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PRRSV-2 NSP7间接ELISA检测方法的建立 被引量：1
1
作者 赵孟孟 沙惠阳 +1 位作者 张航 黄良宗 《佛山科学技术学院学报（自然科学版）》 CAS 2022年第3期51-56,共6页
为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒-2(PRRSV-2)抗体检测方法,试验采用原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP7蛋白,并以该蛋白为基础建立间接ELISA方法,对该方法的特异性、重复性、敏感性以及与爱德士商品化试剂盒符合率进行比较。试验结果表... 为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒-2(PRRSV-2)抗体检测方法,试验采用原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP7蛋白,并以该蛋白为基础建立间接ELISA方法,对该方法的特异性、重复性、敏感性以及与爱德士商品化试剂盒符合率进行比较。试验结果表明,PRRSV-2 NSP7蛋白表达良好,可获得可溶蛋白,建立NSP7间接ELISA方法特异性、重复性、敏感性良好,与爱德士商品化试剂盒的符合率96.2%,说明PRRSV-2 NSP7间接ELISA检测方法建立成功。 展开更多
关键词 prrsv-2 间接ELISA NSP7 血清 爱德士
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检测PRRSV-Ⅰ、PRRSV-Ⅱ和PCV-2多重PCR方法的建立及初步应用 被引量：4
2
作者 徐艇 刘长龙 +1 位作者 石逢庄 袁世山 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第2期24-30,共7页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virns,PRRSV)欧洲株(PRRSV-I)、北美株(PRRSV-II)常与猪圆环病毒2型(Porcine Circorirns type2,PCV-2)呈混合感染,严重影响养猪业的经济效益。本文根据GenBank... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virns,PRRSV)欧洲株(PRRSV-I)、北美株(PRRSV-II)常与猪圆环病毒2型(Porcine Circorirns type2,PCV-2)呈混合感染,严重影响养猪业的经济效益。本文根据GenBank上已发表的PRRSV北美型(PRRSV-I)、PRRSV欧洲型(PRRSV-II)、圆环病毒2型(PCV-2)的基因组全序列,分别设计了3对能特异性扩增PRRSV-I、PRRSV-II和PCV-2的引物,建立并优化了可同时检测PRRSV-I、PRRSV-II和PCV-2三种病毒的多重PCR方法,通过对临床病料的检测,证实了此方法具有高特异性、高灵敏度、高效率、低成本的特点,适合大量样本的分析与鉴定。利用该方法能在24h内对样品进行检测并获得结果,因此本方法的建立对这3种病毒的早期快速诊断有十分重要的意义。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 猪圆环病毒2型(PCV-2) 多重PCR
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小单元隔离栏舍对PRRSV和PCV2免疫退出防控的效果研究
3
作者 张杏艳 陈宝剑 +12 位作者 刘明君 关志惠 秦谦涛 潘星辰 蓝晞 朱文 梁旦 农素群 潘翠玲 杨楷 廖玲玲 谢炳坤 蓝海恩 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第12期5881-5890,共10页
【目的】研究小单元隔离栏舍对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)免疫及免疫退出的防控效果。【方法】试验设置常规封闭式栏舍免疫... 【目的】研究小单元隔离栏舍对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)免疫及免疫退出的防控效果。【方法】试验设置常规封闭式栏舍免疫退出组(conventional closed pigsty immune-exit group,CCP-N)和PCV2免疫组(PCV2 immune group,CCP-PCV2),小单元隔离栏舍免疫退出组(small-cell partition pigsty immune-exit group,SPP-N)、PCV2免疫组(PCV2 immune group,SPP-PCV2)和PRRSV免疫组(PRRSV immune group,SPP-PRRSV),每组10个重复,每个重复1头猪,从断奶至出栏养殖200 d。2种栏舍的免疫退出组不进行任何疫苗免疫,PCV2免疫组和PRRSV免疫组分别于入栏后第20和30天进行1次疫苗免疫。试验第0、60、140、200天检测血液PRRSV N蛋白抗体和PCV2抗体水平,试验第200天检测血液PRRSV GP5蛋白抗体水平和组织PRRSV核酸水平,观察和统计试验猪肺部病变情况。【结果】在试验期内,SPP-N组猪血清PRRSV N蛋白的抗体水平全程处于低水平状态,显著低于其余各组(P<0.05);PRRSV阳性率全程为0,明显低于其余各组。试验结束时SPP-N组猪血清PRRSV GP5蛋白抗体水平极显著低于其余各组(P<0.01);PRRSV N蛋白抗体单阴性率及N蛋白和GP5蛋白抗体双阴性率均为100%,高于其余各组;猪肺脏组织病变得分值最低且极显著低于其余各组(P<0.01);组织PRRSV核酸阴性率及猪血清PRRSV N蛋白抗体、GP5蛋白抗体和组织PRRSV核酸三阴性率为100%,高于其余各组。试验第60天,所有试验组猪血清PCV2抗体水平和阳性率升至峰值并维持至试验结束。【结论】在存在PRRSV和PCV2混合感染的养殖场,小单元隔离栏舍PRRSV和PCV2免疫退出养殖效果显著,可有效阻断PRRSV的感染,明显提升猪肺脏健康度,起到PRRSV长期阴性养殖的效果,是一种良好的施行PRRSV和PCV2免疫退出养殖的支撑设备。 展开更多
