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PRDX5基因启动子的荧光素酶报告质粒的构建
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作者 胡乐林 《医学信息(医学与计算机应用)》 2014年第16期243-244,共2页
目的:构建含PRDX5基因启动子的荧光素酶报告质粒。方法①通过生物信息学方法,查询PRDX5基因启动子核酸序列;②使用PCR扩增人PRDX5基因启动子片段,将启动子插入到pGL3-Basic载体中,构建含PRDX5基因启动子片段的荧光素酶报告质粒;③双酶... 目的:构建含PRDX5基因启动子的荧光素酶报告质粒。方法①通过生物信息学方法,查询PRDX5基因启动子核酸序列;②使用PCR扩增人PRDX5基因启动子片段,将启动子插入到pGL3-Basic载体中,构建含PRDX5基因启动子片段的荧光素酶报告质粒;③双酶切及测序确定 PRDX5基因启动子的荧光素酶报告质粒扩增正确。结果 PCR扩增的PRDX5启动子片段插入到载体中,经测序证实正确。结论成功构建含PRDX5启动子的荧光素酶报告质粒。 展开更多
关键词 prdx5 启动子 荧光素酶报告基因
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藏绵羊PRDX5基因的克隆及其在睾丸中的表达 被引量:2
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作者 陈娜娜 安雪姣 +3 位作者 满永恒 李讨讨 王霞 马友记 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1015-1023,共9页
过氧化物氧化还原酶5(PRDX5)是一种硫氧还蛋白,参与机体多种生物学过程。为了研究PRDX5基因在藏绵羊(Ovis aries)睾丸发育和精子发生过程中的作用,本研究以不同发育阶段(3月龄、1周岁和3周岁)的藏绵羊为研究对象,克隆了PRDX5基因的CDS区... 过氧化物氧化还原酶5(PRDX5)是一种硫氧还蛋白,参与机体多种生物学过程。为了研究PRDX5基因在藏绵羊(Ovis aries)睾丸发育和精子发生过程中的作用,本研究以不同发育阶段(3月龄、1周岁和3周岁)的藏绵羊为研究对象,克隆了PRDX5基因的CDS区,并对其进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色法,对PRDX5基因在藏绵羊睾丸不同发育阶段的表达和分布进行了检测。结果显示,PRDX5基因CDS区全长659 bp,可编码219个氨基酸;蛋白质结构预测显示PRDX5以α-螺旋为主,无信号肽;系统进化树显示,藏绵羊PRDX5基因与山羊(Capra hircus)亲缘关系最近;1周岁(性成熟期)和3周岁(成年)藏绵羊睾丸中PRDX5 mRNA相对表达量极显著(P<0.01)高于3月龄(性成熟前),但PRDX5蛋白表达量极显著(P<0.01)低于3月龄,且两者在性成熟后趋于稳定;PRDX5蛋白在藏绵羊睾丸不同发育阶段的支持细胞和间质细胞中均有表达。推测PRDX5基因可能通过调节细胞内ROS的水平影响精子发生微环境,从而调控精子发生过程。 展开更多
关键词 过氧化物氧化还原酶5(prdx5) 睾丸 基因克隆 支持细胞 间质细胞 表达 定位
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siRNA干扰PRDX5基因对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响
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作者 张英 杨长群 李荟芹 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期4790-4794,共5页
为了探讨PRDX5对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制,本研究运用RNA干扰技术使子宫内膜癌细胞系RL-952中PRDX5低表达;采用MTT法检测RL-952细胞增殖能力;使用流式细胞术检测RL-952细胞凋亡;采用Western blotting法检测RL-952细胞P... 为了探讨PRDX5对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制,本研究运用RNA干扰技术使子宫内膜癌细胞系RL-952中PRDX5低表达;采用MTT法检测RL-952细胞增殖能力;使用流式细胞术检测RL-952细胞凋亡;采用Western blotting法检测RL-952细胞PRDX5、Bcl-2、Notch1及Hes1蛋白水平。Western blotting结果显示,PRDX5-siRNA能够成功降低PRDX5的表达水平;siRNA下调PRDX5表达后,子宫内膜癌RL-952细胞增殖能力显著降低(p<0.05),细胞的凋亡率明显增加,而抗凋亡蛋白Bcl-2显著下调(p<0.05)。此外,本研究还发现PRDX5降低可显著下调Notch1及Hes1蛋白表达水平。本研究初步认为,siRNA干扰PRDX5的表达能够抑制子宫内膜癌细胞的增殖能力及促进细胞凋亡,其作用机制可能涉及对Notch1信号通路的抑制作用。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 prdx5 细胞增殖 细胞凋亡 NOTCH1 信号通路
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The synergistic effects of PRDX5 and Nrf2 on lung cancer progression and drug resistance under oxidative stress in the zebrafish models
