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基于PTEN/mTOR/STAT3通路探讨夹脊电针对脊髓损伤大鼠自噬的影响 被引量:1
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作者 尹洪娜 仲思潼 +4 位作者 李竹馨 张硕 周新宇 崔杨 孙忠人 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第11期1-7,I0001-I0004,共11页
目的观察夹脊电针对脊髓损伤(spinal and injury,SCI)大鼠第10号染色体上缺失的磷酸酶与同源张力蛋白(phosphatase and tensinhomolog,PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/信号转导和转录激活子3(signal... 目的观察夹脊电针对脊髓损伤(spinal and injury,SCI)大鼠第10号染色体上缺失的磷酸酶与同源张力蛋白(phosphatase and tensinhomolog,PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/信号转导和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路相关因子(p-PTEN、p-mTOR、p-STAT3)、自噬相关因子(LC3-Ⅱ、p62、Atg5)以及星形胶质细胞中星形胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)共定位信号的表达情况,探讨夹脊电针调控SCI细胞自噬促进神经功能恢复的可能机制,为临床运用夹脊电针治疗SCI提供新的思路和分子生物学理论依据。方法将72只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、夹脊电针(EA)组、抑制剂+夹脊电针(bpV)组,每组按照造模后3、7和14 d治疗时间点分为3个亚组,每个亚组6只大鼠。采用Allen’s法建立SCI大鼠模型。EA组予双侧胸(T)9、T11夹脊穴,电针30 min,强度1 mA,密波(100 Hz),1次/d,分别连续治疗3、7、14 d。bpV组在电针治疗前10 min注射PTEN通路抑制剂bpV(HOpic),200μL/kg,1次/d,分别连续治疗3、7、14 d。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分观察并比较各组大鼠后肢运动功能;HE染色观察各组大鼠脊髓组织的病理形态学变化;Nissl染色观察各组大鼠脊髓组织前角运动神经元的形态和数量;IHC检测各组大鼠脊髓组织p-PTEN、p-mTOR、p-STAT3、LC3-Ⅱ、p62、Atg5的免疫组化染色累积光密度值(imaging object definition,IOD)值;WB检测各组大鼠p-PTEN、p-mTOR、p-STAT3蛋白相对表达量;IF检测脊髓组织星形胶质细胞GFAP、LC3共定位情况。结果大鼠行为学检测结果示:与Model组比,在3、7、14 d时,EA组、bpV组BBB评分均增高(P<0.05);HE结果示:Model组脊髓组织出现大量内含片状出血以及坏死组织的空腔,神经细胞松散排列,3 d后EA组脊髓组织结构逐渐规整、空泡逐渐减少、神经元数量增加;Nissl染色结果示:与Sham组比,Model组神经元染色较浅,数量明显降低,EA组神经元染色较深,数量增多;IHC结果示:与Model组比,EA组p-PTEN、p-mTOR、p-STAT3的IOD值在3 d时明显降低(P<0.01),在7、14 d时明显增高(P<0.01);与Model组比,EA组在3 d时LC3-Ⅱ和Atg5显著升高,p62显著降低(P<0.01),在7、14 d时,LC3-Ⅱ和Atg5显著降低,p62显著增高(P<0.01);与Model组比,bpV组在3、7、14 d时LC3-Ⅱ、Atg5和p62的IOD值均降低(P<0.05);与EA组比,在3、7 d时,bpV组LC3-Ⅱ和Atg5表达均降低,p62增高(P<0.01),在14 d时,LC3-Ⅱ和Atg5降低,p62增高(P<0.05);WB结果示:与Model组相比,3 d时,EA组LC3-Ⅱ和Atg5表达显著升高,p62显著降低(P<0.01);在7、14 d时,LC3-Ⅱ和Atg5显著降低,p62显著增高(P<0.01);与Model组相比,在3、7、14 d时,bpV组LC3-Ⅱ、Atg5表达均降低,p62表达增高(P<0.05);与EA组比,在3、7 d时,bpV组LC3-Ⅱ表达较低,p62表达较高(P<0.01);在14 d时,LC3-Ⅱ明显增高(P<0.05)、Atg5明显增高,p62明显降低(P<0.01)。IF结果示:在3、7、14 d时,Model组有明显共定位信号,阳性细胞数与时间成正比。EA组的共定位阳性细胞数较Model组减少。bpV组阳性细胞数较EA组减少。结论夹脊电针能明显促进SCI大鼠后肢运动功能恢复,其机制与调控PTEN/mTOR/STAT3通路介导的自噬和星形胶质细胞生长有关。 展开更多
关键词 夹脊电针 脊髓损伤 pten/mtor/stat3 自噬 星形胶质细胞
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涤痰益智汤通过PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制自噬改善血管性痴呆大鼠认知障碍的机制研究
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作者 吴凡 顾梦宇 +10 位作者 孙烈乾 王凯漪 杨佳 郑莉 谌向忠 夏丽秀 赖星 马哲 易在凤 黄芳 杨超 《中国中医药信息杂志》 2026年第1期99-107,共9页
目的观察涤痰益智汤对血管性痴呆(VaD)大鼠PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路及自噬的影响,探讨其改善VaD认知障碍的作用机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、涤痰益智汤+抑制剂组、涤痰益智汤组、盐酸多奈哌齐组,每组8只,... 目的观察涤痰益智汤对血管性痴呆(VaD)大鼠PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路及自噬的影响,探讨其改善VaD认知障碍的作用机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、涤痰益智汤+抑制剂组、涤痰益智汤组、盐酸多奈哌齐组,每组8只,假手术组仅分离颈总动脉不结扎,其余组大鼠采用改良双侧颈总动脉永久性结扎法制备VaD模型。分别予相应处理4周。