关键词 小单元 隔离 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 猪圆环病毒2型(PCV2) 防控 免疫退出
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上海地区出现猪繁殖与呼吸综合征和2型猪圆环病毒混合感染 被引量：34
4
作者 李玉峰 王先炜 姜平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期442-444,共3页
上海地区 6个规模化猪场断奶后仔猪出现全身消耗性综合征 ,剖检的 18头病仔猪都表现肺脏严重病变和淋巴结肿大出血。分别设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) N蛋白和 2型猪... 上海地区 6个规模化猪场断奶后仔猪出现全身消耗性综合征 ,剖检的 18头病仔猪都表现肺脏严重病变和淋巴结肿大出血。分别设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) N蛋白和 2型猪圆环病毒 (porcine circovirus type 2 ,PCV- 2 )部分基因的特异性 PCR引物 ,通过 RT- PCR和 PCR技术从患病猪肺脏组织均扩增出 PRRSV和 PCV- 2的特异基因片段。结合临床症状和流行病学调查 ,证实上海地区出现PRRSV和 PCV- 展开更多
关键词 上海地区 猪 繁殖呼吸综合征病毒 2型猪圆环病毒 混合感染 RT-PCR PCR 症状 流行病学
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采用PCR方法对猪场猪瘟病毒、猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒、猪圆环病毒2型混合感染的诊断研究 被引量：16
5
作者 吴志明 闫若潜 +3 位作者 赵明军 盛敏 赵雪丽 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第1期86-89,共4页
采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2型(PCV-2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明:60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感... 采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2型(PCV-2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明:60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感染的阳性率分别为38.3%、30%和43.3%;3种病毒共感染样品数目占所有样品的13.3%,CSFV-PCV-2双感染的比例最高,达到31.7%,PRRSV-PCV-2双感染比例为18.3%,而CSFV-PRRSV双感染比例只有15%。自感染猪内脏器官和血清中均能成功检测出病毒。本研究结果表明PCR诊断可作为临床上这3种病的病原学快速、灵敏的诊断方法,并为猪场猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸道综合征、猪圆环病毒2型3种病的流行病学和检测方法的研究奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒 猪圆环病毒2型 PCR 检测
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猪传染性胸膜肺炎病料中PCV-2和PRRSV的PCR检测 被引量：9
6
作者 刁有祥 丁家波 +2 位作者 姜世金 崔治中 陈本龙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期397-400,共4页
应用PCR方法对从山东省不同地区采集的2 5 3份猪传染性胸膜肺炎肺脏和12 5份临床健康猪肺脏进行PCV_2和PRRSV的检测。结果显示,在传染性胸膜肺炎猪肺脏中,171份为PCV_2阳性,阳性率达6 7 5 % ;10 1份样品为PRRSV阳性,阳性率达4 0 % ;其中... 应用PCR方法对从山东省不同地区采集的2 5 3份猪传染性胸膜肺炎肺脏和12 5份临床健康猪肺脏进行PCV_2和PRRSV的检测。结果显示,在传染性胸膜肺炎猪肺脏中,171份为PCV_2阳性,阳性率达6 7 5 % ;10 1份样品为PRRSV阳性,阳性率达4 0 % ;其中,6 8份样品同时检出PCV_2和PRRSV ,共感染阳性率达2 6 8%。而临床健康猪肺组织中,2 1份样品PCV_2检测结果为阳性,阳性率为16 8% ;12份样品PRRSV检测结果阳性,阳性率为9 6 % ,PCV_2和PRRSV共感染未检出。统计结果显示,传染性胸膜肺炎发病猪与临床健康猪PCV_2、PRRSV及PCV_2和PRRSV共感染的阳性率差异极显著,传染性胸膜肺炎发病猪的肺脏中PCV_2和PRRSV的检出率明显高于临床健康猪。上述检测结果提示。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 圆环病毒 呼吸与繁殖综合征病毒 共感染
