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PSMC4表达下调促进MEF细胞衰老
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作者 骆诗凌 谢健鸿 +3 位作者 吴世裕 曾芷彤 刘新光 袁源 《生物技术》 CAS 2024年第5期543-547,共5页
[目的]探讨PSMC4表达下调对小鼠胚胎成纤维(Mouse Embryonic Fibroblast,MEF)细胞衰老的影响。[方法]利用小干扰RNA(siRNA)敲低PSMC4,荧光定量PCR和Western Blotting验证siRNA的敲低效果;通过β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况;通过Ed... [目的]探讨PSMC4表达下调对小鼠胚胎成纤维(Mouse Embryonic Fibroblast,MEF)细胞衰老的影响。[方法]利用小干扰RNA(siRNA)敲低PSMC4,荧光定量PCR和Western Blotting验证siRNA的敲低效果;通过β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况;通过EdU检测细胞增殖;通过酶联免疫吸附法检测26S蛋白酶体活性。[结果]下调PSMC4后β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数量明显增加,EdU细胞增殖率降低约2.7倍(P<0.01),26S蛋白酶体活性降低约1.6倍(P<0.01)。[结论]PSMC4表达下调通过降低26S蛋白酶体活性抑制MEF细胞增殖,进而促进MEF细胞衰老。 展开更多
关键词 蛋白酶体 小鼠胚胎成纤维细胞 psmc4 SIRNA 细胞衰老 细胞增殖
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应用酵母双杂交技术筛选与癌性锚蛋白重复序列相互作用的蛋白
2
作者 包玉洁 戴强 +3 位作者 杨文燕 程芃 王碧君 张燕捷 《内科理论与实践》 2011年第4期295-297,共3页
目的:筛选与癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)相互作用的蛋白。方法:构建诱饵(Bait)质粒pGB-Psmd10-1,采用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测其自身转录活性,以Bait质粒筛选人Hela细胞MATCHMAKER cDNA文库,共转染重复验证阳性克隆,并测序鉴定。结... 目的:筛选与癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)相互作用的蛋白。方法:构建诱饵(Bait)质粒pGB-Psmd10-1,采用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测其自身转录活性,以Bait质粒筛选人Hela细胞MATCHMAKER cDNA文库,共转染重复验证阳性克隆,并测序鉴定。结果:成功构建Bait质粒,经验证对报告基因LacZ无自激活作用。以Bait质粒筛选人Hela细胞cDNA文库,获得83个克隆,其中5个克隆经重复验证确定为阳性克隆,测序结果显示其cDNA为Psmc4的3段不同剪接体(NM_006503.2,NM_153001.1)。结论:在人Hela细胞中,Psmc4为与Gankyrin相互作用的蛋白。 展开更多
关键词 癌性锚蛋白重复序列 酵母双杂交 psmc4 HELA细胞
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