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噪声性听力损伤对豚鼠耳蜗Prestin蛋白及mRNA表达水平影响 被引量:7
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作者 王军义 邹志辉 +3 位作者 陈晓滨 张敏 杨翠婵 夏源 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2014年第4期384-388,共5页
目的探讨噪声性听力损伤(NIHL)对耳蜗Prestin蛋白表达的影响。方法无特定病原体级健康雄性豚鼠60只随机分为对照组和85、95、105、115 dB声压级(SPL)暴露组5组,除对照组外,其余4组分别予以85、95、105、115 dB SPL的高斯白噪声暴露,每天... 目的探讨噪声性听力损伤(NIHL)对耳蜗Prestin蛋白表达的影响。方法无特定病原体级健康雄性豚鼠60只随机分为对照组和85、95、105、115 dB声压级(SPL)暴露组5组,除对照组外,其余4组分别予以85、95、105、115 dB SPL的高斯白噪声暴露,每天6 h,连续28 d,暴露前1 d和暴露结束后第7天分别进行听性脑干反应测量,噪声暴露结束后第7天,分别进行耳蜗病理学检查、逆转录-聚合酶链反应分析Prestin mRNA表达水平、蛋白免疫印迹法分析Prestin蛋白表达水平。结果对照组和85、95、105、115 dB SPL暴露组的永久性听阈位移(PTS)水平依次为(2.08±0.97)、(7.08±2.79)、(13.33±1.63)、(21.88±1.88)和(27.92±2.34)dB nHL,上述5组PTS水平两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理学检查结果显示115 dB SPL暴露组豚鼠耳蜗出现明显毛细胞损伤。上述5组Prestin mRNA的2-ΔΔCt值依次为(1.12±0.39)、(0.98±0.24)、(1.53±0.55)、(2.84±0.51)和(7.65±0.63);105 dB SPL暴露组Prestin mRNA的2-ΔΔCt值分别高于对照组及85、95 dB SPL暴露组(P<0.05),115 dB SPL暴露组Prestin mRNA的2-ΔΔCt值分别高于其余4组(P<0.05)。上述5组Prestin蛋白相对灰度值依次为(0.18±0.07)、(0.20±0.09)、(0.29±0.10)、(0.45±0.19)和(1.19±0.16);105 dB SPL暴露组Prestin蛋白相对灰度值分别高于对照组及85、95 dB SPL暴露组(P<0.05),115 dB SPL暴露组Prestin蛋白相对灰度值分别高于其余4组(P<0.05)。结论严重的NIHL会导致耳蜗外毛细胞Prestin的表达代偿性增高。 展开更多
关键词 prestin蛋白 prestin MRNA 噪声性听力损伤 耳蜗
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耳毒性药物对小鼠耳蜗外毛细胞prestin表达的影响 被引量:6
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作者 赵宁 柳柯 +4 位作者 杨仕明 王小宇 石闯 施磊 姜学钧 《解剖科学进展》 CAS 2013年第3期250-254,共5页
目的探讨氨基糖甙类药物庆大霉素对小鼠外毛细胞马达蛋白prestin的影响以及和听力损害之间的关系。方法选择鼠龄为5周的C57BL/6J小鼠,每天腹腔注射庆大霉素1次,药物浓度为100mg/kg,连续给药14d。实验期间,分别在第4d,7d和第14d时检测受... 目的探讨氨基糖甙类药物庆大霉素对小鼠外毛细胞马达蛋白prestin的影响以及和听力损害之间的关系。方法选择鼠龄为5周的C57BL/6J小鼠,每天腹腔注射庆大霉素1次,药物浓度为100mg/kg,连续给药14d。实验期间,分别在第4d,7d和第14d时检测受试小鼠的ABR(Click)以观察耳毒性药物对小鼠听功能的影响,并以未进行腹腔注射给药的小鼠(0d)作为对照组。采用免疫组织化学结合激光共聚焦显微镜方法,观察小鼠耳蜗基底膜铺片标本上prestin表达变化,并采用比较荧光强度的方法定量分析prestin在各组之间表达量的差异。结果听功能检测显示,实验组小鼠听力在第4d时开始下降,到第7d时下降达到峰值(P<0.01),14d时较第7d有所降低但无显著差异(P>0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。prestin在外毛细胞表达量在第4d开始上调,表现为圆环状的绿色荧光变得模糊,第7d时圆环的形状已经变得不规则并且多带有比较长的尾迹,而prestin表达量达到了最高水平(P<0.01),第14d时表达量和第7d相比有所降低(P<0.05),但是仍然高于对照组(P<0.05)。结论氨基糖甙类耳毒性药物持续暴露导致prestin过表达,与小鼠的听力损害过程存在一致性,提示prestin过表达可能参与致聋过程。 展开更多