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PRRSV和PCV-2双重PCR检测方法的建立及应用 被引量：8
7
作者 谢玉洁 王桂军 +4 位作者 李郁 魏建忠 占松鹤 何长生 朱良强 《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期21-25,共5页
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCCVR-2332)的ORF7保守序列和猪圆环病毒2型(PCV-2)(AF381175)的ORF2基因保守序列,设计合成了两对特异性引物。用这两对引物,通过优化的PCR条件,对PRRSV阳性毒株反转录后的cDNA模板和PC... 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCCVR-2332)的ORF7保守序列和猪圆环病毒2型(PCV-2)(AF381175)的ORF2基因保守序列,设计合成了两对特异性引物。用这两对引物,通过优化的PCR条件,对PRRSV阳性毒株反转录后的cDNA模板和PCV-2毒株的DNA模板进行双重PCR扩增,同时得到两条与试验设计相符的432bp(PRRSV)和630bp(PCV-2)特异性条带,建立了同时检测PRRSV和PCV-2的双重PCR方法。并用此方法对在安徽省不同地区所采集的72头份病猪的淋巴结、肺、肝、脾、肾等组织进行检测,证明建立的PCR方法可用于临床诊断。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 双重PCR应用
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混合感染猪繁殖与呼吸综合征和圆环病毒2型猪群的猪瘟抗体变化研究 被引量：6
8
作者 杨苗 李建臻 +2 位作者 林华 陈世界 徐刚 《中国动物检疫》 CAS 2016年第3期5-9,共5页
本试验研究旨在探究猪场发生猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)与圆环病毒2型(PCV2)混合感染后,猪群的猪瘟抗体变化,运用RT-PCR、实时荧光RT-PCR与PCR方法,对四川某规模化发病猪场进行高致病性PRRS、猪瘟与圆环2型的病原检测。结果显示高致病性P... 本试验研究旨在探究猪场发生猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)与圆环病毒2型(PCV2)混合感染后,猪群的猪瘟抗体变化,运用RT-PCR、实时荧光RT-PCR与PCR方法,对四川某规模化发病猪场进行高致病性PRRS、猪瘟与圆环2型的病原检测。结果显示高致病性PRRS、圆环2型和猪瘟阳性率分别为54%(19/35)、50%(17/34)、0(0/5)。结合临床症状、病猪剖检变化,确诊为PRRSV与PCV-2混合感染。采集PRRS与PCV-2混合感染病猪血清12份为试验组,本场健康猪只(无临床症状、抗原检测阴性)12份为对照组,运用ELISA试验检测猪群猪瘟抗体,结果显示试验组的猪瘟抗体合格率为33%(4/12),显著低于健康对照组的合格率83.3%(10/12)(P<0.05),结果表明PRRS和PCV2混合感染会对猪瘟抗体产生负面影响。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 圆环病毒2型 混合感染 猪瘟抗体
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PCR检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV的混合感染 被引量：9
9
作者 何后军 陆承平 罗咏梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期177-179,共3页
参照GenBank中已发表的有关基因序列,分别设计合成针对PCV-2、PRRSV和CSFV的3对引物,分别建立检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV感染的PCR或RT-PCR方法。结果显示,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,分别各呈现1条大小约1154,372,375bp的特异条... 参照GenBank中已发表的有关基因序列,分别设计合成针对PCV-2、PRRSV和CSFV的3对引物,分别建立检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV感染的PCR或RT-PCR方法。结果显示,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,分别各呈现1条大小约1154,372,375bp的特异条带。采用建立的PCR方法对江西各地发病猪和死亡猪的133份临床病料进行PCV-2检测,结果总检出率53.38%(71/133)。在71份PCV-2阳性的病料中检测出PRRSV20份,阳性率28.17%(20/71);CSFV9份,阳性率12.68%(9/71);PRRSV和CSFV共同感染9份,阳性率12.68%(9/71)。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 混合感染
