烟草PVYN辽宁分离物全序列测定与分析 被引量：2

1

作者 王芳 高正良 +3 位作者 周本国 许大凤 安梦楠 吴元华 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期109-113,共5页

利用引起烟草脉坏死病的马铃薯Y病毒脉坏死株系辽宁分离物(Potato virus Y—vein necrosis strain Liaoning isolate,PVYN-LN),以GenBank中已有的PVY全序列为基础,设计特异引物。通过总RNA提取、RT-PCR、3’RACE和5’RACE扩增及序列测定... 利用引起烟草脉坏死病的马铃薯Y病毒脉坏死株系辽宁分离物(Potato virus Y—vein necrosis strain Liaoning isolate,PVYN-LN),以GenBank中已有的PVY全序列为基础,设计特异引物。通过总RNA提取、RT-PCR、3’RACE和5’RACE扩增及序列测定,测得PVYN-LN全长基因组序列(NCBI登录号为JQ971975)包括9714个碱基(含PolyA尾),整条序列仅包含一个由9186个碱基组成的开放读码框(ORF),编码一条包含3061个氨基酸的多聚蛋白。对所得序列进行BLAST,利用MEGA软件对所测得的PVYN-LN全序列与GenBank中已有的PVY全序列及氨基酸进行系统进化分析,发现PVYN-LN分离物与已报道的PVYN株系具有较高的进化亲缘关系,该分离物属于PVYN株系。序列重组分析软件RDP4分析,该序列无重组。 展开更多

关键词 烟草 pvyn 基因组全序列 重组分析

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PVYN侵染对白肋烟烟气冷凝物性质的影响:[va]基因保护作用评估

2

作者 VERRIERJL ACHARDS +1 位作者 CAILLETEAU 张成省 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2005年第3期38-38,共1页

关键词 白肋烟 烟气冷凝物 基因保护作用 pvyn侵染 CSC诱变性 抗性基因

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铜元素诱导烟草抗PVY^N相关生理生化及信号物质的研究 被引量：6

3

作者 李鑫 吴元华 +1 位作者 顾晶晶 赵秀香 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期536-540,共5页

通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株... 通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株体内的与抗性相关物质如脯氨酸及可溶性糖含量升高,电解质的外渗减少。此外,Cu元素处理能诱导信号物质水杨酸和乙烯的积累,水杨酸含量在接种后15d达到最大量3.93μg·g-1,为接种对照的1.3倍;而乙烯释放量在3～9d内均高于接种对照,在12d时乙烯释放量显著低于接种对照,分析认为前期Cu元素处理后诱导了乙烯释放的增强,进行抗性信号的传递。因此,喷施Cu元素后可以诱导烟草植株产生抗病性,增强烟草对PVYN侵染的抵抗力,并且诱导了相关抗性信号的传递。 展开更多

关键词 烟草 铜 马铃薯Y病毒脉坏死株系(pvyn) 诱导抗性 信号物质

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硫酸镁对烟草感染PVY^N后病情及防御酶系活性的影响 被引量：1

4

作者 顾晶晶 李鑫 +1 位作者 赵秀香 吴元华 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期286-290,共5页

对叶面喷施240mg·L-1硫酸镁溶液后,烟草幼苗感染烟草马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato Virus Y-vein necrosis,PVYN)的发病情况、病毒含量及防御酶系活性进行研究。结果表明:烟草幼苗经240 mg·L-1 MgSO4处理,再接种PVYN后其发病... 对叶面喷施240mg·L-1硫酸镁溶液后,烟草幼苗感染烟草马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato Virus Y-vein necrosis,PVYN)的发病情况、病毒含量及防御酶系活性进行研究。结果表明:烟草幼苗经240 mg·L-1 MgSO4处理,再接种PVYN后其发病程度减轻,病情指数及幼苗叶片中病毒含量均低于未喷施MgSO4的对照。叶面单独喷施MgSO4处理和喷施后接种PVYN处理,对苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性均有较强的促进作用,烟草幼苗接种PVYN后,PAL在处理第6天时达到酶活高峰(2.63U·g-1FW),POD、PPO的活性在接种PVYN后第15天时产生高于对照处理的酶活高峰,峰值分别为55.76U·g-1FW和10.62U·g-1FW;但喷施MgSO4对过氧化氢酶(CAT)活性影响较小。本研究证实,MgSO4具有较强的诱导植物产生抗病毒的能力,可明显提高植株的抗病性。 展开更多

关键词 烟草 马铃薯Y病毒脉坏死株系(pvyn) 苯丙氨酸解氨酶 过氧化物酶 多酚氧化酶 过氧化氢酶 MgSO4

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烟草在PVY^N病毒与烟蚜作用下对高CO_2浓度的响应 被引量：1

