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氧化苦参碱对结肠癌LoVo细胞c-myc,PSMD9,CDK4 mRNA表达的影响 被引量：10
1
作者 彭燕 韩凌 +1 位作者 孙静 危建安 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期220-224,共5页
目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制。方法:采用流式细胞仪检测LoVo细胞凋亡率以及细胞周期分布;采用荧光定量PCR法检测0.25,0.5 g.L-1 OM对LoVo细胞增殖相关基因c-myc,蛋白酶调解因... 目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制。方法:采用流式细胞仪检测LoVo细胞凋亡率以及细胞周期分布;采用荧光定量PCR法检测0.25,0.5 g.L-1 OM对LoVo细胞增殖相关基因c-myc,蛋白酶调解因子9(PSMD9),CDK4的基因表达的影响。结果:0.5 g.L-1以下浓度的OM作用结肠癌LoVo细胞48 h,对细胞凋亡无明显影响。0.25 g.L-1 OM作用48 h时可明显抑制人结肠癌LoVo细胞c-myc基因表达(P<0.05)。0.5g.L-1 OM作用48 h时可明显抑制LoVo细胞c-myc,CDK4的基因表达(P<0.01,P<0.01,)。药物作用时间为96 h时,0.5g.L-1 OM可明显抑制c-myc,PSMD9,CDK4基因表达(P<0.05,或P<0.01)。结论:较低剂量OM显著抑制人结肠癌LoVo细胞增殖的作用机制,可能与下调LoVo细胞c-myc,PSMD9,CDK4表达有关。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 LOVO细胞 抑制增殖 凋亡 C-MYC psmd9 CDK4
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PSMD9对山羊前体脂肪细胞脂质沉积的调控作用研究 被引量：2
2
作者 邵鹏 唐崟梅 +4 位作者 林亚秋 王永 向华 黄炼 朱江江 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3653-3663,共11页
旨在克隆山羊PSMD 9基因序列并对其进行生物信息学分析,检测PSMD 9在山羊各组织中的表达情况和肌内前体脂肪细胞不同分化时期的表达水平,并进一步揭示过表达和干扰PSMD 9基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响。本研究以1周岁健康... 旨在克隆山羊PSMD 9基因序列并对其进行生物信息学分析,检测PSMD 9在山羊各组织中的表达情况和肌内前体脂肪细胞不同分化时期的表达水平,并进一步揭示过表达和干扰PSMD 9基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响。本研究以1周岁健康简州大耳羊公羊(n=12)为试验对象,采用T-A克隆技术获得山羊PSMD 9基因序列,进行生物信息学分析,并通过双酶切方法构建PSMD9过表达载体。利用脂质体转染在山羊肌内脂肪细胞中过表达PSMD 9,小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰PSMD 9表达。通过油红O染色法观察PSMD 9对脂滴形成的影响,GPO-Trinder酶学反应检测甘油三酯含量;同时利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PSMD 9在山羊不同组织中的表达水平和肌内前体脂肪细胞不同分化时期的表达水平。结果,获得山羊PSMD 9基因核苷酸序列763 bp,其中5′UTR 67 bp,CDS区564 bp,3′UTR 132 bp,编码187个氨基酸残基;山羊PSMD 9基因在肝脏中的表达量最高,在脾脏中表达量最低,在诱导分化前4 d其表达水平随着山羊前体脂肪细胞分化而逐渐降低,随后上升,并在第8天表达量最高;过表达PSMD 9基因,肌内前体脂肪细胞的脂滴明显增加,甘油三酯含量显著提高,同时可显著上调DGAT2、FASN和ACC的相对表达量,DGAT1、PPARγ和SCD 1表达量无显著变化;干扰PSMD 9基因肌内前体脂肪细胞脂滴减少,甘油三酯含量降低,同时可显著下调DGAT1、PPARγ、FASN和ACC表达量,DGAT 2和SCD 1无显著变化。本试验成功获得山羊PSMD 9基因CDS区序列,其在肝脏组织中表达量最高,山羊PSMD 9基因的表达随着肌内前体脂肪细胞的分化而逐渐降低,在第4天表达量最低,之后表达量逐渐升高,PSMD 9的表达能够显著促进山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积,这些结果为进一步阐明PSMD 9基因对调控山羊肌内脂肪形成的作用机制提供了重要数据支撑。 展开更多
关键词 山羊 psmd9 RNA干扰 过表达 肌内前体脂肪细胞
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