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大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建
1
作者
马露
杨雷
+7 位作者
晏凡晨
刘晓丹
丁煌
谭维
李菀榆
唐映红
张伟
邓常清
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期2192-2198,共7页
目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧...
目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。
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关键词
血管内皮细胞
主动脉
povpc
模型
活性氧
氧化损伤
暂未订购
题名
大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建
1
作者
马露
杨雷
晏凡晨
刘晓丹
丁煌
谭维
李菀榆
唐映红
张伟
邓常清
机构
湖南中医药大学中西医结合学院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期2192-2198,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 82174218,81774032)
湖南省研究生科研创新项目(No CX20220786)。
文摘
目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。
关键词
血管内皮细胞
主动脉
povpc
模型
活性氧
氧化损伤
Keywords
vascular endothelial cells
aorta
povpc
model
reactive oxygen species
oxidative damage
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.121 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R340.5 [医药卫生—基础医学]
R916.3 [医药卫生—药学]
暂未订购
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建
马露
杨雷
晏凡晨
刘晓丹
丁煌
谭维
李菀榆
唐映红
张伟
邓常清
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
暂未订购
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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