5

作者 付雪 叶乐夫 戈峰 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期3575-3583,共9页

以CO2浓度为主处理因子,研究了加倍CO2浓度和对照大气CO2浓度条件下,烟蚜、马铃薯Y病毒N株(PVYN)以及二者共同作用下烟草各指标的响应。结果表明,在当前CO2浓度条件下,PVYN、烟蚜及两者联合作用对烟草生物量影响不显著;而在未来高CO2浓... 以CO2浓度为主处理因子,研究了加倍CO2浓度和对照大气CO2浓度条件下,烟蚜、马铃薯Y病毒N株(PVYN)以及二者共同作用下烟草各指标的响应。结果表明,在当前CO2浓度条件下,PVYN、烟蚜及两者联合作用对烟草生物量影响不显著;而在未来高CO2浓度条件下,PVYN、烟蚜及两者联合作用对烟草生物量影响很大。CO2浓度升高后,PVYN和蚜虫二者联合作用显著降低烟草产量,危害加重,高CO2的"肥料"作用被极大地削弱。在有烟蚜、PVYN以及两者共同作用时烟草的化学物质及主要的次生代谢物烟碱的含量对CO2浓度升高的响应也发生一定的变化,表现在:高CO2浓度条件下,蚜虫、蚜虫与PVYN共同作用显著增加了烟草的含氮量;显著减少了烟叶含糖量;PVYN及其与蚜虫共同作用显著升高叶片可溶性蛋白含量;当高CO2浓度下,各处理的烟草烟碱含量均显著下降,而且PVYN感染的烟叶烟碱含量无论在哪一种CO2浓度条件下,都比无毒无虫的对照烟叶烟碱含量升高。结果显示,烟蚜和马铃薯Y病毒N株(PVYN)对烟草的产量、营养物质及防御物质都有影响;CO2浓度升高对烟草的生长有促进作用,增加了烟草的产量,但蚜虫的危害和PVYN感染使烟草产量下降,在高CO2浓度条件下,烟蚜和PVYN共同作用相对于目前CO2浓度对烟草产量的危害加重。 展开更多

关键词 CO2 烟草 烟蚜 马铃薯Y病毒N株(pvyn)

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马铃薯Y病毒黑龙江分离物株系鉴定 被引量：7

6

作者 高秀妍 高艳玲 +5 位作者 耿宏伟 张威 范国权 白艳菊 吕文河 蒋希峰 《中国马铃薯》 2009年第1期11-14,共4页

通过生物学方法、血清学方法、RT-PCR方法对黑龙江省一个马铃薯Y病毒分离物进行株系鉴定。该病毒侵染洋酸桨产生枯斑,在黄苗榆烟上表现系统花叶,并伴有坏死症状,血清学反应强烈,三重PCR特异性条带清晰,鉴定该分离物为PVYN。

关键词 pvyn 生物学 血清学 RT-PCR 花叶 坏死

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抗PVY^N烟草突变株SN01的筛选及其生理生化特性 被引量：3

7

作者 由书妍 吴元华 +1 位作者 赵秀香 张天园 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2009年第8期61-64,共4页

为筛选出烟草抗PVYN种质资源,利用病毒汁液摩擦接种法,从烤烟品种NC89烟株中筛选出一株自然突变的抗PVYN变异株,留取其种子编号为SN01。接种PVYN后,对抗病植株SN01与常规NC89烟株的总酚、类黄酮、丙二醛含量以及多酚氧化酶(PPO)活性进... 为筛选出烟草抗PVYN种质资源,利用病毒汁液摩擦接种法,从烤烟品种NC89烟株中筛选出一株自然突变的抗PVYN变异株,留取其种子编号为SN01。接种PVYN后,对抗病植株SN01与常规NC89烟株的总酚、类黄酮、丙二醛含量以及多酚氧化酶(PPO)活性进行了比较。结果表明:在接种后第12 d烟草抗PVYN突变株SN01的总酚和类黄酮含量最高,高于常规NC89,丙二醛含量基本无变化,PPO活性在接种后第15 d有小幅度升高,但明显低于接种后常规NC89的PPO活性,说明在接种PVYN后抗病突变株与常规NC89烟株的生理指标有明显差异,抗病突变株对病毒的侵染有较强的抵抗和调节能力。 展开更多

关键词 pvyn 烟草 突变株 生理生化特性

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烤烟品种K326抗PVY^N突变株SN02的筛选及其抗病生理生化特性 被引量：2

8

作者 杨丽烨 吴元华 赵秀香 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2010年第9期61-64,共4页