关键词 氨基糖甙类药物毒性 耳蜗 外毛细胞 prestin 小鼠
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电离辐射对大鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达影响的实验研究 被引量:3
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作者 杜莎莎 任陈 +5 位作者 田允鸿 谢国柱 刘英 孙权权 刘爱华 袁亚维 《热带医学杂志》 CAS 2011年第10期1127-1130,共4页
目的探讨电离辐射下大鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的改变及意义。方法建立大鼠耳放射损伤模型,检测其听力复合动作电位(CAP)阈值及畸变产物耳声发射(DPOAEs)幅值,验证其电离辐射晚期感音神经性耳聋(SNHL)的发生。提取大鼠耳蜗组织mRN... 目的探讨电离辐射下大鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的改变及意义。方法建立大鼠耳放射损伤模型,检测其听力复合动作电位(CAP)阈值及畸变产物耳声发射(DPOAEs)幅值,验证其电离辐射晚期感音神经性耳聋(SNHL)的发生。提取大鼠耳蜗组织mRNA及蛋白,荧光实时定量PCR检测耳蜗Prestin蛋白mRNA水平的表达,以及Western杂交检测Prestin蛋白水平的表达。结果成功建立了电离辐射晚期SNHL大鼠模型,其耳蜗Prestin蛋白无论是mRNA表达水平还是蛋白表达水平均较未照射组明显降低。结论放疗晚期感音神经性耳聋的发生机制可能与电离辐射导致内耳外毛细胞Prestin蛋白的表达异常有关。 展开更多
关键词 感音神经性耳聋 外毛细胞 prestin蛋白
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Prestin基因敲除小鼠听力和毛细胞改变的相关性研究 被引量:5
4
作者 郭运凯 谢鼎华 杨新明 《中华耳科学杂志》 CSCD 2004年第4期245-249,共5页
目的研究发育和成熟过程中的prestin基因敲除小鼠听力特征,比较其听力损害和外毛细胞(OHC)丧失的相关性,初步探讨OHC丧失的机制。方法利用听性脑干反应(ABR)、抗小鼠耳蜗毛细胞特异性的肌浆球蛋白7a(Mysoin7a)抗体免疫染色和耳蜗连续切... 目的研究发育和成熟过程中的prestin基因敲除小鼠听力特征,比较其听力损害和外毛细胞(OHC)丧失的相关性,初步探讨OHC丧失的机制。方法利用听性脑干反应(ABR)、抗小鼠耳蜗毛细胞特异性的肌浆球蛋白7a(Mysoin7a)抗体免疫染色和耳蜗连续切片观察出生后(postnatal,P)14天(P14)~P56的prestin基因敲除纯合子(prestin-/-)、杂合子(prestin+/-)和野生型(prestin+/+)小鼠听阈、耳蜗毛细胞和Corti器的改变。结果P14的prestin-/-小鼠听阈较prestin+/+升高25dBSPL,至P21和P28,听阈分别提高49dB和52dB,P35后听阈改变不明显。在P21的prestin-/-小鼠,32kHz听阈提高46dB;prestin+/-也显示约3.5dB的听阈升高(p<0.0001)。Prestin-/-小鼠在P28以前无明显的OHC丧失,但是,OHC的长度较prestin+/+明显缩短,P28以后,OHC丧失进行性加重。内毛细胞(IHC)丧失明显延迟和轻于OHC。结论Prestin-/-小鼠在毛细胞丧失之前呈现明显的听力损害,OHC的丧失可能与其本身的结构改变和成熟过程中的代谢异常有关。 展开更多
关键词 prestin 小鼠 听力损害 内毛细胞 听力特征 基因敲除
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年龄相关听力损失DBA/2J小鼠耳蜗毛细胞马达蛋白-prestin表达下调与耳聋的关系 被引量:8
5
作者 李胜利 武坤毅 +1 位作者 任晓勇 翟所强(审核人) 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期562-569,共8页
