马铃薯Y病毒蚜传辅助成分介导PVX/PVY协生作用 被引量：3

1

作者 鲁瑞芳 郭明 +2 位作者 李为民 梁小波 彭学贤 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期250-254,共5页

构建了马铃薯Y病毒中国株系 (PVY C)蚜传辅助成分 (HC Pro)基因的正义、反义和缺失三种植物表达载体 ,通过农杆菌介导法转化烟草品种NC89。Southernblot分析表明 ,HC Pro基因及其突变体已经整合到烟草染色体中 ,Westernblot分析证明 ,正... 构建了马铃薯Y病毒中国株系 (PVY C)蚜传辅助成分 (HC Pro)基因的正义、反义和缺失三种植物表达载体 ,通过农杆菌介导法转化烟草品种NC89。Southernblot分析表明 ,HC Pro基因及其突变体已经整合到烟草染色体中 ,Westernblot分析证明 ,正义HC Pro基因及其缺失突变体在转基因烟草中有表达产物。攻毒试验结果证明 ,转正义HC Pro基因及其缺失突变体不仅能够提高T1转基因烟草中PVY C的病毒积累和致病性 ,而且对异源病毒PVX具有同样的作用 ,而转反义HC Pro基因烟草对PVY C和PVX的致病性无影响。因此PVY CHC 展开更多

关键词 马铃薯Y病毒 HC-PRO基因 致病性 pvx/pvy 协生作用 蚜传辅助成分

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应用Dot-ELISA检测PVX、PVY和PVS 被引量：15

2

作者 孟清 张鹤龄 宋伯符 《中国病毒学》 CAS CSCD 1993年第4期366-372,共7页

以NCM为固相载体、应用间接ELISA法测定了纯化的PVX、PVY和PVS;对接种的烟草,马铃薯块茎的芽、休眠块茎顶端的PVX、PVY和PVS也分别进行了测定。结果表明检测纯病毒PVX、PVY和PVS的灵敏度分别为2.76pg、2.835pg和5.831pg。检测感病烟草... 以NCM为固相载体、应用间接ELISA法测定了纯化的PVX、PVY和PVS;对接种的烟草,马铃薯块茎的芽、休眠块茎顶端的PVX、PVY和PVS也分别进行了测定。结果表明检测纯病毒PVX、PVY和PVS的灵敏度分别为2.76pg、2.835pg和5.831pg。检测感病烟草汁液马铃薯块茎芽、休眠块茎顶端的稀释度PVX分别为:1/20480～1/81920、1/20480和1/5120;PVY分别为1/81920、1/20480和1/5120;PVS分别为1/81920～1/327680、1/20480～1/81920和1/5120～1/20480。和Cocktail-ELLSA相比,检测PVX和PVY的灵敏度提高至少16倍。实验结果表明,Dot-ELISA是检测PVX、PVY和PVS灵敏而有效的方法。 展开更多

关键词 马铃薯病毒 ELISA 硝酸纤维素膜

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amiRNA介导的兼抗PVX、PVY、PSTVd马铃薯植株获得及抗性鉴定 被引量：1

3

作者 姜丽丽 牟芮 +2 位作者 刘尚武 张桂芝 金光辉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第3期195-202,共8页

为获得兼抗多种病毒(类病毒)的马铃薯植株,分别克隆了靶向PVX、PVY和PSTVd蛋白的P25、HC-Pro和Virp1基因,以拟南芥pre-miR159a为骨架设计了针对P25、HC-Pro和Virp1基因的amiRNA序列,通过Overlapping PCR将3个amiRNA片段连接,并导入植物... 为获得兼抗多种病毒(类病毒)的马铃薯植株,分别克隆了靶向PVX、PVY和PSTVd蛋白的P25、HC-Pro和Virp1基因,以拟南芥pre-miR159a为骨架设计了针对P25、HC-Pro和Virp1基因的amiRNA序列,通过Overlapping PCR将3个amiRNA片段连接,并导入植物双元表达载体pCAMBIA1300-221,构建植物表达载体p1300-221-pre-amiR-P25-HCPro-Virp1,经PCR及酶切验证,表达载体构建正确。农杆菌介导法将含目的基因质粒菌液侵染马铃薯品种费乌瑞它脱毒微型薯片,经再生、压力筛选,抗性植株分化及植株壮苗共获得转化株系15株,PCR检测结果表明,其中10株检测到与目的基因大小一致的片段(729 bp)。qRT-PCR结果显示,外源amiR-P25-HCPro-Virp1基因在10个转化植株中均有表达,相对表达量在7.68~21.37。对T0阳性转化植株的攻毒试验,将PVX、PVY和PSTVd病毒等量混合液摩擦接种至6~8叶期的植株叶片,20 d后观察发现,对照植株感病严重,出现植株矮小、叶片斑驳等症状,而转化植株未表现出感病症状,生长正常。RT-PCR进行病毒特异性检测,结果显示,转化植株中也未检测到病毒序列,这表明转amiR-P25-HCPro-Virp在转化植株中能稳定表达,转化植株能够兼抗PVX、PVY和PVSTd 3种病毒(类病毒)。得到了同时兼抗PVX、PVY和PVSTd转化植株,且抗性显著,为马铃薯抗病毒育种提供了新的遗传资源。 展开更多