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作者 SITONG QIAN YING FANG +11 位作者 CHENGYUN YAO YONGSHENG WANG ZHI ZHANG XIAOHUA WANG JIN GAO YONG FENG LEI SUN RUNYUE ZOU GUOREN ZHOU JINJUN YE RUIXUE XIA HONGPING XIA 《Oncology Research》 SCIE 2022年第2期53-64,共12页
Previous studies have shown that PRDX5 and Nrf2 are antioxidant proteins related to abnormal reactive oxidative species(ROS).PRDX5 and Nrf2 play a critical role in the progression of inflammations and tumors.The combin... Previous studies have shown that PRDX5 and Nrf2 are antioxidant proteins related to abnormal reactive oxidative species(ROS).PRDX5 and Nrf2 play a critical role in the progression of inflammations and tumors.The combination of PRDX5 and Nrf2 was examined by Co-immunoprecipitation,western blotting and Immunohistochemistry.H2O2 was applied to affect the production of ROS and induced multi-resistant protein 1(MRP1)expression in NSCLC cells.The zebrafish models mainly investigated the synergistic effects of PRDX5 and Nrf2 on lung cancer drug resistance under oxidative stress.We showed that PRDX5 and Nrf2 form a complex and significantly increase the NSCLC tissues compared to adjacent tissues.The oxidative stress improved the combination of PRDX5 and Nrf2.We demonstrated that the synergy between PRDX5 and Nrf2 is positively related to the proliferation and drug resistance of NSCLC cells in the zebrafish models.In conclusion,our data indicated that PRDX5 could bind to Nrf2 and has a synergistic effect with Nrf2.Meanwhile,in the zebrafish models,PRDX5 and Nrf2 have significant regulatory impacts on lung cancer progression and drug resistance activities under oxidative stress. 展开更多
关键词 prdx5 NRF2 Oxidative stress Lung cancer Drug resistance Zebrafish models
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LncRNA DSCAM-AS1调节miR-431-5p/PRDX1信号轴对肝癌细胞恶性进展的影响 被引量:1
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作者 陈志飞 孙伟涛 +4 位作者 颜廷启 孙江江 石彦科 于生才 黄伟 《广东医学》 2025年第2期167-175,共9页
目的探究长链非编码RNA(LncRNA)DSCAM-AS1调节微小RNA-431-5p(miR-431-5p)/过氧化物氧化还原蛋白1(PRDX1)信号轴对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人正常肝细胞... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)DSCAM-AS1调节微小RNA-431-5p(miR-431-5p)/过氧化物氧化还原蛋白1(PRDX1)信号轴对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人正常肝细胞系L02以及人肝癌细胞系Hep G2中LncRNA DSCAM-AS1、miR-431-5p水平;将si-DSCAM-AS1+miR-431-5p inhibitor、si-DSCAM-AS1+inhibitor NC、si-DSCAM-AS1、si-NC分别转染至Hep G2细胞并记为si-DSCAM-AS1+miR-431-5p inhibitor组、si-DSCAM-AS1+inhibitor NC组、si-DSCAM-AS1组、si-NC组,未作处理的Hep G2细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA DSCAM-AS1与miR-431-5p、PRDX1的关系;qRT-PCR检测Hep G2细胞中LncRNA DSCAM-AS1、miR-431-5p表达;噻唑蓝(MTT)法检测Hep G2细胞增殖情况;流式细胞术检测Hep G2细胞凋亡率;Transwell检测Hep G2细胞侵袭、迁移数量;蛋白质印迹法(Western blot)检测Hep G2细胞Ki-67、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏附素(E-cadherin)、PRDX1蛋白表达。