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植物BTB/POZ蛋白及其抗病性研究进展 被引量:9
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作者 张淑珍 闫晓飞 +2 位作者 张传忠 韩丹 徐鹏飞 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期311-316,共6页
为了适应各种生物胁迫和非生物胁迫,植物在长期进化过程中形成了完整的调节机制,感受外界刺激,调整基因的表达,调节代谢途径。植物BTB/POZ蛋白在一系列生物过程中发挥重要作用。文中介绍了植物中的BTB/POZ蛋白的分子特征和抗病功能。此... 为了适应各种生物胁迫和非生物胁迫,植物在长期进化过程中形成了完整的调节机制,感受外界刺激,调整基因的表达,调节代谢途径。植物BTB/POZ蛋白在一系列生物过程中发挥重要作用。文中介绍了植物中的BTB/POZ蛋白的分子特征和抗病功能。此外,也就BTB/POZ蛋白在抗病应答途径、抗病反应中的作用机理等进行综述,为作物抗病的分子机理研究提供参考。 展开更多
关键词 BTB/poz 蛋白 抗病 核定位 信号调控网络
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香蕉BTB/POZ域基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 贾彩红 张丽丽 +4 位作者 金志强 周雪莉 刘菊华 张建斌 徐碧玉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期30-33,共4页
利用抑制缩减杂交文库从香蕉中分离获得一个cDNA片段,结合RACE技术获得该基因的全长序列,命名为MaBTB基因,该cDNA的ORF全长1080个碱基。通过Blastx同源性分析结果显示该基因的氨基酸序列与水稻OsBTB、苜蓿MtBTB/POZ、拟南芥AtBPM4、葡萄... 利用抑制缩减杂交文库从香蕉中分离获得一个cDNA片段,结合RACE技术获得该基因的全长序列,命名为MaBTB基因,该cDNA的ORF全长1080个碱基。通过Blastx同源性分析结果显示该基因的氨基酸序列与水稻OsBTB、苜蓿MtBTB/POZ、拟南芥AtBPM4、葡萄VvBTB、玉米ZmBTB、松树PsBTB基因的氨基酸序列同源性很高,分别为86%、85%、84%、84%、86%和87%。遗传进化树分析发现该基因与苜蓿MtBTB/POZ和拟南芥AtBPM4基因亲缘关系较近。用RT-PCR的方法研究该基因在不同胁迫处理下的表达特性,结果表明该基因在盐、乙烯和紫外线处理后其表达量逐渐增强;低温处理和香蕉尖孢镰刀菌4号生理小种处理后该基因表达量开始降低,随后逐渐升高;伤害处理后该基因的表达量没有明显变化。 展开更多
关键词 香蕉 BTB/poz结构域基因 克隆 表达分析
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BTB/POZ结构域蛋白7假基因1在肝细胞癌中的表达及功能的初步研究 被引量:1
3
作者 陶一明 胡宽 +2 位作者 汤参娥 冯铁诚 王志明 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期37-42,共6页
目的:探讨BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)假基因1(BTBD7P1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:检测106例配对的HCC组织与癌旁组织标本中BTBD7P1 m RNA的表达,分析BTBD7P1m RNA表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。用BTBD7P1过表达慢... 目的:探讨BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)假基因1(BTBD7P1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:检测106例配对的HCC组织与癌旁组织标本中BTBD7P1 m RNA的表达,分析BTBD7P1m RNA表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。用BTBD7P1过表达慢病毒载体转染HCC细胞系Bel7404后,检测细胞增殖率以及BTBD7 m RNA与蛋白的表达。结果:HCC组织中BTBD7P1相对表达量明显低于癌旁组织为(0.71 vs.2.14,P<0.05);BTBD7P1m RNA低表达与肿瘤大小、卫星灶、分化程度、静脉血管侵犯、出血坏死、HCC分期明显有关(均P<0.05);BTBD7P1 m RNA低表达患者的1、3、5年总体生存率及无瘤生存率均明显低于BTBD7P1m RNA高表达患者(均P<0.05)。与转染空载体质粒的对照组Bel7404细胞比较,转染BTBD7P1过表达慢病毒载体的Bel7404细胞,细胞增殖能力明显减低,BTBD7 m RNA表达明显下调(均P<0.05),但BTBD7蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:BTBD7P1可能在m RNA水平对亲本基因BTBD7表达进行调控,从而参与了HCC发生与发展。 展开更多
关键词 肝细胞 BTB/poz结构域蛋白7 拟基因 RNA 长链非编码
