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水稻种子OsPR1-1基因的克隆及表达模式分析
1
作者 金祖英 章露露 +1 位作者 王娜 王澍 《种子科技》 2025年第4期9-12,共4页
为探究水稻病程相关蛋白PR1基因在水田种植模式及旱地种植模式下的表达差异,从水田水稻及旱地水稻种子中克隆得到PR1基因,命名为OsPR1-1,分析其表达模式。结果显示,水稻OsPR1-1序列全长为504 bp,编码氨基酸168个,分子质量约为18.33 kDa... 为探究水稻病程相关蛋白PR1基因在水田种植模式及旱地种植模式下的表达差异,从水田水稻及旱地水稻种子中克隆得到PR1基因,命名为OsPR1-1,分析其表达模式。结果显示,水稻OsPR1-1序列全长为504 bp,编码氨基酸168个,分子质量约为18.33 kDa,理论等电点为8.63。亚细胞定位液泡内,为亲水性蛋白。OsPR1-1蛋白为稳定碱性蛋白,具有一个跨膜结构,OsPR1-1氨基酸序列与光稃稻同源相似性最高,为98.8%。荧光定量PCR分析显示,OsPR1-1基因在旱地种植模式下表达量显著高于水田种植,说明旱地种植条件下水稻种子抗病性、抗逆性优于水田种植,并为深入研究OsPR1-1基因的结构特性及表达特异性提供理论参考。 展开更多
关键词 水稻 pr1基因 基因克隆 表达模式
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酸枣仁汤调控SP1/SK1/S1PR1信号通路改善抑郁模型大鼠海马神经炎症和突触可塑性的作用机制
2
作者 冯建宇 王文华 +2 位作者 汪尤文 谈滢 田旭升 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第21期1-10,共10页
目的:通过重塑炎症微环境并介导海马突触可塑性的改变,来评估酸枣仁汤对孤养联合慢性不可预见性温和应激(CUMS)法建立的抑郁大鼠模型的抗抑郁效果。方法:采用随机数字表法将72只雄性SD大鼠分为6组:空白组,模型组,氟西汀组(0.003 6 g... 目的:通过重塑炎症微环境并介导海马突触可塑性的改变,来评估酸枣仁汤对孤养联合慢性不可预见性温和应激(CUMS)法建立的抑郁大鼠模型的抗抑郁效果。方法:采用随机数字表法将72只雄性SD大鼠分为6组:空白组,模型组,氟西汀组(0.003 6 g·kg^(-1)),酸枣仁汤高、中、低剂量组(10、5、2.5 g·kg^(-1)),每组12只。使用孤养联合CUMS的方式对大鼠进行造模,观察各组大鼠的糖水偏好率和旷场实验得分并进行评估;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)分析特异性蛋白1(SP1)/鞘氨醇激酶1(SK1)/鞘氨醇1磷酸酯受体1(S1PR1)信号通路的关键蛋白及海马突触素Ⅰ(SYNⅠ)、突触后密度蛋白-95(PSD-95)、序列相似的家族19成员A5(FAM19A5)的蛋白表达;免疫组化法(IHC)分析SP1、PSD-95、SYNⅠ、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-6(IL-6)的阳性表达情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测SP1和S1PR1 mRNA的表达;采用结合透射电镜观察海马突触超微结构变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠的糖水偏好率、旷场实验总分显著下降(P<0.01),表明孤养联合CUMS成功诱导了抑郁样行为;与空白组比较,模型组海马区域中突触囊泡数量显著减少(P<0.01),且SP1、SK1、S1PR1与IL-6蛋白的表达水平显著提高(P<0.01),SYNⅠ、PSD-95、FAM19A5、IL-10表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,酸枣仁汤高、中剂量组和氟西汀组糖水偏好率和旷场实验总分均显著上升(P<0.01),酸枣仁汤高、中、低剂量组及氟西汀组大鼠SP1、SK1、S1PR、IL-6蛋白表达均明显下降(P<0.05,P<0.01),SYNⅠ、PSD-95、FAM19A5、IL-10表达明显上升(P<0.05,P<0.01),大鼠海马突触囊泡明显增多(P<0.05,P<0.01)。结论:酸枣仁汤可调控抑郁模型大鼠FAM19A5、SYNⅠ、PSD-95、IL-10、IL-6、SP1/SK1/S1PR1在海马中的表达,其抗抑郁机制可能与改善神经炎症与重塑突触可塑性有关。 展开更多
关键词 序列相似的家族19成员A5(FAM19A5) 抑郁症 特异性蛋白1(SP1)/鞘氨醇激酶1(SK1)/受体1-磷酸鞘氨醇受体1(S1pr1)信号通路 突触可塑性 神经炎症
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血清ANGPTL4、S1PR1、Autotaxin水平联合检测对急性呼吸窘迫综合征患者疾病转归的预测价值
3
作者 高彦娜 刘宏 《医学理论与实践》 2025年第17期2993-2995,共3页
