Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉...Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉默对细胞周期产生的影响,通过添加dNTPs分析核糖核苷酸还原酶表达下降在PRR11敲降导致的S期阻滞中的作用。Brdu标记结果表明,PRR11敲减阻滞细胞周期在S期,并且核糖核苷酸还原酶表达下降导致细胞周期阻滞。使用分裂期标记蛋白pHH3分析结果表明,PRR11下调表达同时也导致细胞在G2期产生阻滞,从而抑制细胞进入有丝分裂。研究结果表明,在细胞周期过程中抑制PRR11的表达会阻滞DNA合成和有丝分裂进行,推测PRR11异常表达可能导致细胞周期紊乱,从而促进肿瘤的发生发展。展开更多
PRR11(proline-rich protein 11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因,在细胞周期和肿瘤发生等过程中起重要作用。该研究是在此前对PRR11启动子鉴定分析的基础上,对PRR11核心启动子区域中的核因子(nuclear factor Y,NF-Y)结合位点进...PRR11(proline-rich protein 11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因,在细胞周期和肿瘤发生等过程中起重要作用。该研究是在此前对PRR11启动子鉴定分析的基础上,对PRR11核心启动子区域中的核因子(nuclear factor Y,NF-Y)结合位点进行进一步的分析以确定其在PRR11转录调控中的作用。核苷酸序列同源性分析结果表明,PRR11核心启动子区域中的两个NF-Y结合位点在人、牛、大鼠和小鼠四个物种中均高度保守。共转染NF-Y表达质粒后,发现NF-Y的外源过表达可以明显提高PRR11的启动子活性。采用定点突变方法将PRR11启动子区域中的两个NF-Y结合位点单独或同时进行有效突变后,PRR11启动子活性明显下降,且NF-Y外源过表达对其启动子活性的激活效应也明显削弱甚至丧失。另外,对基因定点突变方法做出了改进,提出了一种更好的基于转录因子结合位点分析的碱基突变方法。这些结果表明,NF-Y结合位点是PRR11核心启动子区域中的重要的顺式作用元件,NF-Y可能通过调节PRR11的转录进而调节细胞周期和肿瘤发生等过程。展开更多
目的:探索富脯氨酸蛋白11(Proline-rich protein 11,PRR11)过表达诱发染色体凝聚异常的分子机理。方法:综合利用瞬时过表达、si RNA敲减和免疫荧光染色方法在人肺癌细胞系A549中过表达或沉默PRR11后,检测波形蛋白(Vimentin)的表达与亚...目的:探索富脯氨酸蛋白11(Proline-rich protein 11,PRR11)过表达诱发染色体凝聚异常的分子机理。方法:综合利用瞬时过表达、si RNA敲减和免疫荧光染色方法在人肺癌细胞系A549中过表达或沉默PRR11后,检测波形蛋白(Vimentin)的表达与亚细胞分布及染色质凝聚异常情况。结果:肺癌细胞中内源性PRR11在胞浆中呈现弥散型分布,而Flag-PRR11过表达后在细胞中的分布呈现弥散状和网络状两种不同形态。进一步检测发现内源性或外源过表达PRR11与Ⅲ型中间丝蛋白Vimentin共定位,并且导致Vimentin绕核分布紊乱及染色质凝聚异常。结论:在细胞周期过程中PRR11与Vimentin共定位并调节其组装过程。推测PRR11异常表达可能通过与Vimentin共定位导致核骨架核纤层不稳定并诱发染色质异常凝聚,从而促进肿瘤的发生发展。展开更多
目的探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29...目的探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29细胞miR-4731-5p的相对表达量。采用集落形成实验和流式细胞术分别检测HT-29细胞的增殖水平和凋亡情况。生物信息学软件miRTarBase预测miR-4731-5p的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测HT-29细胞靶基因的相对表达量。结果miR-NC组和miR-4731-5p组HT-29细胞中miR-4731-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26),差异有统计学意义(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞增殖能力明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增强(P<0.01)。