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斑点型POZ蛋白在膀胱癌中的表达及意义
4
作者 问晓东 邵晋凯 +1 位作者 吕永安 庞磊 《中国药物与临床》 CAS 2016年第2期224-226,共3页
膀胱癌是第二个最常见的泌尿生殖系统肿瘤,发病率近年来逐年增高;其发病是一个多因素混合、多基因参与、多步骤形成的过程,在遗传素质基础上外加环境因素作用导致恶性肿瘤形成。临床上低度恶性膀胱癌具有高复发性及恶性转化倾向,高度恶... 膀胱癌是第二个最常见的泌尿生殖系统肿瘤,发病率近年来逐年增高;其发病是一个多因素混合、多基因参与、多步骤形成的过程,在遗传素质基础上外加环境因素作用导致恶性肿瘤形成。临床上低度恶性膀胱癌具有高复发性及恶性转化倾向,高度恶性膀胱癌具有侵袭性和高致死率。因此,需要寻求一种特异的、简便的、灵敏的早期监测指标。 展开更多
关键词 膀胱癌细胞 poz 泛素蛋白 肿瘤抑制基因 侵袭性 膀胱癌组织 早期监测 正常膀胱组织 遗传素质 膀胱肿瘤
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细胞蛋白质组学和代谢组学整合策略表征散斑型BTB/POZ蛋白质突变调控的关键代谢通路 被引量:8
5
作者 颜敏 刘静 +2 位作者 夏天 许国旺 朴海龙 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期887-896,共10页
散斑型BTB/POZ蛋白(SPOP)是前列腺癌中突变率最高的蛋白质之一。该研究通过整合细胞蛋白质组学和代谢组学的方法,揭示SPOP突变引起的代谢紊乱及其调控的代谢通路。首先,系统地研究了LNCaP SPOP野生型及突变型高表达细胞中的代谢变化。... 散斑型BTB/POZ蛋白(SPOP)是前列腺癌中突变率最高的蛋白质之一。该研究通过整合细胞蛋白质组学和代谢组学的方法,揭示SPOP突变引起的代谢紊乱及其调控的代谢通路。首先,系统地研究了LNCaP SPOP野生型及突变型高表达细胞中的代谢变化。代谢组学结果显示,SPOP野生型和突变型(SPOP_Y87N和SPOP_F133L)导入的LNCaP细胞在偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)得分图上得到了很好的区分。进一步通过单因素方差分析发现,SPOP突变引起富马酸、苹果酸、柠檬酸、天冬氨酸和天冬酰胺等代谢物含量的增加。蛋白质组学共发现909种蛋白质在两种LNCaP SPOP突变体细胞中发生变化。分别对差异代谢物和差异蛋白质进行通路富集分析,发现三羧酸循环、氨酰基-转运核糖核酸生物合成在代谢组学和蛋白质组学分析中都发生了明显改变。最后,在SPOP敲除的Du145细胞中验证了上述研究结果。该研究证明SPOP突变可促进三羧酸循环。 展开更多
关键词 代谢组学 蛋白质组学 散斑型BTB/poz蛋白突变 前列腺癌
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原癌基因Zbtb7A的POZ区在大肠杆菌中的表达及其多抗制备 被引量:2
6
作者 季玉连 赵树立 +2 位作者 黄亚红 赵光锋 侯亚义 《医学研究生学报》 CAS 2009年第7期687-691,共5页
目的:原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起"分子开关"的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法:根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表... 目的:原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起"分子开关"的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法:根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表达载体pET-26b(+)中。重组表达质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmolIPTG诱导重组蛋白表达。所获重组表达蛋白经15%SDS-PAGE分离,切胶回收目的蛋白,研磨后免疫家兔制备抗血清。收集的抗血清经饱和硫酸铵沉淀和G蛋白柱联合纯化,用Western blot证实对纯化的抗血清进行鉴定。结果:获得了密码子优化后的Zbtb7APOZ区的编码序列,并成功地获得了其重组蛋白,制备了高纯度的抗POZ区多克隆抗体。结论:所获得的重组POZ区蛋白及其多克隆抗体可应用于对Zbtb7A的进一步研究。 展开更多
关键词 原癌基因Zbtb7A poz pET-26b(+) 原核表达 多克隆抗体
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鹌鹑gcl基因BTB/POZ结构域编码序列的克隆及组织中的表达 被引量:1
7
作者 王焕楠 邓凤姣 郑文萱 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期27-31,共5页