目的:分析血清血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、内皮细胞表面鞘氨醇-1-磷酸受体1(S1PR1)、自分泌运动因子(Autotaxin)水平联合检测对急性呼吸窘迫综合征患者疾病转归的预测价值。方法:回顾性收集我院2022年4月—2024年4月收治的96例急性呼... 目的:分析血清血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、内皮细胞表面鞘氨醇-1-磷酸受体1(S1PR1)、自分泌运动因子(Autotaxin)水平联合检测对急性呼吸窘迫综合征患者疾病转归的预测价值。方法:回顾性收集我院2022年4月—2024年4月收治的96例急性呼吸窘迫综合征患者为研究对象,根据患者30d预后情况分为转归不良组(n=21)、转归良好组(n=75)。对比两组入院时临床一般资料及血清ANGPTL4、S1PR1、Autotaxin水平,分析疾病转归的影响因素及对患者疾病转归的预测价值。结果:转归不良组氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))水平显著低于转归良好组,急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)及序贯器官衰竭评估(SOFA)评分显著高于转归良好组(P<0.05);转归不良组入院时及入院7d时血清ANGPTL4、Autotaxin水平均高于转归良好组,血清S1PR1水平均低于转归良好组(P<0.05);转归不良组血清ΔANGPTL4、ΔS1PR1、ΔAutotaxin水平显著低于转归良好组(P<0.05);logistic回归分析显示,PaO_(2)/FiO_(2)、S1PR1为患者转归不良的保护因素,APACHEⅡ评分、SOFA评分及血清ANGPTL4、Autotaxin均为患者转归不良的危险因素(P<0.05);入院时及入院7d时血清ANGPTL4、S1PR1、Autotaxin水平联合预测患者转归不良ROC分析曲线下面积分别为0.735、0.897。结论:血清ANGPTL4、S1PR1、Autotaxin异常与呼吸窘迫综合征患者疾病转归有关,可作为预测急性呼吸窘迫综合征患者转归不良的参考指标。 展开更多
关键词 ANGPTL4 S1pr1 AUTOTAXIN 急性呼吸窘迫综合征 疾病转归
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S1P/S1PR1的血管调节功能在胸腔积液形成中的作用
4
作者 钱倩 李孟兰 景楚薇 《中国工业医学杂志》 2025年第3期292-297,I0002,共7页
目的探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)对人血管内皮细胞(HUVECs)的生物调节功能在胸腔积液产生中的可能作用。方法利用含S1P受体(S1PR)1-shRNA的慢病毒转染HUVECs以沉默S1PR1;将实验分为shRNA对照、shRNA+S1P(100μmol/L)、shRNA+SEW287(S1PR1激动... 目的探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)对人血管内皮细胞(HUVECs)的生物调节功能在胸腔积液产生中的可能作用。方法利用含S1P受体(S1PR)1-shRNA的慢病毒转染HUVECs以沉默S1PR1;将实验分为shRNA对照、shRNA+S1P(100μmol/L)、shRNA+SEW287(S1PR1激动剂,20μg/L)、shRNA+W146(S1PR1抑制剂,0.2 mmol/L)、S1PR1-shRNA、S1PR1-shRNA+S1P、S1PR1-shRNA+SEW287、S1PR1-shRNA+W146共8组,应用划痕实验、Transwell小室实验、成管实验和流式细胞术等技术分别检测细胞迁移、侵袭、血管形成和凋亡情况。结果划痕实验、Transwell小室实验和成管实验结果表明,shRNA+S1P和shRNA+SEW287组细胞迁移、侵袭和成管能力增强;shRNA组的细胞迁移、侵袭和成管能力显著高于S1PR1-shRNA组(P<0.05);S1PR1-shRNA+S1P和S1PR1-shRNA+SEW287组细胞的迁移、侵袭和成管能力有所恢复,而S1PR1-shRNA+W146组显著降低。流式细胞术结果显示,S1PR1-shRNA组的凋亡率相较shRNA组略有升高;S1PR1-shRNA+S1P和S1PR1-shRNA+SEW287组凋亡率有所下降,接近shRNA组水平;而S1PR1-shRNA+W146组凋亡率进一步上升至最高水平,但差异无统计学意义。结论S1P似可通过S1PR1促进细胞的迁移、侵袭和脉管形成,并抑制细胞凋亡,提示S1P/S1PR1通路在调节血管生成中发挥一定作用,并可能参与胸腔积液的病程。 展开更多
关键词 1-磷酸鞘氨醇(S1P) S1P受体1(S1pr1) 慢病毒 血管内皮细胞 血管功能 胸腔积液
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麦冬皂苷D调节SphK1/S1P/S1PR1信号通路对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症的影响 被引量：5