目的老年性聋亦称年龄相关性听力损失,主要是听觉器官退行性改变所致。许多研究已证明prestin与内耳的声强感觉和频率分辨密切相关,我们推测老年性聋与耳蜗毛细胞prestin的表达具有一定的关系,本研究探讨prestin在耳蜗毛细胞表达的改变... 目的老年性聋亦称年龄相关性听力损失,主要是听觉器官退行性改变所致。许多研究已证明prestin与内耳的声强感觉和频率分辨密切相关,我们推测老年性聋与耳蜗毛细胞prestin的表达具有一定的关系,本研究探讨prestin在耳蜗毛细胞表达的改变在老年性聋发病机制的作用,期望为老年性聋的防治提供依据。方法采用快速老化DBA/2J小鼠,对4,8,16和32周龄(W)的48只小鼠进行听觉脑干诱发电位(ABR)测定。耳蜗快速取材固定,全耳蜗铺片行毛细胞记数,免疫组化荧光标记prestin在耳蜗毛细胞的表达,激光共聚焦显微镜进行观察。Western biotting进行prestin蛋白定量分析。结果耳蜗毛细胞记数结果可见4周龄DBA/2J小鼠的耳蜗基底回有56.35%外毛细胞(outer hair cells,OHCs)消失,中回仅有个别消失,顶回有11.07%的OHCs消失;到8W时,DBA/2J小鼠的耳蜗基底回有97.85%OHCs消失,中回12.7%OHCs消失,顶回近20%的OHCs消失;16周龄时基底回OHCs完全消失,中回有80%的消失,顶回有30%的消失;DBA/2J老化小鼠到32W时,基底回OHCs已全部消失,中回也基本消失殆尽达99.5%,顶回的OHCs有80%左右消失。同时,在4W时OHCs prestin的表达从基底回到顶回均有较强的表达;到8W时耳蜗OHCs prestin的表达整体下降,与4W时相比表达下降十分显著(P≤0.01);到16W时,耳蜗OHCsprestin的表达下降更明显。与其相对应的是ABR反应阈值随年龄增长显著升高。Prestin表达与细胞核显示同时存在,OHCs消失同时prestin表达亦消失。结论本实验结果证明,年龄相关听力损失DBA/2J小鼠的耳蜗OHCsprestin表达随听力损失而正向表达下降,毛细胞消失部位有prestin表达的消失。说明prestin表达下降是导致老年性聋的重要因素之一,其结果可能是导致老年性聋发生的分子机制之一。 展开更多
关键词 老年性聋 耳蜗 毛细胞 prestin
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慢性注射水杨酸钠使大鼠耳蜗prestin表达上调 被引量:3
6
作者 黄治物 杨琨 肖伯奎 《中华耳科学杂志》 CSCD 2010年第4期451-455,共5页
目的前期研究表明急性及慢性注射水杨酸钠可致豚鼠畸变产物耳声发射(distortion productot oacoustic emissions,DPOAE)幅值可逆性改变。本研究通过对急性及慢性水杨酸钠肌注后,大鼠耳蜗prestin基因mRNA及其蛋白表达的检测,探讨其引起DP... 目的前期研究表明急性及慢性注射水杨酸钠可致豚鼠畸变产物耳声发射(distortion productot oacoustic emissions,DPOAE)幅值可逆性改变。本研究通过对急性及慢性水杨酸钠肌注后,大鼠耳蜗prestin基因mRNA及其蛋白表达的检测,探讨其引起DPOAE幅值改变的可能机制。方法实验动物随机分为慢性组、急性组、慢性恢复组、正常对照组。各组大鼠断头处死后迅速剥离耳蜗;采用基于Taqman探针的荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction,real-time RT-PCR)及Western blot(蛋白质印迹)方法,检测各组大鼠耳蜗prestin基因mRNA及其蛋白的表达变化。结果 (1)慢性组prestin基因mRNA及其蛋白表达水平较正常组高,差异有显著性(P<0.05),其中mRNA上调2.25倍;(2)急性水杨酸钠注射组prestin基因mRNA及其蛋白表达量水平与正常对照组无显著性差异(P>0.05);(3)慢性注射水杨酸钠后恢复28天,大鼠耳蜗中prestin基因mRNA及其蛋白表达水平与正常对照组无显著性差异(P>0.05)。结论 (1)急性注射水杨酸钠对耳蜗prestin基因的表达无影响;(2)长期注射水杨酸钠使耳蜗prestin基因表达可逆性上调可能是其引起DPOAE幅值增加的主要原因,推测水杨酸钠致耳鸣极可能起源于OHC水平,为水杨酸钠致耳鸣的机制提供了重要的实验依据。 展开更多
关键词 耳鸣 水杨酸钠 外毛细胞 prestin
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氧化应激损伤与HEI-OC1细胞株中Prestin表达的相关性分析 被引量:1
7
作者 王军义 赖晓敏 +2 位作者 龚丽娟 夏源 王致 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期49-52,共4页