Germ cell-less(GCL)是与原始生殖细胞发生相关的重要因子,果蝇、斑马鱼、青鳉鱼和小鼠的GCL蛋白都含有一个进化上保守的BTB/POZ结构域。本研究应用简并PCR克隆技术,在鹌鹑(Coturnix coturnix)中扩增得到319bp的gcl基因(包含BTB/POZ结... Germ cell-less(GCL)是与原始生殖细胞发生相关的重要因子,果蝇、斑马鱼、青鳉鱼和小鼠的GCL蛋白都含有一个进化上保守的BTB/POZ结构域。本研究应用简并PCR克隆技术,在鹌鹑(Coturnix coturnix)中扩增得到319bp的gcl基因(包含BTB/POZ结构域编码序列)保守序列。通过与线虫、果蝇、斑马鱼、小鼠和人gcl同源序列的比对,发现该片段与它们的同源性分别为52.4%、55.4%、84.6%、79.6%和76.8%。采用RT-PCR和mRNA整体原位杂交方法,研究了gcl基因在不同组织和原条期胚胎中的表达。结果显示,该基因在卵巢、精巢和肝中表达;gcl mRNA存在于原条期胚胎的生殖新月区。 展开更多
关键词 GERM cell—less 原始生殖细胞 BTB/poz 鹌鹑
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BTB/POZ蛋白质家族的结构和功能 被引量:3
8
作者 王重 赵德标 《生命的化学》 CAS CSCD 1997年第6期10-13,共4页
BTB/POZ蛋白质家族的结构和功能王重赵德标(中国科学院上海细胞生物学研究所,上海200031)关键词BTB/POZ结构域锌指结构现在已经发现了许多具有保守序列的蛋白质,尽管它们在不同的生理过程中发挥不同的作用,但... BTB/POZ蛋白质家族的结构和功能王重赵德标(中国科学院上海细胞生物学研究所,上海200031)关键词BTB/POZ结构域锌指结构现在已经发现了许多具有保守序列的蛋白质,尽管它们在不同的生理过程中发挥不同的作用,但它们却介导类似的分子功能。人们把许... 展开更多
关键词 蛋白 BTB/poz蛋白 结构 功能
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POZ锌指蛋白在发育和肿瘤发生中的作用 被引量:1
9
作者 梅竹 杨予涛 徐志卿 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期55-60,共6页
POZ锌指蛋白是一类在进化中高度保守的蛋白,具有多种重要的生物学功能。POZ锌指蛋白主要作为一种转录抑制因子而存在,通过POZ结构域招募一些转录辅阻遏物而调节靶基因的表达。近年来的研究发现,POZ锌指蛋白在发育和肿瘤的发生中有着重... POZ锌指蛋白是一类在进化中高度保守的蛋白,具有多种重要的生物学功能。POZ锌指蛋白主要作为一种转录抑制因子而存在,通过POZ结构域招募一些转录辅阻遏物而调节靶基因的表达。近年来的研究发现,POZ锌指蛋白在发育和肿瘤的发生中有着重要的作用,综述5个POZ锌指蛋白在肿瘤的发生和生物体发育中的作用及功能,为人们进一步了解POZ锌指蛋白的功能提供资料。 展开更多
关键词 poz锌指蛋白 发育 肿瘤发生
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烟草BTB/POZ蛋白家族的鉴定及其在抗马铃薯Y病毒中的作用
10
作者 张劭文 赵天伦 +2 位作者 肖钦之 祝水金 陈进红 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期295-307,共13页
马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)侵染烟草(Nicotiana tabacum)会引起烟草脉带病,造成烟叶品质下降。broad complex,tramtrack,and bric-à-brac/pox virus and zinc finger(BTB/POZ)是动植物体内广泛存在的蛋白质家族,在植物生长... 马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)侵染烟草(Nicotiana tabacum)会引起烟草脉带病,造成烟叶品质下降。broad complex,tramtrack,and bric-à-brac/pox virus and zinc finger(BTB/POZ)是动植物体内广泛存在的蛋白质家族,在植物生长和发育的各个环节都起着非常重要的作用。本研究鉴定到90个烟草BTB/POZ家族蛋白,对应71个基因。在这些蛋白质的序列中,识别到9种保守基序(motif),并根据其出现顺序将BTB/POZ家族成员划分至6个亚家族。结构域分析表明,BTB/POZ同一亚家族成员的结构域具有一致性。对BTB/POZ蛋白的三维构象进行预测发现,所有亚家族成员结构都以α螺旋为主,同一亚家族成员的三维构象相似。烟草品种K326和突变体M867(抗PVY)的BTB/POZ家族基因表达模式分析显示,叶片接种PVY后,NtBTB2M、NtBTB2K、NtBTB2L、NtBTB6E基因的表达丰度显著增加,这可能与烟草M867对PVY的抗性较强有关。顺式作用元件分析显示,NtBTB2K、NtBTB2L、NtBTB2M和NtBTB6E基因的上游2000 bp区域内含有若干逆境响应相关元件,包括水杨酸响应元件、MYB结合位点等,可能和这些基因的上调表达有关。本研究为BTB/POZ蛋白的功能研究提供了理论依据,为烟草抗病育种提供了一定参考。 展开更多
关键词 烟草 BTB/poz家族 保守基序 顺式作用元件
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Identification of speckle-type POZ protein somatic mutations in African American prostate cancer 被引量:2
11