5
作者 赵志成 梁国英 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1698-1704,共7页
目的探讨麦冬皂苷D调节鞘氨醇激酶1(SphK1)/1-磷酸鞘氨醇(S1P)/鞘氨醇1磷酸酯受体1(S1PR)通路对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌炎症的影响。方法将大鼠随机分为MIRI组、麦冬皂苷D组、SphK1激活剂(K6PC-5)组、麦冬皂苷D+K6PC-5组、假... 目的探讨麦冬皂苷D调节鞘氨醇激酶1(SphK1)/1-磷酸鞘氨醇(S1P)/鞘氨醇1磷酸酯受体1(S1PR)通路对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌炎症的影响。方法将大鼠随机分为MIRI组、麦冬皂苷D组、SphK1激活剂(K6PC-5)组、麦冬皂苷D+K6PC-5组、假手术组,每组12只。除假手术组外,其它组大鼠均通过结扎冠状动脉左前降支法构建MIRI模型。建模成功后,立即给药处理,每日1次,持续2周。超声成像系统评估大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室分数缩短(LVFS)变化;HE染色检测心肌组织的病理;ELISA法检测心肌组织中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;TUNEL染色检测心肌组织的心肌细胞凋亡;免疫组化染色心肌组织中Bim、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)阳性细胞数占比;Western Blot法检测心肌组织中S1P、SphK1、S1PR1蛋白水平。结果与假手术组比较,MIRI组大鼠心肌结构损伤、纤维排列紊乱、心肌细胞减少、细胞核固缩且有大量炎症细胞浸润;LVFS、LVEF降低(P<0.05);心肌组织中CK-MB、LDH、IL-1β、TNF-α水平,心肌细胞凋亡率,Bim、Caspase-3阳性细胞数占比及S1P、SphK1、S1PR1蛋白水平升高(P<0.05)。与MIRI组比较,麦冬皂苷D组大鼠心肌结构损伤、纤维排列紊乱、心肌细胞减少、细胞核固缩及有大量炎症细胞浸润现象有所缓解;LVFS、LVEF升高(P<0.05);心肌组织中CK-MB、LDH、IL-1β、TNF-α水平,心肌细胞凋亡率,Bim、Caspase-3阳性细胞数占比及S1P、SphK1、S1PR1蛋白水平降低(P<0.05)。K6PC-5逆转了麦冬皂苷D对MIRI大鼠心功能障碍、心肌炎症及心肌细胞凋亡的影响(P<0.05)。结论麦冬皂苷D抑制MIRI大鼠心肌炎症及心肌细胞凋亡的机制可能与抑制SphK1/S1P/S1PR1通路有关。 展开更多
关键词 麦冬皂苷D SphK1/S1P/S1pr1通路 心肌缺血再灌注损伤 炎症 凋亡 大鼠
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S1PR1在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：2
6
作者 刘加蒙 李明 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第1期93-95,共3页
目的:探讨1-磷酸神经鞘氨醇受体(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1PR1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:回顾性分析具有完整临床病理资料的胃癌患者328例,选用免疫组化方法检测S1PR1的表达,并分析其与胃癌临床病理特征和预... 目的:探讨1-磷酸神经鞘氨醇受体(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1PR1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:回顾性分析具有完整临床病理资料的胃癌患者328例,选用免疫组化方法检测S1PR1的表达,并分析其与胃癌临床病理特征和预后的关系。结果:S1PR1在临床Ⅰ+Ⅱ期组织中阳性率为55.3%,在临床Ⅲ+Ⅳ期组织中阳性率为70.2%,两者差异具有统计学意义(P<0.05),S1PR1与胃癌淋巴结转移、肿瘤最大径之间具有统计学差异(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、Lauren分型无统计学差异。S1PR1阳性表达者相比阴性表达者总生存期较短,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中S1PR1的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论:S1PR1与胃癌患者的临床分期及肿瘤淋巴结转移密切相关,S1PR1阳性表达与患者预后较差有关,这为未来胃癌的治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 S1pr1 胃癌 免疫组化 临床病理特征
