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伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE^-/gI^-/GFP^+缺失株的构建
被引量：
2
1
作者
姜焱
侯玉峰
陈溥言
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期15-20,共6页
在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部...
在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部分 ,并在下游引入一个多克隆位点 ,构建了缺失转移载体pgEI GFP。用DOTAP转染试剂盒将pgEI GFP转染了感染PRV SH的BHK 2 1细胞 ,待出现 80 %病变后收获病毒 ,并以蚀斑法得到纯化的缺失了gE gI重组病毒株。小鼠试验证实了缺失株的毒力有所下降。
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关键词
伪狂犬病病毒上海株
prv-sh
gE^-/gI^-/GFP^+缺失株
构建
转移载体质粒
绿色荧光蛋白(GFP)表达盒
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE^-/gI^-/GFP^+缺失株的构建
被引量：
2
1
作者
姜焱
侯玉峰
陈溥言
机构
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室
南京出入境检验检疫局
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期15-20,共6页
文摘
在构建了含伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上 ,采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因 5’端 363bp,同时把绿色荧光蛋白 (GFP)基因表达盒插入到缺失部分 ,并在下游引入一个多克隆位点 ,构建了缺失转移载体pgEI GFP。用DOTAP转染试剂盒将pgEI GFP转染了感染PRV SH的BHK 2 1细胞 ,待出现 80 %病变后收获病毒 ,并以蚀斑法得到纯化的缺失了gE gI重组病毒株。小鼠试验证实了缺失株的毒力有所下降。
关键词
伪狂犬病病毒上海株
prv-sh
gE^-/gI^-/GFP^+缺失株
构建
转移载体质粒
绿色荧光蛋白(GFP)表达盒
Keywords
Pseudorabies virus, Tansfer plasmid vector, gE-/gI-/GFP+ deletion mutant, GFP expressing castle
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE^-/gI^-/GFP^+缺失株的构建
姜焱
侯玉峰
陈溥言
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
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