目的观察氧化应激损伤对HEI-OC1细胞Prestin表达的影响,探讨感音性聋的发生机制。方法采用不同浓度(50、100、200μM)双氧水(H_2O_2)染毒培养的HEI-OC1细胞(染毒组),对照组细胞加入无药物培养液,24h后检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活... 目的观察氧化应激损伤对HEI-OC1细胞Prestin表达的影响,探讨感音性聋的发生机制。方法采用不同浓度(50、100、200μM)双氧水(H_2O_2)染毒培养的HEI-OC1细胞(染毒组),对照组细胞加入无药物培养液,24h后检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力,实时荧光定量PCR检测Prestin mRNA表达水平,免疫荧光法分析Prestin表达水平。结果与对照组相比,氧化应激损伤后染毒组的HEI-OC1细胞SOD活力明显下降,尤以200μM H_2O_2染毒组下降更明显(F=9 926.293,P<0.01);氧化应激损伤的HEI-OC1细胞Prestin mRNA和Prestin蛋白表达水平均明显下降,200μM H_2O_2染毒组下降更明显(F=4 065.046、7 657.217,P<0.01)。结论氧化应激损伤可抑制Prestin的表达,此为感音性聋的重要病理学变化。 展开更多
关键词 氧化应激 HEI-OC1细胞 prestin
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哺乳动物耳蜗外毛细胞的马达蛋白:Prestin 被引量:2
8
作者 于利 汤浩 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期53-56,共4页
近几年的研究发现,在耳蜗基底膜的外毛细胞膜上有一种新奇的蛋白质:prestin(马达蛋白),它能感受细胞膜电位的变化,进而发生构象改变,引发外毛细胞的形状和表面积的改变。Prestin作为一种独特的马达蛋白,能驱动耳蜗外毛细胞的电能动性(el... 近几年的研究发现,在耳蜗基底膜的外毛细胞膜上有一种新奇的蛋白质:prestin(马达蛋白),它能感受细胞膜电位的变化,进而发生构象改变,引发外毛细胞的形状和表面积的改变。Prestin作为一种独特的马达蛋白,能驱动耳蜗外毛细胞的电能动性(electrom otility),产生耳蜗的放大器作用,因而使哺乳动物的听觉具有高度的敏感性,广阔的听觉域,敏锐的频率选择性。这种蛋白质的缺失或基因的突变会导致听觉功能严重受损,对于prestin的深入细致的研究,也许可以使人们进一步认识和理解哺乳动物的听觉调谐机制,通过对这种蛋白质基因的表达的调控,是否能够防治一些与之相关的疾病?这或许将是今后听觉研究领域的一个重要课题。 展开更多
关键词 外毛细胞 电能动性 马达蛋白 prestin
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水杨酸对prestin无表达小鼠耳蜗噪声性损伤的作用 被引量:1
9
作者 刘丹政 王德辉 +1 位作者 周梁 王建中 《中国眼耳鼻喉科杂志》 2008年第4期217-219,I0001,共4页
目的探讨水杨酸对prestin无表达小鼠耳蜗噪声性损伤的保护作用。方法以出生20-28d的prestin无表达小鼠30只为研究对象,分为A组(噪声暴露前单次注射水杨酸10只)、B组(噪声暴露前单次注射生理盐水10只)和C组(空白对照组10只)。对... 目的探讨水杨酸对prestin无表达小鼠耳蜗噪声性损伤的保护作用。方法以出生20-28d的prestin无表达小鼠30只为研究对象,分为A组(噪声暴露前单次注射水杨酸10只)、B组(噪声暴露前单次注射生理盐水10只)和C组(空白对照组10只)。对比观察各组小鼠处理后不同时刻听性脑于反应(auditory brainstem response,ABR)阈值、基底膜扫描和透射电镜情况。结果噪声暴露后第1天和第8天,A,B两组小鼠ABR阈值均较C组显著升高,但两组间差异无统计学意义(均P〉0.05)。噪声暴露后第8天,A,B两组小鼠扫描电镜观察均可见噪声损伤表现,差异不明显;而透射电镜显示B组外毛细胞胞浆内出现明显空泡化改变。结论噪声暴露前给予水杨酸干预对prestin无表达小鼠耳蜗噪声性损伤具有轻微保护作用,这种保护作用主要反映在形态学上,并在噪声损伤后期更易显现出来。 展开更多
关键词 水杨酸 噪声性损伤 prestin
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大鼠Prestin-3'UTR双荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定
10
作者 王军义 夏源 +2 位作者 张川 朱艳丽 杨湘宁 《中国工业医学杂志》 CAS 2015年第1期8-10,37,共4页