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水稻病程相关PR1家族蛋白质在叶片生长及与白叶枯病菌互作反应中的表达 被引量：10
7
作者 李雪姣 范伟 +8 位作者 牛东东 关明俐 缪刘杨 史佳楠 窦世娟 魏健 刘丽娟 李莉云 刘国振 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期127-138,共12页
病程相关(PR)蛋白质经常被用作抗病反应的分子标记。利用免疫印迹(WB)技术检测了7个PR1家族蛋白质在水稻(Oryza sativa)叶片生长及与白叶枯病菌互作反应过程中的表达,发现6个PR1家族蛋白质在叶片生长中有表达。检测PR1蛋白质在Xa21介导... 病程相关(PR)蛋白质经常被用作抗病反应的分子标记。利用免疫印迹(WB)技术检测了7个PR1家族蛋白质在水稻(Oryza sativa)叶片生长及与白叶枯病菌互作反应过程中的表达,发现6个PR1家族蛋白质在叶片生长中有表达。检测PR1蛋白质在Xa21介导的抗白叶枯病过程中的表达,结果显示PR1#052、PR1#072、PR1#073和PR1#121四个蛋白质在抗病反应后期呈上调或诱导表达,PR1#071则表达下调。进一步比较它们在抗病、感病和对照(Mock)反应中的表达丰度,发现在抗病和感病反应中的变化幅度均明显大于对照反应,推测这些PR蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作反应中发挥作用。另外,对PR1基因上游启动子区的cis元件进行了分析。该研究初步揭示了水稻PR1家族蛋白质的表达谱,为进一步了解PR1蛋白质的功能提供了线索。 展开更多
关键词 pr1家族 水稻 免疫印迹 白叶枯病菌
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白僵菌菌株毒力与Pr1蛋白酶活性相关性研究 被引量：6
8
作者 田志来 朱晓敏 +3 位作者 李启云 高月波 温嘉伟 赵宇 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期607-611,共5页
利用专一性短肽底物Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA对不同突变体菌株进行Pr1蛋白酶活性测定,同时应用玉米螟3龄幼虫对不同突变体菌株进行毒力测定,求算LT50值。以不同突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活为自变量,菌株毒力LT50值为因变量,进行相关性... 利用专一性短肽底物Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA对不同突变体菌株进行Pr1蛋白酶活性测定,同时应用玉米螟3龄幼虫对不同突变体菌株进行毒力测定,求算LT50值。以不同突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活为自变量,菌株毒力LT50值为因变量,进行相关性分析,得到突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活与毒力LT50值的线性回归方程:y=-2.411 6x+31.405,r2=0.521 6。由线性回归方程可以得出:不同突变体菌株的Pr1蛋白酶比酶活与菌株毒力LT50值呈负相关趋势,说明菌株的Pr1蛋白酶活性越高,菌株的LT50值就越低,菌株的毒力也就越大。两者相关系数r=-0.722 2,在0.05水平上相关显著,因此建议将Pr1蛋白酶的酶活性作为菌株初筛时的一个补充指标,但由于Pr1蛋白酶比酶活与菌株毒力LT50值相关性未达极显著水平,所以不建议将Pr1蛋白酶的酶活性作为菌株初筛时的替代指标。 展开更多
关键词 白僵菌 菌株毒力 pr1蛋白酶 比酶活 相关性
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基于S1PR1/PI3K/Akt/eNOS信号通路探究健脾化痰方对高脂血症脾虚痰浊小猪血管内皮的保护机制 被引量：11
9
作者 李芹 张会永 +4 位作者 周鹤 庞琳琳 李佳 肖程予 杨关林 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期4564-4567,共4页
目的:基于S1PR1/PI3K/Akt/eNOS信号通路探究健脾化痰方对高脂血症(HLP)脾虚痰浊小猪血管内皮的保护机制。方法:普通级广西巴马小型猪15只按随机数字表法随机分为正常组、模型组和健脾化痰组,每组5只。正常组予基础饲料喂饲,模型组和健... 目的:基于S1PR1/PI3K/Akt/eNOS信号通路探究健脾化痰方对高脂血症(HLP)脾虚痰浊小猪血管内皮的保护机制。方法:普通级广西巴马小型猪15只按随机数字表法随机分为正常组、模型组和健脾化痰组,每组5只。正常组予基础饲料喂饲,模型组和健脾化痰组均予高脂饲料喂饲,造模周期为24周,其中健脾化痰组小型猪在0~24周均应用健脾化痰中药干预。