作者 Eric Buckles Chiping Qian +6 位作者 Andrew Tadros Sumana Majumdar Jennifer Cvitanovic Jovanny Zabaleta John Estrada John Wilson Wanguo Liu 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2014年第6期829-832,共4页
The speckle-type POZ protein (SPOP) is a tumor suppressor in prostate cancer (PCa). SPOP somatic mutations have been reported in up to 15% of PCa of those of European descent. However, the genetic roles of SPOP in... The speckle-type POZ protein (SPOP) is a tumor suppressor in prostate cancer (PCa). SPOP somatic mutations have been reported in up to 15% of PCa of those of European descent. However, the genetic roles of SPOP in African American (AA)-PCa are currently unknown. We sequenced the SPOP gene to identify somatic mutations in 49 AA prostate tumors and identified three missense mutations (p.Y87C, p.F102S, and p.G111E) in five AA prostate tumors (10%) and one synonymous variant (p.11061) in one tumor. Intriguingly, all of mutations and variants clustered in exon six, and all of the mutations altered conserved amino acids. Moreover, two mutations (p.F102S and p.G111E) have only been identified in AA-PCa to date. Quantitative real-time polymerase chain reaction analysis showed a lower level of SPOP expression in tumors carrying SPOP mutations than their matched normal prostate tissues. In addition, SPOP mutations and novel variants were detected in 5 of 27 aggressive PCa and one of 22 less aggressive PCa (P 〈 0.05). Further studies with increased sample size are needed to validate the clinicopathological significance of these SPOP mutations in AA-PCa. 展开更多
关键词 African American mutation analysis prostate cancer speckle-type poz protein
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转录因子LRF蛋白POZ结构域的表达与纯化
12
作者 刘子矜 于孟斌 +1 位作者 徐志卿 杨予涛 《生物技术》 CAS 2019年第5期420-425,共6页
[目的]旨在原核表达转录因子LRF的POZ结构域,纯化获得GST-POZ融合蛋白。[方法]以SD大鼠海马组织c DNA为模板,利用PCR扩增带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的LRF基因的POZ结构域,并将其插入到原核表达载体p GEX-4T-1中,将构建成功的p GEX-4T-1-... [目的]旨在原核表达转录因子LRF的POZ结构域,纯化获得GST-POZ融合蛋白。[方法]以SD大鼠海马组织c DNA为模板,利用PCR扩增带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的LRF基因的POZ结构域,并将其插入到原核表达载体p GEX-4T-1中,将构建成功的p GEX-4T-1-POZ原核表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导融合蛋白表达,再利用MagneGST particles亲和纯化GST-POZ融合蛋白,最后通过Western Blot鉴定融合蛋白。[结果]p GEX-4T-1-POZ原核表达质粒构建成功;在37℃条件下,浓度为0. 2 mmol/L的IPTG诱导7 h能够使重组蛋白大量表达,经MagneGST particles纯化后的GST-POZ重组蛋白能够被识别LRF的抗体特异性识别。[结论]纯化后的GST–POZ重组蛋白能够用于后续的生物学研究。 展开更多
关键词 LRF poz结构域 原核表达 蛋白纯化
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斑点型POZ蛋白对膀胱癌T24细胞增殖和迁移能力的影响 被引量:2
