目的分析长链非编码RNA-PRR34-AS1在肝癌组织中的表达特性,探究其对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在分子作用机制。方法收集2020年6月~12月于榆林市第二医院行手术治疗的30例肝癌患者癌组织及其对应癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PC...目的分析长链非编码RNA-PRR34-AS1在肝癌组织中的表达特性,探究其对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在分子作用机制。方法收集2020年6月~12月于榆林市第二医院行手术治疗的30例肝癌患者癌组织及其对应癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR实验(RT-qPCR)检测组织中LncRNA-PRR34-AS1相对表达水平。通过转染siRNA介导敲低PRR34-AS1基因表达,利用细胞增殖实验和细胞迁移实验验证PRR34-AS1对肝癌细胞增殖、迁移的影响;通过生物信息学数据库网站预测PRR34-AS1与JAK1结合的基因位点,双荧光素酶报告基因实验验证两者靶向关系,探究其在肝癌发生发展中的调控作用。结果30例临床肝癌组织中PRR34-AS1表达显著高于癌旁正常组织(5.714±0.612 vs 2.981±0.572),差异有统计学意义(t=17.870,P=0.000),PRR34-AS1具有高表达预后差的临床特征。敲低PRR34-AS1后,转染24,48和72 h时siRNA-PRR34-AS1#1组和siRNA-PRR34-AS1#2组细胞增殖率较对照组明显降低,差异均有统计学意义(F=83.440~89.297,均P<0.001);siRNA-PRR34-AS1#1组(38.451±4.263)和siRNA-PRR34-AS1#2组(42.106±3.512)细胞愈合迁移速率较对照组(83.247±6.205)显著减慢,差异均有统计学意义(F=83.357,P<0.001)。JAK1是PRR34-AS1的靶基因,siRNA-PRR34-AS1#1组(0.453±0.019)和siRNA-PRR34-AS1#2组(0.476±0.022)细胞中JAK1相对表达较对照组相比(1.002±0.003)明显降低,差异均有统计学意义(F=716.287,P<0.001)。转染敲低JAK1表达后,各转染时间点siRNA-JAK1#1组和siRNA-JAK1#2组细胞增殖速率较对照组明显减缓,差异均有统计学意义(F=45.465~76.548,均P<0.05)。30组临床肝癌组织中JAK1表达显著高于癌旁正常组织(5.963±1.214 vs 4.052±0.876),差异有统计学意义(t=6.992,P=0.000),PRR34-AS1与JAK1表达呈显著正相关(r=0.907,P<0.05)。在敲低PRR34-AS1表达的肝癌细胞中回补JAK1后,肝癌细胞增殖、迁移速率又回归到正常水平。结论肝癌中PRR34-AS1显著高表达,其可能通过正向调控JAK1表达影响JAK/STAT信号通路,进而调控促进肝癌细胞的增殖和迁移。展开更多
文摘目的分析长链非编码RNA-PRR34-AS1在肝癌组织中的表达特性,探究其对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在分子作用机制。方法收集2020年6月~12月于榆林市第二医院行手术治疗的30例肝癌患者癌组织及其对应癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR实验(RT-qPCR)检测组织中LncRNA-PRR34-AS1相对表达水平。通过转染siRNA介导敲低PRR34-AS1基因表达,利用细胞增殖实验和细胞迁移实验验证PRR34-AS1对肝癌细胞增殖、迁移的影响;通过生物信息学数据库网站预测PRR34-AS1与JAK1结合的基因位点,双荧光素酶报告基因实验验证两者靶向关系,探究其在肝癌发生发展中的调控作用。结果30例临床肝癌组织中PRR34-AS1表达显著高于癌旁正常组织(5.714±0.612 vs 2.981±0.572),差异有统计学意义(t=17.870,P=0.000),PRR34-AS1具有高表达预后差的临床特征。敲低PRR34-AS1后,转染24,48和72 h时siRNA-PRR34-AS1#1组和siRNA-PRR34-AS1#2组细胞增殖率较对照组明显降低,差异均有统计学意义(F=83.440~89.297,均P<0.001);siRNA-PRR34-AS1#1组(38.451±4.263)和siRNA-PRR34-AS1#2组(42.106±3.512)细胞愈合迁移速率较对照组(83.247±6.205)显著减慢,差异均有统计学意义(F=83.357,P<0.001)。JAK1是PRR34-AS1的靶基因,siRNA-PRR34-AS1#1组(0.453±0.019)和siRNA-PRR34-AS1#2组(0.476±0.022)细胞中JAK1相对表达较对照组相比(1.002±0.003)明显降低,差异均有统计学意义(F=716.287,P<0.001)。转染敲低JAK1表达后,各转染时间点siRNA-JAK1#1组和siRNA-JAK1#2组细胞增殖速率较对照组明显减缓,差异均有统计学意义(F=45.465~76.548,均P<0.05)。30组临床肝癌组织中JAK1表达显著高于癌旁正常组织(5.963±1.214 vs 4.052±0.876),差异有统计学意义(t=6.992,P=0.000),PRR34-AS1与JAK1表达呈显著正相关(r=0.907,P<0.05)。在敲低PRR34-AS1表达的肝癌细胞中回补JAK1后,肝癌细胞增殖、迁移速率又回归到正常水平。结论肝癌中PRR34-AS1显著高表达,其可能通过正向调控JAK1表达影响JAK/STAT信号通路,进而调控促进肝癌细胞的增殖和迁移。