24周后全自动生化分析仪检测各组小猪血清TC、TG、LDL-C、HDL-C含量变化;ELISA法检测各组小猪血清NO、ET-1水平;Western blot法检测各组小猪冠状动脉内皮PI3K、p-Akt/Akt、S1PR1、p-eNOS/eNOS蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组TG、TC、LDL-C、ET-1水平升高(P<0.01),HDL-C、NO水平降低(P<0.05,P<0.01),冠状动脉内皮PI3K、p-Akt/Akt、S1PR1、p-eNOS/eNOS蛋白表达水平下调(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,健脾化痰组小猪TG、LDL-C、ET-1水平降低(P<0.05,P<0.01),NO水平升高(P<0.01);健脾化痰组小猪冠状动脉内皮PI3K、p-Akt/Akt、S1PR1、p-eNOS/eNOS蛋白表达水平上调(P<0.05,P<0.01)。结论:健脾化痰中药具有良好的保护血管内皮功能的作用,其机制可能是通过激活S1PR1/PI3K/Akt/eNOS信号通路实现的。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 高脂血症 脾虚痰浊 血管内皮 机制 动物模型 S1pr1/PI3K/Akt/eNOS信号通路
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球孢白僵菌Pr1蛋白酶基因cDNA克隆与序列分析 被引量：2
10
作者 陈红梅 谢翎 +2 位作者 吴甘霖 魏和平 黄勃 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期61-64,共4页
从球孢白僵菌菌株Bb202中克隆了昆虫蛋白酶Pr1的基因。使用特异性引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板进行PCR反应,得到了球孢白僵菌的Pr1蛋白酶基因cDNA和结构基因序列。测序结果表明球孢白僵菌Pr1蛋白酶结构基因全长大小为1606bp,含有3... 从球孢白僵菌菌株Bb202中克隆了昆虫蛋白酶Pr1的基因。使用特异性引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板进行PCR反应,得到了球孢白僵菌的Pr1蛋白酶基因cDNA和结构基因序列。测序结果表明球孢白僵菌Pr1蛋白酶结构基因全长大小为1606bp,含有3个内含子,分别为69、61和68bp。其ORF全长1140bp,预测编码379个氨基酸残基。成熟蛋白理论分子量为38.8kD,理论等电点为8.06。为进一步研究球孢白僵菌Pr1基因,并构建高毒力工程菌株提供了理论基础。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 pr1基因 CDNA克隆 序列分析
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巴西橡胶树病程相关蛋白基因(HbPR1)的克隆及分析 被引量：5
11
作者 罗红丽 秦云霞 +1 位作者 闫志烨 向鹏 《热带作物学报》 CSCD 2011年第8期1499-1502,共4页
利用同源克隆技术,在前期课题组对橡胶树转录组进行测序的基础上,根据模式植物中PR1蛋白的氨基酸序列进行同源搜索并设计引物,通过RT-PCR方法扩增巴西橡胶树PR1同源基因的cDNA片段,命名为HbPR1。该片段包含一个450 bp的开放阅读框,编码... 利用同源克隆技术,在前期课题组对橡胶树转录组进行测序的基础上,根据模式植物中PR1蛋白的氨基酸序列进行同源搜索并设计引物,通过RT-PCR方法扩增巴西橡胶树PR1同源基因的cDNA片段,命名为HbPR1。该片段包含一个450 bp的开放阅读框,编码150个氨基酸的多肽。生物信息学分析结果表明,该氨基酸序列与杨树(Populus tomentosa)、葡萄(Vitis vinifera)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的PR1蛋白高度同源,同源性分别为76%,74%和72%,并含有SCP_PR1_like结构域。半定量分析结果表明,该基因表达受水杨酸的诱导。以上结果暗示该基因为橡胶树的PR1同源基因,可作为橡胶树系统获得性抗性产生的标签基因。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 系统获得性抗性 病程相关蛋白1(pr1)
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绿僵菌蝗虫菌株Pr1蛋白酶基因的克隆及序列分析 被引量：2
12
作者 农向群 张泽华 +1 位作者 高松 苏红田 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2006年第1期33-36,共4页
