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siRNA阻断PRKCι表达对人卵巢癌细胞株SKOV3迁移和侵袭的影响
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作者 蒯玲玲 周金华 +2 位作者 沈芳荣 李珉 陈友国 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2015年第9期651-655,共5页
目的:探讨PRKCι在卵巢癌迁移和侵袭中的作用。方法:生物信息学分析PRKCι在卵巢癌中的表达,Real-time PCR和Western blot法检测卵巢癌细胞株中PRKCι的表达情况,设计针对PRKCι的siRNA并转染SKOV3卵巢癌细胞,观察转染后SKOV3细胞中PRK... 目的:探讨PRKCι在卵巢癌迁移和侵袭中的作用。方法:生物信息学分析PRKCι在卵巢癌中的表达,Real-time PCR和Western blot法检测卵巢癌细胞株中PRKCι的表达情况,设计针对PRKCι的siRNA并转染SKOV3卵巢癌细胞,观察转染后SKOV3细胞中PRKCι基因表达情况,以及SKOV3细胞的迁移、侵袭能力的变化,并检测PRKCι基因敲减后其下游转移相关效应分子MMP10的表达。结果:PRKCι在卵巢癌芯片(TCGA和GDS3592)中的表达与正常卵巢组织比较,表达差异>2倍(P<0.0001和P=0.0078)。与HOSE细胞相比,ES2、CAOV3、OVCAR3、SKOV3、A2780卵巢癌细胞株中存在PRKCιmRNA和蛋白水平的高表达,其中SKOV3细胞中PRKCι表达水平最高。PRKCι特异性的siRNA-1和siRNA-2均能有效抑制SKOV3细胞中PRKCιmRNA和蛋白表达,mRNA水平抑制效率分别为(80.5±10.23)%、(74.6±12.48)%(P<0.01),在蛋白水平抑制效率分别为(71.37±11.34)%、(68.22±12.19)%(P<0.05)。细胞划痕实验显示,PRKCιsiRNA明显降低了SKOV3细胞的迁移能力,抑制效率分别为(54.31±12.87)%、(45.25±14.02)%(P<0.05);Transwell实验显示,PRKCιsiRNA明显降低了SKOV3细胞的侵袭能力,分别降低了57.48%和38.38%(P<0.05);PRKCιsiRNA明显抑制了转移相关效应分子MMP10在mRNA和蛋白水平表达,mRNA水平分别下调(56.76±13.83)%、(52.99±14.38)%(P<0.05),蛋白水平分别下调(35.65±9.10)%、(37.14±14.26)%(P<0.05)。结论:PRKCι在卵巢癌中高表达,是参与卵巢癌转移的重要基因,可能作为抑制卵巢癌转移的新的靶向分子。 展开更多
关键词 prkcι 卵巢癌 迁移 侵袭 MMP10
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