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儿童结核病结核分枝杆菌临床分离株抗原基因pepA和PPE18的变异研究 被引量：1
1
作者 苏薇 黄延风 +2 位作者 杨震华 郑改焕 朱朝敏 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第24期2556-2562,共7页
目的对结核抗原编码基因pepA和PPE18进行测序,了解pepA和PPE18的基因多态性。方法选取重庆医科大学附属儿童医院感染科2006年12月至2013年12月收集的结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株168株,对应168例结核病患儿... 目的对结核抗原编码基因pepA和PPE18进行测序,了解pepA和PPE18的基因多态性。方法选取重庆医科大学附属儿童医院感染科2006年12月至2013年12月收集的结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株168株,对应168例结核病患儿,年龄(7.8±5.7)岁,其中男孩87名,女孩81名。运用PCR方法扩增目的基因pepA和PPE18并进行测序,与结核标准株H37Rv基因序列以及从免疫表位数据库(immune epitope database,IEDB)中查询到的表位序列进行对比,分析pepA和PPE18基因序列中的变异特征。结果在168株菌株中,117(69.64%)株菌株出现了PPE18基因突变,且PPE18基因的17个T细胞抗原表位有10个发生了改变。168株临床结核分离株中,共6例(9.84%)结核菌株发生了pepA基因多态性,且未造成其T细胞抗原表位改变。结论抗原pepA基因序列较保守,PPE18存在基因高度多态性,预测会对由pepA和PPE18蛋白组成的M72疫苗的免疫功能造成影响,从而影响M72疫苗的免疫有效性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 PEPA ppe18 M72 基因多态性
原文传递
融合蛋白RAP的免疫原性分析
2
作者 刘新矿 王鑫鑫 王晓春 《安徽理工大学学报（自然科学版）》 CAS 2024年第3期101-108,共8页
目的结核病(Tuberculosis,TB)目前是全球单一感染源造成死亡的主要原因之一,且广泛接种的卡介苗对于不同人的效果不一且有一定的副作用,甚至在某些成年人身上效果甚微,为了获得效果更好、安全性更好的结核疫苗对融合蛋白RAP进行了分析... 目的结核病(Tuberculosis,TB)目前是全球单一感染源造成死亡的主要原因之一,且广泛接种的卡介苗对于不同人的效果不一且有一定的副作用,甚至在某些成年人身上效果甚微,为了获得效果更好、安全性更好的结核疫苗对融合蛋白RAP进行了分析验证。方法将融合蛋白RAP连接到pET30b原核表达载体上通过双酶切鉴定构建重组质粒、用热休克法和诱导剂诱导蛋白表并通过Ni-NTA纯化蛋白;全血干扰素释放测定法(WBIA)检测RAP刺激的人外周血中IFN-γ的水平;ELISA法检测小鼠特异性IgG、IgG1和IgG2a以及IFN-γ、TNF-α、IL-2和IL-4的分泌水平。结果成功构建pET30b-RAP重组质粒并表达纯化RAP蛋白;RAP及其各组成蛋白能明显导致国内M.tb感染者分泌高水平的IFN-γ;小鼠经过RAP/MTO免疫后会发生Th1型反应产生特异性高滴度IgG抗体且使抗原特异性Th1型细胞因子分泌能力明显增强。结论根据得到的实验结果推断出RAP具有强大且特异性的免疫能力,所以有希望成为一种有前景的结核病候选疫苗。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Rv0577 AG85B ppe18 结核疫苗
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