关键词 马铃薯 amiRNA pvx pvy PSTVD

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芦苇提取物对几种植物病毒的抑制作用

4

作者 孙振琪 李一晖 +4 位作者 陈美滢 刘春艳 孟卓 王海娟 赵明敏 《西南大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期46-58,共13页

以本氏烟(Nicotiana benthamiana)为试验材料,研究芦苇提取物对马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)的抑制作用。首先用芦苇提取物处理本氏烟,6 h后接种PVX,观... 以本氏烟(Nicotiana benthamiana)为试验材料,研究芦苇提取物对马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)的抑制作用。首先用芦苇提取物处理本氏烟,6 h后接种PVX,观察植株的发病情况,并通过RT-qPCR对PVX的外壳蛋白(Coat Protein,CP)表达量进行检测。结果表明:芦苇提取物处理后,本氏烟发病较轻,且PVX CP表达量显著降低。将芦苇提取物涂抹于本氏烟上,6 h后分别接种PVYros和TuMV-GFP,观察植株发病情况并通过Western Blot对病毒积累量进行检测,同时检测接种病毒12 d后本氏烟叶片中的叶绿素和氮含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性。结果表明:接种PVYros后,芦苇提取物处理的本氏烟上未观察到PVY症状,且Western Blot未检测到PVY CP;叶绿素含量和氮含量显著高于对照,SOD和POD活性与对照相比,显著降低。接种TuMV-GFP后,芦苇提取物处理的本氏烟症状较轻,且病毒积累量显著低于对照;叶绿素含量和氮含量显著高于对照,SOD和POD活性与对照相比,显著降低。 展开更多

关键词 芦苇提取物 植物病毒 马铃薯X病毒 马铃薯Y病毒 芜菁花叶病毒

原文传递

河南疑似烟草PVX的病原种类鉴定及田间发生规律

5

作者 薛超群 杨军 +1 位作者 奚家勤 王广山 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2007年第12期63-65,共3页

采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术和多点田间试验调查的方法,研究了河南疑似烟草PVX的病原种类及田间发生规律。结果表明,河南疑似烟草PVX的病原种类为马铃薯Y病毒;移栽后10～20d发生较轻且发展缓慢,20～60d发生较重且发展迅速,60d... 采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术和多点田间试验调查的方法,研究了河南疑似烟草PVX的病原种类及田间发生规律。结果表明,河南疑似烟草PVX的病原种类为马铃薯Y病毒;移栽后10～20d发生较轻且发展缓慢,20～60d发生较重且发展迅速,60d以后病情趋于稳定;中烟100和云烟87品种的抗性无显著差异,且均显著低于NC89。 展开更多

关键词 疑似烟草马铃薯X病毒病 马铃薯Y病毒病 病原种类 双抗体夹心酶联免疫吸附法

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马铃薯六种主要病毒通用RT-PCR检测体系的建立 被引量：9

6

作者 张威 白艳菊 +6 位作者 文景芝 范国权 高艳玲 申宇 张抒 孟宪欣 王军 《中国马铃薯》 2015年第4期222-227,共6页

马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒,因此,建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对... 马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒,因此,建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。结果表明,当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、d NTPs浓度为0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。最终,建立了一套通用RT-PCR检测体系,只需要变换每种病毒的引物,就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。 展开更多

关键词 马铃薯 pvx pvy PVS PLRV PVM PVA

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四种广普性植物病毒高效mPCR检测方法的建立 被引量：5

7

作者 曾静 张飞云 +2 位作者 李晶晶 于银霞 王法军 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第6期108-112,共5页

本研究建立了能同时检测出烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的多重RT-PCR体系。TMV、CMV、PVX、PVY是四种广普性植物病毒,寄主范围广泛,并且常常发生复合侵染。本研究以上述四种病毒的CP基因... 本研究建立了能同时检测出烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的多重RT-PCR体系。TMV、CMV、PVX、PVY是四种广普性植物病毒,寄主范围广泛,并且常常发生复合侵染。本研究以上述四种病毒的CP基因部分序列设计引物,以反转录的cDNA为模板,建立多重RT-PCR反应体系,分别扩增出211～417bp的不同长度的基因片断,并通过序列测定来确认扩增序列的特异性。将反转录合成的cDNA进行浓度稀释,来对多重RT-PCR与单重RT-PCR的灵敏度进行比较,结果证明,多重RT-PCR体系能够同时快速检测这四种病毒,并且有很高的灵敏度。 展开更多

