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牛PSMA5基因RNA干扰载体的构建与筛选及在奶牛乳腺上皮细胞中的表达 被引量:4
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作者 迟玉杨 张晶 +6 位作者 徐子娴 高安崇 王秀娜 周长海 牛淑玲 金永成 沈景林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期112-117,131,共7页
设计4条待选的shRNA序列以及1条阴性对照序列,构建RNA干扰载体,然后转染到奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中,最后利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测蛋白酶体α5亚基(PSMA5)在奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中mRNA和蛋白水平的表达... 设计4条待选的shRNA序列以及1条阴性对照序列,构建RNA干扰载体,然后转染到奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中,最后利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测蛋白酶体α5亚基(PSMA5)在奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中mRNA和蛋白水平的表达。结果显示:转染shRNA-1组,shRNA-3组和shRNA-4组的PSMA5基因相对表达量显著低于阴性对照组(P<0.05),且shRNA-4组的PSMA5基因相对表达量最低。结果表明:本试验成功构建并筛选出了PSMA5基因RNA干扰载体,并在奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中成功表达。 展开更多
关键词 psma5 共轭亚油酸 MACT RNA干扰载体
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脑胶质瘤PSMA5的表达、功能及临床意义 被引量:1
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作者 李南丁 贾博 +4 位作者 王赞 李成才 王冀伟 桂宇凡 刘伟 《临床神经外科杂志》 2024年第6期629-635,共7页
目的 研究蛋白酶体Alpha-5亚单位(PSMA5)在脑胶质瘤中的表达情况、功能及临床意义。方法 利用获取自癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)的胶质瘤样本信息,通过生物信息学方法分析PSMA5的表达情况。利用DESeq2 R程序包... 目的 研究蛋白酶体Alpha-5亚单位(PSMA5)在脑胶质瘤中的表达情况、功能及临床意义。方法 利用获取自癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)的胶质瘤样本信息,通过生物信息学方法分析PSMA5的表达情况。利用DESeq2 R程序包筛选出差异表达基因(DEGs),并通过基因本体论(GO)和基因集富集分析(GSEA)进行功能富集分析。利用单因素和多因素Cox回归分析和Kaplan-Meier法评估PSMA5对患者预后的影响。利用SiRNA敲低PSMA5的表达以探究其对胶质瘤细胞生长的影响。结果 PSMA5在胶质瘤患者中呈高表达(P<0.05),且在高级别胶质瘤及异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型胶质瘤患者中有更高的表达水平(P<0.05)。GO和GSEA分析结果显示,PSMA5与免疫反应、有丝分裂等密切相关。Cox分析的结果表明,PSMA5的高表达是胶质瘤的一个显著独立预后因素(CGGA:P<0.01,TCGA:P=0.032);Kaplan-Meier法结果表明,PSMA5高表达组的患者生存期明显少于低表达组(P<0.001)。敲低PSMA5后,胶质瘤细胞增殖受抑制,诱发细胞周期停滞。结论 PSMA5的高表达水平会导致患者的不良预后,PSMA5可以作为胶质瘤患者预后的预测因素。此外,PSMA5还有作为治疗胶质瘤的生物靶点的潜在作用。 展开更多
关键词 蛋白酶体Alpha-5亚单位 神经胶质瘤 基因表达 预后 psma5
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PSMA5通过调控PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路对肺癌细胞生物学行为的影响
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作者 周静 孙可 +2 位作者 焦鹏 姚含秉 王刚锋 《解剖学研究》 2025年第6期555-560,共6页
目的探析人类20S蛋白酶体的α5亚基(PSMA5)通过调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核生物起始因子2α(eIF2α)/活化转录因子4(ATF4)/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)生物学行为的影响。方法收集2019年2月至2020年2月在医院进行手术治疗... 目的探析人类20S蛋白酶体的α5亚基(PSMA5)通过调控蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核生物起始因子2α(eIF2α)/活化转录因子4(ATF4)/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)生物学行为的影响。方法收集2019年2月至2020年2月在医院进行手术治疗的肺癌患者获得的25例肺癌组织标本及癌旁组织标本,并以肺癌H1299细胞为模型,利用构建慢病毒过表达载体和shRNA手段,分别构建PSMA5过表达(PSMA5-OE组)及沉默(shPSMA5组)细胞株,同时设置对照组。采用RT-qPCR法检测组织中PSMA5表达;MTT实验检测细胞的增殖;TransWell实验检测细胞的侵袭和迁移;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法分析PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。结果与癌旁组织相比,肺癌组织中的PSMA5表达要明显升高(P<0.05);沉默PSMA5显著抑制H1299细胞增殖(P<0.05),过表达PSMA5显著增强H1299细胞增殖(P<0.05);与shNC组侵袭和迁移数(664.67±85.80)相比,shPSMA5组的H1299细胞侵袭和迁移数(278.00±33.87)明显减少(P<0.05),与vector组侵袭和迁移数(711.25±15.22)相比,PSMA5-OE组的H1299细胞侵袭和迁移数(1392.75±97.60)明显增加(P<0.05);与shNC组凋亡率(2.34±0.10)%相比,shPSMA5组的H1299细胞凋亡率(6.60±1.04)%明显增加(P<0.05),与vector组凋亡率(2.99±0.85)%相比,PSMA5-OE组的H1299细胞凋亡率(1.25±0.21)%明显减少(P<0.05);与shNC组相比,shPSMA5组的PERK、磷酸化PERK、磷酸化eIF2α、ATF4、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及CHOP表达均明显升高(P<0.05),与vector组相比,PSMA5-OE组H1299细胞中的PERK、磷酸化PERK、磷酸化eIF2α、ATF4、GRP78及CHOP表达均明显降低(P<0.05)。结论PSMA5是调控肺腺癌细胞内质网应激的重要功能基因,其沉默可激活PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路,诱导内质网应激反应,抑制肺癌细胞增殖、侵袭及迁移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺癌 人类20S蛋白酶体的α5亚基 蛋白激酶R样内质网激酶/真核生物起始因子2α/活化转录因子4/增强子结合蛋白同源蛋白信号通路 生物学行为 H1299细胞
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