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,HE染色及尼氏染色观察海马组织神经元形态,透射电镜观察神经元自噬情况,ELISA检测血清脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)含量,Western blot及免疫组化检测海马组织磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、p-蛋白激酶B(AKT)、p-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p62、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少(P<0.01);海马CA1区神经元间隙增大,细胞形态不规则,边界模糊,神经元固缩,尼氏体溶解破碎、数量减少,透射电镜显示神经元内自噬体数目增多;血清BDNF、NGF含量显著降低(P<0.01);海马组织PTEN、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著升高(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、p-PI3K、p62蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,涤痰益智汤组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多(P<0.01);海马CA1区神经元数量增多,形态正常,排列整齐,尼氏体丰富,透射电镜可见自噬体及自噬小体减少;血清BDNF、NGF含量显著升高(P<0.01);海马组织PTEN、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、p-PI3K、p62蛋白表达显著升高(P<0.01)。使用PI3K抑制剂可抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,逆转涤痰益智汤对自噬的抑制作用。结论涤痰益智汤可以改善Va D大鼠学习记忆能力与神经元形态,其机制可能与调控PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制自噬有关。 展开更多
关键词 血管性痴呆 pten/PI3K/AKT/mtor信号通路 自噬 涤痰益智汤 神经元 大鼠
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桑色素调节mTOR/STAT3信号通路对哮喘幼年大鼠炎症反应的影响
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作者 陈洋洋 马鸿琦 +2 位作者 杨静 吴宗跃 朱萍 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1394-1400,共7页
目的:探究桑色素(Morin)调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/信号转导子与转录激活子3(STAT3)信号通路对哮喘幼年大鼠炎症反应的影响及机制。方法:建立哮喘大鼠模型。实验分为对照(Control)组、模型(Model)组、桑色素低剂量[Morin-L,10 m... 目的:探究桑色素(Morin)调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/信号转导子与转录激活子3(STAT3)信号通路对哮喘幼年大鼠炎症反应的影响及机制。方法:建立哮喘大鼠模型。实验分为对照(Control)组、模型(Model)组、桑色素低剂量[Morin-L,10 mg/(kg·d)]组、桑色素中剂量[Morin-M,30 mg/(kg·d)]组、桑色素高剂量[Morin-H,100 mg/(kg·d)]组和桑色素高剂量+mTOR激活剂[Morin-H+MHY-1485,100 mg/(kg·d)Morin+7 mg/(kg·d)MHY-1485]组。检测并记录增强呼气间歇值;ELISA测定总Ig E和卵清蛋白(OVA)特异性Ig E、IL-4、IL-5、IL-17、IL-13、IFN-γ和TGF-β1水平;Giemsa染色观察记录相关炎症细胞情况;流式细胞术检测Th1、Th2、Th17细胞比例;HE和PAS染色观察肺组织病理变化及杯状细胞增生情况;免疫组化及q RT-PCR检测GATA结合蛋白3(GATA-3)表达;Western blot检测mTOR和STAT3蛋白表达及磷酸化水平。结果:与Control组相比,Model组大鼠炎症细胞浸润明显,管壁及基底膜增厚不规则,杯状细胞明显较多,黏液分泌物增多,Penh值、IL-4、IL-5、IL-17、IL-13、TGF-β1、总Ig E和OVA-s Ig E水平、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性细胞和中性粒细胞数、Th2、Th17细胞比例、GATA-3平均光密度值、GATA-3 m RNA及mTOR和STAT3磷酸化水平显著升高(P<0.05),Th1细胞比例、IFN-γ水平显著降低(P<0.05)。与Model组相比,Morin-L组、Morin-M组和Morin-H组大鼠支气管壁结构较光滑完整,上皮细胞排列较整齐,气道壁厚度适中,炎症细胞浸润减少,杯状细胞增生减少,Penh值、IL-4、IL-5、IL-17、IL-13、TGF-β1、总Ig E和OVA-s Ig E水平、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸性细胞和中性粒细胞数、Th2、Th17细胞比例、GATA-3平均光密度值、GATA-3 m RNA及mTOR和STAT3磷酸化水平显著降低(P<0.05),Th1细胞比例、IFN-γ水平显著升高(P<0.05)。MHY-1485逆转了桑色素对哮喘大鼠炎症反应的抑制作用(P<0.05)。结论:桑色素可能通过抑制mTOR/STAT3信号通路激活抑制哮喘幼年大鼠炎症反应,进而改善哮喘症状。 展开更多
关键词 桑色素 mtor/stat3信号通路 哮喘 炎症反应
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菊藻丸对乳腺癌MCF-7细胞PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 被引量:1
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作者 欧阳志 郑裴凡 李松莲 《中医药导报》 2025年第4期34-41,共8页
目的:探究菊藻丸含药血清通过调控PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞恶性行为的作用及机制。方法:设计合成针对人PTEN基因的shRNA及阴性对照NC序列,构建PTEN基因沉默的慢病毒载体,分别感染MCF-7细胞。Real-time PCR和Wes... 目的:探究菊藻丸含药血清通过调控PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞恶性行为的作用及机制。方法:设计合成针对人PTEN基因的shRNA及阴性对照NC序列,构建PTEN基因沉默的慢病毒载体,分别感染MCF-7细胞。Real-time PCR和Western blotting验证PTEN敲减效果。将细胞分为正常对照组、空白血清组、菊藻丸含药血清组、LV-shNC组、LV-shNC+菊藻丸含药血清组、LV-shPTEN组、LV-shPTEN+菊藻丸含药血清组、LV-shPTEN+菊藻丸含药血清+MK2206组。CCK-8和集落形成实验检测细胞增殖能力,TUNEL染色检测凋亡水平,流式细胞术分析细胞周期分布,划痕实验和Transwell小室实验分别检测细胞迁移和侵袭能力,Western blotting检测PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路关键蛋白表达变化。结果:Real-time PCR和Western blotting结果证实,PTEN shRNA转染MCF-7细胞后,PTEN mRNA和蛋白表达水平明显降低。