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猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病二联核酸疫苗的构建及其免疫效力 被引量：21
10
作者 隋慧 杨金生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第11期4991-4994,共4页
[目的]构建猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病的二联核酸疫苗并研究其免疫效果。[方法]将辽宁某猪场发病猪病料中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因克隆至真核表达载体pIRES-neo的CMV启动子下游,然后用猪2型圆环病毒(PCV-2)... [目的]构建猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病的二联核酸疫苗并研究其免疫效果。[方法]将辽宁某猪场发病猪病料中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因克隆至真核表达载体pIRES-neo的CMV启动子下游,然后用猪2型圆环病毒(PCV-2)的内蒙古分离株的ORF2基因替换pIRES的neo基因,构建真核表达质粒。通过W estern blot和IFA方法检测构建的重组质粒在BHK细胞中的表达情况。将重组质粒免疫Balb/c小鼠,检测免疫后的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群的数量。[结果]成功构建了重组表达质粒pIRES-ORF2-ORF5,W estern blot和IFA试验证实该重组质粒在BHK细胞内成功表达了目的蛋白。与灭活苗相比,pIRES-ORF2-ORF5核酸疫苗免疫小鼠ELISA抗体水平差异不显著;其脾T淋巴细胞亚群数量显著高于灭活疫苗免疫组。[结论]构建的二联核酸疫苗能够诱导小鼠产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应,为更好地防制猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病提供了条件。 展开更多
关键词 PRRSV PCV-2 二联核酸疫苗 免疫效力
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PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的小鼠免疫试验 被引量：3
11
作者 许信刚 张宽 +1 位作者 王志昇 童德文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期53-59,共7页
为了研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病双价基因工程亚单位疫苗,利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-OR... 为了研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病双价基因工程亚单位疫苗,利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF3-ORF2,并对该重组病毒进行Western-blot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验、血清中和试验以及淋巴细胞增殖试验。结果显示,重组杆状病毒表达了重组GP3蛋白和Cap蛋白;该重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf-9后在细胞膜上展示了重组GP3蛋白和Cap蛋白,并且重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。动物免疫试验表明,重组杆状病毒免疫小鼠产生了抗PRRSV和抗PCV-2的特异性抗体,免疫小鼠血清中抗PRRSV和抗PCV-2的中和抗体效价分别达到1∶9.6和1∶13.6。淋巴细胞增殖试验表明,该重组杆状病毒能诱发较强的细胞免疫应答。结果表明,表面展示PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白的重组杆状病毒已构建成功,这为下一步应用该重组杆状病毒作为双价亚单位疫苗预防PRRSV和PCV-2的共感染奠定了基础。 展开更多
关键词 杆状病毒表面展示系统 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 GP3蛋白 CAP蛋白
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云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合症(PRDC)患病猪群中PRRSV,PCV-2,CSFV,PRV混合感染调查 被引量：25