结果与L02细胞相比,Hep G2细胞LncRNA DSCAM-AS1表达水平、PRDX1蛋白表达显著上调(P<0.05),miR-431-5p表达水平显著下调(P<0.05)。与NC组、si-NC组相比,si-DSCAM-AS1组Hep G2细胞A570、LncRNA DSCAM-AS1表达、侵袭细胞数量、N-cadherin、迁移细胞数量、Vimentin蛋白表达、Ki-67显著下降(P<0.05),Hep G2细胞凋亡率、miR-431-5p表达水平、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05);而抑制miR-431-5p表达削弱了沉默LncRNA DSCAM-AS1抑制Hep G2细胞增殖、迁移、侵袭的作用;LncRNA DSCAM-AS1负向调控miR-431-5p/PRDX1轴。结论沉默LncRNA DSCAM-AS1可能通过上调miR-431-5p来下调PRDX1的表达,诱导细胞凋亡,并抑制肝癌细胞增殖和EMT,进而抑制肝癌细胞系Hep G2的恶性进展。 展开更多
关键词 LncRNA DSCAM-AS1 miR-431-5p/PRDX1轴 肝癌 增殖 凋亡 上皮间质转化 迁移 侵袭
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杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制 被引量:8
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作者 任虹 刘娟 +1 位作者 于桂泳 李美 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1144-1149,共6页
目的杜仲苷影响软骨细胞增殖和凋亡的分子机制尚未完全清楚。文中旨在研究杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及分子机制。方法取对数生长期软骨细胞,分别用终浓度为10、100、500、1000μmol/L的杜仲苷处理,分别为杜仲苷10μmol/... 目的杜仲苷影响软骨细胞增殖和凋亡的分子机制尚未完全清楚。文中旨在研究杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及分子机制。方法取对数生长期软骨细胞,分别用终浓度为10、100、500、1000μmol/L的杜仲苷处理,分别为杜仲苷10μmol/L组、杜仲苷100μmol/L组、杜仲苷500μmol/L组、杜仲苷1000μumol/L组,对照组为正常培养的细胞。检测不同浓度杜仲苷对骨关节炎软骨细胞增殖的影响,并选出最佳杜仲苷浓度作后续实验,为杜仲苷组。取对数生长期软骨细胞,无血清重悬后进行转染,分为pcDNA组(转染peDNA)、pcDNA-Prdx5组(转染peDNA-Prdx5 mimics)、杜仲苷+si-NC组(转染si-NC后用500 μmol/L杜仲苷处理)、杜仲苷+si-Prdx5组(转染si-Prdx5后用500 μmol/L杜仲苷处理)。qRT-PCR检测骨关节炎软骨细胞中Prdx5mRNA的表达水平;Westernblot检测Prdx5蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组比较,随着杜仲苷浓度的升高,骨关节炎软骨细胞的活性逐渐升高(P<0.05),选用500μmoVL杜仲苷作后续实验。流式细胞仪检测结果显示,杜仲苷组骨关节炎软骨细胞的凋亡率[(7.89±1.03)%]较对照组[(18.76±1.24)%]显著降低(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot检测结果显示,与对照组比较,杜仲苷组Bel-2、Prdx5的mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。peDNA-Prdx5组Prdx5蛋白的表达水平、骨关节炎软骨细胞的活性显著高于pcDNA组(P<0.05),骨关节炎软骨细胞的凋亡率显著低于pcDNA组(P<0.05)。与杜仲苷+si-NC组Prdx5蛋白的表达水平比较,杜仲苷+si-Prdx5组显著降低(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,与对照组骨关节炎软骨细胞的活性比较.杜仲苷组显著升高(P<0.05);与杜仲苷+si-NC组骨关节炎软骨细胞的活性比较,杜仲苷+si-Prdx5组显著降低(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与对照组骨关节炎软骨细胞的凋亡率比较,杜仲苷组显著降低(P<0.05);与杜仲苷+si-NC组骨关节炎软骨细胞的凋亡率比较,杜仲苷+si-Prdx5组显著升高(P<0.05)。结论杜仲苷可能通过上调Prdx5促进骨关节炎软骨细胞增殖,抑制其凋亡。 展开更多
关键词 杜仲苷 骨关节炎 prdx5 增殖 凋亡
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