbio测序
在线阅读 下载PDF
PacBio测序分析开菲尔发酵过程中细菌演替 被引量:2
14
作者 史大伟 邢军 +4 位作者 马龙 李安 于红 古丽加马力·艾萨 张瑞 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第2期19-23,共5页
利用PacBio SMRT测序技术,对采集自新疆喀什地区牧民家中的开菲尔进行0~96 h发酵过程中细菌群落的结构演替进行分析。研究结果如下:在整个发酵过程中芽孢杆菌(Bacillus)、肠杆菌属(Enterobacter)和气单胞菌属(Aeromonas)是开菲尔发酵过... 利用PacBio SMRT测序技术,对采集自新疆喀什地区牧民家中的开菲尔进行0~96 h发酵过程中细菌群落的结构演替进行分析。研究结果如下:在整个发酵过程中芽孢杆菌(Bacillus)、肠杆菌属(Enterobacter)和气单胞菌属(Aeromonas)是开菲尔发酵过程中的优势菌属。在发酵过程中鉴定到种约有6种。在整个发酵过程中,开菲尔中的细菌多样性呈现降低趋势,pH值与发酵过程中的大多数物种呈正相关关系;乳酸含量与发酵过程中的大多数物种呈负相关关系。 展开更多
关键词 开菲尔 微生物多样性 pacbio测序 菌群演替
在线阅读 下载PDF
基于PacBio测序数据的蜜蜂球囊菌转录因子、融合基因及RNA编辑事件的鉴定 被引量:2
15
作者 许雅静 吴鹰 +9 位作者 余岢骏 孙明会 刘佳美 郭意龙 徐细建 鲍佳益 康育欣 陈大福 郭睿 付中民 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期63-72,共10页
【目的】本研究旨在利用已获得的PacBio单分子实时(single molecule real-time,SMRT)测序数据对蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis菌丝(AaM)和孢子(AaS)中的转录因子(TF)、融合基因和RNA编辑事件进行鉴定和分析,以期丰富蜜蜂球囊菌的相关信息... 【目的】本研究旨在利用已获得的PacBio单分子实时(single molecule real-time,SMRT)测序数据对蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis菌丝(AaM)和孢子(AaS)中的转录因子(TF)、融合基因和RNA编辑事件进行鉴定和分析,以期丰富蜜蜂球囊菌的相关信息,并为进一步探究它们的功能提供理论依据。【方法】利用BLASTx工具将AaM和AaS的全长转录本序列比对到Nr,Swiss-Prot和KEGG数据库以获得一致性最高的蛋白序列,再利用hmmscan软件将上述蛋白序列比对到Plant TFdb数据库以获得TF的分类及注释信息。采用TOFU软件中的fusion_finder.py程序进行融合基因的预测,进而分析融合基因的序列和位置信息。使用SAMtools预测AaM和AaS中的RNA编辑事件,再利用ANNOVAR软件对RNA编辑事件进行注释,进而采用相关生物信息学软件对RNA编辑位点基因进行GO功能和KEGG通路注释。【结果】在AaS中共鉴定到17个TF家族的213个TF,其中C2H2家族包含的TF成员最多。在AaM和AaS中分别鉴定到921和510个融合基因,二者共有的融合基因为510个,特有的融合基因分别为411和0个。在AaM和AaS中分别鉴定到547和191次RNA编辑事件,其中AaM中同义单核苷酸突变的数量最多,AaS中非同义单核苷酸突变的数量最多。此外,在AaM中鉴定到12种碱基替换类型,其中发生C->T的RNA编辑事件数量最多,达到158次;在AaS中鉴定到9种碱基替换类型,其中发生C->T和G->T的RNA编辑事件数量最多,均有42次。AaM和AaS中RNA编辑位点基因分别涉及19和24个GO功能条目;此外还能注释到11和20条KEGG通路。【结论】蜜蜂球囊菌的菌丝和孢子中含有丰富的TF、融合基因和RNA编辑位点;转录因子C2H2家族与蜜蜂球囊菌菌丝和孢子的生长发育和细胞活动具有潜在关联;RNA编辑事件的碱基替换类型在蜜蜂球囊菌和其他物种中具有物种特异性;RNA编辑可能在蜜蜂球囊菌菌丝和孢子的生长和代谢中发挥作用。 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 pacbio测序 RNA编辑 转录因子 融合基因
在线阅读 下载PDF
