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卵巢癌相关基因的筛选与鉴定 被引量：5
1
作者 岳文 孙丽亚 +2 位作者 李春海 张立新 裴雪涛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期141-145,共5页
背景与目的:卵巢癌在妇科肿瘤中死亡率最高,但是目前对于在卵巢癌发生中的敏感和特异癌基因或抑癌基因的改变还知之甚少。因此,筛选新的卵巢癌相关基因并对其作用进行研究可能有助于探讨卵巢癌发生的机理,并可为卵巢癌的早期诊治提供有... 背景与目的:卵巢癌在妇科肿瘤中死亡率最高,但是目前对于在卵巢癌发生中的敏感和特异癌基因或抑癌基因的改变还知之甚少。因此,筛选新的卵巢癌相关基因并对其作用进行研究可能有助于探讨卵巢癌发生的机理,并可为卵巢癌的早期诊治提供有意义的生物学指标。本研究旨在获得新的卵巢癌相关基因。方法:在改良mRNA差异显示方法的基础上,结合反向Northern点杂交等鉴定方法,筛选卵巢癌组织和对侧正常卵巢组织之间的差异表达基因,进一步利用生物信息学资源对所获得的差异表达基因片段进行分析。并以差异表达片段作为探针,原位杂交方法检测基因在其它卵巢正常组织和卵巢癌组织中的表达。结果:筛选后得到12个差异表达基因,其中3个为基因组重复序列,5个未知基因序列,4个已知基因序列。原位杂交结果表明锌指蛋白361(Zincfingerprotein361,ZNF361)基因、蛋白酶体PSMA2(proteasomesubunit,alphatype2,PSMA2)基因、位于人1号染色体的未知基因OCRC13和位于9号染色体的未知基因OCRC4在36例卵巢癌组织中的表达均高于其在16例正常卵巢组织中的表达(P<0.05)。尤其是与鼠配子形成期特异表达家族成员-纺锤体蛋白(spindlin)基因高度同源的OCRC4基因,在16例正常卵巢癌组织中未见其表达,而在卵巢癌组织中的表达可达53%(17/36)。结? 展开更多
关键词 卵巢癌 ZNF361 psma2 OCRC4 OCRC13 MRNA差异显示法
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日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析 被引量：2
2
作者 洪炀 韩宏晓 +6 位作者 彭金彪 李晔 石耀军 傅志强 刘金明 李祥瑞 林矫矫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期509-516,共8页
26S蛋白酶体是一种能够降解大多数内源性蛋白的多亚基复合物,它的蛋白降解作用能够影响细胞周期、转录控制和其他一些重要的细胞进程。本实验利用PCR技术从日本血吸虫18d童虫中首次扩增到蛋白酶体α2亚基基因(GenBank Accession No.AY81... 26S蛋白酶体是一种能够降解大多数内源性蛋白的多亚基复合物,它的蛋白降解作用能够影响细胞周期、转录控制和其他一些重要的细胞进程。本实验利用PCR技术从日本血吸虫18d童虫中首次扩增到蛋白酶体α2亚基基因(GenBank Accession No.AY813725),序列分析表明该基因的开放阅读框(ORF)含708bp,编码235个氨基酸,理论分子量25.84kDa。同源性分析结果显示,该基因为日本血吸虫蛋白酶体α2亚基,命名为SjPSMA2。实时定量PCR分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d和42d虫体中都有表达,7d和23d虫体表达量低于其他几个时期。构建了该基因的原核表达质粒pET28a(+)-SjPSMA2,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别,并且能检测到天然状态下该蛋白的存在。应用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,诱导产生了较高的特异性抗体水平及12.33%的减虫率和35.23%的肝脏减卵率。SjPSMA2基因及其表达产物的获得,为探索蛋白酶体在血吸虫生长发育中的作用提供了重要基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 蛋白酶体α2亚基 克隆 表达 免疫保护
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