与空白血清组比较,菊藻丸含药血清组MCF-7细胞增殖、集落形成、迁移侵袭能力显著下降,凋亡水平升高,G1期阻滞更明显,PTEN表达量升高,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR水平降低(P<0.05);LV-shNC组与空白血清组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05);LV-shNC+菊藻丸含药血清组较LV-shNC组细胞增殖、集落形成、迁移侵袭能力受到抑制,凋亡率及G1期比例升高,PTEN表达上调,PI3K/Akt/mTOR通路活性下降(P<0.05);与LV-shNC+菊藻丸含药血清组比较,LV-shPTEN+菊藻丸含药血清组细胞增殖、侵袭转移能力增强,凋亡水平及G1期比例下降,PTEN表达量降低,PI3K/Akt/mTOR通路过度活化(P<0.05);LV-shPTEN+菊藻丸含药血清+MK2206组较LV-shPTEN+菊藻丸含药血清组细胞恶性表型受到更明显抑制,PI3K/Akt/mTOR通路活性进一步降低(P<0.05)。结论:菊藻丸含药血清可通过激活PTEN,抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、侵袭转移,促进其凋亡和G1期阻滞。这可能是菊藻丸发挥抗乳腺癌作用的重要机制之一。 展开更多
关键词 乳腺癌 菊藻丸 pten PI3K/AKT/mtor 细胞增殖 侵袭转移 凋亡 细胞周期
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弥漫性大B细胞淋巴瘤肿瘤微环境中PTEN、FOXP3和STAT3的表达及临床病理学意义
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作者 于靖雯 李君娜 +3 位作者 王小树 马文梅 庞雪莲 崔文丽 《诊断病理学杂志》 2025年第2期175-181,共7页
目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)肿瘤微环境中PTEN缺失、FOXP3和STAT3蛋白表达并阐述其临床病理意义。方法回顾性收集120例DLBCL患者蜡块,运用免疫组化技术(IHC)检测PTEN、FOXP3和STAT3蛋白的表达并作相关统计分析。结果PTEN蛋白阳... 目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)肿瘤微环境中PTEN缺失、FOXP3和STAT3蛋白表达并阐述其临床病理意义。方法回顾性收集120例DLBCL患者蜡块,运用免疫组化技术(IHC)检测PTEN、FOXP3和STAT3蛋白的表达并作相关统计分析。结果PTEN蛋白阳性率30.8%(37/120);PTEN缺失率达69.2%(83/120),其中55%(66/120)为GCB型,14.2%(17/120)为non-GCB型;FOXP3阳性率81.7%(98/120),STAT3阳性率50%(60/120),FOXP3低表达患者比例为37.5%(45/120);高表达患者比例为44.2%(53/120),STAT3低表达患者比例为9.2%(11/120);STAT3高表达患者比例为40.8%(49/120);PTEN缺失、FOXP3和STAT3高表达均与骨髓累及、IPI评分及PS评分相关(P<0.05),STAT3高表达与肿瘤直径相关(P<0.05);PTEN缺失与FOXP3、STAT3高表达均呈负相关(P<0.05),单因素及多因素生存分析显示IPI评分高危组、PS评分和PTEN缺失是影响DLBCL患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论PTEN在DLBCL肿瘤细胞中缺失率较高,并且在GCB型中显著缺失;PTEN缺失和STAT3高表达可作为评价DLBCL恶性程度或预后的指标之一,FOXP3是调节性T细胞(Treg)最特异的生物标志物,其表达水平可为DLBCL恶性程度提供参考价值。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 pten FOXP3 stat3 肿瘤微环境 预后
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芹菜素调节mTOR及STAT3信号通路对人胃癌细胞增殖及自噬的影响
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作者 侯兴存 耿亚迪 +2 位作者 刘萍 张蕾 伍琳 《现代中药研究与实践》 2025年第3期31-36,共6页
目的探讨芹菜素(APG)对人胃癌细胞HGC-27、MKN-28的增殖、自噬及相关机制的影响。方法采用细胞增殖检测试剂盒法,实时无标记细胞分析法,细胞增殖荧光探针法检测APG对胃癌细胞增殖能力的影响;采用吖啶橙及嗜酸性染色剂MDC染色观察细胞内... 目的探讨芹菜素(APG)对人胃癌细胞HGC-27、MKN-28的增殖、自噬及相关机制的影响。方法采用细胞增殖检测试剂盒法,实时无标记细胞分析法,细胞增殖荧光探针法检测APG对胃癌细胞增殖能力的影响;采用吖啶橙及嗜酸性染色剂MDC染色观察细胞内酸性细胞器的变化;采用蛋白免疫印迹法检测微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。结果APG显著抑制HGC-27、MKN-28细胞的增殖能力,促进细胞内酸性细胞器的生成。同时诱导细胞内自噬相关蛋白LC3B-表达升高、p62表达降低,加入雷帕霉素(RAPA)后HGC-27细胞p62表达和细胞活力进一步降低。进一步研究发现APG能够降低细胞内p-mTOR及p-STAT3蛋白表达水平。结论APG抑制HGC-27、MKN-28细胞的增殖并促进自噬发生,其作用机制可能与抑制mTOR及STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 芹菜素 胃癌 细胞增殖 自噬 mtor stat3
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微小RNA-93介导PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路对子宫内膜癌细胞增殖的影响
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作者 陈玲玲 刘小梅 +1 位作者 何嘏娜 林煜 《中国妇幼保健》 2025年第21期4028-4032,共5页
目的探讨微小RNA-93(miRNA-93)对子宫内膜癌细胞增殖的影响,检测同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路相关蛋白,分析miRNA-93对该通路的调控作用,探讨miRNA... 目的探讨微小RNA-93(miRNA-93)对子宫内膜癌细胞增殖的影响,检测同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路相关蛋白,分析miRNA-93对该通路的调控作用,探讨miRNA-93在子宫内膜癌发生、发展中可能的作用及机制。方法实验起止时间:2022年3月—2023年8月。将人子宫内膜癌Ishikawa细胞分为5组,分别为空白对照组(NC组)、miRNA-93激动剂组(miRNA-93 mimic组)、miRNA-93激动剂阴性对照组(miRNA-93 mimic NC组)、miRNA-93抑制剂组(miRNA-93 inhibitor组)、miRNA-93抑制剂阴性对照组(miRNA-93 inhibitor NC组),进行定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR),比较各组转染后miRNA-93表达水平。采用CCK-8法检测过表达和抑制miRNA-93对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的影响。