基于PacBio三代测序技术鉴定cisAB亚型及利用分子对接探究其分子机制 被引量:1
16
作者 夏悦昕 邵林楠 +2 位作者 李宁 周世航 刘志远 《临床输血与检验》 CAS 2024年第6期792-796,共5页
目的利用血清学及PacBio三代测序技术鉴定1例罕见cisAB亚型,利用分子对接探讨糖基转移酶氨基酸突变导致亚型的分子机制。方法利用免疫血清学试验鉴定ABO表型,利用PacBio三代测序方法鉴定其基因型。突变后的糖基转移酶同源建模和分子对接... 目的利用血清学及PacBio三代测序技术鉴定1例罕见cisAB亚型,利用分子对接探讨糖基转移酶氨基酸突变导致亚型的分子机制。方法利用免疫血清学试验鉴定ABO表型,利用PacBio三代测序方法鉴定其基因型。突变后的糖基转移酶同源建模和分子对接后,与野生型α1,3-N-乙酰氨基半乳糖转移酶(α1-3-N-acetylgalactosaminyltransferase,GTA)进行结构叠加和比对,探究关键位点氨基酸突变后糖基转移酶的结构变化。结果免疫血清学试验鉴定表型为AB型,三代基因测序技术结果显示该患者基因型为cisAB.01/O.01.02,分子对接结果显示与野生型相比,cisAB01糖基转移酶p.Pro156Leu和p.Gly268Ala突变导致临近氨基酸结构朝向改变,催化口袋凹槽结构改变,出现双功能酶活性。结论p.Pro156Leu和p.Gly268Ala突变是形成cisAB01糖基转移酶双功能活性的关键位点。 展开更多
关键词 cisAB亚型 pacbio三代测序 同源建模 分子机制 分子对接
暂未订购
基于PacBio SMRT测序技术分析食管癌特征性肠道菌群及其生物标志物 被引量:2
17
作者 万萍 沈伟涛 +1 位作者 彭珍燕 刘冉 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1011-1020,共10页
[背景]食管癌是常见的消化道肿瘤,中国是食管癌高发地区。有研究提示,肠道菌群与肿瘤等多种疾病的发生发展相关。受测序读长所限,传统的16S rDNA测序技术只能鉴定到属。[目的]本研究基于PacBio单分子实时(SMRT)测序技术在种水平筛选与... [背景]食管癌是常见的消化道肿瘤,中国是食管癌高发地区。有研究提示,肠道菌群与肿瘤等多种疾病的发生发展相关。受测序读长所限,传统的16S rDNA测序技术只能鉴定到属。[目的]本研究基于PacBio单分子实时(SMRT)测序技术在种水平筛选与食管癌相关的特征性微生物标志。[方法]招募首次诊断为食管癌的新发病例120例,和性别、年龄匹配的健康对照60例。采集所有研究对象的新鲜粪便样本。利用第三代测序PacBio SMRT技术对4例食管癌患者及1:1匹配的健康对照者样本进行16S rDNA全长测序,基于测序结果分析其肠道菌群结构差异。采用PICRUSt软件进行功能预测。通过线性判别分析和群落差异分析筛选差异肠道微生物进行大样本人群验证,识别食管癌相关肠道微生物。[结果]基于测序样本,α多样性分析中食管癌组的Ace、Chao1、Simpson Diversity、Shannon Wiener指数均高于健康对照组(P<0.05),β多样性分析显示食管癌组和健康对照组散点簇分离,二者肠道菌群结构存在差异。在门水平上,食管癌组肠道菌群中变形菌门、拟杆菌门、厚壁菌门丰度升高。在属水平上,食管癌组毛螺旋菌属、巴氏杆菌属、罗斯氏菌属和拟杆菌属相对丰度增加。在种水平上,食管癌组相对丰度增加的微生物是肠杆菌E.20、卵形拟杆菌V975、普氏栖粪杆菌等11种,丰度降低的微生物是皮氏罗尔斯通氏菌、肠杆菌未分类、唾液链球菌JIM87773种。PICRUSt功能注释后发现食管癌组与健康组在丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢(map00250)、肽聚糖生物合成(map00550)、叶酸一碳单位库(map00670)、硫胺素代谢(map00730)、氨基酸的生物合成(map01230)通路上存在差异。对验证人群的分析结果显示,与健康对照人群相比,食管癌人群的肠杆菌E.20、马赛拟杆菌的丰度升高,唾液链球菌JIM8777的丰度降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。建立受试者工作特征分析发现,肠杆菌E.20、唾液链球菌JIM8777、马赛拟杆菌联合诊断的曲线下面积(AUC)为0.779,高于单一诊断结果(AUC分别为0.610、0.608、0.659)。[结论]食管癌组的肠道菌群与健康对照组存在差异。肠杆菌E.20、唾液链球菌JIM8777、马赛拟杆菌的联合应用对食管癌的诊断具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 pacbio单分子实时测序技术 食管癌 肠道菌群 16S rDNA 生物标志物