目的构建大鼠Prestin基因(SLC26A5)3'端UTR区双荧光素酶报告系统,为研究Prestin基因的microRNA调控提供基础平台。方法以C6细胞基因组DNA为模板PCR扩增SLC26A5基因的3'UTR序列,并连接至pmri-RBREPORTTM双荧光素酶报告载体多克... 目的构建大鼠Prestin基因(SLC26A5)3'端UTR区双荧光素酶报告系统,为研究Prestin基因的microRNA调控提供基础平台。方法以C6细胞基因组DNA为模板PCR扩增SLC26A5基因的3'UTR序列,并连接至pmri-RBREPORTTM双荧光素酶报告载体多克隆位点,测序验证插入序列并转染入293T细胞检测其荧光素酶活性。结果测序结果表明PMIR-3'UTR的插入序列正确,在转染入293T细胞后其荧光素酶能正常表达。结论大鼠Prestin-3'UTR双荧光素酶报告基因载体构建成功。 展开更多
关键词 prestin 3'非编码区 双荧光素酶报告载体 大鼠
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乳鼠耳蜗单离外毛细胞胞膜Prestin分布的实验研究
11
作者 张博 尹时华 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第30期3178-3179,共2页
目的探讨乳鼠耳蜗外毛细胞(OHC)细胞膜上动力蛋白Prestin的分布。方法获取7日龄的Wistar乳鼠单离的耳蜗OHC,利用Prestin特异性抗体染色,在荧光显微镜下观察Prestin在OHC细胞膜上的表达与分布。结果单离OHC侧膜存在较为均一的Prestin抗... 目的探讨乳鼠耳蜗外毛细胞(OHC)细胞膜上动力蛋白Prestin的分布。方法获取7日龄的Wistar乳鼠单离的耳蜗OHC,利用Prestin特异性抗体染色,在荧光显微镜下观察Prestin在OHC细胞膜上的表达与分布。结果单离OHC侧膜存在较为均一的Prestin抗体阳性染色;OHC基底部细胞膜亦见阳性染色,但较弱;侧膜与底端细胞膜结合部位未见阳性染色。结论 Prestin主要分布在Wistar乳鼠耳蜗OHC的侧膜,基底部膜也有少量表达。 展开更多
关键词 乳鼠 耳蜗 外毛细胞 prestin
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Prestin——一种新型的分子马达蛋白
12
作者 郭维 杨伟炎 《中华耳科学杂志》 CSCD 2003年第3期64-64,23,共2页
近三年来,Prestin,一种新型的耳蜗外毛细胞的转膜蛋白的发现,引起了分子细胞学家及听觉生理学家的极大关注,这个蛋白的发现在解释哺乳动物耳蜗的高度敏感性及频率选择特性以及外毛细胞的电动特性机制上具有重要意义.
关键词 外毛细胞 耳蜗 马达蛋白 哺乳动物 频率选择 敏感性 迷路 内毛细胞 prestin
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不同剂量放射线对小鼠畸变产物耳声发射和外毛细胞Prestin蛋白表达的影响 被引量:2
13
作者 赵向东 梁勇 +1 位作者 任陈 袁亚维 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期267-271,共5页
目的探讨单次不同剂量放射线照射对小鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的影响及放射线照射导致感音神经性聋的可能机制。方法选取48只健康的Balb/c小鼠随机分成4组,每组12只(耳),分别给予0(对照组)、8(第1组)、... 目的探讨单次不同剂量放射线照射对小鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的影响及放射线照射导致感音神经性聋的可能机制。方法选取48只健康的Balb/c小鼠随机分成4组,每组12只(耳),分别给予0(对照组)、8(第1组)、12(第2组)、16Gy(第3组)放射剂量的放射线照射,在照射后第7天对4组小鼠行DPOAE检测,同时分别采用Western-Blot分析和荧光实时定量中PCR检测4组小鼠耳蜗组织Prestin蛋白及Prestin mRNA表达的变化情况。结果放射线照射第7天时,第1、2和3组小鼠3、4、6、8、10和12kHz DPOAE幅值均较正常对照组小鼠明显降低(均P<0.05),正常对照组、第1、2和3组小鼠3、4、6、10、12kHz DPOAE幅值依次减小(均P<0.05);第1、2和3组小鼠耳蜗组织Prestin蛋白及Prestin mRNA的表达均较正常对照组小鼠下降(均P<0.05),正常对照组、第1组、第2组和第3组小鼠耳蜗组织Prestin蛋白及PrestinmRNA的表达依次下降(均P<0.05)。结论单次放射线照射可损伤小鼠的听觉功能,使小鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白及Prestin mRNA的表达下调,下调程度与照射剂量的大小呈正相关性;放射线致感音神经性听力损失可能与其导致耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达下调有关。 展开更多