关键词 多重RT-PCR 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 马铃薯X病毒 马铃薯Y病毒分子检测

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利用RNA干涉技术及微束激光转化法培育抗病毒马铃薯 被引量：6

8

作者 郭志鸿 张金文 +1 位作者 陈正华 王兰岚 《激光生物学报》 CAS CSCD 2006年第5期525-531,共7页

针对马铃薯生产中危害严重、分布广泛并且具有强烈协生作用的马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒,开展了抗病毒病的育种研究.采用RT-PCR技术分别克隆了267 bp的编码马铃薯X病毒外壳蛋白（PVX-cp）基因的相对保守区段X和294 bp的编码马铃薯Y病毒... 针对马铃薯生产中危害严重、分布广泛并且具有强烈协生作用的马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒,开展了抗病毒病的育种研究.采用RT-PCR技术分别克隆了267 bp的编码马铃薯X病毒外壳蛋白（PVX-cp）基因的相对保守区段X和294 bp的编码马铃薯Y病毒外壳蛋白（PVY-cp）基因的相对保守区段Y两个片段,将其按顺序连接,形成融合基因XY,然后分别将融合基因XY正向和反向插入到载体pHANNIBAL中,得到了载体pHIV,再用NotI对pHIV进行酶切,将产生的大片段插入到载体pART27中,得到同时以PVX-cp基因和PVY-cp基因为靶标的XY的RNAi载体pARIV.采用微束激光穿刺转化技术转化马铃薯品种Favorita的愈伤组织,得到了14株表型正常的转基因植株,转基因植株的southern blot分析表明,导入的外源融合基因拷贝数介于2～4之间.攻毒实验表明,其中11株转基因植株对PVX、PVY°以及PVX和PVY°混合侵染均表现免疫,而其它3株的病毒浓度也低于对照.这一结果将为利用RNAi干涉技术开展植物抗多种病毒病的育种提供重要依据,验证了所构建的RNA干涉（RNA interference RNAi）载体具有良好的功能,同时又一次证明微束激光穿刺法是一种有效的遗传转化手段. 展开更多

关键词 RNA干涉 马铃薯X病毒 马铃薯Y病毒 融合基因 微束激光穿刺技术

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高温激活RNA沉默介导的心叶烟抗病毒防御反应 被引量：1

9

作者 孙燕霞 张献军 +2 位作者 刘兰伟 刘秀君 刘红梅 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期58-63,共6页

在真核细胞内,RNA沉默是一种保守的抵抗病毒及外源基因等寄生分子的防御机制。温度可以明显地影响植物体与病毒之间的相互作用。在常温状态下,常常会伴随病毒病的爆发,但在较高温度下,症状则会减轻,甚至有些感病植株新生叶片可以较快地... 在真核细胞内,RNA沉默是一种保守的抵抗病毒及外源基因等寄生分子的防御机制。温度可以明显地影响植物体与病毒之间的相互作用。在常温状态下,常常会伴随病毒病的爆发,但在较高温度下,症状则会减轻,甚至有些感病植株新生叶片可以较快地恢复健康。目前这类现象的内在机制还不完全清楚。本文通过定量分析不同温度下马铃薯X病毒(Po-tatovirus X,PVX)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)侵染的心叶烟(Nicotiana glutinosa)植株体内病毒蛋白含量,结合症状观察,确定30℃左右是PVX和PVY在心叶烟上引起症状消失即发生系统性RNA沉默的临界温度,此时的感病植株上部新生展开叶片呈现无症状态,下部已发病叶片症状不变。在常温时,由病毒激发的RNA沉默会受到抑制,病毒来源的小分子干涉RNA(small interfering RNAs,siRNAs)含量极少或根本检测不到,植株对于病毒的敏感性较强。当温度达到30或32℃时,感病植株下部症状保持叶片中,病毒起源的siRNAs含量明显增加,而上部新生健康叶片中却检测不到siRNAs的存在。这说明高温激活了RNA沉默介导的植物抗病毒防御反应,导致病毒症状减轻甚至消失。 展开更多

