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PNA-FISH技术鉴定血培养中白色假丝酵母菌的方法研究 被引量：2
1
作者 赵晓丽 王秋 +5 位作者 伏改芬 钱净 邵剑春 黎海生 杨悦林 胡大春 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期4325-4327,4341,共4页
目的采用PNA-FISH技术进行快速、准确的鉴定血培养中白色假丝酵母菌的方法学初索。方法模拟血培养阳性标本的制备;对所有血培养报阳的标本均进行革兰染色,初步区分报阳菌的种类;对于镜下显示为念珠菌的标本用两种方法对其进行鉴定,一种... 目的采用PNA-FISH技术进行快速、准确的鉴定血培养中白色假丝酵母菌的方法学初索。方法模拟血培养阳性标本的制备;对所有血培养报阳的标本均进行革兰染色,初步区分报阳菌的种类;对于镜下显示为念珠菌的标本用两种方法对其进行鉴定,一种为PNA-FISH技术,另一种为传统的科马嘉念珠菌显色培养基鉴定技术,最后对这两种方法检测白色假丝酵母菌的特异度、敏感度及检测时间做对比分析。结果 PNA-FISH方法鉴定血培养中白色假丝酵母菌的特异度为100.0%,敏感度为97.5%;采用PNA-FISH技术鉴定血培养中白色假丝酵母菌的时间为（4±0.2）h,较传统真菌鉴定时间（18~24）h明显缩短。结论采用PNA-FISH技术鉴定血培养中白色假丝酵母菌特异性强,敏感度高,所需时间短,值得临床推广。 展开更多
关键词 pna-fish技术 白色假丝酵母菌 鉴定 血培养
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FISH技术在微生物生态学中的研究及进展 被引量：9
2
作者 邢德峰 任南琪 王爱杰 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期114-119,共6页
分子生物学技术在微生物生态学研究中具有灵敏、精确和快速的优势,但不能提供微生物的形态学、数量性状、空间分布等信息。荧光原位杂交技术结合了分子生物学的精确性和显微镜的可视性信息,可以在自然生境中监测和鉴定不同的微生物个体... 分子生物学技术在微生物生态学研究中具有灵敏、精确和快速的优势,但不能提供微生物的形态学、数量性状、空间分布等信息。荧光原位杂交技术结合了分子生物学的精确性和显微镜的可视性信息,可以在自然生境中监测和鉴定不同的微生物个体,尤其是对难培养和未被培养的微生物进行检测。荧光原位杂交技术被广泛用于微生物群落结构诊断和评价,现已成为微生物分子生态学研究中的热点技术。对荧光原位杂交技术的发展和在微生物分子生态学中的应用进行了综述,探讨了该技术应用中存在的问题和发展前景。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 16S RRNA 探针 PNA 微生物分子生态学
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利用流式荧光原位杂交法测定细胞端粒长度 被引量：4
3
作者 黄馨 石桂英 +1 位作者 陈显达 鞠振宇 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第7期67-71,共5页
目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SY... 目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SYBR Green荧光定量PCR方法验证其准确性。结果流式荧光原位杂交法测定G3小鼠细胞端粒相对长度与C57BJ/6野生型小鼠相比为0.5345,荧光定量PCR测定端粒相对长度为0.5717,结果基本一致。结论流式细胞术与原位杂交方法结合起来检测细胞端粒的平均长度可靠易行,对单个核细胞端粒平均长度的检测有较高的实用性。 展开更多
关键词 流式荧光原位杂交法 端粒 PNA探针
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荧光原位杂交在环境微生物学中的应用及进展 被引量：21
4
作者 邢德峰 任南琪 李建政 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期55-58,共4页
荧光原位杂交技术广泛用于分析复杂环境的微生物群落构成,可以在自然生境中监测和鉴定微生物,并能对未被培养的微生物进行检测。rRNA为靶序列寡核苷酸或PNA探针的荧光原位杂交能提供微生物的形态学、数量、空间分布等信息,现已成为环境... 荧光原位杂交技术广泛用于分析复杂环境的微生物群落构成,可以在自然生境中监测和鉴定微生物,并能对未被培养的微生物进行检测。rRNA为靶序列寡核苷酸或PNA探针的荧光原位杂交能提供微生物的形态学、数量、空间分布等信息,现已成为环境科学研究领域中的热点技术。对荧光原位杂交技术的发展和在环境微生物学中的应用进行了综述,探讨了该技术的应用和发展前景。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 16SrBNA 寡核苷酸探针 PNA 环境微生物 微生物生态学