关键词 BALB C小鼠 放射线 外毛细胞 prestin蛋白 畸变产物耳声发射
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阿司匹林联合中药复聪汤对老年性聋小鼠耳蜗外毛细胞存活及prestin蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 武坤毅 李胜利 +2 位作者 姬媛媛 樊小军 刘全征 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期656-662,共7页
目的探讨中西药联合应用上调耳蜗外毛细胞(outer hair cells, OHCs)prestin蛋白表达及促进耳蜗毛细胞存活的影响,为老年性聋的预防和治疗提供参考。方法选用4周龄DBA/2J小鼠120只,雌雄各半,分为六组:200 mg/kg阿司匹林加中药复聪汤治疗... 目的探讨中西药联合应用上调耳蜗外毛细胞(outer hair cells, OHCs)prestin蛋白表达及促进耳蜗毛细胞存活的影响,为老年性聋的预防和治疗提供参考。方法选用4周龄DBA/2J小鼠120只,雌雄各半,分为六组:200 mg/kg阿司匹林加中药复聪汤治疗组、200 mg/kg阿司匹林治疗组、100 mg/kg阿司匹林加中药复聪汤治疗组、100 mg/kg阿司匹林治疗组、中药复聪汤治疗组和饮水对照组,每组20只。在试验前、治疗30、60和90天后检测各组动物ABR反应阈;在治疗90天后,处死动物,取出耳蜗,分别进行耳蜗全基底膜免疫组化prestin表达标记、硝酸银染色全耳蜗铺片毛细胞计数观察、扫描电镜观察和Western blot耳蜗蛋白印迹检测。结果实验前6组小鼠ABR反应阈(均为40~50 dB SPL)差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,疗效最好的是200 mg/kg阿司匹林加中药复聪汤治疗组(治疗后30、60、90天ABR反应阈值分别为46.38±6.66、44.44±5.33、48.91±4.12 dB SPL),其次是单独中药复聪汤治疗组(治疗后30、60、90天ABR反应阈值分别为50.02±0.00、50.88±8.28、53.13±3.28 dB SPL),这两组治疗90天后与治疗前比较ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05),其余各组治疗90天后ABR反应阈较治疗前明显升高(P<0.05)。prestin蛋白表达强度在200 mg/kg阿司匹林加中药复聪汤治疗组最强,200 mg/kg阿司匹林治疗组渐弱,100 mg/kg阿司匹林加中药复聪汤治疗组最弱, 100 mg/kg阿司匹林治疗组、单独中药复聪汤治疗组和饮水对照组几乎没有表达。耳蜗铺片毛细胞计数和扫描电镜观察毛细胞的病变程度显示单独中药治疗组效果最好,其次是200 mg/kg阿司匹林加中药治疗组,这与ABR反应阈值和OHCs prestin表达强度不一致。结论 200 mg/kg阿司匹林联合中药复聪汤对老年性聋小鼠耳蜗OHCs prestin蛋白表达上调明显,对听功能和毛细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 老年性聋 毛细胞 prestin 复聪汤
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不同日龄乳鼠耳蜗外毛细胞底部Prestin蛋白的分布 被引量:2
15
作者 王显红 张博 尹时华 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期407-408,共2页
目的探讨不同日龄乳鼠耳蜗外毛细胞(OHC)底部Prestin蛋白的分布。方法分别取3、7、10日龄的Wistar乳鼠单离的耳蜗OHC,利用Prestin特异性抗体染色,在荧光显微镜下观察Prestin蛋白在单离OHC底部细胞膜上的表达与分布。结果 3天组乳鼠单离... 目的探讨不同日龄乳鼠耳蜗外毛细胞(OHC)底部Prestin蛋白的分布。方法分别取3、7、10日龄的Wistar乳鼠单离的耳蜗OHC,利用Prestin特异性抗体染色,在荧光显微镜下观察Prestin蛋白在单离OHC底部细胞膜上的表达与分布。结果 3天组乳鼠单离OHC底部细胞膜无Prestin蛋白的阳性染色;7天和10天组乳鼠的OHC底部细胞膜的中央部分可见Prestin蛋白的阳性染色。3、7、10天组中OHC基底膜上Prestin蛋白的光密度值分别为0.001±0.000、0.868±0.033、1.007±0.012,各时间点之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同日龄乳鼠OHC基底膜Prestin蛋白的分布存在差异,随月龄增加,Prestin蛋白表达逐渐增强。 展开更多