从绿僵菌蝗虫菌株M2189克隆了昆虫表皮降解酶Pr1的基因。以特异性引物,分别进行了DNA-PCR和mRNA-RT-PCR反应,得到了预期扩增片段,回收纯化后通过pGEM-T载体转化大肠杆菌JM109,得到重组质粒,EcoRⅠ酶切鉴定表明目的片段已插入质粒。对重... 从绿僵菌蝗虫菌株M2189克隆了昆虫表皮降解酶Pr1的基因。以特异性引物,分别进行了DNA-PCR和mRNA-RT-PCR反应,得到了预期扩增片段,回收纯化后通过pGEM-T载体转化大肠杆菌JM109,得到重组质粒,EcoRⅠ酶切鉴定表明目的片段已插入质粒。对重组质粒中插入的DNA片段进行了核苷酸序列测定,表明该序列全长1369bp,其中有3个内含子,分别为76、59、67bp;编码序列长度为1167bp,含有起始密码子和终止密码子,是一个完整的蛋白读码框。与菌株Me1得到的Pr1编码序列(GenBank/M73795)相比,二者的核苷酸数目相同,同源性达到92.2%,编码的389个氨基酸中48个不同,占12.3%。 展开更多
关键词 绿僵菌 蝗虫 pr1基因 克隆 序列分析
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泛素和PR1a信号肽融合基因植物表达载体的构建 被引量：2
13
作者 史芳芳 周鹏 +1 位作者 武冬梅 祝建波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2006年第3期265-269,共5页
泛素(Ubiquitin)融合蛋白策略在近年来已被应用于在植物中提高外源蛋白的产量。信号肽(Signal Peptide)可使外源蛋白定向运输到细胞内的特定部位。本研究是在植物高效表达载体pBin438的基础上,采用三引物PCR法(TP-PCR)技术,将拟南芥(Ara... 泛素(Ubiquitin)融合蛋白策略在近年来已被应用于在植物中提高外源蛋白的产量。信号肽(Signal Peptide)可使外源蛋白定向运输到细胞内的特定部位。本研究是在植物高效表达载体pBin438的基础上,采用三引物PCR法(TP-PCR)技术,将拟南芥(Arabidopsis)泛素基因与烟草病程相关蛋白PR1a基因的信号肽序列体外重组;并将重组的融合基因定向克隆到植物表达载体pBLG中,获得了含有泛素和PR1a信号肽序列的植物表达载体pBLG-UP。这为进一步验证外源基因在植物体内的高效表达奠定了基础。 展开更多
关键词 泛素 pr1a信号肽 二引物PCR 融合基因 表达载体
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S1pr1沉默对弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-LY1细胞增殖和迁移的影响 被引量：1
14
作者 周颖 罗婷 +1 位作者 袁韵 龚玉萍 《河北医药》 CAS 2020年第10期1519-1522,共4页
目的探讨S1pr1沉默对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)OCI-LY1细胞增殖和迁移的影响。方法收集确诊为DLBCL的患者和健康体检者各10例,测定外周血S1pr1 mRNA的含量,用S1pr1特异性siRNA和阴性对照(negative control,NC)转染到OCI-LY1细胞,用RT-PC... 目的探讨S1pr1沉默对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)OCI-LY1细胞增殖和迁移的影响。方法收集确诊为DLBCL的患者和健康体检者各10例,测定外周血S1pr1 mRNA的含量,用S1pr1特异性siRNA和阴性对照(negative control,NC)转染到OCI-LY1细胞,用RT-PCR和Western Blot法检测OCI-LY1细胞中S1pr1的表达,以鉴定S1pr1特异性siRNA沉默效果。检测OCI-LY1细胞增殖率和细胞迁移能力,同时检测STAT3和p-STAT3蛋白表达水平。结果DLBCL患者外周血单个核细胞中S1pr1 mRNA相对中位表达水平高于健康者(P<0.05);给予S1pr1特异性siRNA干预后,S1pr1沉默组OCI-LY1细胞中S1pr1 mRNA和蛋白表达较空白对照组和阴性对照组显著降低(P<0.05);S1pr1沉默组OCI-LY1细胞增殖率和迁移细胞数较空白对照组和阴性对照组显著降低(P<0.05);S1pr1沉默组OCI-LY1细胞STAT3和p-STAT3蛋白表达较空白对照组和阴性对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论S1pr1在DLBCL患者外周血中高表达,对S1pr1基因沉默后,OCI-LY1细胞增殖率和迁移细胞数显著降低,特异性抑制了STAT3的活性。 展开更多
关键词 S1pr1 弥漫大B细胞淋巴瘤 OCI-LY1细胞 细胞增殖 细胞迁移
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联合生物信息学分析S1PR1在肺癌组织中的表达及临床意义 被引量：1
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作者 徐鑫鑫 蔡花 +1 位作者 彭静静 褚福营 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第6期1006-1010,共5页