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作者 马俊红 李胜文 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2016年第3期213-217,共5页
目的探讨RNA干扰斑点型POZ蛋白(SPOP)基因表达对人膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法采用阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine 2000将靶向沉默SPOP基因的小干扰RNA(siRNA)序列siRNA1和siRNA2分别转染至T24细胞株(siRNA1组和siRNA2组)... 目的探讨RNA干扰斑点型POZ蛋白(SPOP)基因表达对人膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法采用阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine 2000将靶向沉默SPOP基因的小干扰RNA(siRNA)序列siRNA1和siRNA2分别转染至T24细胞株(siRNA1组和siRNA2组),设转染随机序列的T24细胞为对照组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRTPCR)和Western blotting分别检测各组转染48 h后的SPOP mRNA及蛋白水平,细胞增殖活性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞体外增殖活力,Transwell迁移试验及划痕试验观察各组的迁移能力。结果对照组、siRNA1组和siRNA2组的SPOP mRNA相对表达量为1.012±0.025、0.281±0.023和0.274±0.053,蛋白相对表达量为0.712±0.153、0.358±0.073和0.317±0.084,siRNA1组和siRNA2组的SPOP mRNA和蛋白水平均低于对照组(P<0.05),siRNA1组和siRNA2组SPOP mRNA和蛋白水平的差异无统计学差异(P>0.05);与对照组比较,siRNA1组和siRNA2组的增殖活性升高,差异有统计学意义(P<0.05),且siRNA1组和siRNA2组的增殖率随转染时间的延长而增加(P<0.05);Transwell迁移试验结果显示siRNA1组和siRNA2组的穿膜细胞数分别为(128.6±9.3)个和(134.5±8.6)个,均高于对照组的(92.5±8.4)个,差异有统计学意义(P<0.05);划痕试验结果显示siRNA1组和siRNA2组的划痕愈合率为(89.1±4.5)%和(93.7±5.1)%,均高于对照组的(32.6±2.8)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SPOP与膀胱癌的恶性行为有关,可能发挥抑癌基因的作用,如抑制增殖及迁移。 展开更多
关键词 膀胱癌 斑点型poz蛋白 RNA干扰技术 细胞增殖 细胞迁移
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原发性干燥综合征患者唇腺组织中BTB/POZ结构域蛋白7及基质金属蛋白酶-9的表达与自身抗体的关系 被引量:1
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作者 王菲 时美红 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第21期98-102,共5页
目的 探讨原发性干燥综合征(pSS)患者唇腺组织中BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与自身抗体的关系。方法 收集2016年9月—2020年10月本院46例pSS患者的唇腺组织为pSS组,收集同期46例口干燥症患者的唇腺组织... 目的 探讨原发性干燥综合征(pSS)患者唇腺组织中BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与自身抗体的关系。方法 收集2016年9月—2020年10月本院46例pSS患者的唇腺组织为pSS组,收集同期46例口干燥症患者的唇腺组织为对照组。检测唇腺组织中BTBD7、MMP-9的mRNA表达及蛋白表达;分析pSS患者血清自身抗体[抗干燥综合征抗原A(SSA)抗体、抗干燥综合征抗原B(SSB)抗体、抗核抗体(ANA)]与BTBD7、MMP-9的关系;分析BTBD7蛋白表达水平与MMP-9蛋白表达水平的相关性。结果 与对照组比较,pSS组患者唇腺组织中BTBD7、MMP-9的mRNA及蛋白表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。在pSS患者的抗SSA抗体、抗SSB抗体以及ANA的检测结果中,各抗体阳性者唇腺组织中BTBD7、MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均高于阴性者,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,pSS患者唇腺组织中BTBD7蛋白表达水平与MMP-9蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.493,P<0.05)。结论 pSS患者唇腺组织中BTBD7、MMP-9均呈高表达,且二者与自身抗体如抗SSA抗体、抗SSB抗体及ANA表达有密切联系。 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 唇腺组织 BTB/poz结构域蛋白7 基质金属蛋白酶-9 自身抗体