原文传递
Novel structural annotation and functional expression analysis of GTP_EFTU conserved genes in pepper based on the PacBio sequencing data 被引量:2
18
作者 Bingqian Tang Lingling Xie +11 位作者 Xuefeng Li Huiping Yang Yi Liu Xiang Cheng Chenliang Liang Juan Chen Shudong Zhou Duanhua Wang Jingyuan Zheng Xiongze Dai Xuexiao Zou Feng Liu 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CSCD 2021年第5期443-456,共14页
Genes containing GTP_EFTU domain mainly express elongation factors(EF),Small GTPases,and GTP-binding proteins,which are closely related to protein synthesis,extension and ATP synthesis.In this study,we identified 39 g... Genes containing GTP_EFTU domain mainly express elongation factors(EF),Small GTPases,and GTP-binding proteins,which are closely related to protein synthesis,extension and ATP synthesis.In this study,we identified 39 genes containing GTP_EFTU domains from peppers.The evolutionary trees constructed from capsicum,Arabidopsis,rice,and tomato are mainly divided into 7 subfamilies.Using PacBio(Pacific Biosciences)sequencing and assembly data,we extracted these 39 gene sequences,fromwhich 25 genes had alternative splicing.Particularly,the Capana08g000545 had 16 alternative splicing processes.Accordingly,we performed promoter sequence analysis,subcellular location prediction,the expression analysis of different tissues and periods,and also the GO(Gene ontology)analysis of co-expressed genes.Lastly we did the qRTPCR analysis in 5 stages of pepper fruit development.These analyses revealed important structural and functional information for the identified 39 genes that contain GTP_EFTU domains,providing important references for further follow-up experiments to verify the genes function on plants or their unique roles in peppers. 展开更多