目的探讨肺癌组织中1-磷酸神经鞘氨醇受体1 (S1PR1)的表达及临床意义。方法收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者组织标本,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肺癌组织及癌旁组织中S1PR1的表达水平,通过Oncomine数据库对S1PR1表达结果进行佐... 目的探讨肺癌组织中1-磷酸神经鞘氨醇受体1 (S1PR1)的表达及临床意义。方法收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者组织标本,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肺癌组织及癌旁组织中S1PR1的表达水平,通过Oncomine数据库对S1PR1表达结果进行佐证,并分析其与临床病理参数之间的关系;利用ROC曲线,评价其表达水平对肺癌的诊断价值;Kaplan-Meier Plotter数据库分析其与肺癌预后的关系。结果肺癌组织中S1PR1的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01),Oncomine数据库共检索出9项符合筛选条件的研究,S1PR1在所有研究中都呈低表达(P<0.01)。S1PR1的表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、吸烟情况、病理类型及TNM分期无明显相关性(P>0.05)。根据S1PR1表达水平绘制ROC曲线,曲线下面积(AUC)为0.711(95%CI:0.610~0.813),临界值取1.127时,S1PR1诊断肺癌的灵敏度和特异性均为71.2%。Kaplan-Meier生存分析发现低表达S1PR1的患者5年总生存期显著低于高表达患者(P<0.01)。结论肺癌组织中S1PR1表达水平下调,且低表达S1PR1的患者预后较差,S1PR1有望成为肺癌诊断和预后的分子标志物。 展开更多
关键词 S1pr1 肺癌 Oncomine数据库 Kaplan-Meier Plotter数据库
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Metarhizium anisopliae var.anisopliae Pr1A基因的克隆表达及抗血清研究
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作者 宋妍 张世清 黄俊生 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第5期3-7,共5页
采用RT-PCR方法从本实验室分离筛选到的金龟子绿僵小孢变种Metarhizium anisopliae vat．anisopliae中,扩增得到PrlA基因全长,此基因全长为1242bp,经Blastn分析此基因序列与M．anopliae的PrlA基因(M73795)同源率为98%。以pET- 22b(+)为... 采用RT-PCR方法从本实验室分离筛选到的金龟子绿僵小孢变种Metarhizium anisopliae vat．anisopliae中,扩增得到PrlA基因全长,此基因全长为1242bp,经Blastn分析此基因序列与M．anopliae的PrlA基因(M73795)同源率为98%。以pET- 22b(+)为基础载体,构建pET-PrlA重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia．coli)BL 21(DE3)中进行表达。经SDS—PAGE分析,获得了约42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63．2%。将表达的PrlA蛋白切胶回收后制备成抗原,免疫家兔4次后,采血收集抗血清,用ELISA测定效价为1/10000。结果表明,获得的抗体可用于更进一步的研究,将有利于我们进一步了解M．anisopliaeis的侵染机理,弄清楚各Pr蛋白酶的作用方式和对寄主的选择优势,提高生防控制的有效性。 展开更多
关键词 METARHIZIUM anisopliae var.anisopliae pr1A基因 克隆 表达 抗血清
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地黄RgPR1基因的克隆、生物信息学及表达分析
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作者 牛乐 赵颖异 韩永光 《江西农业学报》 CAS 2022年第9期113-118,共6页