利用病毒汁液摩擦接种法,从烤烟品种K326中筛选出自然突变的高抗PVYN的变异株SN02,并测定了接种PVYN后,抗病植株SN02与普通K326烟株的抗病性以及防御酶系和叶绿素a、叶绿素b的含量。结果表明,接种PVYN后,SN02均不发病,但普通K326的发病... 利用病毒汁液摩擦接种法,从烤烟品种K326中筛选出自然突变的高抗PVYN的变异株SN02,并测定了接种PVYN后,抗病植株SN02与普通K326烟株的抗病性以及防御酶系和叶绿素a、叶绿素b的含量。结果表明,接种PVYN后,SN02均不发病,但普通K326的发病率达100%,病情指数达84.13。SN02与普通K326的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化趋势一致,接种PVYN后第4 d均达到峰值,但SN02的PAL活性是普通K326品种的1.35倍;过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化氢酶(CAT)活性变化趋势也相似,但SN02的POD,PPO和CAT酶活性高于普通K326品种,3种酶活性出现峰值的时间不同,分别在接种PVYN后第8 d,第12 d和第16 d。在测定时间范围内,SN02的叶绿素a和叶绿素b含量高于普通K326品种。 展开更多

关键词 烟草 K326 pvyn 突变株 SN02 生理生化特性

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一种植物提取物对CMV、PVY^N及其昆虫介体的作用 被引量：5

9

作者 沈建国 谢荔岩 +2 位作者 张正坤 谢联辉 林奇英 《中国农学通报》 CSCD 2005年第5期341-343,359,共4页

以植物Pt为材料,对其抗两种植物病毒———CMV(Cucumbermosaicvirus,CMV)和PVYN(PotatovirusYN,PVYN)及其昆虫介体[蚜虫Myzuspesicae(Suzer)]的作用进行研究。结果表明:(1)VT1具有较高的抗病毒活性,1mg/ml浓度下对CMV和PVYN的抑制率分别... 以植物Pt为材料,对其抗两种植物病毒———CMV(Cucumbermosaicvirus,CMV)和PVYN(PotatovirusYN,PVYN)及其昆虫介体[蚜虫Myzuspesicae(Suzer)]的作用进行研究。结果表明:(1)VT1具有较高的抗病毒活性,1mg/ml浓度下对CMV和PVYN的抑制率分别为91.6%和96.2%;(2)VT1对蚜虫有较强的触杀作用,24h和48h的LC50值分别为1.953mg/ml和0.8125mg/ml。生物活性跟踪发现,氯仿组分为植物Pt对蚜虫起触杀作用的有效部位;(3)VT1对蚜虫具有一定的忌避和内吸作用,但无明显熏蒸作用。 展开更多

关键词 昆虫介体 CMV 植物提取物 virus mosaic 触杀作用 抗病毒活性 LC50值 植物病毒 生物活性 有效部位 内吸作用 熏蒸作用 蚜虫 抑制率 Pt 忌避

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烟草抗PVY^N突变株SN01的SRAP-PCR反应体系的建立与优化

10

作者 李杰 朱丹 +3 位作者 李颖 安梦楠 赵秀香 吴元华 《中国烟草科学》 CSCD 2013年第6期93-97,共5页

采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素(dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物和DNA)进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是:dNTPs(2.5 mmol/... 采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素(dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物和DNA)进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是:dNTPs(2.5 mmol/L)3.2μL、Mg2+(25 mmol/L)1.6μL、Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL)0.16μL、引物(10μmol/L)0.6μL、DNA模板120 ng。对该SRAP-PCR反应程序中的退火温度和循环次数筛选表明,最佳退火温度为57℃,循环次数为35次。该优化体系的建立,为进一步对烟草抗PVYN突变株SN01的抗病基因研究提供了可靠基础。 展开更多

关键词 烟草 抗pvyn突变株 SRAP-PCR 体系优化

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烟草原生质体制备体系的优化及PVY^N导入研究 被引量：1

11

作者 吴元华 董雪 +2 位作者 安梦楠 苏燕妮 李晓冬 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期26-30,共5页

植物原生质体是除去细胞壁后仍具有活力的裸露单细胞,其在植物RNA病毒的复制机理研究方面具有广泛的应用。为了获得高产、高活力的烟草原生质体,以烟草(Nicotiana tabacum Linn.)品种K326为材料,对原生质体制备体系中的不同细胞壁酶解... 植物原生质体是除去细胞壁后仍具有活力的裸露单细胞,其在植物RNA病毒的复制机理研究方面具有广泛的应用。为了获得高产、高活力的烟草原生质体,以烟草(Nicotiana tabacum Linn.)品种K326为材料,对原生质体制备体系中的不同细胞壁酶解液成分、酶解时间、酶解渗透压稳定剂含量、离心时间以及离心转速等因素进行优化。结果表明:在含1%纤维素酶,0.5%离析酶,0.6mol·L-1甘露醇的酶解液中,26℃慢速震荡(40r·min-1)酶解4h,700r·min-1离心3min,得到产量及活力较高的原生质体,可直接用于植物病毒的接种试验;利用聚乙二醇(PEG)融合法向获得的高活力原生质体中接种马铃薯Y病毒N株系(Potato virus Y necrosis strain,PVYN),经培养后提取总RNA,通过PVYN特异性引物经RT-PCR扩增后检测条带明显,表明PVYN成功导入烟草原生质体并自我复制。 展开更多