采用Western blot法检测PTEN、PI3K、AKT、p-AKT、m TOR等通路相关蛋白表达水平。结果转染人子宫内膜癌Ishikawa细胞后,NC组、miRNA-93mimic组、miRNA-93 mimic NC组、miRNA-93 inhibitor组、miRNA-93 inhibitor NC组miRNA-93相对表达水平分别为(1.00±0.11)、(197.25±23.32)、(0.43±0.03)、(0.24±0.02)、(0.46±0.04)。miRNA-93 mimic组miRNA-93相对表达水平高于NC组、miRNA-93 mimic NC组(均P<0.05),说明miRNA-93过表达组成功建立。miRNA-93 inhibitor组miRNA-93相对表达水平低于NC组、miRNA-93 inhibitor NC组(均P<0.05),说明miRNA-93抑制组成功建立。与miRNA-93 inhibitor组吸光度(OD值)[24 h(0.47±0.01)、48 h(0.65±0.01)、72 h(0.86±0.04)]相比,miRNA-93 mimic组OD值[24 h(0.66±0.01)、48h(1.20±0.05)、72 h(1.41±0.03)]均显著升高(均P<0.05),表明过表达miRNA-93显著提高人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖活性。与miRNA-93 inhibitor组[PTEN(1.17±0.08)、p-AKT(0.29±0.02)、p-AKT/AKT比值(0.33±0.01)、m TOR(0.40±0.03)]相比,miRNA-93 mimic组PTEN蛋白表达量(0.50±0.10)显著降低,p-AKT蛋白表达量、p-AKT/AKT比值、m TOR蛋白表达量[(0.97±0.04)、(1.17±0.08)、(1.20±0.09)]均显著升高(均P<0.05),表明过表达miRNA-93可抑制PTEN表达,增加p-AKT、m TOR表达,提高p-AKT/AKT比值,促进AKT磷酸化。结论miRNA-93可以通过调控PTEN/PI3K/AKT/m TOR信号通路促进子宫内膜癌细胞增殖。 展开更多
关键词 微小RNA-93 pten/PI3K/AKT/mtor信号通路 子宫内膜癌 影响
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基于mTOR/STAT3通路探讨羟基红花黄色素A抑制OGD/R后神经元焦亡的机制
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作者 王泽乾 滑键林 +6 位作者 吴艺舸 段彦哲 殷丽君 马存根 闫玉清 黄建军 宋丽娟 《河北中医药学报》 2025年第3期48-54,共7页
目的:本研究通过细胞实验探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对糖氧剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R)诱导HT22细胞焦亡的保护作用及其机制。方法:将HT22细胞分为正常组(NOR组)、模型组(OGD/R... 目的:本研究通过细胞实验探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对糖氧剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R)诱导HT22细胞焦亡的保护作用及其机制。方法:将HT22细胞分为正常组(NOR组)、模型组(OGD/R组)、HSYA+OGD/R组(HSYA组)及核苷酸寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)抑制剂MCC950+OGD/R组(MCC950组),通过乳酸脱氢酶(LDH)释放检测HT22细胞损伤情况,免疫荧光检测信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)、消皮素-D(GSDMD)蛋白表达;Western blot分析哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、STAT3、NLRP3、GSDMD等焦亡相关蛋白表达。结果:与NOR组比较,OGD/R组HT22细胞中GSDMD/TUNEL染色阳性细胞数量增加;NLRP3、剪切型半胱氨酸蛋白酶-1(Cl.caspase-1)和白介素-1β(IL-1β)蛋白表达升高(P<0.05);STAT3与GSDMD蛋白共表达数量增加;mTOR、p-STAT3和NLRP3蛋白的表达升高(P<0.05)。与OGD/R组比较,HSYA组HT22细胞中GSDMD/TUNEL染色阳性细胞数量减少;NLRP3、Cl.caspase-1和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05);STAT3与GSDMD蛋白共表达数量减少;mTOR、p-STAT3和NLRP3蛋白的表达降低(P<0.05)。结论:HSYA可能通过调控mTOR/STAT3信号通路抑制OGD/R后HT22细胞焦亡,发挥神经保护功能。 展开更多
关键词 细胞焦亡 羟基红花黄色素A 神经元 糖氧剥夺/复糖复氧 mtor/stat3信号通路
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PTEN、PI3K和mTOR在鼻咽癌中的表达及意义 被引量:8
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作者 陈英杰 刘健 +1 位作者 陶雅君 贾心善 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第1期41-43,共3页
目的:观察鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中PTEN、PI3K和mTOR的表达,探讨其相互关系及其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学方法检测PTEN、PI3K和mTOR在60例鼻咽癌组织与23例鼻咽部慢性炎症组织中的表达水平... 目的:观察鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中PTEN、PI3K和mTOR的表达,探讨其相互关系及其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学方法检测PTEN、PI3K和mTOR在60例鼻咽癌组织与23例鼻咽部慢性炎症组织中的表达水平。结果:60例NPC中,PI3K表达的阳性率为86.7%(52/60),mTOR为93.3%(56/60),明显高于鼻咽部慢性炎症组60.9%(14/23),69.6%(16/23)(P<0.05);60例NPC中,PTEN的表达率为41.7%(25/60),明显低于鼻咽部慢性炎症组65.2%(15/23)(P<0.01);60例NPC中,PTEN的表达与mTOR、PI3K的表达强度呈负(P<0.05),mTOR与PI3K的表达强度呈正相关相关(P<0.05)。结论:mTOR信号通路的激活与PTEN的抑制,可能在鼻咽癌的发生发展中起重要的作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 pten PI3K mtor
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细胞角蛋白13通过PTEN抑制PI3K/AKT/mTOR通路增强鼻咽癌HNE1细胞放疗敏感性 被引量:6