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Schwann cell Miz without POZ:degeneration meets regeneration 被引量:1
15
作者 David Fuhrmann Hans-Peter Elsasser 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第10期1563-1564,共2页
Peripheral motor and sensory neuropathies are diseases with different etiologies emerging from genetic disorders,diabetes,infection or inflammation,paraneoplastic damage or intoxications including alcohol abuse(Marty... Peripheral motor and sensory neuropathies are diseases with different etiologies emerging from genetic disorders,diabetes,infection or inflammation,paraneoplastic damage or intoxications including alcohol abuse(Martyn and Hughes,1997). 展开更多
关键词 CELL Schwann cell Miz without poz
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Cloning and Expression of BTB/POZ-Domain from Zebrafish gcl (Germ Cell-Less), and Appraisement of Its Polyclonal-Antibody
16
作者 DENG Fengjiao CHENG Pengxiang +2 位作者 LAN Qiang XU Yan ZHUANG Tiangang 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS 2008年第1期123-128,共6页
In this study, a recombinant pET28c-gBTB/POZ was constructed by cloning the sequence of the BTB/POZ domain of the zebrafish gcl (germ cell-less) into the expression vector pET28c, and pET28c-gBTB/POZ was transformed... In this study, a recombinant pET28c-gBTB/POZ was constructed by cloning the sequence of the BTB/POZ domain of the zebrafish gcl (germ cell-less) into the expression vector pET28c, and pET28c-gBTB/POZ was transformed into BL21(DE3) pLysS strain to express the fusion protein for the preparation of antibody. Polyclonal-antibody against the GCL-BTB/POZ domain was prepared by immunizing rabbit with the fusion protein, and the Western Blot and immuno-histochemical analysis were performed to detect the quantity of the polyclonal-antibody. The result indicates that the polyclonal-antibodies were of good quantity and specification. Further studies will be performed to demonstrate the function and expression pattern of the GCL protein during the development process of zebrafish with the polyclonal-antibody. 展开更多
关键词 gel (germ cell-less) polycolonal-antibody BTB/ poz domain zebrafish (Danio rerio)
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基于SPOP/MyD88/NF-κB通路探讨木犀草素对过敏性鼻炎大鼠炎症反应及Th1/Th2失衡的影响
17
作者 董小莉 吴袁媛 郭丹 《国际检验医学杂志》 2026年第4期385-392,398,共9页
