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牛卵泡颗粒细胞PRSS35表达模式及功能研究 被引量：3
1
作者 毕锡麟 王锴 +3 位作者 李鹏飞 景炅婕 韩琦 吕丽华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2394-2401,共8页
旨在探究丝氨酸蛋白酶35(serine protease 35,PRSS35)在牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs)中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡(dominant follicle,DF)与从属卵泡(subordinate follicles,SF),分离优势卵泡与从属卵泡颗... 旨在探究丝氨酸蛋白酶35(serine protease 35,PRSS35)在牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs)中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡(dominant follicle,DF)与从属卵泡(subordinate follicles,SF),分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞;利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在DF与SF的表达情况;免疫组化技术对PRSS35进行定位研究;设计PRSS35siRNA基因沉默序列,经脂质体转染GCs,测定培养液雌激素(estrogen,E_2)浓度和GCs凋亡情况,研究PRSS35对牛卵泡颗粒细胞生长发育的影响。结果表明:1)PRSS35mRNA在DF中的表达量极显著高于SF(P<0.001);2)PRSS35在牛DF和SF颗粒层与膜层均有表达;3)PRSS35在DF中的表达量极显著高于SF(P<0.01);4)PRSS35基因沉默后,GCs凋亡细胞百分率极显著增高(P<0.001),培养液雌激素浓度极显著降低(P<0.01)。综上表明,PRSS35在牛卵泡颗粒层和膜层均有表达,且在DF表达量极显著高于SF;PRSS35基因沉默后,通过抑制GCs增殖,降低E_2分泌浓度,从而抑制牛卵泡的生长发育。该研究为深入探讨PRSS35与牛卵泡发育的关系奠定基础。 展开更多
关键词 牛 卵泡 颗粒细胞 prss35
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牛卵巢PRSS35基因CDS序列分析 被引量：1
2
作者 毕锡麟 王锴 +3 位作者 景炅婕 韩琦 李鹏飞 吕丽华 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期999-1005,共7页
为测定牛卵巢丝氨酸蛋白酶35 (PRSS35)的CDS序列并进行生物信息学分析。试验根据NCBI上已公布牛PRSS35基因的mRNA序列设计特异性引物,使用RT-PCR技术扩增牛卵泡中PRSS35的CDS序列。结果显示,牛PRSS35基因CDS区序列全长为1 239 bp,共编码... 为测定牛卵巢丝氨酸蛋白酶35 (PRSS35)的CDS序列并进行生物信息学分析。试验根据NCBI上已公布牛PRSS35基因的mRNA序列设计特异性引物,使用RT-PCR技术扩增牛卵泡中PRSS35的CDS序列。结果显示,牛PRSS35基因CDS区序列全长为1 239 bp,共编码412个氨基酸,PRSS35与其他10个物种的同源序列相似性较高,且该蛋白具有一个长度为20个氨基酸的信号肽,具有11个O-糖基化位点和2个N-糖基化位点,以及3个磷酸化位点,并发现有一个典型的Tryp_Spc结构域,即胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶结构域。为进一步研究该基因及其编码蛋白在卵泡发育过程中所起的作用提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 牛 卵泡 prss35 生物信息学分析
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PRSS35在鸡卵泡膜细胞中的表达与卵泡液雌激素含量的关系 被引量：7
3
作者 孟金柱 陆雨芳 +2 位作者 赵成刚 张羽强 赵园园 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期653-658,共6页
旨在研究PRSS35在鸡卵泡中的表达部位及在不同大小等级前卵泡内膜细胞中的表达模式与雌激素分泌的关系。选取直径为1~2 mm的小白卵泡、3~5 mm的大白卵泡、6~8 mm的小黄卵泡和9~12 mm的大黄卵泡,应用免疫组织化学技术对PRSS35在大白卵泡... 旨在研究PRSS35在鸡卵泡中的表达部位及在不同大小等级前卵泡内膜细胞中的表达模式与雌激素分泌的关系。选取直径为1~2 mm的小白卵泡、3~5 mm的大白卵泡、6~8 mm的小黄卵泡和9~12 mm的大黄卵泡,应用免疫组织化学技术对PRSS35在大白卵泡和小黄卵泡中的表达进行组织定位;分别抽取4种卵泡的卵泡液,并通过ELISA法测定各卵泡液中的雌激素(E2)含量;刮取卵泡内膜细胞,分别利用QRT-PCR和Western blot技术检测PRSS35 mRNA和蛋白在蛋鸡不同大小等级前卵泡内膜细胞中的表达情况。结果显示,PRSS35在蛋鸡卵泡颗粒细胞层、膜细胞层和卵丘细胞均有表达;PRSS35 mRNA和蛋白在小黄卵泡中的含量均显著高于其他卵泡;E2在小黄卵泡卵泡液中的含量显著高于其他卵泡,在小白卵泡和大白卵泡卵泡液中显著高于大黄卵泡。推测PRSS35在小黄卵泡中可能会促进卵泡内膜细胞分泌E2,从而影响卵泡的选择。 展开更多
关键词 蛋鸡 卵泡 prss35 表达 雌激素
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