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作者 王欢 万佳 +2 位作者 施明 王锦 余宏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期31-36,共6页
目的:探讨细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌HNE1细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:将HNE1细胞分为对照组、anti-CK13#a组及anti-CK13#b组(敲减CK13)、对照组+西罗莫司处理组(100 nmol/L的西罗莫司处理1 h)、anti-CK13... 目的:探讨细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌HNE1细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:将HNE1细胞分为对照组、anti-CK13#a组及anti-CK13#b组(敲减CK13)、对照组+西罗莫司处理组(100 nmol/L的西罗莫司处理1 h)、anti-CK13#a+西罗莫司处理组(100 nmol/L的西罗莫司处理1 h),经放疗处理(200 c Gy/min剂量照射5 min)后,用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,q PCR法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关基因PTEN的表达,WB法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果:经放疗处理后,与对照组相比,敲减CK13后HNE1细胞增殖能力明显增强(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);细胞中c-caspase-3和γH2AX的表达明显降低(均P<0.01)、p-AKT和p-S6K表达明显升高(P<0.01)、PTEN蛋白表达明显降低(P<0.01)。敲减CK13+西罗莫司(PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂)处理可以回复敲减CK13导致的细胞增殖能力增强(P<0.05)和细胞凋亡率降低(P<0.01)。结论:敲减CK13通过下调PTEN蛋白水平进而增强PI3K/AKT/mTOR信号通路活性,最终降低HNE1细胞的放疗敏感性。 展开更多
关键词 鼻咽癌 HNE1细胞 放疗 细胞角蛋白13 pten PI3K/AKT/mtor信号通路
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PTEN和STAT3在结直肠癌中的表达及其临床意义 被引量:7
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作者 金灿辉 陈建民 +2 位作者 王公平 刘孝民 王爱红 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第6期1184-1186,共3页
目的:探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)和信号转导及转录激活因子3(STAT3)在结直肠癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测PTEN和STAT3在68例结直肠癌组织及20例正常结直肠组织中的表达,并分析其与结... 目的:探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)和信号转导及转录激活因子3(STAT3)在结直肠癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测PTEN和STAT3在68例结直肠癌组织及20例正常结直肠组织中的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果:68例结直肠癌组织中PTEN和STAT3阳性率分别为32.4%、60.3%,20例正常结直肠组织中分别为90.0%、0。二者的表达均与结直肠癌组织分化、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关(P<0.01),而与患者年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。PTEN与STAT3表达阳性率之间呈明显负相关(P<O.05)。结论:结直肠癌中PTEN和STAT3表达可能成为判断肿瘤恶性程度、转移及预后的指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 pten stat3 免疫组织化学
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人胚胎干细胞Pten基因表达及PI3K/Akt/mTOR信号通路下游蛋白的磷酸化 被引量:6
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作者 周睿卿 龚玉萍 +1 位作者 邢宏运 杨曦 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第49期9207-9210,共4页
背景:各种磷酸化蛋白质表达水平对人胚胎干细胞维持未分化状态或定向分化的影响逐渐成为人胚胎干细胞的研究热点,研究发现磷酸化蛋白质表达水平可能决定着人胚胎干细胞的命运。目的:对PI3K/Akt途径下游的关键蛋白磷酸化水平进行检测,寻... 背景:各种磷酸化蛋白质表达水平对人胚胎干细胞维持未分化状态或定向分化的影响逐渐成为人胚胎干细胞的研究热点,研究发现磷酸化蛋白质表达水平可能决定着人胚胎干细胞的命运。目的:对PI3K/Akt途径下游的关键蛋白磷酸化水平进行检测,寻找PI3K/Akt途径中能够维持人胚胎干细胞未分化状态的下游蛋白。方法:用胎鼠成纤维细胞作为饲养层,二维培养的方法培养人胚胎干细胞,胶原酶消化后待测;以饲养层细胞、K562细胞株为对照。观察人胚胎干细胞生长状态;RT-PCR检测Pten基因表达;WesternBlot检测p-PTEN、p-mTOR、p-P70S6Kp-4E-BP14种蛋白的表达。结果与结论:人胚胎干细胞在未分化状态时PtenmRNA表达高于肿瘤细胞K562,而且Pten抑制的mTOR信号通路中关键蛋白表达均明显低于K562,尤其以p-4E-BP1表达最低。提示PI3K/Akt/mTOR信号通路下游磷酸化蛋白在人胚胎干细胞活性较低,如果抑制负调节蛋白PTEN或直接激活该通路正调节关键蛋白,可能会加快人胚胎干细胞增殖、减少凋亡,进而为定向分化、再生医学提供更多的细胞来源。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 PI3K/Akt/mtor信号通路 pten基因 下游蛋白 磷酸化
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RNAi沉默STAT3基因联合mTOR抑制剂rapamycin诱导BEL-7402肝癌细胞凋亡 被引量:3
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作者 张毅 张君薇 +1 位作者 谢淑丽 王广义 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期903-908,I0003,共7页