miR-4731-5p的靶基因可能是富含脯氨酸蛋白11(proline-rich protein 11,PRR11)基因。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞中PRR11基因表达明显降低[(0.28±0.11)比(1.02±0.12)](P<0.01)。结论过表达miR-4731-5p可抑制结直肠癌HT-29细胞的增殖、促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能是通过抑制PRR11基因表达实现。展开更多
为了探讨PRR11(proline-rich protein 11)在糖尿病合并胰腺癌患者中的表达,我们分析了PRR11在糖尿病合并胰腺癌发生发展的作用。本研究采用免疫组织化学染色的方法,检测了50胰腺癌患者的癌症组织中PRR11的蛋白表达水平,其中糖尿病患者32...为了探讨PRR11(proline-rich protein 11)在糖尿病合并胰腺癌患者中的表达,我们分析了PRR11在糖尿病合并胰腺癌发生发展的作用。本研究采用免疫组织化学染色的方法,检测了50胰腺癌患者的癌症组织中PRR11的蛋白表达水平,其中糖尿病患者32例,非糖尿病患者18例。选用自动生化分析仪检测胰腺癌患者空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白以及血糖控制情况,分析比较糖尿病对胰腺癌患者癌组织中PRR11水平的影响。研究发现PRR11蛋白在糖尿病合并胰腺癌患者的癌组织中阳性率为87.5%,显著高于非糖尿病合并胰腺癌患者中PRR11蛋白的阳性率。同时PRR11在血糖控制不良组中的水平显著性高于血糖控制良好组。相关性分析显示,癌组织中PRR11的表达水平与空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白的水平呈正相关关系。因此PRR11在胰腺癌患者的异常高表达会促进糖尿病的发生和发展,可作为糖尿病合并胰腺癌患者新的潜在预测指标和治疗靶点。展开更多
目的:研究Proline-rich protein 11(PRR11)对胰腺癌(Pancreatic cancer)和SW1990细胞的影响。方法:用RTPCR和免疫组化检测PRR11在67例胰腺癌组织和胰腺癌旁组织样本中的表达情况;用RT-PCR的方法检测4种胰腺癌细胞中PRR11的表达,筛选出PR...目的:研究Proline-rich protein 11(PRR11)对胰腺癌(Pancreatic cancer)和SW1990细胞的影响。方法:用RTPCR和免疫组化检测PRR11在67例胰腺癌组织和胰腺癌旁组织样本中的表达情况;用RT-PCR的方法检测4种胰腺癌细胞中PRR11的表达,筛选出PRR11表达量最高的SW1990细胞。随机将SW1990细胞分成3组:对照组(Con组),敲减PRR11空载组(si-NC组),敲减PRR11组(siRNA-PRR11组),敲减PRR11组对PRR11进行敲减,用RT-PCR的方法检测Caspase 3、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL2)在SW1990细胞中的表达;Transwell检测SW1990细胞的迁移能力。结果:在胰腺癌组织的免疫组化结果中,呈现有大量呈黄褐色的阳性细胞和组织,PRR11在癌旁组织的表达显著低于胰腺癌组织。PRR11在si-PRR11组的表达显著低于对照组和si-NC组。与对照组比较,Caspase 3在si-PRR11组的表达显著升高,BCL2的表达显著降低,对照组和si-NC组没有显著性差异。与对照组比较,si-PRR11组SW1990细胞的迁移能力显著降低。结论:PRR11是影响胰腺癌发生和发展的关键基因之一,PRR11的研究将为胰腺癌的致病机制和治疗提供一定的理论基础。展开更多
文摘Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉默对细胞周期产生的影响,通过添加dNTPs分析核糖核苷酸还原酶表达下降在PRR11敲降导致的S期阻滞中的作用。Brdu标记结果表明,PRR11敲减阻滞细胞周期在S期,并且核糖核苷酸还原酶表达下降导致细胞周期阻滞。使用分裂期标记蛋白pHH3分析结果表明,PRR11下调表达同时也导致细胞在G2期产生阻滞,从而抑制细胞进入有丝分裂。研究结果表明,在细胞周期过程中抑制PRR11的表达会阻滞DNA合成和有丝分裂进行,推测PRR11异常表达可能导致细胞周期紊乱,从而促进肿瘤的发生发展。