关键词 烟草 原生质体制备 马铃薯Y病毒N株系 侵染

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嘧肽·吗啉胍对茄科作物PVY^N的防效研究

12

作者 王潮钟 黄翯 +1 位作者 苏燕妮 董雪 《安徽农业科学》 CAS 2015年第20期152-153,155,共3页

[目的]明确嘧肽·吗啉胍对马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)在不同茄科植物上的抑制作用。[方法]研究嘧肽·吗啉胍对PVYN在不同茄科作物上的防效,并采用分光光度计法测定植株体内PVYN病毒的浓度。[结果]嘧肽·吗啉胍对不同茄科寄... [目的]明确嘧肽·吗啉胍对马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)在不同茄科植物上的抑制作用。[方法]研究嘧肽·吗啉胍对PVYN在不同茄科作物上的防效,并采用分光光度计法测定植株体内PVYN病毒的浓度。[结果]嘧肽·吗啉胍对不同茄科寄主上的PVYN引起的病毒病害均具有较好的防治效果,可明显降低感病茄科作物体内PVYN的浓度。[结论]试验结果为嘧肽·吗啉胍的推广应用及由PVYN引起的病害防治提供了理论依据。 展开更多

关键词 嘧肽·吗啉胍 pvyn 防效

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嘧肽·吗啉胍对烟草PVY^N的抑制作用及对寄主防御酶活性的影响

13

作者 周建全 张忠光 +1 位作者 苏燕妮 董雪 《湖北农业科学》 2015年第21期5306-5309,共4页

为了明确嘧肽·吗啉胍对马铃薯Y病毒坏死株系(Potato virus Y necrosis strain,PVY^N)的抑制作用及诱导寄主的抗性反应,采用紫外分光光度计和ELISA法研究了嘧肽·吗啉胍对烟草中PVY^N浓度的影响。结果表明,嘧肽·吗啉胍可... 为了明确嘧肽·吗啉胍对马铃薯Y病毒坏死株系(Potato virus Y necrosis strain,PVY^N)的抑制作用及诱导寄主的抗性反应,采用紫外分光光度计和ELISA法研究了嘧肽·吗啉胍对烟草中PVY^N浓度的影响。结果表明,嘧肽·吗啉胍可明显降低感病植物体内PVY^N的浓度,抑制率达32.71%~68.73%。并检测不同处理下烟草体内过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)及超氧化物歧化酶(SOD)的变化,嘧肽·吗啉胍能诱导烟草体内PPO、POD、PAL及SOD的活性提高,说明该药剂可诱导植株产生抗病性。 展开更多

关键词 嘧肽·吗啉胍 pvyn 抑制作用 防御酶

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半巢式RT-Realtime PCR检测马铃薯Y病毒脉坏死株系 被引量：1

14

作者 耿金培 粟智平 +2 位作者 张京萱 方绍庆 王真 《植物检疫》 北大核心 2009年第3期17-20,共4页

马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virusY,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本文根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶基因序列保守区域,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测PVYn的新方... 马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virusY,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本文根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶基因序列保守区域,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测PVYn的新方法。该方法采用E.Z.N.ATM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR和TaqMAN探针检测技术。第二步半巢式RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Real time PCR等方法高。实验结果表明,该方法检测灵敏度可达4fg/μL植物总RNA。 展开更多

关键词 马铃薯Y病毒脉坏死株系(pvyn) 半巢式RT-Realtime PCR 检测

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《沈阳农业大学学报》2009年(第40卷)第1～6期总目次

15

《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期758-768,共11页

关键词 沈阳农业大学学报 硕士学位授予权 研究简报 学科简介 pvyn JUN 封二 水稻产量 目次

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巢式-多重RT-Realtime PCR检测马铃薯Y病毒脉坏死株系的方法 被引量：1

16

作者 粟智平 耿金培 +2 位作者 杨益娥 钟响 张京萱 《检验检疫科学》 2009年第4期8-11,共4页

马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Yvein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependentRNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一... 马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Yvein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependentRNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一条TaqMAN荧光探针,建立了巢式-多重RT-Real-time PCR检测PVYn的新方法。该方法采用E.Z.N.ATM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,本方法检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Real time PCR等方法高。该方法检测灵敏度可达3 fg/μL植物总RNA。利用四对引物和一条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,检测的准确性比其它方法高。 展开更多

关键词 马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVY^N) 巢式-多重RT-RealtimePCR 检测

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