关键词 RNA沉默 SIRNAS pvx pvy 心叶烟

原文传递

银川地区番茄病毒病主要毒原种类研究 被引量：4

10

作者 冯兰香 穆淑云 田如燕 《宁夏农林科技》 1994年第2期24-27,共4页

近两年来，首次对银川地区番茄病毒的主要毒原种类进行了系统的鉴定研究，明确了烟草花叶病毒（ＴＭＶ）是第一位毒源，占样本数的６１．５％；黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）是第二位毒原，占样本数的３４．６％；马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）和马... 近两年来，首次对银川地区番茄病毒的主要毒原种类进行了系统的鉴定研究，明确了烟草花叶病毒（ＴＭＶ）是第一位毒源，占样本数的６１．５％；黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）是第二位毒原，占样本数的３４．６％；马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）和马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ）较少，分别占样本数的２０．８％和１８．６％。田间番茄病毒病的主要症状是重花叶和植株的局部或系统坏死症状。 展开更多

关键词 番茄 病毒病 病原 银川地区

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马铃薯不同级别脱毒种薯病毒再侵染情况及产量变化 被引量：19

11

作者 黄萍 何庆才 颜谦 《贵州农业科学》 CAS 2008年第4期39-41,共3页

通过对大西洋原原种、一级原种、二级原种、一级种薯和二级种薯的生产试验及其PVX、PVY、PVS、PLRV病毒的DAS-ELISA检测,结果表明,从原原种到一级种薯的生产过程中,产量随着脱毒种薯代数的增加而升高,其中以二级原种生产一级种薯的增产... 通过对大西洋原原种、一级原种、二级原种、一级种薯和二级种薯的生产试验及其PVX、PVY、PVS、PLRV病毒的DAS-ELISA检测,结果表明,从原原种到一级种薯的生产过程中,产量随着脱毒种薯代数的增加而升高,其中以二级原种生产一级种薯的增产幅度最显著;除原原种不带以上4种病毒外,一级原种、二级原种分别带3%、13.3%的PVS病毒,一级种薯带PLRV和PVS病毒,带毒率分别是5.8%、21%,二级种薯带PVY、PVS、PLRV病毒,带毒率分别是8.9%、30%、13%。 展开更多

关键词 脱毒马铃薯 再侵染 马铃薯X病毒 马铃薯Y病毒 马铃薯S病毒 马铃薯卷叶病毒

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反转录-环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测马铃薯病毒 被引量：3

12

作者 陈恩发 李其义 +2 位作者 邓宽平 卢扬 彭慧元 《贵州农业科学》 CAS 2015年第3期74-77,共4页

为寻求低成本快速准确灵敏度高的马铃薯病毒检测方法,根据马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)的外壳蛋白基因序列设计4条特异引物,建立LAMP检测技术。结... 为寻求低成本快速准确灵敏度高的马铃薯病毒检测方法,根据马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)的外壳蛋白基因序列设计4条特异引物,建立LAMP检测技术。结果表明:LAMP检测方法灵敏度下限是10个拷贝的病毒量,该方法检测PVX、PVY和PLRV特异性好,灵敏度高,1h可完成检测,且检测成本低。 展开更多

关键词 马铃薯X病毒 马铃薯Y病毒 马铃薯卷叶病毒 反转录-环介导等温扩增技术 (RT-LAMP) 病毒检测

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电子显微镜技术在鉴定筛选马铃薯无毒核心材料中的应用 被引量：5

13

作者 周淑芹 朱光新 《黑龙江农业科学》 北大核心 1996年第6期17-20,共4页

应用免疫电镜和负染法检测马铃薯试管苗中的微量病毒。试验表明,二者都具有很高的灵敏度,复合血清免疫电镜检出率比负染法高出7.4个百分点,从而在原有基础上提高试管苗的无毒化。

关键词 免疫电镜 马铃薯 无毒材料

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西宁市马铃薯3种常见病毒的检测分析 被引量：3

14

作者 赵发海 许海宁 +3 位作者 刘智令 张忠福 汪梦成 李保平 《现代农业科技》 2019年第3期79-82,84,共5页

为了解西宁市马铃薯(大西洋)PVX、PVY、PLRV这3种病毒的发生情况,从该地区采集了270份叶片样品,应用DAS-ELISA法进行检测。检测结果表明,有26份样品为PVY阳性,此样品中PVY病毒感染率高达9.63%,由此可推测出该地区大西洋品种马铃薯被PVY... 为了解西宁市马铃薯(大西洋)PVX、PVY、PLRV这3种病毒的发生情况,从该地区采集了270份叶片样品,应用DAS-ELISA法进行检测。检测结果表明,有26份样品为PVY阳性,此样品中PVY病毒感染率高达9.63%,由此可推测出该地区大西洋品种马铃薯被PVY病毒感染较为严重;有1份样品为PLRV阳性,其感染率为0.37%,说明该地区种植的大西洋品种马铃薯被PLRV病毒感染并不严重;在本次检测中没有出现PVX阳性,其病毒感染率为0,说明该地区大西洋品种马铃薯极不容易被PVX病毒感染。 展开更多

关键词 马铃薯 pvx pvy PLRV 检测分析 青海西宁

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