12
作者 舒相华 尹革芬 +4 位作者 杨志雷 宋春莲 李文贵 潘伟荣 刘旭川 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期54-58,共5页
针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1 164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型... 针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1 164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型PCV-2特异抗体。结果表明:各季节和不同生长阶段猪群存在一种及两种以上的病毒混合感染,四重感染相对较少。从全年看单独感染占39.10%,PCV-2感染率最高,其次是PRV,PRRSV和CSFV;二重感染占26.13%,以PCV-2+PRV最常见,其次是PCV-2+PRRSV、PRV+PRRSV;三重感染占8.05%,PCV-2+PRRSV+PRV最常见;有四重感染出现,仅占1.57%。从季节来看,春季和夏季混合感染最高,分别为76.53%和60.74%,冬季和秋季的混合感染率分别为59.50%和53.55%。从年龄和性别看,育肥猪的混合感染率高于仔猪,分别为68.66%和61.11%,种公猪的感染率高于母猪,分别为70.00%和55.51%。说明4种病毒有单独感染或混合感染,推测其中PCV-2在混合感染中可能充当免疫抑制的角色,混合感染使PRDC症状更明显,死亡率增高。 展开更多
关键词 猪呼吸道疾病综合征 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪伪狂犬病病毒
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猪2′,5′寡腺苷酸合成酶OAS1a基因克隆与序列分析及其在Marc-145细胞上对PRRSV复制的影响 被引量：2
13
作者 赵孟孟 张雅 +7 位作者 谢莎 陈静 夏爽飞 罗雪刚 刘迎琦 黄晓静 乔松林 张改平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期25-32,共8页
旨在探索猪2’，5’寡腺苷酸合成酶OASla对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRs）的复制是否有抑制作用，进而为探索抑制病毒复制寻求新的思路。从PAM猪肺泡巨噬细胞中克隆了猪2’，5‘寡腺苷酸合成酶OASln基因，将该基因克隆到真核表达载体pc... 旨在探索猪2’，5’寡腺苷酸合成酶OASla对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRs）的复制是否有抑制作用，进而为探索抑制病毒复制寻求新的思路。从PAM猪肺泡巨噬细胞中克隆了猪2’，5‘寡腺苷酸合成酶OASln基因，将该基因克隆到真核表达载体pcDNA3．1中，测序与序列分析之后将该基因转染Marc-145细胞，然后接种PRRSV病毒，与对照组比较病毒的抑制效果。结果显示，病毒的滴度明显下降，病毒的RNA水平也明显下降，由此推断猪2’，5，寡腺苷酸合成酶OAS1a可以在Marc-145细胞上抑制PRRS的复制。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 2’ 5’寡腺苷酸合成酶OAS1a 序列分析 滴度 MARC-145细胞
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PRRSV和PCV-2共感染小鼠疾病模型的建立 被引量：1
14
作者 马元元 张中文 +4 位作者 周旭平 裴兆柱 刘钧 许承扬 吴国娟 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1580-1585,1589,共7页
45只6周龄昆明小鼠,随机分为3组:单次攻毒组(A组)、连续攻毒组(B组)和正常对照组(C组)各15只。A组于试验1 d先后接种PRRSV和PCV-2,B组于1,3,5 d接种PRRSV和PCV-2,C组于1 d接种MEM细胞培养液,各组于试验后7,14,21,28,35 d随机选3只采血... 45只6周龄昆明小鼠,随机分为3组:单次攻毒组(A组)、连续攻毒组(B组)和正常对照组(C组)各15只。A组于试验1 d先后接种PRRSV和PCV-2,B组于1,3,5 d接种PRRSV和PCV-2,C组于1 d接种MEM细胞培养液,各组于试验后7,14,21,28,35 d随机选3只采血后处死,采用体质量测定、抗体ELISA、荧光定量PCR、肉眼和显微病理观察等4项检测指标进行模型鉴定。结果显示,与C组相比,A组和B组小鼠体质量增率减慢;肺脏出现典型的间质性肺炎病变;腹股沟淋巴结肿大,淋巴细胞坏死;脾脏淋巴细胞缺失,被膜散在出血;肝静脉淤血;抗体检测均呈阳性;荧光定量PCR检测证实,C组不存在病毒复制,A、B组小鼠被检组织均存在病毒复制,相对病毒含量在淋巴结中较其他组织差异显著(P<0.01)。结果表明,试验已成功建立PRRSV和PCV-2共感染昆明小鼠疾病模型。 展开更多
关键词 小鼠 PRRSV PCVC-2 共感染 模型
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2016年山东省猪病毒性疫病的病原学检测 被引量：7
15