文摘PRR11(proline-rich protein 11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因,在细胞周期和肿瘤发生等过程中起重要作用。该研究是在此前对PRR11启动子鉴定分析的基础上,对PRR11核心启动子区域中的核因子(nuclear factor Y,NF-Y)结合位点进行进一步的分析以确定其在PRR11转录调控中的作用。核苷酸序列同源性分析结果表明,PRR11核心启动子区域中的两个NF-Y结合位点在人、牛、大鼠和小鼠四个物种中均高度保守。共转染NF-Y表达质粒后,发现NF-Y的外源过表达可以明显提高PRR11的启动子活性。采用定点突变方法将PRR11启动子区域中的两个NF-Y结合位点单独或同时进行有效突变后,PRR11启动子活性明显下降,且NF-Y外源过表达对其启动子活性的激活效应也明显削弱甚至丧失。另外,对基因定点突变方法做出了改进,提出了一种更好的基于转录因子结合位点分析的碱基突变方法。这些结果表明,NF-Y结合位点是PRR11核心启动子区域中的重要的顺式作用元件,NF-Y可能通过调节PRR11的转录进而调节细胞周期和肿瘤发生等过程。
文摘目的:探索富脯氨酸蛋白11(Proline-rich protein 11,PRR11)过表达诱发染色体凝聚异常的分子机理。方法:综合利用瞬时过表达、si RNA敲减和免疫荧光染色方法在人肺癌细胞系A549中过表达或沉默PRR11后,检测波形蛋白(Vimentin)的表达与亚细胞分布及染色质凝聚异常情况。结果:肺癌细胞中内源性PRR11在胞浆中呈现弥散型分布,而Flag-PRR11过表达后在细胞中的分布呈现弥散状和网络状两种不同形态。进一步检测发现内源性或外源过表达PRR11与Ⅲ型中间丝蛋白Vimentin共定位,并且导致Vimentin绕核分布紊乱及染色质凝聚异常。结论:在细胞周期过程中PRR11与Vimentin共定位并调节其组装过程。推测PRR11异常表达可能通过与Vimentin共定位导致核骨架核纤层不稳定并诱发染色质异常凝聚,从而促进肿瘤的发生发展。
文摘目的探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29细胞miR-4731-5p的相对表达量。采用集落形成实验和流式细胞术分别检测HT-29细胞的增殖水平和凋亡情况。生物信息学软件miRTarBase预测miR-4731-5p的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测HT-29细胞靶基因的相对表达量。结果miR-NC组和miR-4731-5p组HT-29细胞中miR-4731-5p的表达分别为(1.05±0.16)和(7.91±1.26),差异有统计学意义(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞增殖能力明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增强(P<0.01)。miR-4731-5p的靶基因可能是富含脯氨酸蛋白11(proline-rich protein 11,PRR11)基因。与miR-NC组相比,miR-4731-5p组HT-29细胞中PRR11基因表达明显降低[(0.28±0.11)比(1.02±0.12)](P<0.01)。结论过表达miR-4731-5p可抑制结直肠癌HT-29细胞的增殖、促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能是通过抑制PRR11基因表达实现。
文摘为了探讨PRR11(proline-rich protein 11)在糖尿病合并胰腺癌患者中的表达,我们分析了PRR11在糖尿病合并胰腺癌发生发展的作用。本研究采用免疫组织化学染色的方法,检测了50胰腺癌患者的癌症组织中PRR11的蛋白表达水平,其中糖尿病患者32例,非糖尿病患者18例。选用自动生化分析仪检测胰腺癌患者空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白以及血糖控制情况,分析比较糖尿病对胰腺癌患者癌组织中PRR11水平的影响。研究发现PRR11蛋白在糖尿病合并胰腺癌患者的癌组织中阳性率为87.5%,显著高于非糖尿病合并胰腺癌患者中PRR11蛋白的阳性率。同时PRR11在血糖控制不良组中的水平显著性高于血糖控制良好组。相关性分析显示,癌组织中PRR11的表达水平与空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白的水平呈正相关关系。因此PRR11在胰腺癌患者的异常高表达会促进糖尿病的发生和发展,可作为糖尿病合并胰腺癌患者新的潜在预测指标和治疗靶点。
