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高温胁迫下CgPOU3F4L调控长牡蛎血淋巴细胞凋亡的功能分析 被引量:1
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作者 李庆嵩 高磊 +3 位作者 胡利 叶佳钰 王玲玲 宋林生 《大连海洋大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期905-914,共10页
为解析长牡蛎(Crassostrea gigas)POU家族基因的组成、进化特征,以及在高温胁迫下参与调控长牡蛎血淋巴细胞凋亡的功能,采用siRNA干扰和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡标记等方法进行了高温胁迫下CgPOU3F4L调控血淋巴细胞凋亡的功能研究。... 为解析长牡蛎(Crassostrea gigas)POU家族基因的组成、进化特征,以及在高温胁迫下参与调控长牡蛎血淋巴细胞凋亡的功能,采用siRNA干扰和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡标记等方法进行了高温胁迫下CgPOU3F4L调控血淋巴细胞凋亡的功能研究。结果表明:长牡蛎基因组中包含4个POU家族基因,分别为CgPOU2F1、CgPOU3F4、CgPOU3F4L和CgPOU4F3,其中Cg POU3F4L具有一段特有的氨基酸序列,其所涉及的功能分化特征尚不清楚;CgPOU3F4L基因在外套膜、闭壳肌和血淋巴细胞中的mRNA表达水平显著高于肝胰腺(P<0.05),分别为肝胰腺中表达水平的91.32倍、19.24倍和7.92倍,其mRNA表达水平在28℃高温胁迫后12、24、36 h时与对照组(15℃)相比显著升高(P<0.05),分别为对照组的2.63倍、3.05倍和3.62倍;在凋亡相关基因CgBcl-2的启动子区的1197~1207区间和CgCaspase3的启动子区的1286~1297区间处发现了POU转录结合位点;利用RNAi技术抑制CgPOU3F4L基因表达,在高温胁迫24 h后CgPOU3F4L-RNAi组血淋巴细胞中CgBcl-2的mRNA表达水平显著上升(P<0.001),为对照组的7.49倍,CgCaspase3的mRNA表达水平显著下降(P<0.05),为对照组的0.57倍,且血淋巴细胞的凋亡率(16.53%)极显著低于对照组(45.90%)(P<0.001)。研究表明,长牡蛎CgPOU3F4L通过调控CgBcl-2和CgCaspase3的mRNA表达参与调节高温胁迫下血淋巴细胞凋亡过程,本研究结果为进一步解析牡蛎POU家族基因的进化特征及环境胁迫响应机制提供了参考依据。 展开更多
关键词 长牡蛎 pou3f4l 转录调控 细胞凋亡 高温胁迫
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