目的:探讨PI3K/AKT/mTOR和JAK/STAT3 2条信号转导途径共同作用对肝癌细胞凋亡的影响,为肝癌基因治疗提供依据。方法:选取对数生长期BEL-7402细胞,随机分为对照组、mTOR抑制剂rapamycin(Rapa)组、阴性质粒组、阴性质粒+Rapa组、STAT3-si... 目的:探讨PI3K/AKT/mTOR和JAK/STAT3 2条信号转导途径共同作用对肝癌细胞凋亡的影响,为肝癌基因治疗提供依据。方法:选取对数生长期BEL-7402细胞,随机分为对照组、mTOR抑制剂rapamycin(Rapa)组、阴性质粒组、阴性质粒+Rapa组、STAT3-siRNA质粒组和STAT3-siRNA质粒+Rapa组,应用LipofectamineTM2000转染试剂将含有目的基因的质粒转染BEL-7402细胞,同时应用rapamycin,分别采用流式细胞术和Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡率和形态学的变化,JC-1荧光染色观察线粒体膜电位(ΔΨm)变化,Western blotting法检测活性caspase-3蛋白表达水平。结果:STAT3-siRNA+Rapa组细胞凋亡率为60.22%±0.87%,明显高于其他各组(P<0.05),且细胞ΔΨm明显降低(27.28%±1.82%,P<0.05);Hoechst33258荧光染色检测,见STAT3-siRNA有大量细胞出现细胞核聚集、边缘化和核碎裂等典型细胞凋亡形态;Western blotting检测,STAT3-siRNA+Rapa组活性caspase-3蛋白表达水平明显高于其他各组(P<0.05)。结论:RNAi沉默BEL-7402肝癌细胞STAT3基因联合rapamycin可促进BEL-7402肝癌细胞的凋亡,二者具有明显的协同作用。 展开更多
关键词 mtor蛋白 stat3基因 RNA干扰 RAPAMYCIN 细胞凋亡 肝细胞癌
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枸杞多糖通过miRNA-21-5p靶向PTEN调控PI3K/Akt/mTOR通路抗人视网膜色素上皮细胞光损伤机制 被引量:10
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作者 李娟 师若迪 +2 位作者 陈雨婷 高园园 俞洋 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3588-3593,共6页
目的:研究枸杞多糖(LBP)对光诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡作用的影响及其保护机制。方法:将体外培养的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)随机分为空白对照组,模型组,枸杞多糖低、中、高剂量组,建立人RPE细胞光损伤模型,于光照24h后... 目的:研究枸杞多糖(LBP)对光诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡作用的影响及其保护机制。方法:将体外培养的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)随机分为空白对照组,模型组,枸杞多糖低、中、高剂量组,建立人RPE细胞光损伤模型,于光照24h后进行相应指标检测。采用CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测miRNA-21-5p、PTENmRNA表达水平;WesternBlot法检测PTEN、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR蛋白表达量。结果:与空白对照组比较,模型组细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,miRNA-21-5p表达显著下降,PTENmRNA表达显著升高,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平显著降低,PTEN蛋白表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,枸杞多糖低、中、高剂量组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著下降,miRNA-21-5p表达显著升高,PTENmRNA表达均显著降低,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平均显著升高,PTEN蛋白表达量显著降低(P<0.05,P<0.01);与LBP低剂量组比较,中、高剂量组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低,miRNA-21-5p表达显著升高,PTENmRNA表达显著降低,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平均显著增高,PTEN蛋白表达量显著降低(P<0.05,P<0.01);LBP高剂量组与LBP中剂量组相比细胞存活率显著上升,细胞凋亡率显著降低,miRNA-21-5p表达显著上升,PTENmRNA表达显著下降,mTOR、PI3K、Akt磷酸化水平均显著升高,PTEN蛋白表达量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:枸杞多糖可抑制光诱导下ARPE-19细胞凋亡,其机制可能是通过上调miRNA-21-5p、下调PTENmRNA表达,从而激活PI3K/Akt/mTOR信号通路来增强保护RPE细胞对抗光损伤作用,且呈浓度依赖性。 展开更多
关键词 枸杞多糖 视网膜色素上皮细胞 光损伤 miRNA-21-5p pten PI3K/Akt/mtor信号通路
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基于PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用及机制 被引量:5
15
作者 吕娟 张云霞 +2 位作者 白俊嫄 蒲晓薇 戴恩来 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期739-746,共8页
目的探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用及分子机制。方法体外培养大鼠肾小球足细胞,阿霉素诱导建立足细胞损伤模型,分为:空白组、模型组、淫羊藿苷联合地塞米松组及氯喹组。免疫荧光法测定足细胞特异性骨架蛋白... 目的探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用及分子机制。方法体外培养大鼠肾小球足细胞,阿霉素诱导建立足细胞损伤模型,分为:空白组、模型组、淫羊藿苷联合地塞米松组及氯喹组。免疫荧光法测定足细胞特异性骨架蛋白synaptopodin的表达;转染mRFP-GFP-LC3双荧光自噬指示体系,激光共聚焦显微镜观察足细胞内自噬流的强弱;透射电镜观察足细胞内自噬体、自噬溶酶体的变化;Western Blot法检测足细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62及自噬信号通路蛋白PTEN、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达。结果与模型组比,淫羊藿苷联合地塞米松组的synaptopodin的表达升高(P<0.05);足细胞内自噬流水平、自噬体及自噬溶酶体数量均增加(P<0.01);LC3-Ⅱ、PTEN的表达上调(P<0.01),但p62、pPI3K、p-Akt、p-mTOR的表达下调(P<0.01)。与淫羊藿苷联合地塞米松组比,氯喹组synaptopodin的表达降低(P<0.05);足细胞内自噬流的水平降低;自噬体数量增加(P<0.05),自噬溶酶体的数量减少(P<0.01);且LC3-Ⅱ和p62表达同步升高(P<0.05,P<0.01),但PTEN、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达无明显变化(P>0.05)。结论淫羊藿苷联合地塞米松可能通过激活PTEN,抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,增强足细胞自噬水平,达到保护足细胞的作用。 展开更多
