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胃腺癌细胞中miR-23a靶基因PPP2R5E的鉴定 被引量:4
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作者 朱丽华 李盖 +3 位作者 刘爱华 张科 李冀 章广玲 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期1-7,共7页
目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证mi R-23a的靶基因PPP2R5E。方法选取表达绿色荧光蛋白的质粒pc DNA3/EGFP,将PPP2R5E-3’UTR的特异性序列插入其中,并与红色荧光蛋白表达质粒p Ds Red2-N1及表达mi R-23a的质粒共同稳定转染胃腺... 目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证mi R-23a的靶基因PPP2R5E。方法选取表达绿色荧光蛋白的质粒pc DNA3/EGFP,将PPP2R5E-3’UTR的特异性序列插入其中,并与红色荧光蛋白表达质粒p Ds Red2-N1及表达mi R-23a的质粒共同稳定转染胃腺癌细胞MGC803,稳定转染后提取细胞蛋白,荧光分光光度计进行定量检测。并通过半定量RT-PCR、实时定量PCR检测mi R-23a功能受抑制或过表达mi R-23a的MGC803细胞或胃腺癌组织中PPP2R5E基因m RNA的表达情况,验证mi R-23a对其调控作用。表达si RNA抑制MGC803中PPP2R5E m RNA的表达后,通过MTT和平板克隆形成实验观察其对胃腺癌细胞系MGC803细胞活性和克隆形成能力的影响。结果绿色荧光蛋白的表达量,稳定转染pc DNA3/EGFPPPP2R5E-3’UTR质粒和mi R-23a质粒组明显低于pc DNA3/EGFP-PPP2R5E-3’UTR和pc DNA3共同稳定转染组。mi R-23a功能受抑制的胃腺癌细胞MGC803中靶基因PPP2R5E的m RNA表达水平升高;相反,过表达mi R-23a的胃腺癌细胞MGC803及胃腺癌组织中靶基因PPP2R5E的m RNA表达水平下降。沉默MGC803细胞中的PPP2R5E后,细胞活性和克隆形成能力均加强。结论 PPP2R5E可能是mi R-23a的直接靶基因。 展开更多
关键词 胃腺癌 MGC803 MI R-23a ppp2r5e 靶基因
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miR-23a通过调节PPP2R5E促进人舌鳞癌细胞的增殖 被引量:5
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作者 陶亚东 柳雪 +2 位作者 孙继红 霍峰 郭洪杰 《河北医学》 CAS 2020年第1期88-93,共6页
目的: 探讨miR-23a在人舌鳞癌细胞增殖中的作用机制。 方法: 收集舌鳞癌的临床组织标本,并培养舌鳞癌细胞系Tca8113和CAL27。实时定量PCR检测miR-23a和PPP2R5E舌鳞癌组织中的表达。过表达或封闭miR-23a后,应用MTT、平板集落形成实验和... 目的: 探讨miR-23a在人舌鳞癌细胞增殖中的作用机制。 方法: 收集舌鳞癌的临床组织标本,并培养舌鳞癌细胞系Tca8113和CAL27。实时定量PCR检测miR-23a和PPP2R5E舌鳞癌组织中的表达。过表达或封闭miR-23a后,应用MTT、平板集落形成实验和生长曲线实验检测miR-23a和PPP2R5E对舌鳞癌细胞增殖的影响。荧光素酶报告实验验证miR-23a对PPP2R5E的调控关系。 结果: miR-23a在舌鳞癌组织中的表达明显上调(P<0.01),而且可以促进舌鳞癌细胞增殖。生物信息学预测和荧光素报告实验显示PPP2R5E是miR-23a的直接靶基因。PPP2R5E在舌鳞癌组织中表达降低,且抑制舌鳞癌细胞增殖。PPP2R5E过表达可以逆转miR-23a对舌鳞癌细胞的促进增殖作用。 结论: miR-23a可以通过PPP2R5E促进舌鳞癌细胞的增殖,在舌鳞癌的发生发展中发挥致癌基因功能。 展开更多
关键词 舌鳞癌 miR-23a ppp2r5e基因 细胞增殖
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miR-23a Promoting Cell Proliferation of Human Tongue Squamous Cell Carcinoma Cell through Regulating PPP2R5E
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作者 Xue LIU Yadong TAO +2 位作者 Jihong SUN Feng HUO Hongjie GUO 《Medicinal Plant》 CAS 2020年第2期82-86,90,共6页
[Objectives]To investigate the mechanism of miR-23a in the proliferation of human tongue squamous cell carcinoma cells.[Methods]Clinical tissue samples of tongue squamous cell carcinoma were collected and Tca8113 and ... [Objectives]To investigate the mechanism of miR-23a in the proliferation of human tongue squamous cell carcinoma cells.[Methods]Clinical tissue samples of tongue squamous cell carcinoma were collected and Tca8113 and CAL27 were cultured.Real-time quantitative PCR was performed to detect the expressions of miR-23a and PPP2R5E in clinical tissue samples of tongue squamous cell carcinoma.MTT assay,colony formation assay and growth curve assay were used to detect the effect of miR-23a and PPP2R5E on the proliferation of human tongue squamous carcinoma cell.Luciferase reporter assay verified the regulatory relationship between miR-23a and PPP2R5E.[Results]The expression of miR-23a in tongue squamous cell carcinoma was significantly up-regulated(P<0.01).miR-23a promoted the proliferation of tongue squamous cell carcinoma cells.Bioinformatics prediction and luciferin reporting experiments showed that PPP2R5E was a direct target gene of miR-23a.The expression of PPP2R5E was decreased in tongue squamous cell carcinoma.PPP2R5E inhibited the proliferation of tongue squamous cell carcinoma cells.Overexpression of PPP2R5E can reverse the proliferation promoting effect of miR-23a on tongue squamous cell carcinoma cells.[Conclusions]miR-23a can promote the proliferation of tongue squamous cell carcinoma cells through PPP2R5E and miR-23a plays an oncogene role in the occurrence and development of tongue squamous cell carcinoma. 展开更多
关键词 miR-23a TONGUE SQUAMOUS CELL carcinoma ppp2r5e CELL PROLIFERATION
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