作者 韦雪华 汪洋 +7 位作者 李玉杰 孙圣福 肉先姑.库尔班 刘丽平 姜秀云 陈静 王贵升 田夫林 《中国动物检疫》 CAS 2017年第4期13-15,共3页
为了解2016年山东省几种主要猪病毒性疫病的流行情况,采用荧光定量RT-PCR或PCR方法,对山东省部分猪场送检的730份病料进行了病原学检测。结果检出248份阳性病料,样品个体阳性检出率由高到低的病原依次为猪圆环病毒2型(13.02%)、猪蓝耳... 为了解2016年山东省几种主要猪病毒性疫病的流行情况,采用荧光定量RT-PCR或PCR方法,对山东省部分猪场送检的730份病料进行了病原学检测。结果检出248份阳性病料,样品个体阳性检出率由高到低的病原依次为猪圆环病毒2型(13.02%)、猪蓝耳病病毒(10.41%)、古典猪瘟病毒(8.08%)、猪流行性腹泻病毒(7.26%)、猪伪狂犬病毒(3.84%)、猪轮状病毒(1.65%)、猪传染性胃肠炎病毒(0.14%);样品混合感染阳性率为8.08%,以猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型混合感染最为常见(3.02%)。本次病原学检测为山东省猪场病毒性疾病的综合防控提供了数据参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪蓝耳病病毒 古典猪瘟病毒 猪流行性腹泻病毒 猪伪狂犬病毒 猪轮状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 病原学检测 混合感染
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PRRSV感染对猪肺泡巨噬细胞Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响 被引量：3
16
作者 穆杨 李亮亮 +2 位作者 刘园园 张冲 周恩民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1313-1318,1351,共7页
凋亡过程的启动直接决定了细胞的"命运"。在细胞凋亡的线粒体和死亡受体信号转导途径中,Bcl-2家族成员的构成比例是凋亡调控的关键因素,尤其是Bcl-2/Bax比率是启动细胞凋亡的"分子开关"。为研究Bcl-2和Bax在猪繁殖... 凋亡过程的启动直接决定了细胞的"命运"。在细胞凋亡的线粒体和死亡受体信号转导途径中,Bcl-2家族成员的构成比例是凋亡调控的关键因素,尤其是Bcl-2/Bax比率是启动细胞凋亡的"分子开关"。为研究Bcl-2和Bax在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染过程中的表达情况,为PRRSV的发病机制研究积累资料,本试验以PRRSV的易感细胞—猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)为试验材料,应用SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法检测了PRRSV感染PAM后不同时间Bcl-2和Bax的表达变化。结果表明,与对照组相比,PRRSV感染PAM后6、12h,Bax的表达下降,而Bcl-2的表达升高;且12h时与对照组相比均差异显著(P<0.05);感染后24h,与对照组相比,Bax的表达基本无变化,而Bcl-2的表达降低且与对照组存在显著差异;感染后48h,Bax的表达升高而Bcl-2的表达降低,且与对照组均差异显著。提示感染初期,PRRSV为了自身的复制使细胞处于抑凋亡状态,而病毒感染的后期增加了细胞凋亡。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 肺泡巨噬细胞 BCL-2 BAX 凋亡
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PCV-2 ORF2和PRRSV ORF5基因的扩增与双基因真核表达载体的构建 被引量：2
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作者 赵鸿雁 李俊 +4 位作者 丛晓燕 曹帅 王文志 张秀美 王金宝 《动物医学进展》 CSCD 2006年第11期61-64,共4页
根据GenBank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因序列,分别设计一对引物,应用PCR和RT-PCR扩增出PCV-2 ORF2基因和PRRSV ORF5基因。将PCR产物ORF2经NheⅠ/EcoRⅠ双酶切回收后插入真核表达载体pIRES得到pIRES-OR... 根据GenBank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因序列,分别设计一对引物,应用PCR和RT-PCR扩增出PCV-2 ORF2基因和PRRSV ORF5基因。将PCR产物ORF2经NheⅠ/EcoRⅠ双酶切回收后插入真核表达载体pIRES得到pIRES-ORF2,RT-PCR产物ORF5经NotⅠ/XbaⅠ双酶切回收后插入pIRES-ORF2构建重组质粒pIRES-ORF2/ORF5。对此质粒中的插入片段,进行PCR RT-PCR及双酶切鉴定,同时对插入序列进行测序分析,表明SD1株ORF2与国内多种毒株的同源性为99%,pIRES-ORF2ORF5转移载体ORF5基因的核苷酸推导氨基酸与北美洲原型(VR-2332株)氨基酸同源性为99%。此重组表达载体的成功构建,为进一步研究PCV-2 ORF2及PRRSV ORF5编码蛋白的生物学活性及研究猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒二联核酸疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ORF2 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5 真核表达载体