关键词 阿霉素 足细胞损伤 地塞米松 淫羊藿苷 pten/PI3K/Akt/mtor信号通路 自噬
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参苓白术散对NAFLD大鼠肝脏超微结构及mTOR、STAT3蛋白磷酸化的影响 被引量:4
16
作者 徐拥建 冯高飞 +3 位作者 杨钦河 张云城 黄裕华 邓远军 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第11期2669-2673,共5页
目的:观察参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化的影响。方法:SPF级SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型组及参苓白术散低、高剂量组,每组10只。采用高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD模型组,8 w后处死大鼠,... 目的:观察参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化的影响。方法:SPF级SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型组及参苓白术散低、高剂量组,每组10只。采用高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD模型组,8 w后处死大鼠,取血、肝组织。全自动生化分析检测血清TC、TG、ALT、AST,ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平,HE染色和油红O染色观察肝组织病理学改变,透射电子显微镜观察肝组织超微结构变化,Western blot法检测大鼠肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化水平。结果:8 w高脂饮食成功复制了NAFLD大鼠模型,模型组大鼠肝组织存在严重的脂质蓄积和肝脏脂肪变性,血清TNF-α、IL-6含量及肝组织p-mTOR/mTOR、p-STAT3/STAT3水平较正常对照组显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组血脂及病理组织学有不同程度改善,血清TC、TG、ALT、AST、TNF-α、IL-6水平及肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。参苓白术散高剂量作用优于低剂量。结论:mTOR、STAT3蛋白可能是参苓白术散防治NAFLD的有效作用靶点。参苓白术散可能通过抑制肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化,减轻肝脏脂质蓄积及炎症反应,发挥防治NAFLD的作用。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 参苓白术散 mtor stat3
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氧化苦参碱通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响研究 被引量:7
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作者 孙超群 杨树立 +2 位作者 陈桂平 郝阳 莫承强 《新中医》 CAS 2019年第9期9-12,共4页
目的:探讨氧化苦参碱能否通过第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因/3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶向基因(Phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten/phosphoinositide 3-kinase/protein kin... 目的:探讨氧化苦参碱能否通过第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因/3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶向基因(Phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten/phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PTEN/PI3K/Akt/mTOR)通路对人膀胱癌T24细胞的增殖、凋亡产生影响。方法:T24细胞复苏传代后与不同剂量氧化苦参碱共培养,MTT法检测不同剂量氧化苦参碱对T24细胞增殖的影响,流式细胞仪检测氧化苦参碱对T24细胞凋亡的影响,Hoechst光镜观察氧化苦参碱对T24细胞核形态的影响,Western blot检测氧化苦参碱对T24细胞PI3K、Akt、mTOR、PTEN蛋白表达的影响。结果:与0μmol/L组比较,氧化苦参碱各剂量组T24细胞的增殖率下降,凋亡率升高,PI3K、Akt、mTOR蛋白表达下降,PTEN蛋白表达上升,且在一定范围内存在剂量依赖性(P<0.05)。结论:氧化苦参碱可能通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路抑制T24细胞的增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 人膀胱癌T24细胞 pten/PI3K/Akt/mtor通路 细胞实验
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mTOR/STAT3信号通路在谷氨酸诱导的PC12细胞损伤中的作用
18
作者 李含 文益民 +2 位作者 张涛 魏祥科 史林 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第24期4620-4623,共4页