关键词 耳蜗 外毛细胞 prestin蛋白
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耳蜗外毛细胞Prestin蛋白调控机制的研究现状 被引量:1
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作者 罗璇 夏云 王军义 《听力学及言语疾病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期320-324,共5页
世界卫生组织于2015年报道,全世界人口的5%,即3.6亿人患有残疾性听力损失,严重影响人类的生活质量并对国家及社会的经济产生重大影响。目前尚无药物能彻底治愈感音性聋,根本原因在于哺乳类动物耳蜗外毛细胞(outer hair cells,OHCs)的... 世界卫生组织于2015年报道,全世界人口的5%,即3.6亿人患有残疾性听力损失,严重影响人类的生活质量并对国家及社会的经济产生重大影响。目前尚无药物能彻底治愈感音性聋,根本原因在于哺乳类动物耳蜗外毛细胞(outer hair cells,OHCs)的死亡不可逆性,应用药物治疗促使其恢复正常是不可能的。 展开更多
关键词 外毛细胞 prestin蛋白 感音性聋 听力损失 不可逆性 药物治疗 基因转录调控 内耳毛细胞 转录因子 耳蜗功能
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Prestin在Spag6基因敲除小鼠外毛细胞中的表达
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作者 王镜涵 李霄飞 +2 位作者 张志兵 王海波 李建峰 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第8期16-22,共7页
目的探究prestin在精子相关抗原6(Spag6)基因敲除小鼠中的表达及其与SPAG6之间的关系。方法获取小鼠耳蜗基底膜组织,进行免疫染色,采用共聚焦显微镜观察prestin与SPAG6在毛细胞中的共同分布。比较野生小鼠(Spag6+/+)、杂合型小鼠(Spag6+... 目的探究prestin在精子相关抗原6(Spag6)基因敲除小鼠中的表达及其与SPAG6之间的关系。方法获取小鼠耳蜗基底膜组织,进行免疫染色,采用共聚焦显微镜观察prestin与SPAG6在毛细胞中的共同分布。比较野生小鼠(Spag6+/+)、杂合型小鼠(Spag6+/-)和同窝基因敲除小鼠(Spag6-/-)外毛细胞prestin的荧光强度差异和毛细胞的形态改变,并以蛋白印记实验和实时定量聚合酶链反应检测3种基因型小鼠的prestin表达水平。结果SPAG6存在于野生型和杂合型成年小鼠的外毛细胞中,在表皮板处呈阳性表达,与prestin共同分布于外毛细胞的外侧壁处。基因敲除小鼠prestin的荧光强度较野生小鼠更弱,并且外毛细胞出现形态异常。蛋白印迹实验和实时定量聚合酶链反应均显示,基因敲除小鼠prestin表达量显著降低。结论SPAG6参与外毛细胞的构成,且影响外毛细胞prestin表达,提示两种蛋白之间存在相互作用。 展开更多
关键词 精子相关抗原6 prestin 外毛细胞 基因敲除小鼠 听觉障碍
原文传递
噪声性听力损失与耳蜗外毛细胞Prestin蛋白的相关性分析 被引量:7
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作者 陈秉 夏源 +2 位作者 王海涛 杨翠婵 王军义 《中国工业医学杂志》 CAS 2015年第2期92-94,F0003,共4页
目的探讨噪声性听力损失(NIHL)与耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的关系。方法将60只成年豚鼠随机分5组,除对照组外分别予以不同噪声声压级(85、95、105、115 d B SPL)的高斯白噪声暴露(28 d,6 h/d),而后检测听性脑干反应(ABR)以确定听阈... 目的探讨噪声性听力损失(NIHL)与耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的关系。方法将60只成年豚鼠随机分5组,除对照组外分别予以不同噪声声压级(85、95、105、115 d B SPL)的高斯白噪声暴露(28 d,6 h/d),而后检测听性脑干反应(ABR)以确定听阈位移水平,同时进行耳蜗病理学检查,采用免疫组化法分析耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达水平。结果各组豚鼠平均永久性听阈位移水平变化随着噪声暴露声压级的增强而增加(F=308.655,P<0.01),强噪声声压级组(>105 d B SPL)豚鼠的病理形态学显示明显的毛细胞损失,Prestin蛋白表达水平在高于95 d B SPL时随着噪声暴露声压级的增加而上调(F=700.072,P<0.01)。结论耳蜗外毛细胞Prestin的表达增高,与耳蜗外毛细胞损失程度有关。 展开更多