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PRRSV河南地方分离株ORF 2～6基因的克隆与序列分析 被引量：1
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作者 党占国 李志勇 +2 位作者 陈溥言 崔保安 夏平安 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第7期10-13,共4页
根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ATCC VR-2332株的ORF2～6基因的核苷酸序列，设计合成4对特异性引物，用RT—PCR方法扩增出PRRSV河南地方株（命名为HN-2株）的ORF 2～6片段，克隆到pUC-57T载体并进行测序。应用DNASta... 根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ATCC VR-2332株的ORF2～6基因的核苷酸序列，设计合成4对特异性引物，用RT—PCR方法扩增出PRRSV河南地方株（命名为HN-2株）的ORF 2～6片段，克隆到pUC-57T载体并进行测序。应用DNAStar序列分析软件对分离株的ORF 2～6基因和其推导的氨基酸序列与不同来源的9个PRRSV毒株进行了同源性比较，结果表明：该分离株的ORF 2～6基因与不同来源美洲型毒株之间的同源性分别为89．1％～98．1％和81．4％～96．1％，而与欧洲型毒株之间的同源性仅为46．9％～61．9％和44．2％～45．0％；同时将分离株ORF 2～6基因的推导氨基酸序列与7个关洲型PRRSV毒株进行变异分析比较，证实了该分离株ORF 2～6基因发生了变异。 展开更多
关键词 PRRSV ORF 2-6基因 基因克隆 变异分析
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猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的流行病学调查 被引量：5
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作者 王小敏 何孔旺 +10 位作者 张文文 周忠涛 茅爱华 俞正玉 温立斌 倪艳秀 张雪寒 郭容利 吕立新 李彬 周俊明 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第B12期390-394,共5页
研究2009-2010年我国部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染的情况。采用PCR和RT-PCR方法对采集自我国安徽、江苏、山东、浙江等7省的227份组织和血清样品进行PCV2和PRRSV检测。PCV2a感染率为15.9%,PCV2... 研究2009-2010年我国部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染的情况。采用PCR和RT-PCR方法对采集自我国安徽、江苏、山东、浙江等7省的227份组织和血清样品进行PCV2和PRRSV检测。PCV2a感染率为15.9%,PCV2b感染率为44.5%,PRRSV感染率为45.8%,其中17份样品表现为PCV2a和PRRSV的混合感染,50份样品表现为PCV2b和PRRSV的混合感染,10份样品表现为PCV2a,PCV2b和PRRSV的混合感染,分别占样品总数的7.5%,22.0%和4.4%。猪群中PCV2和PRRSV的感染比较普遍,混合感染率也较高,加重了疫病防控的难度。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 共感染
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猪链球菌2型仔猪感染动物模型的建立及免疫保护试验 被引量：4
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作者 王建 沈莉萍 +2 位作者 刘佩红 沈素芳 陆承平 《动物医学进展》 CSCD 2007年第5期1-4,共4页
采用猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒与猪链球菌2型协同感染仔猪的方式,建立动物感染模型,结果协同感染组试验仔猪均死亡,PRRS弱毒、猪链球菌攻毒组及空白对照组仔猪均存活。结果表明,PRRS弱毒可增强猪链球菌2型对猪的易感性。将建立的动... 采用猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒与猪链球菌2型协同感染仔猪的方式,建立动物感染模型,结果协同感染组试验仔猪均死亡,PRRS弱毒、猪链球菌攻毒组及空白对照组仔猪均存活。结果表明,PRRS弱毒可增强猪链球菌2型对猪的易感性。将建立的动物感染模型用于猪链球菌灭活苗(马链球菌兽疫亚种+猪链球菌2型)的效力检验,结果灭活苗可以保护PRRSV与链球菌的协同感染。 展开更多
关键词 猪链球菌 猪繁殖与呼吸综合征病毒 动物模型 免疫保护
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