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快速鉴定白念珠菌的临床应用研究 被引量：1
5
作者 阳春丽 任宝军 +5 位作者 徐跃轩 卢赞 钱净 杨文迪 马永鑫 赵晓丽 《中国临床新医学》 2022年第10期933-937,共5页
目的探究肽核酸-荧光原位杂交(PNA-FISH)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴定白念珠菌的临床应用价值。方法采用经VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪YST卡鉴定白念珠菌100株,模拟血培养阳性标本。对报阳的标本直... 目的探究肽核酸-荧光原位杂交(PNA-FISH)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴定白念珠菌的临床应用价值。方法采用经VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪YST卡鉴定白念珠菌100株,模拟血培养阳性标本。对报阳的标本直接进行PNA-FISH鉴定,再转种培养出单个新鲜菌落,完成MALDI-TOF MS鉴定。记录两种方法鉴定白念珠菌结果和鉴定所需时间,计算其与VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率。结果100株白念珠菌模拟血培养样本,PNA-FISH鉴定结果与VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率为98%,平均鉴定时间为(2.5±0.5)h。采用MALDI-TOF MS鉴定报阳后单个新鲜菌落,与VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定方法的符合率达100%,从血培养报阳开始计算,平均鉴定时间为(22.0±0.6)h。结论PNA-FISH方法鉴定白念珠菌,设备简单,鉴定结果可靠,相较于传统鉴定方法和MALDI-TOF MS方法,鉴定时间显著缩短,有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 白念珠菌 鉴定 肽核酸-荧光原位杂交技术 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析
暂未订购
荧光扫描法快速检测肽核酸分子信标标记的单增李斯特菌 被引量：3
6
作者 吴姗 张晓峰 +3 位作者 帅江冰 李可 虞惠贞 金晨晨 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1105-1112,共8页
【目的】建立了单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,单增李斯特菌)的肽核酸(Peptide nucleic acid,PNA)分子信标(Molecular beacon)的荧光扫描检测方法,以简化普通PNA原位荧光杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH... 【目的】建立了单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,单增李斯特菌)的肽核酸(Peptide nucleic acid,PNA)分子信标(Molecular beacon)的荧光扫描检测方法,以简化普通PNA原位荧光杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)检测方法中显微镜观察步骤。【方法】在具有单增李斯特菌特异性的肽核酸探针的5′和3′分别标记报告荧光基团和淬灭基团形成分子信标PNA探针,利用FISH技术和荧光扫描技术对单增李斯特菌进行检测。【结果】用普通PNA探针进行荧光扫描检测时,以N1处理为空白对照,假阳性率11.4%,假阴性率为0;以N2处理为空白时,假阳性率降低至4.3%,但假阴性率上升为18.6%。用分子信标PNA探针进行检测时,用N1为空白对照时,假阳性率8.6%,假阴性率为1.4%;以N2处理作为空白时,假阳性率5.7%,假阴性率为1.4%。与普通探针比较,分子信标PNA探针能有效减少假阳性和假阴性的发生。2种普通PNA探针的杂交成功率分别为83.3%和95.2%;2种"分子信标化"的肽核酸探针的成功率分别为91.7%和90.5%,表明探针两端标记并不会降低与目标菌的杂交成功率。【结论】将液相PNA-FISH和荧光扫描技术结合,通过大通量快速的荧光扫描检测可大幅提高检测效率。同时将肽核酸探针分子信标化,有效的降低了荧光扫描结果的假阳性,并通过了N1和N2两种空白对照处理把假阴性控制在较低的范围。 展开更多
关键词 肽核酸荧光原位杂交 分子信标 荧光扫描 单增李斯特菌
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