关键词 噪声性听力损失 Presin蛋白 耳蜗外毛细胞 免疫组化
原文传递
单次放射线照射早期Balb/c小鼠畸变产物耳声发射变化和耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的实验观察
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作者 赵向东 梁勇 +1 位作者 任陈 袁亚维 《中国听力语言康复科学杂志》 2013年第1期19-23,共5页
目的探讨放射线照射早期对Balb/c小鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗外毛细胞Prestin蛋白的影响及放射线照射导致感音神经性耳聋的可能机制。方法建立放疗早期感音神经性耳聋(sensorineural hearing loss,SNHL)Balb/c小鼠模型。... 目的探讨放射线照射早期对Balb/c小鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗外毛细胞Prestin蛋白的影响及放射线照射导致感音神经性耳聋的可能机制。方法建立放疗早期感音神经性耳聋(sensorineural hearing loss,SNHL)Balb/c小鼠模型。检测一次性给予单侧耳总放射剂量为16Gy的放射线之前.照射后第3天.照射后第7天小鼠畸变产物耳声发射幅值,比较放射线照射前后小鼠听觉生理功能的变化情况。提取小鼠耳蜗组织蛋白及mRNA,通过Western blot及逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测各组小鼠耳蜗Prestin蛋白及其基因Prestin mRNA的表达。结果成功建立了放疗早期SNHL Balb/c小鼠模型。照射后第3天组及照射后第7天组小鼠在3、4、6,8、10和12kHz时的DPOAE幅值较照射前组小鼠均降低,照射后第7天组小鼠的DPOAE幅值在大部分频率上要比照射后第3天组小鼠的DPOAE幅值要低。照射后第3天组及照射后第7天组小鼠的耳蜗Prestin蛋白及其基因PrestinmRNA的表达较照射前组小鼠出现一致性下降,照射后第7天组小鼠的耳蜗Prestin蛋白及其基因PrestinmRNA的表达较照射后第3天组小鼠下调。结论放射线照射早期即可影响小鼠的听觉生理功能。放射线照射早期可使耳蜗外毛细胞Prestin蛋白及其基因PrestinmRNA的表达下调。本研究表明放射线照射导致SNHL可能与放射线照射引起耳蜗外毛细胞Prestin蛋白功能表达的改变有关。 展开更多
关键词 BALB C小鼠 放射治疗 外毛细胞 prestin蛋白 畸变产物耳声发射 感音神经性聋
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Atoh1过表达水平对异位耳蜗毛细胞样细胞的prestin表达及纤毛形态的影响
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作者 郑宇 马锐 +1 位作者 迟放鲁 赵萌 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期197-204,共8页
目的探讨Atoh1过表达水平对体外培养的耳蜗小上皮嵴区域毛细胞样细胞数量、prestin表达情况及其表面纤毛形态的影响。方法取出生后第1天的大鼠耳蜗中圈进行体外培养,之后采用不同浓度的带有Atoh1基因的腺病毒(含报告基因EGFP)进行转染,... 目的探讨Atoh1过表达水平对体外培养的耳蜗小上皮嵴区域毛细胞样细胞数量、prestin表达情况及其表面纤毛形态的影响。方法取出生后第1天的大鼠耳蜗中圈进行体外培养,之后采用不同浓度的带有Atoh1基因的腺病毒(含报告基因EGFP)进行转染,检测腺病毒转染后不同时间点体外培养组织的Atoh1 mRNA相对表达量,同时观察小上皮嵴区域绿色荧光蛋白信号强度、毛细胞样细胞数量、毛细胞样细胞的prestin表达情况及其表面纤毛形态。结果带有Atoh1基因的腺病毒转染浓度越高,Atoh1的mRNA表达水平越高,小上皮嵴区域绿色荧光蛋白信号越强,同时该区域生成的毛细胞样细胞数量越多,表达prestin的毛细胞样细胞数量也越多(P<0.05),并且这些细胞表面静纤毛由低到高排列,形态更为规则。结论Atoh1过表达水平与诱导生成的能够表达prestin的异位耳蜗毛细胞样细胞数量正相关,并且Atoh1过表达水平越高,这些细胞的表面纤毛形态越规则。 展开更多
关键词 Atoh1 小上皮嵴 prestin 纤毛 毛细胞样细胞
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