目的探讨木犀草素对过敏性鼻炎(AR)大鼠炎症反应及辅助性T细胞(Th)1/Th2失衡的影响及其机制。方法将56只SD大鼠按照数字随机表法分为对照组、模型(AR)组、木犀草素低剂量[20 mg/(kg·d)]组、木犀草素高剂量[40 mg/(kg·d)]组、A... 目的探讨木犀草素对过敏性鼻炎(AR)大鼠炎症反应及辅助性T细胞(Th)1/Th2失衡的影响及其机制。方法将56只SD大鼠按照数字随机表法分为对照组、模型(AR)组、木犀草素低剂量[20 mg/(kg·d)]组、木犀草素高剂量[40 mg/(kg·d)]组、AAV-shRNA-NC组、AAV-shRNA-斑点型POZ蛋白(SPOP)组和木犀草素[40 mg/(kg·d)]+AAV-shRNA-SPOP组,每组各8只。各组处理3周后,评估各组大鼠AR症状。采用苏木精-伊红染色观察大鼠鼻黏膜病理学和炎症变化,采用酶联免疫吸附试验检测血清中Th1、Th2型细胞因子及卵白蛋白(OVA)-特异性免疫球蛋白E(sIgE)水平,采用免疫共沉淀实验检测髓样分化因子(MyD88)泛素化水平,采用蛋白质印迹法检测SPOP/MyD88/核因子(NF)-κB通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,AR组大鼠行为学评分升高(P<0.05),鼻黏膜大部分上皮脱落,固有层血管扩张,腺体增生,伴嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润,血清干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2水平降低(P<0.05),IL-4、IL-5、IL-13、OVA-sIgE水平升高(P<0.05),MyD88泛素化水平降低(P<0.05),MyD88非泛素化水平升高(P<0.05),SPOP水平降低(P<0.05),MyD88水平、p-P65/P65升高(P<0.05)。与AR组比较,木犀草素低、高剂量组大鼠行为学评分均降低(P<0.05),鼻黏膜上皮病变、腺体增生和炎症反应均逐渐减轻,血清IFN-γ、IL-2水平升高(P<0.05),IL-4、IL-5、IL-13、OVA-sIgE水平降低(P<0.05),MyD88泛素化水平升高(P<0.05),非泛素化状态下MyD88水平降低(P<0.05),SPOP水平升高(P<0.05),MyD88水平、p-P65/P65降低(P<0.05)。与木犀草素高剂量组比较,木犀草素+AAV-shRNA-SPOP组鼻黏膜MyD88泛素化水平降低(P<0.05),MyD88水平、p-P65/P65升高(P<0.05),血清IFN-γ、IL-2水平降低(P<0.05),IL-4、IL-5、IL-13、OVA-sIgE水平及行为学评分升高(P<0.05)。AR组与AAV-shRNA-SPOP组大鼠鼻黏膜MyD88泛素化水平、MyD88水平、p-P65/P65、血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13、OVA-sIgE水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论木犀草素可通过调控SPOP/MyD88/NF-κB通路,抑制NF-κB活化,改善OVA诱导的AR炎症损伤及Th1/Th2失衡。 展开更多
关键词 木犀草素 过敏性鼻炎 炎症损伤 辅助性T细胞1/辅助性T细胞2失衡 斑点型poz蛋白/髓样分化因子/核因子-κB通路
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BPOZ抑制乳腺癌细胞系增殖的初步研究
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作者 王鹏皓 张萍萍 +6 位作者 魏从文 张艳红 马胜利 曹叶 朱永杰 何湘 钟辉 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期308-310,330,共4页
目的研究BTB/POZ(broad complex,tramtrack and bric a brac/poxviruses and zinc finger)基因对乳腺癌细胞系增殖能力的影响。方法以人脾脏c DNA文库为模板,p CMV-HA-Vector为载体,构建真核表达载体p CMV-HA-BPOZ;免疫印迹实验鉴定重... 目的研究BTB/POZ(broad complex,tramtrack and bric a brac/poxviruses and zinc finger)基因对乳腺癌细胞系增殖能力的影响。方法以人脾脏c DNA文库为模板,p CMV-HA-Vector为载体,构建真核表达载体p CMV-HA-BPOZ;免疫印迹实验鉴定重组蛋白p CMV-HA-BPOZ的表达;细胞生长实验检测BPOZ对细胞增殖能力的影响;平板克隆实验检测BPOZ对细胞生长能力的影响。结果免疫印迹实验结果证实,构建的真核表达载体p CMV-HA-BPOZ能正确表达;过表达HA-BPOZ可显著抑制MCF7和ZR-75-1细胞的增殖和生长。结论成功构建了真核表达载体p CMV-HA-BPOZ,并在细胞中成功表达;BPOZ可明显抑制MCF7和ZR-75-1细胞的增殖和生长能力,为进一步研究BPOZ在乳腺癌发生发展中的作用打下基础。 展开更多
关键词 BTB/poz(ABTB1) 乳腺肿瘤 细胞增殖
原文传递
LncRNA FOXD2-AS1调节miR-338-3p/ABTB1轴促进结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 任恩伯 贺小铭 +3 位作者 董陆佳 汪建光 袁鹏飞 刘德纯 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2025年第1期18-26,共9页