基于实验室前期获取的地黄转录组数据,设计了特异性引物,克隆了完整的RgPR1基因序列,通过生物信息学等方法对编码蛋白质进行了分析;利用荧光定量PCR方法分析了植物激素水杨酸和茉莉酸诱导下的RgPR1基因组织差异性表达。结果显示,RgPR1... 基于实验室前期获取的地黄转录组数据,设计了特异性引物,克隆了完整的RgPR1基因序列,通过生物信息学等方法对编码蛋白质进行了分析;利用荧光定量PCR方法分析了植物激素水杨酸和茉莉酸诱导下的RgPR1基因组织差异性表达。结果显示,RgPR1基因全长668 bp,共编码163个氨基酸,其编码的蛋白可能定位于细胞外,为不稳定的分泌蛋白。RgPR1蛋白与一串红的PR1蛋白的同源性最高;经水杨酸和茉莉酸处理后,PR1基因在地黄根、茎、叶中均显著提高,其中在叶中的表达量最高,根中次之,茎中的表达量最低。本研究成功克隆出RgPR1基因,发现其在不同组织中的表达具有一定的差异性,且外源水杨酸和茉莉酸对其表达具有调节作用,为进一步研究PR1基因在地黄抗病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 地黄 pr1基因 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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土壤特性的空间变异性及PR1土壤水分速测仪的适用性研究
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作者 郑和祥 傅卫平 +4 位作者 柴建华 史海滨 王胜利 马慧绒 王宇 《内蒙古水利》 2006年第4期25-27,共3页
通过对河套灌区七排域明沟排水效益监测研究和对明沟运行现状,排水、排盐、侧渗情况的监测分析,表明在引黄水量逐年减少、地下水位逐年下降的新形势下,排水量逐年减少,排水任务相对减轻。节水灌溉实施后,节水灌溉必将成为灌区水利工作... 通过对河套灌区七排域明沟排水效益监测研究和对明沟运行现状,排水、排盐、侧渗情况的监测分析,表明在引黄水量逐年减少、地下水位逐年下降的新形势下,排水量逐年减少,排水任务相对减轻。节水灌溉实施后,节水灌溉必将成为灌区水利工作的中心;排水的方式、作用及规划设计标准、灌排关系有所改变。 展开更多
关键词 空间变异 干容重 pr1土壤水分速测仪 体积含水率
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Pr1—xSrxMnO3体系价带的光电子能谱研究
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作者 奎热西 熊光成 等 《北京同步辐射装置年报》 1998年第1期210-215,共6页
对于x从0．0到0．4之间变化的Pt1-xSrxMnO3多晶体所进行的价带光电子能谱实验显示，在Fermi边和Fermi边以下－12eV范围内出现的能带态密度随掺杂量x有一个显著的变化。对这些现象以Pr1-xSrxMnO3体系在基态下发生电荷转移为出发点进行了... 对于x从0．0到0．4之间变化的Pt1-xSrxMnO3多晶体所进行的价带光电子能谱实验显示，在Fermi边和Fermi边以下－12eV范围内出现的能带态密度随掺杂量x有一个显著的变化。对这些现象以Pr1-xSrxMnO3体系在基态下发生电荷转移为出发点进行了讨论。提出了随掺杂量x的非线性电荷转移机制和存在由电荷转移导致的二级相变的可能性。 展开更多
关键词 pr1-xSrxMnO3 价带 光电子能谱 稀土锰酸盐 能带态密度 非线性电荷转移机制
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玫烟色棒束孢Pr1酶活力、Pr1酶基因表达量与其毒力的相关性 被引量：2
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作者 王宏民 李赫 +1 位作者 张天浩 张仙红 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期114-120,共7页
丝氨酸弹性凝乳蛋白酶Pr1是一类能高效降解昆虫体壁蛋白的重要酶,其活力与虫生真菌的毒力有很大的关系。探索玫烟色棒束孢不同菌株Pr1酶活力、Pr1蛋白酶基因表达量与毒力的相关性对该菌的应用具有重要的意义。文中采用专一性短肽底物Suc... 丝氨酸弹性凝乳蛋白酶Pr1是一类能高效降解昆虫体壁蛋白的重要酶,其活力与虫生真菌的毒力有很大的关系。探索玫烟色棒束孢不同菌株Pr1酶活力、Pr1蛋白酶基因表达量与毒力的相关性对该菌的应用具有重要的意义。文中采用专一性短肽底物Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA和荧光定量PCR分别测定了玫烟色棒束孢不同菌株的Pr1酶活和Pr1基因的表达量,并采用坡塔喷雾法测定了供试菌株对桃蚜的毒力。结果表明:不同供试菌株Pr1蛋白酶活力与其毒力的线性回归方程为y=3.64x+0.62,R^2=0.432,两者呈正相关;供试菌株Pr1酶活力、Pr1基因表达量与毒力的回归方程为y=0.236+10.833x_1–0.039x_2 (x_1=Pr1酶活力,x_2=Pr1基因表达量),R^2=0.568,说明线性拟合方程能很好地反映原始数据;序列相关系数D-W为2.444,在0.05水平上相关显著,表明Pr1酶活力、Pr1基因表达量对毒力有显著影响;VIF=12.705表明Pr1酶活力、Pr1基因表达量存在中度多重共线性。因此建议将Pr1蛋白酶的酶活力和Pr1基因表达量作为菌株毒力筛选时的重要指标。 展开更多
关键词 玫烟色棒束孢 菌株毒力 pr1蛋白酶活力 基因表达
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