目的:研究谷氨酸(glutamate,Glu)诱导PC12细胞损伤后mTOR/STAT3信号通路的表达情况及对细胞损伤的保护作用。方法:用不同浓度谷氨酸作用不同时间诱导PC12细胞损伤,筛选出合适的浓度和作用时间后,将细胞分为3组进行下一步实验,分别为A组... 目的:研究谷氨酸(glutamate,Glu)诱导PC12细胞损伤后mTOR/STAT3信号通路的表达情况及对细胞损伤的保护作用。方法:用不同浓度谷氨酸作用不同时间诱导PC12细胞损伤,筛选出合适的浓度和作用时间后,将细胞分为3组进行下一步实验,分别为A组:正常对照组;B组:20 mmol/L谷氨酸处理组;C组:20 mmol/L谷氨酸+800 nmol/L雷帕霉素(rapamycin,RAPA)处理组。应用流式细胞术检测各组处理12 h后细胞凋亡率,Western blot观察各组处理1 h、4 h、8 h、12 h后,p-mTOR,p-STAT3蛋白表达情况。结果:(1)谷氨酸对PC12细胞的生长抑制作用随作用时间和作用浓度的增加而增强。(2)C组凋亡率明显高于A组和B组。(3)Western blot检测结果表明B组各时间点p-mTOR,p-STAT3表达均高于A、C组,并在4 h时达到高峰。结论:细胞损伤激活了mTOR/STAT3信号通路,该通路的激活减少了细胞凋亡,对谷氨酸导致的神经细胞损伤具有保护作用,有助于神经损伤的修复。 展开更多
关键词 mtor stat3 谷氨酸 细胞损伤 信号转导通路
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mTOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路串话调节胃癌能量代谢和酸性微环境的机制研究 被引量:6
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作者 高苏萌 王卓婷 +5 位作者 徐磊 沈永华 凌亭生 王雷 邹晓平 陈敏 《胃肠病学》 2020年第2期76-83,共8页
背景:c-Myc和PKM2在多种肿瘤中高表达,但mTOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路对胃癌调节作用的研究不多见。目的:探讨mTOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路串话调节胃癌能量代谢和酸性微环境的机制。方法:PKM2和c-Myc慢病毒转染人胃癌AGS和HGC-2... 背景:c-Myc和PKM2在多种肿瘤中高表达,但mTOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路对胃癌调节作用的研究不多见。目的:探讨mTOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路串话调节胃癌能量代谢和酸性微环境的机制。方法:PKM2和c-Myc慢病毒转染人胃癌AGS和HGC-27细胞,构建敲减PKM2、c-Myc的细胞模型。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测PKM2、c-Myc、LDHA、STAT3、p-STAT3、GLUT-1 mRNA和蛋白表达,比色法检测乳酸和葡萄糖水平。结果:PKM2和c-Myc表达在胃癌细胞中上调。敲减c-Myc可抑制胃癌细胞增殖能力,细胞迁移能力明显降低,LDHA、GLUT-1蛋白表达明显降低,葡萄糖和乳酸含量明显降低。共同敲减PKM2和c-Myc对胃癌细胞增殖能力和糖酵解代谢的抑制作用更明显。mTOR/PKM2与STAT3/c-Myc信号通路之间存在相关性。结论:PKM2联合c-Myc可能成为胃癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 糖酵解 信号通路 mtor/PKM2 stat3/c-Myc
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新风胶囊通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR抑制骨关节炎CD4^(+)T与软骨细胞共培养的免疫炎症 被引量:17
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作者 鲍丙溪 刘健 +3 位作者 万磊 张颖 龙琰 孙广瀚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期483-494,共12页
目的观察新风胶囊(XFC)含药血清通过调控miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制骨关节炎(OA)CD4^(+)T与软骨细胞共培养中免疫炎症反应的作用机制。方法选取30例OA患者(OA组)及30例正常人(NC组)检测miR-23a-3p、10号染色体同源丢失... 目的观察新风胶囊(XFC)含药血清通过调控miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制骨关节炎(OA)CD4^(+)T与软骨细胞共培养中免疫炎症反应的作用机制。方法选取30例OA患者(OA组)及30例正常人(NC组)检测miR-23a-3p、10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,观察临床指标:红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、IgA、IgG、IgM、补体C3、补体C4的表达,并观察通路与临床指标的相关性。观察30例OA患者经XFC治疗后通路及临床指标的变化。分离及提取OA-CD4^(+)T细胞,transwell小室培养OA-CD4^(+)T细胞与OA-CH,SD大鼠给药灌胃制备XFC含药血清;采用CCK8法检测OA-软骨细胞的细胞增殖;双荧光素酶报告实验分析miR-23a-3p和PTEN的靶向关系;RT-PCR技术检测共培养细胞中miR-23a-3p、PTENmRNA、PI3KmRNA、AKTmRNA、mTORmRNA的表达;采用ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的水平;Western blotting检测PTEN、PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果与NC组相比,OA组miR-23a-3p、PTEN、PI3K、AKT、IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著上调,而PTEN、IL-10表达显著下调(P<0.01);相关性分析表明:miR-23a-3p与IL-6呈正相关(P<0.01),PI3K与IL-10呈正相关,mTOR与IL-6、IL-10、补体C3、补体C4呈正相关(P<0.01或P<0.05);加入XFC含药血清,miR-23a-3p及PI3K/AKT/mTOR通路被抑制,L-1β、IL-6、TNF-α表达水平下降、IL-10表达水平升高(P<0.01);Model组miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平升高,PTEN、IL-10表达水平降低(P<0.01);miR-23a-3p经过表达后,miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平显著升高,PTEN、IL-10表达水平显著降低(P<0.01或P<0.05);XFC组IL-1β、IL-6、TNF-α表达降低,IL-10表达升高,miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR表达下调,PTEN表达上调(P<0.01或P<0.05)。结论XFC可通过下调miR-23a-3p的表达,抑制PTEN/PI3K/AKT/mTOR通路的活化,改善IL-1β、IL-6,IL-10和TNF-α的表达,降低OA患者炎症反应。 展开更多
关键词 骨关节炎 新风胶囊 miR-23a-3p pten/PI3K/AKT/mtor 免疫炎症反应
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