目的探讨长链非编码RNA叉头盒转录基因D2反义RNA1(LncRNA FOXD2-AS1)通过调节miR-338-3p/含蛋白1的Ankyrin重复序列和BTB/POZ结构域(ABTB1)轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌患者... 目的探讨长链非编码RNA叉头盒转录基因D2反义RNA1(LncRNA FOXD2-AS1)通过调节miR-338-3p/含蛋白1的Ankyrin重复序列和BTB/POZ结构域(ABTB1)轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌患者组织以及细胞系(SW620、HCT116、SW480)中LncRNA FOXD2-AS1和miR-338-3p的表达水平,Western blot检测ABTB1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2等蛋白的表达,通过克隆形成实验和CCK-8实验进行评估细胞增殖能力,通过划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过miR-338-3p抑制实验进一步分析miR-338-3p对LncRNA FOXD2-AS1沉默后细胞增殖、迁移和侵袭的逆转作用,同时验证LncRNA FOXD2-AS1与miR-338-3p、miR-338-3p与ABTB1的相互关系。结果在结直肠癌组织和细胞系中,LncRNA FOXD2-AS1和ABTB1蛋白表达上调,miR-338-3p表达下调;SW480细胞中的LncRNA FOXD2-AS1和ABTB1表达最高,miR-338-3p表达最低。沉默LncRNA FOXD2-AS1的SW480细胞其细胞增殖、迁移和侵袭显著下降,miR-338-3p表达升高,ABTB1、MMP-9、PCNA、MMP-2蛋白水平下调。miR-338-3p抑制实验表明,miR-338-3p的抑制可逆转LncRNA FOXD2-AS1沉默对细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及对ABTB1、MMP-9、PCNA、MMP-2蛋白水平的下调作用。结论沉默LncRNA FOXD2-AS1可通过调节miR-338-3p/ABTB1轴抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 叉头盒转录基因D2反义RNA1 miR-338-3p 锚蛋白重复和BTB/poz域蛋白1 结直肠癌 增殖 迁移 侵袭
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基于SPOP/HnRNPK通路探讨双氢青蒿素对前列腺癌增殖和转移的影响
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作者 张鉴通 高振庄 +1 位作者 王之秀 孙丽娜 《昆明医科大学学报》 2025年第11期26-34,共9页
目的基于斑点型POZ蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)/核内不均一核糖核蛋白K(HnRNPK)通路探讨双氢青蒿素(DHA)对前列腺癌细胞增殖和转移的影响。方法体外培养前列腺癌细胞系DU145并采用不同浓度DHA处理,根据DHA浓度将细胞分组为空白... 目的基于斑点型POZ蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)/核内不均一核糖核蛋白K(HnRNPK)通路探讨双氢青蒿素(DHA)对前列腺癌细胞增殖和转移的影响。方法体外培养前列腺癌细胞系DU145并采用不同浓度DHA处理,根据DHA浓度将细胞分组为空白组(0μmol/L)、低浓度组(10μmol/L)、中浓度组(50μmol/L)、高浓度组(100μmol/L)。通过克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验分别观察不同浓度DHA作用下DU145细胞增殖、迁移、侵袭活性变化,Western blot检测SPOP、HnRNPK、波形蛋白(Vimentin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白1(ZO-1)表达水平。对DU145细胞进行SPOP表达敲低处理(SPOP-shNC-DU145,SPOP-sh-DU145),分别给予前述低浓度组、中浓度组、高浓度组干预条件进行回复实验。将敲低SPOP细胞注射到小鼠体内建立异种移植小鼠模型,同时灌胃给药DHA低浓度(2.5 mg/kg)、中浓度(5 mg/kg)、高浓度(10 mg/kg)。结果与空白组相比,DHA低浓度组、DHA中浓度组和DHA高浓度组DU145细胞增殖、迁移和侵袭活性均受到抑制(P<0.05),且细胞内HnRNPK、Vimentin、Ncadherin表达水平降低(P<0.05),SPOP、E-cadherin、ZO-1表达水平升高(P<0.05)。与SPOP-shNC-DU145细胞比较,SPOP-sh-DU145受到的DHA抑制作用减弱,细胞内HnRNPK、Vimentin、N-cadherin表达水平升高(P<0.05),E-cadherin、ZO-1表达水平降低(P<0.05)。结论DHA可以靶向诱导SPOP表达升高,抑制DU145细胞增殖和转移。 展开更多
关键词 斑点型poz蛋白 核内不均一核糖核蛋白K 双氢青蒿素 前列腺癌
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