关键词 CAPSICUM GTP_EFTU pacbio Phylogenetic analysis Expression analysis GO analysis
在线阅读 下载PDF
基于PacBio平台的黄颡鱼全长转录组测序及分析 被引量:2
19
作者 王家琪 熊阳 +2 位作者 韩庆庆 皇培培 梅洁 《湖北农业科学》 2023年第4期194-201,共8页
为进一步丰富黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)信息数据库,采用PacBio测序平台对黄颡鱼的肝脏、肾、背部肌肉、脑、脾、心脏、皮肤、血液、鳃、性腺等组织进行全长转录组混样测序。共获得685574个全长非嵌合(Full-length non-chimeric r... 为进一步丰富黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)信息数据库,采用PacBio测序平台对黄颡鱼的肝脏、肾、背部肌肉、脑、脾、心脏、皮肤、血液、鳃、性腺等组织进行全长转录组混样测序。共获得685574个全长非嵌合(Full-length non-chimeric read,FLNC)序列,通过与黄颡鱼基因组比对分析,共获得72509个非冗余isoforms,平均长度为2918 bp。共鉴定到3169个LncRNA、45872个可变剪接事件、4881个基因存在可变多聚腺苷酸化位点和304个融合基因。将12492个新基因与NR、GO、KEGG、KOG和Swwassprot 5个公共数据库进行比对,成功注释了7233个isoforms。GO分析发现,新基因主要集中于细胞过程(Cellular process)、细胞组分(Cell)和结合功能(Binding)。KEGG pathway分析显示,新基因主要在信号转导(Signal transduction)和免疫系统(Immune system)信号通路中得到富集,此外,涉及黄颡鱼生殖与繁殖相关的内分泌系统代谢途径包括催产素信号通路、雌二醇信号通路、孕酮介导的卵母细胞成熟、促性腺激素释放激素信号通路和卵巢类固醇合成。 展开更多
关键词 黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco) pacbio 全长转录组 可变剪接 信号通路
在线阅读 下载PDF
基于PacBio三代测序的茯茶加工过程真菌群落分析 被引量:2
20
作者 白亚妮 冯璞阳 +2 位作者 秦涛 冯志珍 陈卫锋 《中国茶叶加工》 2023年第1期63-68,共6页
茯茶是陕西省地理标志产品,具有重要商业价值。目前茯茶生产过程中的真菌群落组成变化情况尚不清楚。为了解茯茶生产过程中真菌群落变化情况,为生产过程的微生物安全控制提供数据支撑,文章以茯茶生产过程中主要阶段的制品样品为研究对象... 茯茶是陕西省地理标志产品,具有重要商业价值。目前茯茶生产过程中的真菌群落组成变化情况尚不清楚。为了解茯茶生产过程中真菌群落变化情况,为生产过程的微生物安全控制提供数据支撑,文章以茯茶生产过程中主要阶段的制品样品为研究对象,采用PacBio三代测序技术分析原毛茶、渥堆期、发花期、干燥期和陈化期真菌群落多样性及组成。结果表明样品测序获得的序列数范围从12771到13110,获得序列的平均长度分别为554 bp。样品香农指数随着序列数的增加趋于平稳,覆盖率均达到1,测序结果反映了实际的群落组成,且测序深度已经基本覆盖到样品中的所有物种。从茯茶原毛茶到渥堆期,再到发花期,真菌群落多样性不断减少,干燥期和陈化期群落多样性和组成与发花期基本相似,原毛茶时期表征真菌群落多样性的香农指数高达1.99,渥堆期降为1.06,而发花期、干燥期和陈化期分别为0.15、0.11和0.21。在群落组成方面,原毛茶比发酵茯茶含有相对丰度较高的节担菌纲种群(Wallemiomycetes),相对丰度约为27.3%。在渥堆期,银耳纲(Tremellomycetes)、伞菌纲(Agaricomycetes)和锤舌菌纲(Leotiomycetes)相比其他时期丰度增加。在随后的生产过程中,包括发花期、干燥期、陈化期,主要优势菌种是冠突散囊菌(Eurotiomycetes)中的曲霉属(Aspergillus),相对丰度达到98%以上,是这三个时期的生物标记种群。以上研究结果为茯茶标准化生产中微生物控制提供了数据基础。 展开更多
关键词 茯茶 加工时期 pacbio测序技术 真菌群落 散囊菌
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部