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PRKCQ-AS1通过Akt信号促进气道平滑肌细胞增殖的研究
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作者 吴露依 胡方启 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期88-94,共7页
目的探讨PRKCQ-AS1在气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的作用。方法首先通过转录组测序技术(RNA-seq)检测哮喘儿童肺泡灌洗液中的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。随后,分别构建PRKCQ-AS1慢病毒... 目的探讨PRKCQ-AS1在气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的作用。方法首先通过转录组测序技术(RNA-seq)检测哮喘儿童肺泡灌洗液中的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。随后,分别构建PRKCQ-AS1慢病毒敲低和过表达载体并转染ASMCs。qRT-PCR方法检测了ASMCs中PRKCQ-AS1的表达;用CCK-8和流式细胞术分别检测ASMCs的增殖和凋亡;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测ASMCs培养上清液中TNF-α和IL-1β的含量;lncRNA芯片检测PRKCQ-AS1敲低后的DEGs并进行KEGG通路富集;Western blot检测p-Akt和Akt的水平。结果RNA-seq结果显示,PRKCQ-AS1是上调最明显的DEGs之一。PRKCQ-AS1过表达促进了ASMCs的增殖和迁移并抑制了其凋亡,同时,PRKCQ-AS1过表达使上清液中炎性因子TNF-α和IL-1β的水平升高,而PRKCQ-AS1敲低则呈现相反的结果。对PRKCQ-AS1敲低后得到的606个DEGs进行KEGG信号通路富集分析,结果显示PI3K-Akt信号被明显富集。Western blot结果表明,PRKCQ-AS1敲低抑制了Akt的活化;相反,PRKCQ-AS1过表达则促进了Akt的水平。结论PRKCQ-AS1可能通过增强Akt信号促进ASMCs炎症反应,进而加剧了ASMCs的增殖和迁移,最终导致哮喘的发展。 展开更多
关键词 prkcq-as1 ASMCs 哮喘 Akt信号 细胞实验 炎性细胞因子
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lncRNA PRKCQ-AS1调控miR-143-3p/IL-6/STAT3通路影响肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导凋亡的实验研究 被引量：5
2
作者 石鑫 陈虎 +1 位作者 王威 张敬坡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期2986-2992,共7页
目的:探讨lncRNA PRKCQ-AS1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导凋亡的影响及分子机制。方法:Hep3B细胞分为si-NC组、si-PRKCQ-AS1组、pcDNA-NC组、pcDNA-PRKCQ-AS1组、miR-NC组、miR-143-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-143-3p组、si-PRK... 目的:探讨lncRNA PRKCQ-AS1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导凋亡的影响及分子机制。方法:Hep3B细胞分为si-NC组、si-PRKCQ-AS1组、pcDNA-NC组、pcDNA-PRKCQ-AS1组、miR-NC组、miR-143-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-143-3p组、si-PRKCQ-AS1+anti-miR-NC组、si-PRKCQ-AS1+anti-miR-143-3p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA PRKCQ-AS1、miR-143-3p和IL-6 mRNA表达水平;Western blot检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证PRKCQ-AS1和miR-143-3p的靶向关系。结果:肝癌细胞系中lncRNA PRKCQ-AS1表达水平升高,miR-143-3p表达水平降低(P<0.05)。lncRNA PRKCQ-AS1低表达或miR-143-3p高表达,肝癌细胞Hep3B中PRKCQ-AS1表达水平降低,C-myc、MMP2、MMP9表达水平降低,Cleaved-caspase-3表达水平升高,细胞增殖活性降低,细胞迁移、侵袭数减少,细胞凋亡率升高(P<0.05)。lncRNA PRKCQ-AS1靶向调控miR-143-3p。lnc-RNA PRKCQ-AS1低表达,IL-6 mRNA和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05)。低表达miR-143-3p可以逆转lncRNA PRKCQ-AS1低表达对Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡以及IL-6/STAT3通路的影响。结论:lncRNA PRKCQ-AS1低表达可能通过上调miR-143-3p进一步抑制IL-6/STAT3通路从而抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 lncRNA prkcq-as1 miR-143-3p IL-6/STAT3通路 肝癌 增殖 凋亡
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